中药甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道的影响.doc

中药甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜 L 型钙
通道的影响

作者：曹明， 葛郁芝， 罗骏， 王云霞， 张淑华， 吴志婷

【摘要】 目的研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜 L 型钙通

道的影响，探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常的作用机制。

方法用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞， 采用全细胞膜片钳记录技术，

观察不同浓度的甘松挥发油对 L 型钙通道的影响。结果浓度为 3，5，

10，20，50 mg/g 甘松挥发油可浓度依赖性地抑制 L 型钙电流，在浓

度 为 10 m g/g 时 ， 给 药 后 电 流 密 度 抑 制 约 为 （ 45.7 ±

3.5）%(n=5,P<0.01), 可使心肌细胞 L 型钙电流-电压曲线上移，

但激活电位、峰电位及反转电位无改变；使激活曲线向正电位方向变

化 ， V1/2 从 (-5.47 ± 0.50)mV 右 移 至 (-2.77 ± 0.49)mV(n=5 ，

P<0.05) ； 使 失 活 曲 线 向 负 电 位 方 向 变 化 , V1/2 从 (-20.82±

0.48)mV 左移至(-29.44±1.03)mV(n=5，P<0.05)。结论甘松挥发

油可通过浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞膜 L 型钙通道电流，使 I-V

曲线上移；使激活曲线右移，使失活曲线左移。

【关键词】 甘松； 膜片钳； L 型钙通道； 心室肌细胞

Abstract ： ObjectiveTo observe the effects of the

volatile oil of Nardostachys chinensis on L-Type Calcium channel

1

in isolated ventricular myocytes of rats.MethodsSingle

ventricular myocytes of rat were obtained by enzymatic

dissociation method ． The whole — cell patch clamp recording

technique was used to record the change of L-Type Calcium channel

current by diferent dosage of the volatile oil of Nardostachys

chinensis from 3to 50ppm.ResultsThe volatile oil of

Nardostachys chinensis decreased L-type calcium channel current

in a dose—dependent manner. The volatile oil of Nardostachys

chinensis (10mg/g) decreased the current density by 45.7％

(n=5,P<0.01),the current—voltage curve was moved up and

active potential，peak potential and reverse potential had no

change． activation curve was moved to more positive potential The

and the inactivation curve moved to more negative

potential．ConclusionThe volatile oil of Nardostachys chinensis

decreases the L-Type Calcium channel current in a dose —

dependent manner,the current-voltage curve was shifted

upward,the activation curve was shifted towards the

depolarizing direction and the inactivation curve was shifted

towards the hyperpolarizing direction.

Key words ： Nardostachys chinensis ； Patch-clamp

techniques； L-Type Calcium channel； Myocardial cell

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甘松为败酱科甘松属植物，甘松挥发油是甘松有效浓缩成分

［1］
，主要分布在四川、甘肃、青海等地。其抗心律失常机制已有初

步的研究［2］ 我们发现甘松挥发油对快钠通道（INa）以及瞬时外向 ，

钾通道(Ito)均有浓度依赖性抑制作用， 本研究应用膜片钳全细胞记录

技术，观察甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜 L 型钙通道(ICa-L)的影

响，从离子通道水平探讨其作用机制。

1 材料和方法

1.1 材料健康成年雌雄性 SD 大鼠，体质量 200～300 g，由

南昌大学医学院动物所提供。甘松挥发油由阴干后的甘松样品 1 000

g，按《中国药典》 Ⅰ部）甲法进行水蒸馏，经 6 h 后停止加热，静 （

置过夜，油水相分离后得浅绿色油状液体［3］,再将已提取好的甘松

挥发油按 1∶3 的比例用二甲基亚砜溶解，再与 ICa-L 细胞外液相溶。

1.2 膜片钳记录仪器与设备膜片钳放大器(Axopatch 200B)

及 DigiData 1200B 型数/模（或模/数）转换器均为美国 Axon 公司产

品，荧光倒置显微镜，03-D 玻璃微电极拉制仪。

1.3 溶液配制无钙台氏液为(mmol/L)：NaC1 136，KC1 5.4，

MgCl2 1．0，NaH2PO4 0．33，HEPES 10，glucose 10，NaOH 调 pH 至

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