1、目的:了解抑菌剂对微生物生长影响;目的:了解抑菌剂对微生物生长影响;学习抑菌实验的基本方法。学习抑菌实验的基本方法。菌种:金黄色葡萄球菌;大肠杆菌菌种:金黄色葡萄球菌;大肠杆菌化学消毒剂:化学消毒剂:75-100酒精;大蒜水;氨苄酒精;大蒜水;氨苄青霉素(青霉素(80万单位万单位/ml)。)。实验原理实验原理微生物的生长受很多因素的影响,如物理因素微生物的生长受很多因素的影响,如物理因素(紫外紫外线、高温、离子强度等线、高温、离子强度等)、化学因素、化学因素(pH值、盐度、值、盐度、化学消毒剂如乙醇、甲醛、酚等化学消毒剂如乙醇、甲醛、酚等)、生物因素、生物因素(抗生素、抗生素、病毒等病毒等)。
2、研究或观察这些因素对微生物生长的影响。研究或观察这些因素对微生物生长的影响可用抑菌圈法。在固体平板培养基上接入实验菌,可用抑菌圈法。在固体平板培养基上接入实验菌,接入实验菌的量以能长满整个平板为宜,同时以合接入实验菌的量以能长满整个平板为宜,同时以合适的方式加入抑菌剂。适的方式加入抑菌剂。实验原理实验原理接种后在平板的某些位置放置含抑菌剂的载体接种后在平板的某些位置放置含抑菌剂的载体(滤纸滤纸片、牛津杯等片、牛津杯等),抑菌剂会由载体的位置向周围扩散,抑菌剂会由载体的位置向周围扩散,中央的浓度最高,周围逐渐下降。中央浓度高的位中央的浓度最高,周围逐渐下降。中央浓度高的位置微生物不能生长,周围浓
3、度低的位置菌可以生长,置微生物不能生长,周围浓度低的位置菌可以生长,形成抑菌圈。在同样的浓度下,抑菌圈的大小可反形成抑菌圈。在同样的浓度下,抑菌圈的大小可反映样品的抑菌能力。若是相同的样品,则可反映抑映样品的抑菌能力。若是相同的样品,则可反映抑菌剂的浓度。菌剂的浓度。实验原理实验原理抑菌剂抑菌剂实验步骤实验步骤1.菌液制备:提前菌液制备:提前18小时培养小时培养50ml;2.混菌:无菌吸取混菌:无菌吸取1ml菌液到固体肉汤培养基中菌液到固体肉汤培养基中混合均匀;混合均匀;3.倒平板:把已经混有菌的固体肉汤培养基倒平倒平板:把已经混有菌的固体肉汤培养基倒平板,每组板,每组2个;个;4.贴滤纸片:用无菌镊子取浸有化学消毒剂滤纸贴滤纸片:用无菌镊子取浸有化学消毒剂滤纸片,在容器内沥干多余溶液,取出贴在平板上,片,在容器内沥干多余溶液,取出贴在平板上,并标记。并标记。5.培养和观察培养和观察:37保温保温24小时,记录抑菌圈大小。小时,记录抑菌圈大小。作业作业1.完成实验报告。完成实验报告。2.根据抑菌圈的大小,比较我们使用的微生根据抑菌圈的大小,比较我们使用的微生物对三种抑菌剂的敏感性,并分析原因。物对三种抑菌剂的敏感性,并分析原因。