NB∕T 34057.7-2020 木质纤维素类生物质原料化学成分的测定 第7部分：淀粉的测定(能源).pdf

ICS 27.010 CCS F 13 4-囊号，xxx-xxxNB 中华人民共和国能源行业标准NB!T 34057.7-2020 木质纤维素类生物质原料化学成分的测定2020-10-23发布第7部分:淀粉的测定Determination of chemical components in Iignocellulosic feedstocks一Part 7:Determination of starch 国家能源局发布2021-02-01实施前百主FF司NBtr 34057.7- 2020 本文件按照GB/T1. 1-202叫标准化工作导则第1部分2标准化文件的结构租起草规则的规定起草.本文件是NB/T34057(术质纤维章类生物质原料化学成分的测定的第7部分.NB/T 34057分为9个部分第1部分.标准样品的制备;-一第z部分s标准样品的纯化F第3部分s水分的测定，第4部分.可榕性精的测定;一一第5部分.纤维章、半纤维章、果胶和木质章的测定，第6部分s灰分的测定，第7部分:淀粉的测定，第8部分z蛋白质的测定s第9部分，I类的测定.本文件由能濒行业非粮生物质原料标准化技术委员会(NEAjTC24)归口.本文件起草单位z中国农业大学.本士件主要起草人s李慧、张佳佳、谢光辉.I NB，厅34057.7-2020木质纤维素类生物质原料化学成分的测定第7部分:淀粉的测定1 范围本文件规定了木质纤维章类生物质原料淀粉测定的术语和定义、原理、仪器设骨、试剂、试验步骤、试验数据处理以且精密度.本文件适用于农林废弃物、能源植物等各类草本就术本本质纤维肃类生物质原料标准样品包括衍生材料).2 规范性引用立件下列主件中的内容通过主中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件s不注目期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单适用于本文件.GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法NB/T 34029 非粮生物质原料名词术语NB/T 34057. 1 本质纤维章类生物质原料化学成分的测定第1部分z标准样品的制备NB/T 34057. 2木质纤维章类生物质原料化学成分的测定第2部分s标准样品的纯化NB/T 34057. 3本质纤维章类生物质原料化学成分的测定第3部分g水分的测定NB/T 34057. 6本质纤维素类生物质原料化学成分的测定第6部分=灰分的测定3 术语和定义NB/T 34029界定的下列术语和定义适用于本文件.为了便于使用，以下直直列出了NB/T34029中的某些术语和寇且.3. 1 3.2 本质纤维章Iignocellul晒混有束质嚣、纤维章和半纤维章的天然植物纤维.来源，NB/T34029-2015.4.11 淀粉sta.-clt由葡萄糖的离黯体形成的碳水化合物，分为直链淀粉和支链淀粉两类E辈翻.NB/T34029-2015,4. 12J 4原理淀粉是由葡萄糖残基组成的直链或主链多糖，在r淀粉酶和淀粉葡萄糖背酶处理后*解为葡萄糖的形式，在规定的条件下定量测定.5 仪榻设备5. 1 恒温振荡水浴锅:可维持000士的的条件.5.2 1 mL移液据.5.3 15 mL离心管.5.4低速离心机z可雄持3or/min的条件.阳厅34057.7-2020 5.5 高效液相色谱仪.配有示差折光检测器.5.6 色谱柱及保护柱.5.7 包谱瓶.5.80.22m徽孔滤膜.5.9 5 mL一次性注射器.5. 10 广泛pH试纸g范围4-9.5. 11 分析天平z精宿度达0.0001 g. 6试剂所用试剂除注明外均为分析纯，所用革应符合GB/T6682中一级水的规定-6. 1 r淀粉酶.1000 U/mg. 6.2 淀粉葡萄糖昔酶.70U/mg. 6. 3 磷酸二氢销确酸组二锅缓忡液，0.1mol!L.pH=6.0. 6.4 乙酸乙酸纳缓冲液.0.1mol/L,pH=4. 6. 6.5二用基亚枫.6.6 95%乙醇.6.7 r淀粉酶榕液.388U/mL.在100mL确酸二氧铀响酸氢二铀组冲液中加38.8吨的r淀粉酶进行配制.6. 8 淀粉葡萄糖昔酶溶液.10U/mL.在IOmL己酸-乙酸销缓冲液中加人138mg的淀粉葡萄糖昔酶进行配制.6.9 淀粉标准品-6.10色谱级以+l葡萄糖.6. 11 色谱级流动相.7试验步7.1 标准样晶的制备和纯化7. 1. 1 标准样品的制备方法按照NB/T34057. 1的规定执行.7. 1.2 所采用点分除注明外均为相对啻水量，水分的测定方法按照NB/T34057. 3的规定执行.7. 1.3 标推样品的纯化方法按照NB/T34057. 2的规寇执行.7. 1. 4 标准样品和技正样品灰分的测定方法按照NB/T34057. 6的规定执行.7.2 挥准样晶的酶解排取100mg吨化后的缸惟样品，精确I皿莓，记录为W.特神最后的骨幢样品事15mL离心管中，加入95.Yo乙廓。.2mL.D盖密封后振荡混匀.打开盖于，立即加入2mL二甲基亚鼠溶液，振蔼混句后拥盖密封，在1的条件下水楠摄葛提取5min.打开强于，加入。淀粉酶梅液3mL.根据待测样品淀粉吉盘水平，在l的条件下水楼振荡提取6min-16 min. 打开盖于，在水浴后的15皿L离心管中加入4mL乙酸-乙酸纳缓冲液，加盖密封后援萄渴匀.打开盖子，立即加入淀粉葡萄糖苦酶溶液0.4mL.加盖密封后振荡混匀，在50C的条件下7l吕摄苦奋提取30mln.将盛有样品的15mL离管冷拥王室温，置于离心机中，在3000r/min的牵件下离心10min.此时淀粉酶解液的体积CVl为9.6mL.使用5mL一次性注射器和0.22m徽孔墟膜过滤，待测.采用同样方法处理淀粉标准品，用于测试淀精色谱校正标样回收率R，.7.3 淀粉的测定7. 3. 1 高效擅帽色诺标准曲线的绘制IB/T 34057. 7-2020 称取色谱，t!l0(+)-葡萄糖1吨一同置于一个事先盛好5mL去离子水的10mL容量瓶中，充分il!句并定窑，此时标准母液中葡萄糖的浓度为10.000 0 mg/mL.以此类推，配制浓度分别为5.0000 mg/mL、且5000 mg/mL、1.250 0 mg/mL.O. 625 0 mg/mL、0.3125mg/mL.0.156 3 mg/mL.上机绘制标准曲线.通过包谱级标准样品建立标准曲线，线性回归r要求大于0.999.7.3.2 菌妓擅帽色情仪参考最件用注射器取约2mL过滤盾的酶解液到色谱瓶中，上机待测.高效液相包谱条件按如下设置，时色谱柱:精分析柱且保护桂耐盐), b) 流动相g根据糖分析柱要求配制，c) 柱温，根据糖分析桂要设置，d) 检测揣类型及温度g示差折光检测器.20C-40C，e) 运行时间:20min.40 mn; 。进样量;20L，g) 流速;0.6mL/min-1. 0 mL/min. 记最高效液相色谱仪器显示葡萄糖浓度为C，8试验披据处理8. 1 淀份色谱校正标样回收率按公式(l)计算.Rs=Xl.川. 式中ER，一一淀粉色谱校正标样回收卑，单位为百分号(%)，R，一一淀粉色谱校正标样酶解后实测葡萄糖浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)，R.一一淀粉色谱校正标样水解葡萄糖浓度，单位毫克每毫升(mg(mL) 8.2 标准样晶中淀粉含量按公式(2)计算.S叫且9VCER-。X100.刷刷11 -M、式中3Wx 1:.I 飞100I 5仙一-一标准样品中淀精啻置，单位为百分号(%)，C 一一葡萄糖浓度，单位为毫克每毫升(mg(mL)，V 淀粉酶解液的体坝，单位为升(mL)，此处为9.6mL; R明一-标准样品回收率，单位为百分号灼，W 一一称取标准样品的质量，单位为毫克(mg), M 一一标准样品水分，单位为百分号，Rs -一淀粉色谱校正标样回收事，单位为百分号仰，0.9一一嘀萄糖转化为淀粉的罩数.8. 3 样晶申迫m吉量按公式(3)计算.r. I 1-Ashltl、民lS阻，也= (S/m.F，)+ IS， X 一Fm|阳_=r一一一. 40，坐1+I 飞l-Ash4Q/WJA 卜(3)阴. 100 1 . I-;:;=-100 J 式中3 /T 34057. 7-2020 5, 标准样品中淀粉啻量，单位为百分号(%)，S阐标准样品中淀粉肯量.单位为百分号C%);F一一标准样品获得串，单位为百分号l北E印刷厂印刷新华书店北京监行所韭轩各地新华书店经销 开卫在回OmmX12四mm1/16 印张字敢于字2021年2月1聪l版2021年2月北京第1次印刷书号16109.8470 定价元 版权专有侵权必究警报电话[phone]药1