细胞形态观察.doc

实验二 细胞形态观察

一、实验目的：
1. 认识人体及植物细胞的基本形态；
2. 认识红细胞和白细胞的构造特点；
3. 掌握临时装片和血涂片的制备方法；
4. 掌握光学显微镜的使用方法以及光镜下所见细胞的绘图记录方法。

二、实验原理：
细胞是生物体结构和功能的基本单位，构成高等生物体的细胞种类繁多、形态各异。由于大多数细胞体积微小，必须借助光学显微镜才能被观察到，并且大多数细胞是透明的，须经染色处理，才能看清细胞结构。在普通光学显微镜下，一般可见的基本细胞结构为细胞膜、细胞质和细胞核3个部分。

三、实验器具、材料与试剂：
1．器具：光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、牙签、吸水纸、染缸、一次性医学取血针、
2．材料：洋葱、西红柿、
3．试剂：
（1）1%碘液：1g碘片、2g碘化钾溶于100mL 80%的乙醇或蒸馏水中即可。
（2）75%酒精
（3）Giemsa-Wright联合染液

四、实验内容与方法：
1．植物细胞形态观察：
（1）洋葱鳞茎表皮细胞（平面）的标本制备与观察：
制片：取干净载玻片，中央滴一滴2%碘液；取洋葱肉质磷叶，用镊子在其内表面轻轻撕取一小块方形膜质表皮（边长3-4mm），置于载玻片的碘液滴中，铺平，用镊子夹取干净的盖玻片，将其一侧先接触标本旁的碘液，再缓缓的盖上盖玻片，尽量避免产生气泡，用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察：先用低倍镜观察，再用高倍镜；绘制并描述观察到的细胞形态。
（2）番茄果肉细胞（立体）的标本制备与观察：
制片：掰开番茄的果实，用牙签挑一些熟透的果肉放在载玻片上，加1滴稀释的紫药水（2-3滴水加1滴紫药水），盖上盖玻片，在玻片上轻轻地压一下。
观察：置显微镜下观察，可见立体细胞，轻轻推动一下盖玻片，就能看到分离的果肉细胞在滚动，这样细胞的几个面就看的很清楚。注：水太多，推片时就看不到细胞滚动，可以用吸水纸在盖玻片的边上吸去。
2．人体细胞形态观察：
（1）人口腔黏膜上皮细胞标本的制备与观察：
制片：吸取1滴碘液在载玻片中央，用牙签伸入自己的口腔内壁轻轻刮取黏膜上皮细胞，然后将其放入载玻片上的染液中，来回搅动使细胞散开；染色1min左右，小心加盖盖玻片，尽量避免产生气泡，用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察：先用低倍镜寻找口腔上皮细胞，该细胞体积小、着色淡，寻找时应稍降低视野中的亮度。选择轮廓清晰地细胞移至视野中央，用高倍镜观察。描述观察到细胞。
（2）血涂片的制备与血细胞观察：
采血与涂片：75%酒精棉，对左手无名指进行表面消毒，待酒精挥发后，用一次性采血针刺破指尖，用右手压挤这个伤口两旁，挤出血来，用载玻片与血滴接触取血。另取一片载玻片与前玻片上的血滴接触，使两玻片成40°～ 45°角，血滴就沿玻片边缘散开在两玻片的接触面上。迅速向前推动载玻片，使血在载玻片上形成血膜。血要涂得快、涂得薄，否则，血细胞重叠，不易观察。
染色：待血干燥后，在血涂片上滴上适量的Giemsa-Wright染液，要求盖上血膜。1-2min以后用等量的蒸馏水滴在染液上，轻摇玻片，使之充分混合。再静止3-5min后，用清水漂洗直到血涂片呈淡红色为止，干燥后即可镜检。
观察：高倍镜观察血涂片，能看到染成红色的血细胞中，夹着染成不同颜色的白细胞。白细胞有好几种，观察并区分它们，将它们的特征描述出来。