资源描述
1、参加果酒(如葡萄酒)制作的微生物是酵母菌,属于真核生物,其代谢类型是异养兼性厌氧,酒精发酵的原理(反应式)是略。酵母菌中有(有/没有)线粒体,不能(能/不能)在线粒体中将葡萄糖彻底氧化分解。酒精发酵一般将温度控制在18-25℃,而在20℃左右时,是酵母菌的最适繁殖温度。在果酒制作早期,向发酵装置通气的目标是使酵母菌在有氧条件下大量繁殖,增大菌种密度。在葡萄酒的自然发酵过程中,起重要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。葡萄酒呈红色的原因是伴随酒精度数的提升,红葡萄皮中的色素进入发酵液。在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌能够生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因为无法适应这一环境而受到抑制,他们与酵母菌之间的种间关系是竞争 。酵母菌的繁殖方式重要包括条件适宜时的出芽生殖,与条件恶劣的孢子生殖。
2、参加果醋(如葡萄醋)制作的微生物是醋酸菌,属于原核生物,其代谢类型是异养需氧型,当氧气、糖源充足时,该菌能够将葡萄汁中的糖分解成醋酸,当氧气充足,糖源不足时,该菌能将乙醇变为乙醛,再将其变为醋酸,此时的醋酸制作原理(反应式)是略。其经典的细胞增殖方式是二分裂,酵母菌与醋酸菌最重要的区分是有无核膜包被所形成的细胞核。
3、教材中P4果酒果醋发酵装置图1—4b中的充气口作用是在醋酸发酵时充入氧气;排气口的作用是排除发酵时产生的CO2,以及残存气体;出料口的作用是取发酵液进行检测,并放出发酵液;其中的排气口通过一个长而细的胶管连接瓶身的目标是防空气中的微生物的污染。在果酒制作时,应当适时排气,原因是预防发酵中因气压过高而炸瓶,若用装置1—4a进行果酒果醋制作,在排气时不能(能/不能)完全打开瓶盖,而是拧松瓶盖即可。对葡萄的处理应当先冲洗 (去枝梗/冲洗)再 去枝梗(去枝梗/冲洗),且不能 (能/不能)重复冲洗,以预防减少了酵母菌的数量。在果醋制作时,要适时通气的原因是 醋酸菌是好氧菌,且果酒变为果醋过程中需要氧气的参加。 发酵装置需要 (需要/不需要)进行消毒处理,我们在果酒制作时,不需要(需要/不需要)对葡萄汁进行煮沸处理。在果酒发酵到第10-12 天之后,便能够对果酒进行检测,可在酸性条件下,用重铬酸钾与发酵液反应,假如发酵液呈灰绿色,且颜色较深,则阐明酒精度数较高。若需深入对发酵液中的酵母菌数量进行检测能够用稀释涂布平板法 、 显微镜直接计数法措施。到了果酒制作的后期会发觉,酵母菌的数量会展现下降趋势,其原因重要有①营养物质消耗殆尽②酒精度数的提升对细胞的毒害作用③PH的减少。在果酒制作完成后能够转为果醋制作,不过应当变化的试验条件是适当升温并通氧。
4、为微生物的生长繁殖提供营养的基质叫做培养基。从物理性质上划分,重要可分为 固体培养基 与 液体培养基,其中的液体培养基重要用于工业生产与扩大培养,而扩大培养的目标是增大菌种密度,要让培养基呈固态,一般需向其中加入 琼脂这一凝固剂。固体培养基能够用于菌株的 分离 、判定、计数、菌种保存等。从功效上划分,可分为选择 培养基与 判别培养基,其中的选择 培养基,是在培养基中加入某种化学物质,抑制 不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长,如以纤维素为唯一碳源的培养基来筛选纤维素分解菌;以不加氮源的培养基来筛选自身固氮微生物;在培养基中加入 高浓度NaCl筛选金黄色葡萄球菌;培养基中加入青霉素等抗生素抑制细菌、放线菌,从而筛选酵母菌、霉菌;以尿素为唯一氮源的培养基来筛选尿素分解菌。而判别培养基是依照微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂 ,来判别对应微生物,如在培养基中加入伊红-美蓝 ,可判别大肠杆菌,使其菌落呈黑 色。选择培养基 不是 (是/不是)都是固体培养基。
5、无论哪种培养基,一般都含有水 、碳源 、氮源 、 无机盐 等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如在培养乳酸杆菌时需在培养基中添加维生素;培养霉菌时需将PH调整至酸性 ;培养细菌时需将PH调整至中性或微碱性 ;培养厌氧微生物时则需提供 无氧条件。牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏能够为微生物提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素,重要提供碳源 ;蛋白胨能够为微生物提供碳源、氮源、维生素,重要提供氮源 。
6、取得纯净培养物的核心是 预防外来杂菌入侵 ,重要包括消毒与 灭菌 。对试验操作空间、操作者的衣服、双手应当进行清洁与 消毒 ;培养皿、培养基、接种用具应当 灭菌 ;试验操作应当在 酒精灯火焰旁 进行。操作者的双手一般用 体积分数70%的酒精 进行消毒;接种环、涂布器应当用火焰灼烧灭菌;培养基一般用 高压蒸汽灭菌法进行灭菌;培养皿、滴管等玻璃器材一般用干热灭菌进行灭菌。接种室、超净工作台、接种箱在使用前能够用 紫外线照射30min,进行消毒处理。无论是消毒还是灭菌,其重要的原理都是在理化原因的作用下使微生物 蛋白质 变性或者 核酸破坏损伤,以杀灭微生物。
7、固体培养基的制备一般包括计算、称量、溶化 、 调PH 、 灭菌 、 倒平板 。在灭菌后,待培养基冷却到50℃左右时,便能够进行倒平板操作。在倒平板过程中,拔出棉塞后需使锥形瓶瓶口通过火焰的原因是预防瓶口微生物污染培养基,平板冷凝后,需倒置的原因是 预防皿盖上的水珠滴落到培养基,又可防止培养基中水分过快挥发。
8、微生物的接种最常用的措施是稀释涂布平板法 、 平板划线法 ,其中 稀释涂布平板法 除了能够用于微生物的分离、纯化外,还能够用于菌落的计数。平板划线法是通过 接种环在琼脂固体培养基表面连续的划线操作,将聚集的菌种逐渐稀释分散到培养基表面,在数次划线后培养,能够分离得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落 。在划线操作中,第一次划线前要灼烧接种环的目标是 预防接种环上也许存在的微生物污染培养物 ;在第二次、三次…划线前灼烧接种环的目标是杀死接种环上的残留菌种,使下一次划线的菌种起源于上次划线的末端,以便取得单个菌落
划线结束后还需灼烧接种环的原因是 杀死接种环上的残留菌种,防止污染环境或感染操作者。灼烧接种环后必须待其冷却 ,才能进行划线操作,原因是 以免接种环温度过高,杀死菌种 ;在做第二次以及以后的划线操作时,必须从 上一次划线末端 开始,原因是末端菌体数目少,以便取得单个菌落 。在打开试管棉塞后以及塞上棉塞前都必须使试管口 通过火焰灼烧 ,稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的 梯度稀释,然后将不一样稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,在 稀释度足够高 的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成 单个细胞 ,从而在培养基表面形成单个菌落。该措施重要包括两个步骤,即系列稀释操作与 涂布平板 操作。在稀释时,应当将分别盛有9ml水的各支试管进行 灭菌 ,并编号。在将菌液用 移液管加入对应稀释倍数的试管时,应当用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸3次,使充足混匀。移液管事先应当 灭菌处理。涂布平板操作,用到的涂布工具是 涂布器 ,应当事先将其放入盛有酒精的烧杯中,然后在涂布前将其取出在火焰上引燃,并冷却 ,方可进行涂布。 不是 (是/不是)用涂布器从试管中取菌液,而是用胶头滴管,取的菌液一般不超出0.1 ml。整个接种操作应当在酒精灯火焰旁完成。
9、若用平板划线法接种后培养基上的某条线上的菌落分布呈沟槽状,其原因是划线时用力过大,划破培养基;若第二划线区域的第一条线上没有菌落长出,其原因也许是 未从上次划线末端开始、接种环未冷却 。若用稀释涂布平板法接种后的培养基的右下方没有菌落长出,而其他地方有较多的菌落长出,其原因最也许是 涂布不均 。 不是(是/不是)每次划线的菌种都起源于上次划线的末端;假如在平板上有5个划线区域,则接种环应当被灼烧 6 次。
10、在接种后,应当将一个 未接种的培养基 与接种的培养基都放入 37℃恒温箱 进行同时培养,其目标是 判断培养基灭菌是否彻底或是否被污染 。在微生物培养时,有时候需要进行振荡培养,其重要目标是 ①增大培养液中的溶解氧 ②使营养物质被充足利用 。接种后的培养基在12h与24h时,菌落的颜色、位置、形状 基本不变 ,大小 有
(有/没有)明显差异。
11、对于频繁使用的菌种,能够采取 暂时保藏 的措施,首先将菌种接种在 试管的固体斜面 培养基上,在适宜的温度下 培养 ,待 菌落长成 后,将试管放入 4℃ 的冰箱中保藏。但该措施的缺陷是 保存时间不长,且轻易产生变异或被污染 。对于需要长期保存的菌种,可采取 甘油管藏 的措施,在 -20℃ 的冷冻箱中保存。
12、尿素是一个农业氮肥, 不能 (能/不能)被农作物直接吸取,必须被土壤中的细菌分解成 NH3后,才能被植物吸取,尿素被细菌分解的反应式是 略 。在寻找目标菌株时的思绪是 依照它对生存环境的要求到对应环境中去寻找 。以尿素为唯一氮源的培养基具备选择作用的原因是 标准上只允许能够利用尿素的微生物在其上生长 。若要判断该培养基是否起到选择作用,能够用 接种了的牛肉膏蛋白胨 培养基做对照进行同时培养,假如,对照培养基上长出的菌落数明显 多于 (多于/少于)该选择培养基,则阐明该培养基起到选择作用。在选择培养基上生长的菌, 不一定 (一定/不一定)就是我们的目标菌株。在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入 酚红 指示剂,培养某种细菌后,假如PH 升高 ,指示剂变 红 ,这么便可初步判定该中细菌能够分解尿素。在判定尿素分解菌时,一个以尿素为唯一氮源的酚红判定培养基平板只能判定此前在选择培养基上生长的一个菌落。
13、测定微生物数量的常用措施有 稀释涂布平板法 (或称 活菌计数法 )与 显微镜直接计数法 。其中的稀释涂布平板法能够统计是 菌落 的数目,因此统计成果一般不用活菌数。在统计时一般选择菌落数在 30—300 的平板进行计数,其目标是 确保成果准确 。选择30---300的原因重要包括如下几点:①稀释度过低,轻易计数不准确,导致试验误差②稀释度过低,也许导致两个或者两个以上的菌体连在一起形成一个菌落,导致试验误差③稀释度过低,会导致培养基中的微生物的种内斗争、种间竞争激烈,使得某些个体无法形成菌落,而导致试验误差④稀释度过高,形成的菌落数过少,不具备代表性。该措施统计的菌落数往往比活菌的实际数目 低 ,原因是 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观测到的只是一个菌落 。在用该措施进行菌落计数时,每个稀释度下最少涂布 3 个平板,当几个平板上的菌落数都在30---300时,且数据相差不是很大的情况下,应当用几个数据的 平均值 作为该稀释度下的菌落值做计算。计算公式为:每克土壤(ml)样品菌株数= (C/V)M (其中,C代表某一稀释度下的平均菌落数,V代表涂布时用的稀释液体积,M代表稀释倍数)。显微镜直接计数的计算公式可描述为:1ml原液中的菌体数=每中格平均菌落数×25(或16)× 稀释倍数 × 10000 =每小格平均菌体数×400× 稀释倍数 × 10000 。该措施得到的数据比实际的活菌数目 多 。
14、土壤取样时, 不能 (能/不能)直接选择表层土,用于取样的小铁铲和盛土样的信封在使用前必须 灭菌 ,称取和稀释土样都应当在 酒精灯火焰旁 完成。测定土壤中细菌数量时,一般选用 104、105、106 倍的稀释液进行涂布平板并培养,温度一般控制在 30-37℃ ,培养时间一般 1-2 天;测定土壤中放线菌数量时,一般选用 103、104、105 倍的稀释液进行涂布平板并培养,温度一般控制在 25-28℃ ,培养时间一般 5-7 天;测定土壤中真菌数量时,一般选用 102、103、104 倍的稀释液进行涂布平板并培养,温度一般控制在 25-28℃ ,培养时间一般 3-4 天。若要初步判断培养基上的两个细菌是否为同种,能够依照 菌落 的特性,这些特性重要包括其 形状 、 大小 、 颜色 、 隆起程度 。
15、在植物(或动物等)的个体发育过程中,细胞在 形态 、 结构 、 生理功效 上都会出现 稳定性差异 ,形成这种差异的过程叫做细胞分化。细胞分化的根本原因是 遗传信息在不一样细胞中的执行情况不一样 。一般而言,分裂能力强的细胞,分化程度较 低 (高/低),反之亦然;高度分化的细胞一般 无 (有/无)分裂能力。已经分化的细胞,任然具备发育成 完整个体 的潜能,称为细胞的全能性。全能性是否体现,根本上讲,是要看是否由 细胞 发育成 完整个体 ,如马铃薯块茎的无性繁殖, 没有 (有/没有)体现细胞的全能性。细胞具备全能性的原因是 细胞中含有本物种的全套遗传信息 ,而植物细胞要体现出全能性的一个必要条件是 离体 。全能性的体既有难易程度之差异,如植物细胞比动物细胞更 轻易 (难/轻易);体细胞比生殖细胞,生殖细胞比受精卵都更 难 (难/轻易);幼嫩细胞比衰老细胞 轻易 (难/轻易);分化程度低的细胞比分化程度高的细胞更 轻易 (难/轻易);分裂能力强的细胞比分裂能力弱的细胞 轻易 (难/轻易)。
16、植物组织培养技术的理论基础是(或者说体现了) 植物细胞的全能性 ;离体的植物组织、细胞被称为 外植体 ,由它到愈伤组织的过程称为 脱分化 或 去分化 ;由愈伤组织继续培养,又可重新分化成根或芽的过程称为 再分化 。愈伤组织细胞特点是 排列疏松无规则、高度液泡化、呈无定型状态的薄壁细胞 ,而根尖分生区的细胞特点是 排列紧密呈正方形 。组织培养技术的应用包括①能够实现某些植物的 迅速繁殖 ,并培育无病毒植物②能够通过组织培养来生产药物③用于诱导 胚状体 的形成,进而形成人工种子④用于基因工程中转基因植物的取得。
17、影响植物组织培养的原因较多,重要包括如下几个方面:①组织培养的材料,不一样的植物组织,培养的难易程度差异很大;同种植物材料的 年龄 、 保存时间的长短 也会影响组织培养成果。一般而言,轻易进行 无性繁殖 的植物,也就轻易进行组织培养;菊花组织培养一般选择未开化植株的茎上部 新萌生的侧枝 ,其原因是这里的细胞 分化程度低、分裂能力强 。②组织培养有特殊的营养需求,植物组织培养常用的培养基是 MS培养基 ,该培养基重要成份包括: 大量元素 、 微量元素 、 有机物 。其中有机物里的甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素的作用是 满足离体的植物细胞在正常代谢受到影响时所产生的特殊营养需求 ;蔗糖的作用包括提供 碳源 ,以及 维持细胞渗透压 。③植物激素,包括 细胞分裂素、生长素 , 不是 (是/不是)植物细胞的营养物质,他们是开启 细胞分裂 、 脱分化 、 再分化 的核心性激素。在植物组织培养过程中,往往使用植物激素,来人为控制细胞的 脱分化 与 再分化 。激素的使用次序与 用量的百分比 都会影响组织培养的成果,如先用 生长素 ,再用 细胞分裂素 ,有利于细胞的分裂,但细胞不分化;若先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞 既分裂又分化 ;若二者同时使用,能够 提升分化频率 ,故在植物组织培养时一般都是 同时使用 ,以提升分化的也许性。在二者同时使用的前提下,二者的使用百分比,也会影响组织培养成果,如生长素/细胞分裂素的比值 高 时,有利于根的分化,而抑制芽的形成;比值 低 时,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值适中时,促进 愈伤组织 的形成。MS培养基与微生物培养基的重要差异是MS培养基中需 提供大量无机盐和添加植物激素 。④光照、PH、温度也将影响组织培养,菊花组织培养时,PH一般控制在 5.8左右 ,温度控制在 18-22℃ ,并且每日光照 12 h。⑤微生物的感染也是影响组织培养的另一重要原因,因为组织培养的外植体一般体积 较小 ,抗性 较差 ,因此组织培养对无菌的要求 高 (高/低)。
18、因为MS培养基的成份较多,而用量一般较小,所有需要配制 母液 ,无机盐中的大量元素浓缩 10 倍,微量元素浓缩 100 倍,激素、维生素一般可按照 1mg/ml 的质量浓度单独配制母液。菊花组织培养 无须 (必需/无须)添加植物激素。MS培养基配制过程中,在各种成份熔化定容后,需 调整PH ,再进行分装灭菌,且为了减少污染,应当先 分装 (分装/灭菌),MS培养基的灭菌用到的措施是 高压蒸汽灭菌 。在外植体的消毒时,既要考虑 消毒效果 (常用 污染率 反应),又要考虑植物的 耐受能力 (常用 存活率、死亡率 反应),外植体消毒一般要用 体积分数70%的酒精 、 质量分数0.1%的氯化汞 两种药剂。接种操作都必须在 酒精灯火焰旁 进行,且每次使用器械后,都需要 火焰灼烧 灭菌,在再次接种前必须待其 冷却 。接种的菊花等茎段插入培养基时,应当注意插入的方向,不能 倒插 。假如接种后的外植体,在培养过程中死亡,其原因也许是: ①培养基灭菌不合格 ②外植体消毒不合格 ③外植体消毒时被杀死 ④接种时培养基被污染 ⑤倒插 ⑥接种时镊子未冷却 等。
19、接种后的锥形瓶应当放到 无菌箱 中培养,期间定期消毒。培养其实是一个比较漫长的过程,首先应当是 愈伤组织 的培养阶段,当其长到一定大小时,才能够进行 生芽 培养,进而进行 生根 培养。这三个重要阶段的培养基组成上 不相同 (相同/不相同),即在生芽后欲生根,必须 转瓶 ,且培养基应当提升 生长素 (生长素/细胞分裂素)的含量。在移栽试管苗之前,应当先打开培养瓶的 封口膜 ,让试管苗在 培养间 生长几日。然后才将幼苗移植到消过毒的 蛭石 或 珍珠岩 等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤。
20、果汁制作要处理两个重要问题:一是果肉的 出汁率低、耗时长 ;二是榨取的果汁 浑浊、黏度高、易沉淀 。果胶是植物细胞壁以及 胞间层 的重要组成成份之一,它是由 半乳糖醛酸 聚合而成的大分子化合物,不溶于水。果胶可被 果胶酶 催化分解成 可溶 (可溶/不可溶)的半乳糖醛酸,从而使果汁出汁率提升,变得澄清。果胶酶不特指一个酶,重要包括 多聚半乳糖醛酸酶 、 果胶分解酶 、 果胶酯酶 ,可起源于植物、 霉菌 、 酵母菌 和 细菌 。
21、酶的活性是指 催化一定化学反应的能力 ,能够用一定条件下,酶所催化的某一化学反应的 反应速度 来表示,而酶反应速度用 单位时间 内, 单位体积 中反应物的 减少许 或产物的 增加量 。
22、蛋白质的提取和分离一般分为四步: 样品处理 、 粗分离 、 纯化 和 纯度判定 。血红蛋白提取第一步“样品处理”重要包括 红细胞 的洗涤、血红蛋白的 释放 、分离血红蛋白溶液。其中洗涤红细胞的目标是 清除杂蛋白 ,采集的血样分离红细胞应当采取 地低速短时 离心,然后清除上层透明的 黄色血浆 ,然后用五倍体积的 生理盐水 洗涤下层的红细胞最少 3次,直到 上清不再呈黄色 ,表白红细胞已洗涤洁净。若洗涤次数过少,无法 除去血浆蛋白 ;离心速度过高和时间过长会使 白细胞等一同沉淀 ,达不到分离的效果。血红蛋白的释放是在 蒸馏水 、 甲苯 的作用下,使红细胞破裂,血红蛋白释放。血红蛋白释放后形成的混合液,通过 r/min 的速度离心 10 min后将在离心管中分 4 层。至上而下,第1层为 无色透明甲苯层 ,第2层为 白色薄层固体 ,第3层为 红色透明液体 ,第4层是其他杂质的 暗红色沉淀层 。然后将上面3层通过 过滤 ,清除脂溶性沉淀层,于 分液漏斗 中静置片刻,便可得到血红蛋白水溶液。血红蛋白提取第二步“粗分离”指的是 透析 ,即将分液后得到血红蛋白水溶液装入 透析袋 中,用PH为 7.0 的 20mmol/L的磷酸缓冲液 进行透析 12 h。透析的目标是
清除样品中分子量较小的杂质以及用于更换样品的缓冲液 ,其原理是 透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保存在袋内 。血红蛋白提取第三步“纯化”指的是 凝胶色谱 操作。凝胶色谱法又叫 分派色谱法 ,是依照蛋白质相对分子量大小 分离蛋白质。相对分子质量 小 的蛋白质轻易进入凝胶内部的通道,旅程 较长 ,移动速度 较慢 ;相对分子质量 大 的蛋白质无法进入凝胶内部通道,旅程 较短 ,移动速度 较慢 。在凝胶色谱柱的制作时,用尼龙网和100目标尼龙纱模拟色谱柱的 多孔板 ;凝胶色谱柱的装填时,应当将凝胶用 蒸馏水 /洗脱液充足溶胀后, 一次性迟缓 倒入色谱柱内,整个装填过程必须防止 气泡 的形成。因为它将搅乱 洗脱液中蛋白质的洗脱次序 ,减少蛋白质分离效果。装填完后,需用 20mmol/L的磷酸缓冲液(PH为 7.0 )充足 洗涤平衡凝胶 12h,使装填紧密。当凝胶色谱柱洗涤平衡后,便能够进行 加样 与 洗脱 。加样前,应当打开色谱柱下端的流出口,使凝胶面上的缓冲液下降到 与凝胶面平齐 ,关闭出口;加样时,应当用吸管管头沿管壁 围绕移动 ,贴着管壁加样,注意不要破坏凝胶面,加样后,应当使样品 渗透 凝胶床内,而后补充一定体积的缓冲液于凝胶面上方。然后便可进行用 20mmol/L的磷酸缓冲液 进行洗脱。待 红色蛋白质接近色谱柱底端 时,便可搜集流出液,每 5 ml搜集一管。在洗涤平衡凝胶、加样与洗脱过程中,不能发生 洗脱液 流干,露出 凝胶颗粒 的现象。在色谱操作过程中假如 红色区带均匀一致的移动 ,阐明色谱柱的制作成功。血红蛋白提取第四步“纯度判定”指 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 操作。电泳是指带电粒子在电场的作用下发生 迁移 的过程,在电场作用下,带电粒子会向着与其所带电荷 相反 的电极移动,电泳过程中带电粒子在电场中的 迁移速度 取决于待分离的各分子带电性质的差异、 分子自身大小 、 形状 的不一样。电泳包括 琼脂糖凝胶电泳 与 聚丙烯酰胺凝胶电泳 两种,SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳是利用SDS所带的 负电荷 的量大大超出蛋白质分子原有的电荷量,从而掩盖不一样蛋白质的电荷差异,使电泳 迁移率 完全取决于 分子大小 。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定的蛋白质分子量时,测定的成果只是 单条肽链 的分子量。
23、胡萝卜素是 橘黄色 结晶,化学性质比较稳定,不溶于 水 ,微溶于乙醇 ,易溶于 石油醚 等有机溶剂。胡萝卜素依照 双键 的数目将其划分为 α、β、γ 三类,其中最重要的是β—胡萝卜素 ,—胡萝卜素能够用来治疗缺乏 维生素A 而引起的各种疾病,如夜盲症等。—胡萝卜素重要有三个起源,一是 从植物中提取 ,二是从大面积养殖的 岩藻 中取得,三是利用 微生物发酵 生产。
24、胡萝卜素的提取步骤包括粉碎、 干燥 、 萃取 、 过滤 、 浓缩 从而取得胡萝卜素。萃取胡萝卜素的有机溶剂应当具备 较高的沸点 、 充足溶解胡萝卜素 、 不与水混溶 。另外,还应当考虑萃取效率、对人的毒害、是否易燃等问题。萃取的效率重要取决于 萃取剂的性质与使用量,同时还受到原料颗粒的 大小 、 紧密程度 、 含水量 、 萃取温度 和 时间 等条件的影响。萃取过程中应当防止明火加热,采取 水浴加热 ,因为 有机溶剂易燃易爆 ;萃取装置安装回流冷凝装置,是为了预防 有机溶剂的挥发 ;在浓缩前,需对萃取液 过滤 ,以除去萃取液中的 不溶物 。干燥与萃取时,温度不能过高,时间不能太长,否则会导致 胡萝卜素分解 。提取的胡萝卜素粗品可通过 纸层析法 法进行判定,以判断是否存在所需的胡萝卜素。在判定期,应当在滤纸下端做一条 基线 ,在其上取A、B、C、D四点,其中A、D点加 标准样品 ,B、C点加 萃取样品 。该试验的层析液是 石油醚 ,层析时的层析液液面高度应当 低于 (高于/低于)样品点的基线,以预防样品原点中的色素 溶解于烧杯中的层析液里 。
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