几种树木枝条浸出液对木耳菌丝体生长发育的影响.doc

几种树木枝条浸出液对木耳菌丝体生长发育的影响
竺俊鑫 姚 勇 孟 丽作者简介:竺俊鑫,男,汉族,1979年生.河南师范大学硕士,主要从事植物资源及利用研究.
* 通讯作者: 孟丽,女,汉族,1959年生.河南科技学院生物技术系教授, ,主要从事植物资源和食用菌研究.

(1.河南科技学院 河南新乡 453003 ；2.河南林业勘察设计院 河南郑州 )
摘要：试验以刺槐Robinia pseudoacacia、榆树Ulmus pumila、速生杨Populus sp、连翘Forsythia suspensa、构树Broussonetia papyrifera、荆条Vitex negundo、麻栎Quercus acutissima、桑树Morus alba、柳树Salix matsudana和紫穗槐Amorpha fruticosa 等十种植物的枝条为试验材料，以黑木耳（Auricularia auricula）009、916、139和毛木耳（Auricularia polytricha）“上海”、 “新科”、951、781为试验对象，观察不同枝条浸出液培养基对木耳菌丝体生长发育的影响。结果发现同一枝条浸出液培养基对不同木耳品种的菌丝体生长发育有不同的影响，在同种培养基上木耳菌丝体有的菌株能适应、有的则不能适应。在杨树培养基上黑木耳009、916可以正常生长，黑木耳139在刺槐培养基上适应性比较好。
关键词：黑木耳、毛木耳、培养基

木耳是我国人民比较喜爱的食用菌之一，也是我国的传统出口商品，产量占全世界产量的96%以上，远销日本、泰国、印尼、菲律宾等国[1]。木耳具有较高的食用和医疗价值。木耳多糖对细胞免疫和体液免疫功能具有良好的促进作用[2]；木耳具有抗白细胞降低、抗肿瘤、抗辐射、抗突变、抗炎症等细胞保护功能[3,4]；具有降低血脂、胆固醇、血液粘度，抗血栓形成作用[5]；具有降低血糖、抗糖尿病以及降低脂褐质含量，增强SOD活力，减少有害物质自由基产生的功能[6]；同时还能促进核酸、蛋白质的生物合成和防治多种老年性疾病等[7]。
木耳生产主要有段木栽培和袋料栽培两种生产方式，都消耗大量木材。但目前现阶段我国采取封山育林的政策，限制对森林的砍伐[8]，这将影响到木耳产业的发展。本试验选择了十种在豫北资源比较丰富的树种作为试验材料，用这些材料制作培养基接种木耳菌丝进行对比试验，观测其对木耳菌丝体生长发育的影响，通过对试验结果的分析，拟为科学选择栽培原料和发现新的菇木资源提供理论依据。
1材料和方法
1.1试验材料
1.1.1 供试菌株
黑木耳009、黑木耳916、黑木耳139和毛木耳781、“上海”毛木耳、“新科”、毛木耳951，母种购自河南省科学院生物研究所。
1.1.2供试材料
连翘、构树、荆条、麻栎和桑树取自河南关山；速生杨、刺槐、柳树、紫穗槐和榆树取自河南科技学院校内。
1.2 试验方法
1.2.1试验设计
以PDA为对照（CK），分别以连翘、构树、荆条、麻栎、桑树、速生杨、刺槐、柳树、紫穗槐和榆树的枝条浸出液制作培养基，将供试菌株在无菌条件下分别接种在不同枝条培养基和CK上，每个处理设10个重复。
接种后将试管进行暗光培养，在木耳菌丝恢复生长且生长稳定后，毛木耳菌丝生长指标每天观察一次，连续观察三天，每天测量一次菌丝生长速度；黑木耳菌丝生长指标每2天记录一次数据，连续三次。同时观察木耳菌丝长势、色泽、稠密度等各项指标。
1.2.2 培养基制作
将选取的枝条阴干后破碎，取50g放于1000mL蒸馏水中浸泡24h，然后用文火煮沸30min后过滤，枝条液煮沸后加琼脂20g，待琼脂溶解后再加入蔗糖20g，白糖溶化后将培养基定容至1000mL，最后分装入试管并灭菌、摆斜面。
2结果与分析
2.1 不同枝条浸出液培养基对黑木耳菌丝体生长发育的影响
表1 黑木耳在不同培养基上菌丝体的生长情况（长速:mm/2d）
培养基
黑木耳009　
（LSD0.05=0.32）
黑木耳139
（LSD 0.05=0.39）
黑木耳916
（LSD 0.05=0.36）
密度
长势
长速
密度
长势
长速
密度
长势
长速
CK
浓
+++
8.47
稀疏
+
7.47
稀疏
+
6.27
榆树
浓密
++++
6.6
一般
+++
6.88
一般
+++
5.52
荆条
浓
+++
6.5
一般
++
6.65
稀疏
++
5.81
麻栎
浓
+++
6.29
一般
+++
6.86
一般
++
4.86
刺槐
浓密
++++
6.1
浓密
++++
6.23
浓密
++++
5.26
紫穗槐
浓
++
6
浓
++
4.94
一般
++
4.67
柳树
浓密
+++
5.79
浓密
++
5.64
浓
++
3.88
桑树
浓
+++
5.64
一般
+++
6.48
一般
++
5.37
连翘
浓密
++
4.61
浓密
+++
5.21
一般
++
3.17
构树
浓
++
3.96
浓
++
5.79
一般
++
3.65
速生杨
浓密
+++
5.95
——
——
0
浓
++
4.9
注：+表示菌丝极弱、++表示菌丝较弱、+++表示菌丝比较健壮、++++表示菌丝十分健壮。
由表1可以看出不同的枝条浸出液对黑木耳的菌丝生长速度、菌丝长势、密度和色泽都有显著的影响。
黑木耳009从生长势方面看在榆树、刺槐培养基上木耳菌丝浓密洁白生长势强明显超过CK，从菌丝生长速度来看在CK中生长速度最快达到8.47mm/2d，其次是榆树、荆条、麻栎、刺槐、紫穗槐培养基。速生杨？
黑木耳139从长势方面来分析在刺槐培养基上最适合生长，菌丝浓密洁白粗壮并且生长的整齐度最好。榆树、柳树、桑树、连翘、麻栎培养基上菌丝生长势也比较强。菌丝在CK上生长速度最快达到7.47mm/2d，在榆树、麻栎、荆条培养基上菌丝生长速度都比较快且没有显著差异，在刺槐培养基上菌丝生长速度也比较快达到6.23mm/2d。菌丝在速生杨培养基上未萌发。
黑木耳916菌丝体在CK上的菌丝生长速度最快，其次在荆条、桑树培养基上菌丝生长速度也比较快。从长势看刺槐培养基上黑木耳916菌丝洁白浓密粗壮长势最好，其次是榆树培养基上菌丝密度一般，但菌丝洁白且生长速度较快，总体生长势也比较良好。速生杨？
2.2 不同枝条浸出液培养基对毛木耳菌丝体生长发育的影响
表2 毛木耳在不同培养基上菌丝体的生长情况（长速：mm/d）
培养基
毛木耳781
（LSD 0.05=0.31）
毛木耳“上海”
（LSD 0.05=0.28）
毛木耳“新科”
（LSD 0.05=0.29）
毛木耳951
（LSD 0.05=0.28）
密度
长势
长速
密度
长势
长速
密度
长势
长速
密度
长势
长速
CK
一般
+++
6.39
浓密
++++
5.46
稀疏
+
4.19
一般
++
5.5
刺槐
浓密
++++
6.02
浓密
++++
5.31
浓密
++++
3.02
浓密
++++
5.17
榆树
浓
+++
5.46
浓密
+++
5.5
稀疏
+
2.75
浓
++++
5.52
桑树
浓
+++
5.13
浓密
++++
5.04
浓
+++
3.36
浓
+++
4.89
荆条
浓
+++
4.64
浓
+++
4.88
浓密
+++
3.9
浓
++
3.88
构树
浓
+++
4.35
浓
+++
4.83
浓
++
2.29
浓
++
3.79
麻栎
浓
+++
4.25
浓
+++
4.04
浓
++
2.64
浓
++
3.83
紫穗槐
浓
++
4.15
浓
++
4.56
浓
++
2.86
浓
++
4.39
柳树
浓
++
3.62
浓密
+++
3.37
浓
++
2.88
浓密
++
3.31
连翘
浓
++
2.97
浓
++
3.98
浓
+
2.06
浓
++
3.62
速生杨

0

0

0

注：+表示菌丝极弱、++表示菌丝较弱、+++表示菌丝比较健壮、++++表示菌丝十分健壮。
由表2可以看出不同枝条培养基对毛木耳菌丝体生长有显著影响。
毛木耳781就菌丝生长速度来看，CK菌丝生长最快达到6.39mm/d，其次是刺槐、榆树、桑树培养基菌丝的生长速度都超过了5mm/d，荆条、构树、麻栎、紫穗槐培养基上菌丝生长速度在4mm/d以上，速生杨培养基上的种块未萌发。从菌丝长势来看刺槐培养基上菌丝长势最健壮、菌丝浓密洁白，表现最好。其次是CK、榆树、桑树、速生杨、构树、麻栎培养基，在这些培养基上菌丝浓白、长势较壮，营养条件能够满足毛木耳781的生长。
毛木耳“上海”菌丝生长在不同材料的培养基上也有显著影响。从菌丝生长速度来分析：CK、榆树、刺槐培养基上的菌丝生长速度最快达到5.3mm/d以上，三者菌丝生长速度没有显著差异。其次是桑树、荆条、和构树培养基，这三种培养基上菌丝生长速度也没有显著差异。速生杨培养基上接种的10个重复均未萌发。从菌丝长势来看榆树、刺槐、桑树、CK培养基上菌丝长势最健壮、菌丝浓密洁白，表明这几种枝条提供的营养能够满足“上海”毛木耳生长发育的需要。荆条、构树、麻栎、连翘培养基菌丝生长势较强，菌丝浓白，营养充分。
毛木耳“新科”菌丝从生长速度看，CK上的菌丝生长速度最快，其次是荆条培养基、桑树培养基，再次是刺槐、柳树、紫穗槐、榆树培养基，这几种培养基上菌丝生长速度没有显著差异。速生杨培养基上10个重复菌种块均未萌发。从菌丝长势来分析，CK菌丝生长速度虽快但菌丝稀疏细弱，严重生长不良，培养基所提供的营养不能满足菌丝健壮生长的需要。荆条、桑树、刺槐培养基上菌丝浓密洁白粗壮，菌丝的生活力强、生长速度快、长势健壮，枝条提供的养分能够满足菌丝生长的需要。
毛木耳951菌丝生长从菌丝生长速度方面分析，在榆树和CK培养基上菌丝生长速度最快，其次分别是刺槐、桑树、紫穗槐培养基，荆条、麻栎、构树培养基上菌丝生长速度没有差异。速生杨培养基上菌丝未萌发。从菌丝的长势来分析榆树、刺槐培养基上的菌丝浓白健壮，菌丝体的生长势强，枝条提供的营养能较好的满足毛木耳951的生长发育需要。其次是桑树培养基，其上菌丝浓白较健壮菌丝体的营养比较充分，能够满足菌丝正常生长发育的需要。CK、紫穗槐、荆条、麻栎、构树、连翘培养基上的菌丝长势比较弱营养不太充分。
3讨论
3.1同一木耳品种在不同的枝条培养基上菌丝体表现不同
1 荆条, 2 榆树, 3 桑树, 4 刺槐, 5 速生杨, 6 麻栎, 7 紫穗槐, 8 柳树, 9 构树, 10 连翘
图-1黑木耳009和916在不同培养基上的菌丝生长速度和生长势
同一木耳品种菌丝在不同的培养基上表现出不同的适应性，参试的木耳品种在刺槐、榆树、桑树培养基的适应性比较好，菌丝生长势强，而在速生杨培养基的适应性就比较差，只有黑木耳009和黑木耳916能够正常萌发，但速生杨培养基对这两个品种产量的影响还要进一步观测。从图-1可以看出黑木耳139在不同培养基上菌丝生长速度不同，表显出对不同培养基的适应能力不同，这可能是由于不同培养基所提供的营养成分构成、含量不同，所含有的化学物质不尽相同造成的。
3.2不同木耳品种在同一种培养基上菌丝体生长发育不同
生长速度
0
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
菌丝生长速度
(mm/2d)
菌丝生长势
从图-2可以看出不同木耳品种在同一种培养基上菌丝体生长发育情况不同，毛木耳781在榆树培养基上生长势最强，生长速度也比较快，表明毛木耳781比较适应榆树培养基。毛木耳“新科”在榆树培养基上生长势较弱生长速度比较慢，表明毛木耳“新科”菌丝体不太适应榆树培养基。不同木耳品种在同一种培养基上出现菌丝体表现不同的现象，可能是由于不同品种间菌丝体的生理特性不同，对养分的分解利用能力不同和不同的木耳品种对同种养分的喜好不同造成的。因此在生产中要根据生产原料成分构成选择适合的菌种或根据现有品种选择适合的生产原料，这样才能做到资源的合理利用。
注：1 毛木耳951, 2 毛木耳“新科”, 3 毛木耳“上海”, 4 毛木耳781
图-2榆树培养基上不同毛木耳菌丝生长势和生长速度（mm/d）
3.3速生杨浸体液抑制木耳菌丝生长发育的原因
在试验中出现有些品种的种块，在杨树枝条浸出液培养基上出现不能萌发的现象，可能是由于速生杨中含有某种抑菌物质造成的，目前从速生杨中已分离出对羟基苯甲酸、黄酮类化合物、香草酸等，从速生杨树皮中还分离得出绿原酸，杨树皮中还含有水杨酸、对羟基肉桂酸及咖啡酸[9]，人们已从速生杨中分离出90多种化学成分[10]，可能是其中的某种成分抑制了菌丝的萌发，例如绿原酸是广谱的抗菌药，可能会抑制木耳菌丝的生长发育。但黑木耳916在杨树枝条浸出液培养基上可以生长。我国速生杨种类繁多，分布遍及全国，天然速生杨林面积约300万hm2，人工速生杨林面积已经约800万hm2 [ 11] 。豫北地区近年来大规模发展速生杨，每年伐树和修剪下来的枝条数量相当可观。如果深入研究，把杨树培养料作进一步的处理，在其中添加某些辅料，有望在杨树培养料上栽培木耳，拓宽木耳栽培料来源，发展木耳产业。
参考文献：
[1]丁湖广.中国黑木耳银耳代料栽培与加工[M].北京:金盾出版社.2001:1-3..
[2]周鹏,谢明勇.多糖的生物活性[J].食品研究与开发,2001,22(2):6-8.
[3]张倩.多糖功能的研究进展[J].食品研究与开发,1998,19(3):11-13.
[4]齐德生,于炎湖.黑木耳多糖抗肿瘤作用的实验研究[J].华中农业大学学报,1994,13(2):160-163.
[5]蔡小玲,章佩芬,何有明,等.黑木耳多糖、红菇多糖的降胆固醇作用研究[J].深圳中西医结合杂志,2002,12(3):137-139.
[6]范亚明,王朋,张颖,等.黑木耳抗脂质过氧化的初步探讨[J].心肺血管病杂志,1995,14(4):236-238.
[7]郑炯,黄明发,张坤.黑木耳多糖生物活性研究进展.粮食与油脂[J].2006,10:46-48.
[8]徐立,隋进清.反季节代料栽培黑木耳技术研究[J].中国食用菌. 2006,25(04):59.
[9]魏舜明,周银莲,张英伯.几种速生杨树皮中酚贰和酚酸类化合物的初步研究[J]林产化学与工业,1995,5(2):1-9.
[10]彭镇华,长江中下游滩地速生杨栽培与利用[M],北京:中国林业出版社,2001:4-7.
[11]张绮纹，李金花.速生杨工业用材林新品种[M].北京:中国林业出版社,2003:3-5.
THE DIFFERENT INFLUENCE OF SEVERAL TRESS LIXIVIUM
ON THE GROWTH OF BLACK FUNGUS MYCELLIUM
Zhu Jun-xin Meng Li*
(Henan institute of Science and Technology)
ABSTRACT： In this experiment，all the ten kinds of Robinia pseudoacacia，Ulmus pumila，Populus sp，Forsythia suspensa，Broussonetia papyrifera，Vitex negundo， Quercus acutissima，Morus alba，Salix matsudana and Amorpha fruticosa were used as test materials. The Auricularia auricula 009, 916,139 , Auricularia polytricha “Shanghai”, “new Branch”, 951 and 781 were used as the object of the trail. We can get the conclusion from the observation of different lixivium of branches on the impaction of the medium fungus mycelium growth. The results showed that the same medium had the different influence on the varieties of the fungus mycelium growth .At the same kinds of medium, some kind of the fungus mycelium could adapt to it, while others could not. Meanwhile, the same fungus species adapted to different medium with different capabilities. For example in Poplar medium black fungus 009, 916 can be normal growth, while other varieties tested this is not growth. Black fungus in 139 Locust medium was better adaptability, and in Poplar medium adapt.
Key words: Auricularia auricula, Auricularia polytricha, Medium.