维生素C翻译EP7.0.doc

抗坏血酸质量标准及检验操作规程(EP)
1 结构式、分子式和分子量

1.1 结构式

1.2 分子式：C6H8O6
1.3 相对分子质量： 176.13
2 质量标准
项目
标准限度
检验方法
性状
外观
本品为白色或类白结晶性粉末或无色结晶
EP7.0
熔点
大约190℃，熔融时同时分解
EP7.0
鉴别
A红外吸收：本品的红外吸收光谱图应与抗坏血酸对照品的图谱一致
B pH:2.1～2.6
EP7.0
溶液的澄清度和颜色
溶液应澄清，溶液颜色≤BY7
EP7.0
比旋度,[α]D20
+20.5°～+21.5°
EP7.0
杂质E
≤0.2%
EP7.0
有关物质
杂质C：≤0.15%；
杂质D: ≤0.15%；
未知单杂：≤0.10%；
总杂：0.2%
EP7.0
铜
≤5.0ppm
EP7.0
铁
≤2.0ppm
EP7.0
重金属
≤10ppm
EP7.0
硫酸盐灰分
≤0.1%
EP7.0
含量测定
抗坏血酸含C6H8O6应为
99.0％～100.5％
EP7.0
3检验方法
3.1性状
3.1.1 外观
经目视检测：本品为白色或类白结晶性粉末。
3.1.2 熔点
3.1.2.1 仪器与用具
a) 熔点测定仪
b) 扁形称量瓶
c) 毛细管 硬质玻璃制成，长9cm以上，内径0.9～1.0mm，壁厚0.10～0.15mm，一端熔封;
d) 研钵
e) 温度计 分浸式，具有0.5℃刻度，经熔点测定用对照品校正.
3.1.2.2 测定法 取供试品，置研钵中研细，用真空或使用无水硅胶干燥粉末24小时。取干燥的供试品，置熔点测定用毛细管中，借助长短适宜的洁净玻璃管，垂直放于适宜的硬质物体上，将毛细管自上口放入使自由落下，反复数次，使粉末紧密集结在毛细管的熔封端，装入供试品的高度为4.0mm～6.0mm。另将温度计（放入盛有传温液的容器中，使温度计汞球部的底端与容器的底部距离2.5cm以上。将传温液加热，将浴锅的温度升高至较规定的熔点底限约低10℃，调整加热速率约为1.0℃/min。当温度升高至较规定的熔点低限约低5℃时，将装有供试品的毛细管浸入传温液中，贴附在温度计上，要求毛细管的内容物部分适在温度计汞球的中部，分浸线与传温液同液面，继续加热，记录全部液化时的温度，重复测定3次，取其平均值。
3.2 鉴别
3.2.1 红外吸收：
3.2.2.1 仪器与用具
a) 红外分光光度计
b) 玛瑙研钵
c) 压片机
3.2.2.2 试剂与试液
a）溴化钾 光谱纯
b) 抗坏血酸对照品
3.2.3 测定法 取本品约1～2mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾细粉约300～400mg，充分研磨混匀，移至压模中压片，取出制成的供试片置于仪器光路中，扣除按同法制成的空白溴化钾片作为补偿，录制光谱图。取抗坏血酸CRS同法测定。本品的红外光吸收图谱应与抗坏血酸CRS图谱一致。
3.2.2 pH：
3.2.2.1 仪器与用具
a） 酸度计：精度0.01pH
b) 分析天平：百分之一
c) 烧杯：100ml
d)量筒：50ml
3.2.2.2 试药与试液
a) 新沸并放冷至室温的纯化水。
b) 苯二甲酸盐标准缓冲溶液（25℃时 pH=4.01）
c）磷酸盐标准缓冲液（pH6.86 25℃）
d) 硼砂标准缓冲液（pH9.18 25℃）
3.2.2.3 选择标准缓冲溶液校正酸度计
a)选择苯二甲酸盐标准缓冲液（pH4.01 25℃）作为基准校准缓冲溶液，硼砂标准缓冲液（pH9.18 25℃）校准缓冲溶液，磷酸盐标准缓冲液（pH6.86 25℃）作为测定标准缓冲溶液。
b) 校准仪器：使用选择苯二甲酸盐标准缓冲液（pH4.01 25℃）和硼砂标准缓冲液（pH9.18 25℃）校准仪器后，测定磷酸盐标准缓冲液（pH6.86 25℃），及测定值误差不得过0.05。
3.2.2.4 测定过程
取本品1.0g溶于无二氧化碳的水中，并用相同溶剂稀释到20ml，摇匀，置酸度计上依法测定溶液的pH值，应为2.1～2.6。
3.3 溶液的颜色和澄清度
3.3.1 仪器与用具
3.3.1.1 分析天平 感量 0.1mg
3.3.1.2 纳氏比色管：内径为15～25mm的平底、透明、无色中性玻璃比色管
3.3.1.3 澄明度检测仪
3.3.2 试剂与试液
3.3.2.1 新鲜、澄清的水（可用0.45μm孔径滤膜或G5垂熔玻璃漏斗过滤而得）。
3.3.2.2 1号浊度标准液
3.3.2.3 参比溶液BY7。
3.3.3 测定过程
3.3.3.1 溶液S：取本品1.0g溶于无二氧化碳的水中，并用相同溶剂稀释到20ml.
a) 溶液的澄清度：将溶液S置于比色管中与新鲜配制参比混悬液比较，试液的深度为40mm。浊度标准在配置5分钟后，在散射日光下，从垂直方向，在黑色背景下观察，溶液S应澄清。
澄清是指在上述描述的条件下，供试品溶液的澄清度应与水、或溶剂一致或其浊度应不得大于1号浊度标准液。
b) 溶液的颜色：使用内径为15～25mm的平底、透明、无色中性玻璃比色管，将溶液S加入此比色管中并与盛放于相同比色管中的水或参比溶液BY7进行对比（加入溶液的深度不得大于40mm），同置于白色背景下，水平观察对比其颜色。颜色不得参比溶液BY7更深。
3.4 比旋度
3.4.1 仪器与用具
a）分析天平：万分之一
b) 比旋仪
c）容量瓶 25ml
d) 恒温水浴锅
3.4.2 试剂与试液 无二氧化碳的水
3.4.3 测定法
取本品约2.50g，精密称定，置25ml量瓶中，加无二氧化碳水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中含100mg的溶液，用比旋仪测定，以水作空白校正，将测定管用供试品溶液冲洗三次，缓缓注入供试品溶液，置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度，用同法读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋度。在20℃测定，比旋度应为+20.5°～+21.5°。
计算公式
式中 [α]为比旋度；D为钠光谱D线；t为测定时的温度（20℃±0.5℃）；l为旋光管的长度，dm；α为测得的旋光度；C 为100ml溶液中含有被测物质的重量，g（按干燥品或无水物计算）。W 供试品的质量，g（按干燥品或无水物计算）。
3.5杂质E(草酸)
3.5.1仪器与用具
3.5.1.1 电子天平 千分之一
3.5.1.2 纳氏比色管 10ml
3.5.1.3 刻度吸管1ml、5ml
3.5.1.4 石蕊试纸
3.5.2 试剂与试液
3.5.2.1 纯化水
3.5.2.2 稀氢氧化钠溶液（8.5％w/v）
3.5.2.3 稀醋酸（含C2H4O211.5% ～12.5% w/v 大约2M ） 取冰醋酸12 g 60ml,加水稀释至100ml。
3.5.2.4 氯化钙试液（7.35% w/v ）
3.5.2.5 草酸标准液：精密称取草酸70mg，置500ml量瓶中，加水溶解并稀释到刻度，摇匀。
3.5.3 操作步骤
供试品溶液：取本品0.25g溶于5ml水中，用稀氢氧化钠溶液（8.5％w/v）中和至红色石蕊试纸显中性，加1ml稀醋酸（2M）和0.5ml氯化钙溶液。
参比溶液：将70mg草酸溶解于足量的水中，用水稀释到500ml，取此最终溶液5ml加1ml 稀醋酸（2M）和0.5ml7.35％w/v氯化钙溶液摇匀，即得参比溶液。放置1小时后，供试品溶液所产生的浊度不得大于参比溶液的浊度。
3.6 有关物质（BP2011）
3.6.1 仪器与用具
3.6.1.1 液相色谱仪
3.6.1.2 分析天平：十万分之一
3.6.1.3 容量瓶 5ml、10ml、100ml、200ml;
3.6.1.4 微孔滤膜：0.45μm。
3.6.2 试药与试液
3.6.2.1 乙腈：分析纯
3.6.2.2 磷酸二氢钾：分析纯
3.6.2.3 抗坏血酸杂质C：对照品
3.6.2.4 抗坏血酸杂质D：对照品
3.6.3色谱条件
3.6.3.1 色谱柱：0.25m×4.6mm,氨丙基甲硅烷基键合硅胶柱（5μm）
3.6.3.2 检测波长：210nm
3.6.3.3 流速：1.0ml/min
3.6.3.4 进样量：20μl
3.6.3.5 流动相 磷酸盐缓冲液：乙腈（25：75 v/v）；
3.6.3.6 柱温：45℃。
3.6.4 测定步骤
3.6.4.1 溶液配制,以下溶液临用前新配：
磷酸盐缓冲液：取6.8g的磷酸二氢钾，用水溶解并稀释至175ml，过滤（0.45μm），用水稀释至1000ml。
供试品溶液 取0.500g的样品，用流动相溶解并稀释至10.0ml。
参比溶液（a）：取10.0mg的抗坏血酸杂质C CRS，用流动相溶解并稀释至5.0ml。
参比溶液（b）：取5.0mg的抗坏血酸杂质D CRS和5.0mg的抗坏血酸 CRS，用流动相溶解，加入2.5ml的参比溶液（a），用流动相稀释至100.0ml。
参比溶液（c）：取1.0ml的供试品溶液，用流动相稀释至200.0ml。取1.0ml的该溶液和1.0ml的参比溶液（a）混合。
3.6.4.2 杂质峰的鉴别：进样 20μl的供试品溶液和参比溶液（b）和（c）；
运行时间：抗坏血酸保留时间的2.5倍。
杂质鉴别：使用参比溶液（b）得到的色谱图鉴别杂质C和杂质D。
相对保留时间：相对于抗坏血酸（保留时间=约11分钟）：杂质D约为0.4；杂质C约为1.7。
3.6.4.3 系统适应性：
分离度：参比溶液（c）中得到的色谱图中，抗坏血酸峰和杂质C峰的分离度不小于3.0；信噪比：参比溶液（b）得到的色谱图中，杂质C峰的信噪比不小于20。
3.6.4.4 限度：
a) 放行标准限度
杂质C,D：每个杂质的峰面积不得大于参比溶液（b）中相应杂质峰面积的1.0倍（0.10%）；
其他任意杂质：每个杂质的峰面积不大于参比溶液（b）中得到的色谱图中抗坏血酸峰面积的0.8倍（0.08%）
总杂质：不大于参比溶液（b）得到色谱图中抗坏血酸峰面积的1.5倍（0.15%）。
可忽略杂质：小于参比溶液（b）得到色谱图中抗坏血酸峰面积的0.5倍（0.05%）。
b) 货架期标准限度
杂质C,D：每个杂质的峰面积不得大于参比溶液（b）中相应杂质峰面积的1.5倍（0.15%）；
其他任意杂质：每个杂质的峰面积不大于参比溶液（b）中得到的色谱图中抗坏血酸峰面积（0.10%）
总杂质：不大于参比溶液（b）得到色谱图中抗坏血酸峰面积的2倍（0.2%）。
可忽略杂质：小于参比溶液（b）得到色谱图中抗坏血酸峰面积的0.5倍（0.05%）。
3.7 铜：用原子吸收分光光度法测定，不得大于5ppm。
3.7.1 仪器与用具
3.7.1.1 电子天平 万分之一
3.7.1.2 容量瓶 25ml
3.7.1.3 大肚吸管 1ml
3.7.1.4 原子吸收分光光度计
3.7.1.5 铜空心阴极灯
3.7.1.6乙炔
3.7.2试剂与试液
3.7.2.1 0.1mol/L硝酸溶液
3.7.2.2 标准铜溶液（10ppm Cu）精密称取硫酸铜393mg，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀（100ppm Cu）。临用前精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀（10ppm）.
3.7.3 测定法
3.7.3.1 供试品溶液 取本品2.0g，置25ml量瓶中，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
3.7.3.2对照溶液： 用0.1M硝酸将标准铜溶液（10ppm）稀释成含Cu为0.2ppm、 0.4ppm和0.6ppm的对照溶液。
3.7.3.3 用铜空心阴极灯为放射光源波长324.8nm，空气－乙炔火焰，用0.1M的硝酸溶液调整仪器的零点。照原子吸收分光光度法，在324.8nm的波长处分别测定，对照品溶液和参比溶液的吸光度。
3.7.4 计算
用对照溶液测得结果绘制标准曲线，由标准曲线得到供试品溶液的含量。。
3.8铁：用原子吸收分光光度法测定，不得大于2ppm。
3.8.1 仪器与用具
3.8.1.1 电子天平 万分之一
3.8.1.2 容量瓶 25ml
3.8.1.3 大肚吸管 1ml
3.8.1.4 原子吸收分光光度计
3.8.1.5 铁空心阴极灯
3.8.1.6乙炔
3.8.2试剂与试液
3.8.2.1 0.1mol/L硝酸溶液
3.8.2.2 标准铁溶液（20ppm Fe） 精密称取硫酸铁铵863mg 【FeNH4(SO4)2,12H2O】，置500ml量瓶中，加稀硫酸1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇匀（200ppm Fe）。临用前精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀（20ppm）
3.8.3 测定法
3.8.3.1 供试品溶液 取本品5.0g，置25ml量瓶中，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
3.8.3.2对照溶液： 用0.1M硝酸稀释标准铁溶液（20ppm Fe）成含铁为0.2ppm、0.4ppm和0.6ppm的对照溶液。
3.8.3.3 用铁空心阴极灯为放射光源波长248.3nm，空气－乙炔火焰，用0.1M的硝酸溶液调整仪器的零点。照原子吸收分光光度法，在248.3nm的波长处分别测定，对照品溶液和参比溶液的吸光度。
3.8.4 计算
用对照溶液测得结果绘制标准曲线，由标准曲线得到供试品溶液的含量。
3.9重金属
3.9.1 仪器与用具
3.9.1.1 电子天平 千分之一
3.9.1.2 纳氏比色管 50ml
3.9.1.3 刻度吸管 1ml、2ml
3.9.1.4 量筒25ml
3.9.2 试剂与试液
3.9.2.1铅标准溶液 (0.1% Pb) 溶解0.400g【Pb(NO3)2】于适量水中并用水稀释到 250.0 ml
铅标准溶液(100 ppm Pb) 临用前稀释,用铅标准溶液(0.1%Pb)
铅标准溶液(10 ppm Pb) 临用前稀释,用铅标准溶液 (100 ppm Pb)用水稀释10倍。
铅标准溶液(1 ppm Pb) 临用前稀释,用铅标准溶液 (10 ppm Pb)用水稀释10倍。
3.9.2.2 醋酸盐缓冲液 pH3.5---将25g醋酸铵溶解于25ml水中加入38ml7M盐酸。用2M盐酸或6M氨水调整溶液pH值至3.5并用水稀释至100ml。。
3.9.2.3 硫代乙酰胺-碱性甘油试液
硫代乙酰胺试液——溶解4g硫代乙酰胺溶于100ml水中。
硫代乙酰胺试剂：向0.2ml硫代乙酰胺溶液（4％w/v）中加入1ml15ml1M氢氧化钠、5ml水和20ml甘油（85％）的混合液，在水浴锅中加热20秒，冷却，立即使用此溶液。
3.9.3 测定法
供试品溶液配制 取本品2.0g溶于适量水中，并用水稀释到20.0ml，取此溶液12ml进行检查应符合重金属项下的限度实验A（10ppm）。用标准铅溶液（1ppm pb）制备标准溶液。
供试品溶液：12ml供试品溶液。
参比溶液(标准)：10ml标准铅溶液R(1ppmPb)和2ml供试品溶液的混合液。
空白溶液：10ml水和2ml供试品溶液的混合液。
分别向上述每一种溶液中加入2mlpH3.5的缓冲溶液,混匀。然后加入1.2ml的硫代乙酰胺试剂R,立即混匀。2分钟后观察溶液
系统使用性：若参比溶液与空白溶液相比显轻微的黄棕色，则此检测有效，否则试验无效。
结果判断 如果样品溶液的棕色不比对照溶液的颜色更深，则样品符合规定。
如果较难判断检测结果,可以使用膜过滤 (滤孔为0.45μm)。用缓慢和均匀的力量过滤溶液。比较各溶液过滤后滤膜上的斑点。
3.10 硫酸盐灰分
3.10.1 仪器与用具
3.10.1.1 箱形电阻炉
3.10.1.2 电子天平
3.10.1.3 坩埚
3.10.2.4 加热套
3.10.2.5 电炉
3.10.2 试剂与试液
硫酸
3.10.3 操作步骤
在600±50℃炽灼适宜的坩埚（如硅土、铂和瓷或石英坩埚）30分钟，在干燥器中使用硅胶干燥冷却此坩埚。称量1.0g供试品放置于坩埚中，称量其总重量。使用少量的硫酸（通常为1.0ml）润湿，在尽可能低的温度缓慢加热直至供试品完全炭化。
在冷却后，使用少量的硫酸（通常为1.0ml）润湿，缓慢加热直至再无白烟产生。在600±50℃继续炽灼直至将残渣完全烧成灰。
在干燥器中使用硅胶或其他适宜的干燥剂干燥，再次称量并计算残渣的百分率。若残渣的量超出规定的限度，则使用硫酸润湿并照上述程序炽灼30分钟直至2两次连续称量的差值≤0.5mg或直至残渣的百分率符合规定的限度。
计算公式

式中 W0－坩埚的重量，g；
W1－供试品的重量，g；
W2－炽灼后残渣与坩埚的重量，g
3.11 含量测定
3.11.1 仪器与用具
3.11.1.1 分析天平 万分之一;
3.11.1.2 酸式滴定管(棕色);
3.11.1.3 量筒 100ml;
3.11.1.4 碘量瓶 250mL;
3.11.1.5 刻度吸管1ml。
3.11.2 试剂与试液
3.11.2.1 0.05M碘滴定液；
3.11.2.2 淀粉溶液；
3.11.2.3 稀硫酸 取5.5 ml 浓硫酸加到 60 ml 水中，放冷后，再加水至100 ml。此溶液含 9.8% w/v H2SO4 (大约 1M)。
3.11.3 含量的测定方法
3.11.3.1 测定原理 在酸性介质中，维生素C与碘发生定量氧化还原反应，利用淀粉指示液遇碘显蓝色来判断反应终点。

3.11.3.2 测定方法
取本品约0.150g，精密称定置于250ml碘量瓶中，溶于80ml无二氧化碳的水和10ml 1M硫酸的混合液中，用0.05M碘滴定液滴定，用1ml淀粉溶液为指示剂，每1ml0.05M碘滴定液相当于8.81mg C6H8O6.

含量计算公式

式中
V：样品消耗滴定液的体积，ml
F：滴定液的浓度校正因子
W：称取样品重量，g
0.008806：每1ml0.05N碘滴定液相当于8.806mg C6H8O6.。
3.11.4 允许差：本方法二次平行测定的允许相对差不得大于0.3%。