中药和其制剂分析概论专家讲座.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十四章 中药及其制剂分析概论,基本要求,概 述,中药及其制剂分析中待测成份提取分离与纯化方法,中药及其制剂分析普通程序,练习与思索,返回主目录,中药和其制剂分析概论,第1页,基本要求,一、掌握中药及其制剂测定前提取纯化方法。,二、熟悉中药及其制剂分析普通程序与方法。,三、了解中药及其制剂分类。,返 回,中药和其制剂分析概论,第2页,第一节、概 述,一、中药及其制剂定义 1,中药,：以中医药学理论体系术语表述其性能、功效和使用规律，而且只有当按中医药学理论指导其临床应用传统药品，才可称之谓中药。2,中药制剂（中成药）,：用中药为原料，按中医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型药品制剂。,中药和其制剂分析概论,第3页,3，,中成药(Chinese patent medicine),定义 中药制剂中一些药品经过药品监督局审批，在市场上允许出售，能够经过医生诊疗给患者使用，也可由患者依据经验与常识直接使用中药制剂产品。,中药和其制剂分析概论,第4页,二、中药及其制剂质量标准,1现实状况：中国药典已收载中药品种992种，其中中药材532种，中药制剂460种。中药及其制剂质量控制主要包含判别、检验和含量测定。2进展：怎样确定中药制剂质量评价指标是,关键问题,。只有在天然药品化学、药理学、药剂学、药品分析以及临床和基础医学等方面进行深入研究，探明中药制剂作用机理、主要成份及相互作用关系后，才能评价其质量客观指标，制订出比较完善质量标准。,中药和其制剂分析概论,第5页,三、中药制剂分析特点,1,因为中药制剂组成十分复杂，所以给分析测试带来一定困难，中药制剂分析样品普通需要经过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分干扰。但过于繁琐预处理不宜作为药品常规检验方法。中药制剂中有效成份含量普通较低，所以要求方法有较高灵敏度。,中药和其制剂分析概论,第6页,2，中药制剂成份和作用复杂，认识其成份与作用之间关系还需药学、中西基础和临床医学界共同努力。,3，影响中药制剂质量原因多，如药材产地和采集时间、加工设备和工艺。,4，中西医学理论和对药品认识不一样。,所以不能简单套用化学药品制订标准方法。还需寻找控制其质量新路径和新方法。,中药和其制剂分析概论,第7页,生长环境、采收季节及部位差异,麻黄 东北西北（-）麻黄碱含量,（+）麻黄碱含量,GAP 中药材生产质量管理规范,中药和其制剂分析概论,第8页,益母草 水苏碱 营养期含量最高,益母草碱 营养期含量最低,薄荷脑 秋季叶变黄时含量最高,丹参酮 11、12月份含量最高,中药和其制剂分析概论,第9页,不一样部位人参皂苷含量,重量比(%)总皂苷含量(%),周皮 6.9 2.60,韧皮 46.6 3.04,木质部 46.5 0.31,中药和其制剂分析概论,第10页,五倍子 鞣质（70%）,槐米 芦丁（20%）,长春花 长春新碱（百万分之一）,美登木 美登木碱（千万分之一）,各种有效成份在中药中含量相差悬殊,中药和其制剂分析概论,第11页,三黄泻心汤干浸膏,有效成份与浓缩干燥方法关系(%),常压 减压 逆浸透,成份 浓缩 浓缩 喷雾,大黄酸葡萄糖苷 41.1 51.6 96.8,小檗碱 34.5 37.5 94.5,黄连碱 6.3 12.0 93.7,黄岑苷 77.4 77.6 98.5,中药和其制剂分析概论,第12页,中国药典（年版）一部（二十六种）,丸剂 胶剂 膏药 颗粒剂 滴眼剂,散剂 合剂 露剂 糖浆剂 软膏剂,片剂 酒剂 茶剂 滴丸剂 注射剂,锭剂 酊剂 搽剂 胶囊剂 滴鼻剂,栓剂 巴布膏剂 橡胶膏剂,气雾剂喷雾剂 煎膏剂（膏滋）,流浸膏剂与浸膏剂,四、中药及其制剂分类与质量分析关键点,中药和其制剂分析概论,第13页,四、中药及其制剂分类与质量分析关键点,分类,中药材及其炮制品,液体制剂,：合剂与口服液、酒剂和酊剂、,注射剂,半固体制剂,：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂,固体制剂,：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂、,胶囊剂,中药和其制剂分析概论,第14页,（一）中药材及其炮制品,中药制剂生产原料,必须符合药品标准,质量控制和分析主要性,中药质量标准当代化关键,药品分析学科重点之一。,中药和其制剂分析概论,第15页,（二）,液体制剂,用药材提取物制备液体制剂,合剂、糖浆剂、酒剂、茶剂、酊剂,滴鼻剂、滴眼剂、露剂、搽剂等,（无植物组织与细胞，故无显微判别）,中药和其制剂分析概论,第16页,1、,合剂与口服液,（单剂量合剂也可称为“口服液”）,pH,装量,相对密度,微生物程度,普通检验项目,合剂系指药材用水或其它溶剂，,采取适宜方法提取，经浓缩制成,内服液体制剂,中药和其制剂分析概论,第17页,2、,酒剂与酊剂,酒剂,酊剂,含乙醇量（GC）,甲醇量检验（GC）,总固体,装量,微生物程度,普通检验项目,药材用蒸馏酒提取制成澄清液,体制剂,药品用要求浓度乙醇提取或溶,解而制成澄清液体制剂,中药和其制剂分析概论,第18页,3，注射剂（同化学药品）,装量差异,澄明度,无菌,不溶性微粒,pH值,中药和其制剂分析概论,第19页,（三）,半固体制剂,软膏,装量,微生物程度,检验项目,惯用基质 油脂性、水溶性,乳剂型（乳膏剂）,药品、药材细粉、药材提取,物与适量基质混合制成半,固体外用制剂,中药和其制剂分析概论,第20页,药材提取液浓缩液,（四）,半流体制剂,煎膏剂(膏滋),流浸膏剂与浸膏剂（半流体或固体）,（无植物组织与细胞，故无显微判别）,中药和其制剂分析概论,第21页,药材用水煎煮、去渣浓缩后，加炼,蜜或糖制成半流体制剂,1、,煎膏剂(膏滋),相对密度,不溶物,装量,微生物程度,检验项目,应无焦臭、异味，无糖结晶析出,中药和其制剂分析概论,第22页,2、,流浸膏剂与浸膏剂（半/固）,药材用适宜溶剂提取，蒸去部分,或全部溶剂，调整浓度至要求标准,而制成制剂,装量,微生物程度,检验项目,1ml流 浸膏 1g 原药材,1g 浸膏 2 5g 原药材,中药和其制剂分析概论,第23页,生产提取溶剂大多为水或稀醇,检测时普通需经有机提取后分析,（1）,有效成份明确且有适当方法，测定,有效成份含量,（2）,有效成份不明或无定量方法，可,测一定溶剂浸出物含量,（3）,对于流浸膏，有测总固体量以控,制其质量,中药和其制剂分析概论,第24页,（五）,固体制剂,药材提取物、药材粉末加赋形剂、制备而成,丸剂、胶剂、颗粒剂、散剂、片剂、,胶囊剂、锭剂、胶剂、茶剂、栓剂,（有植物组织与细胞，可做显微判别）,中药和其制剂分析概论,第25页,1、,丸剂,指药材细粉或药材提取物加适宜,黏合剂或其它辅料制成球形或类球形制,剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、,浓缩丸、蜡丸、微丸等,检验项目,水分、重量差异(按丸或重量),装量差异(按一次剂量分装),溶散时限、微生物程度,中药和其制剂分析概论,第26页,水分要求,大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸,15.0%,水蜜丸、浓缩水蜜丸,12.0%,水丸、糊丸、浓缩水丸,9.0%,装量差异,高,低,溶散时限,6丸，照崩解时限检验法,中药和其制剂分析概论,第27页,重量差异,第一法（按丸服用）每次最高丸数或每,丸（1.5g），10份,高,低,高,低,第二法（按重量服）每份10丸，10份,高,低,中药和其制剂分析概论,第28页,2、,散剂,一个或各种药材混合制成粉,末状制剂，分内服和外用散剂,检验项目,均匀度,水分,装量差异,微生物程度,中药和其制剂分析概论,第29页,均匀度,取供试品适量置光滑纸上，平铺,约5cm,2,，将其表面压平，在亮处,观察，应展现均匀色泽，无花,纹、色斑,水分,9.0%,中药和其制剂分析概论,第30页,3、,颗粒剂,药材提取物与适宜辅料或药材细,粉制成颗粒状制剂，分为可溶性颗,粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂,检验项目,粒度,水分,溶化性,装量差异,微生物程度,中药和其制剂分析概论,第31页,粒度,1号筛,4号筛,8,%(左右轻轻往返3分钟),溶化性,装量差异,单剂量包装 同丸剂,多剂量包装 最低装量检验法(附录 C),平均装量标示装量,每个装量限量%,中药和其制剂分析概论,第32页,4、,片剂,药材提取物加药材细粉或药材细,粉与适宜辅料混匀压制而成园片状,或异形片状制剂，分为浸膏片、半,浸膏片和全粉片,检验项目,重量差异,崩解时限,微生物程度,原粉片30,浸膏片1h,薄膜衣片1h,中药和其制剂分析概论,第33页,5、,胶囊剂,硬胶囊剂,软胶囊剂,肠溶胶囊剂,检验项目,水分,装量差异,崩解时限,微生物程度,中药和其制剂分析概论,第34页,2质量分析,关键点,注射剂：为了确保中药注射剂质量稳定、可控，中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂,指纹图谱,。中药指纹图谱包含色谱指纹图谱（HPLC、GC、TLC等），光谱指纹图谱及脱氧核糖核酸指纹图谱。,返 回,中药和其制剂分析概论,第35页,五、中药及其制剂分析中待测成份,提取分离与纯化方法,（一）提取方法,1萃取法 2冷浸法3回流提取法4连续回流提取法5水蒸气蒸馏法,6超声提取法,7超临界流体萃取法,中药和其制剂分析概论,第36页,（一）,提取方法,1、,萃取法,利用溶质在两种互不相溶溶,剂中溶解度不一样，使物质从一个,溶剂转移到另一个溶剂中，将测定,组分提取出来方法,中药和其制剂分析概论,第37页,正丁醇,用于皂苷类,醋酸乙酯,用于黄酮类,氯仿,用于生物碱类,乙醚、石油醚,用于挥发油,（1）萃取溶剂选择,中药和其制剂分析概论,第38页,（2）水相pH选择,酸性成份,比其pKa低12个pH单位,碱性成份,比其pKa高12个pH单位,中药和其制剂分析概论,第39页,（3）仪器和提取次数,（4）酒剂和酊剂先挥去乙醇,（5）预防和消除乳化,分液漏斗,判别1次,含量测定 3 4次,中药和其制剂分析概论,第40页,2、,冷浸法,样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间提取方法,适宜易溶出组分,适宜遇热不稳定药品,费时,（8 24小时）,特点,适用范围,适宜植物性粉末,不宜动物性粉末,中药和其制剂分析概论,第41页,亲脂性,亲水性,石油醚,苯,氯仿,乙醚,乙酸乙酯,丙酮,乙醇,甲醇,水,中药和其制剂分析概论,第42页,3、,回流提取法,样品置有机溶剂中加热回流提取方法,加紧溶出速度，省时,适宜受热稳定药品,适宜较难溶出组分,特点,仪器,普通回流装置,经过更换溶剂，使提取更完全,中药和其制剂分析概论,第43页,中药和其制剂分析概论,第44页,4、,连续回流提取法,样品置有机溶剂中加热，蒸发,溶剂经冷凝流回样品管提取方,法,节约溶剂，提升提取效率,适宜受热稳定药品,费时,特点,仪器,索氏提取器,中药和其制剂分析概论,第45页,中药和其制剂分析概论,第46页,5、,水蒸气蒸馏法,适合用于具挥发性可随水蒸气蒸出组分测定,麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油,中药和其制剂分析概论,第47页,6超声提取法：超声波含有助溶作用，提取较冷浸法速度快，普通仅需数十分钟浸出即可到达平衡。因为超声提取过程中溶剂可能会有一定损失，所以用作含量测定时，,应于,超声振荡前先称定重量，提取完成后，放冷至室温，再称重，并补足减失重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末提取时，因为组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，加溶剂后,宜先放置一段时间,，再超声振荡提取。,中药和其制剂分析概论,第48页,超声提取法,超声波振荡器（超声波清洗器）,简便 省时 提取率高,利用超声波助溶作用进行提取,原理,超声波在液体中以疏密相间形式,向物体辐射，出现“空化”现象（气泡,形成、产生及破裂现象），形成超出,1000个大气压冲击力,中药和其制剂分析概论,第49页,7超临界流体萃取法,（SFE法）,1）超临界流体：是指当压力和温度物质临界点时，所形成单一相态。,惯用超临界流体有超临界CO,2,，它含有较低临界温度（31）和临界压力（7390kPa），惰性、无毒、纯净、价廉。,中药和其制剂分析概论,第50页,中药和其制剂分析概论,第51页,2）特点：,首先,，它含有与液体相同密度，因而含有与液体相同较强溶解能力；,其次,，溶质在其中扩散系数却与气体相同，因而含有传质快，提取时间短优点，提取完全普通仅需数十分钟；超临界流体,表面张力为零,，这使它很轻易渗透到样品里面，带走测定组分；超临界流体萃取,选择性强,，经过改变萃取条件，如温度、压力等，能够选择性萃取一些组分；超临界流体,在通常状态下即成为气,，所以萃取后溶剂马上变为气体而逸出，,轻易到达浓集,目标。,中药和其制剂分析概论,第52页,3）超临界流体萃取原因：,温度、压力、改性剂和提取时间。,中药和其制剂分析概论,第53页,（二）纯化,萃取方法不但用于测定组分提取，也可用于纯化。比如二次萃取和柱色谱法。,返 回,中药和其制剂分析概论,第54页,1、,萃取法,利用药品与杂质溶解性能不一样进行分离,例,生物碱盐,氨水,H,2,O,中药和其制剂分析概论,第55页,2、,柱色谱法,（1）保留测定组分在柱上，洗去杂,质，再用适当溶剂洗下组分,（2）保留杂质于柱上,惯用固定相,硅胶,氧化铝,大孔吸附树脂,中药和其制剂分析概论,第56页,中药及其制剂分析普通程序包含：取样、检验依据和分析方法准备、样品真伪判别试验、样品杂质检验,、,样品中主药含量测定和检验统计等。一、取样取样标准：供试品要含有一定代表性；必须严格按照要求取样方法进行 取样。,第二节、中药及其制剂分析普通程序,中药和其制剂分析概论,第57页,二、判别试验,1判别试验主要性：中药及其制剂判别能够经过确认其中所含药味存在或一些特征成份检出而到达判别目标。当前部分中药尚无含量测定项目，所以，判别就成为中药制剂质量控制一个非常主要步骤。,中药和其制剂分析概论,第58页,判定有临床疗效已知成份,黄连 小檗碱（抗菌消炎）,麻黄 麻黄碱（支气管哮喘）,乌头 乌头碱（毒性）,洋地黄 强心苷（强心）,延胡索 延胡索乙素（镇痛）,中药和其制剂分析概论,第59页,2判别方法,性状判别 显微判别：,显微组织和显微化学反应判别法,理化法判别：,微量升华法,荧光与光谱判别法,颜色反应及沉淀反应判别法,色谱判别：,纸色谱法,毛细管分析法 TLC、GC、HPLC,中药和其制剂分析概论,第60页,1）,显微判别,：用光学显微镜或电子显微镜进行判别。该法通常在以下情况中应用：药材及炮制品外形判别特征不显著或外形相同难于判别而组织结构不一样时；药材破碎或呈粉末不易用肉眼识别或区分时；含原药材粉末中药制剂。显微化学反应判别法：普通可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生结晶、沉淀物，以及特殊颜色改变，作为判别特征。该法能够确定基础品种中特殊化学成份存在及在组织中分布。,中药和其制剂分析概论,第61页,显微判别,（含生药粉制剂）,丸剂、片剂、胶囊剂、散剂,快速，简便，覆盖面大,选择标准,1、应选有专属性特征进行判别,2、多起源药材应选择共有特征进行,判别,中药和其制剂分析概论,第62页,例：,黄连：纤维素鲜黄色,左金丸 均含石细胞：不能采取,吴茱萸：腺毛,例：黄连粉末+水+稀盐酸 黄色结晶,槟榔粉末+水+稀盐酸,滤液+碘化铋钾,浑浊,显微观察：红石榴球形或方形结晶,振摇,微热,过滤,载玻片上,中药和其制剂分析概论,第63页,2）,化学判别,抗干扰能力差,显色、荧光,例,二妙丸中苍术判别,苍术酮,苍术炔,中药和其制剂分析概论,第64页,3),色谱判别,TLC法,应用最多,（R,f,、颜色、荧光）,GC法,适合用于含挥发性成份药品,HPLC法,常与含量测定同时进行,中药和其制剂分析概论,第65页,阴、阳对照法,阳性对照,将要判别药材按制剂,工艺处理，再按判别方,法提取溶液,阴性对照,把制剂中要判别药材,除去，用剩下各味药,按制剂工艺处理，再按,判别方法提取溶液,中药和其制剂分析概论,第66页,O,O,O,O,O,O,O,O,O,O,阴 样 阳,对 品 对,例,中药和其制剂分析概论,第67页,大补阴丸 黄柏TLC法判别,样,品,对照,药材,小,檗,碱,O,O,O,O,O,例,中药和其制剂分析概论,第68页,薄层板选择,硅胶G板（可加0.2%0.5%CMC-Na）多用,氧化铝板 惯用于生物碱类药品,聚酰胺板 惯用于黄酮类及酚类药品,纤维素板 惯用于氨基酸类药品,中药和其制剂分析概论,第69页,TLC法,薄层板：最多是硅胶G板，也可另加0.2%0.5%CMC作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标识；能经受普通化学试剂处理，如用含浓硫酸显色剂处理后，可将酸在水中洗去，然后烘干保留。普通通用展开剂：无水乙醇-苯（1：4）苯-氯仿（1：3）丙酮-甲醇（1：1）显色方法：紫外灯下观察荧光斑点 选取显色剂,中药和其制剂分析概论,第70页,a,定义,中药材或中药制剂经适当处理后，采取一定分析伎俩，得到能够标定该中药材或中药制剂特征共有峰图谱,4）中药判别新技术中药指纹图谱,b,色谱指纹图谱基本属性,整体性 将指纹图谱作为一个整体来分析和比较它综合特征以到达判别目标。,中药和其制剂分析概论,第71页,含糊性 强调分析、比较指纹图谱相同性，而不是完全相同。,是一个综合、量化色谱判别伎俩。,色谱指纹图谱在中药质量评价中能够尽可能多地反应中药全貌。,不需要清楚每一个组分化学结构；不需要对每一个组分都进行定量；只要求不一样批号同一个药品指纹图谱保持一致。,中药和其制剂分析概论,第72页,雅莲,云莲,味莲,雅莲,云莲,c.指纹图谱应用,中药和其制剂分析概论,第73页,I,III,II,诃 子,小诃子,大诃子,绒毛诃子,中药和其制剂分析概论,第74页,人参须根,人参主根,中药和其制剂分析概论,第75页,不一样产地高良姜气相指纹图谱,中药和其制剂分析概论,第76页,指纹图谱研究过程中注意事项,1、在药效学指导下进行研究，确保指纹图谱反应化学成份包含中药材中有效部位所含绝大部分成份或有效成份全部。,2、样品预处理过程及测定方法应简便、经济、易行，且专属性、准确度与重现性好。,中药和其制剂分析概论,第77页,三、杂质检验,杂质检验项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属、农药残留量,、,浸出物、挥发油、总氮测定等。,中药和其制剂分析概论,第78页,杂质起源及检验意义,水分 结块、霉变或有效成份水解,灰分 控制药品本身及泥土、沙石,等无机杂质,砷盐 剧毒，常由除草剂、杀虫剂,或化肥引入,重金属 环境污染和使用农药引入,残留农药 有毒,中药和其制剂分析概论,第79页,三、杂质检验,1水分检验法 中国药典（年版一部）附录收载以下四种方法：烘干法、甲苯法、减压干燥法和GC法。,烘干法（不含或少含挥发性成份）,甲苯法（含挥发性成份）,减压干燥法（含挥发性成份珍贵药）,GC法(年版新增）,中药和其制剂分析概论,第80页,2总灰分和酸不溶性灰分,总灰分,：是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留无机物，包含药品本身所含无机盐（称为生理灰分）、泥土、砂石等药材外表黏附无机杂质。,酸不溶性灰分,：主要是外来杂质，如泥土、砂石,中药和其制剂分析概论,第81页,酸不溶性灰分测定,总灰分测定,总灰分和酸不溶性灰分测定,中药和其制剂分析概论,第82页,3重金属与砷盐检验,与化学合成药品不一样是，检验前必须对样品进行有机破坏，破坏方法有,干法,和,湿法,两种。,中药和其制剂分析概论,第83页,WHO要求植物药,铅10ppm,镉0.3ppm,干法破坏,湿法破坏,硫代乙酰胺法,1)重金属测定,中药和其制剂分析概论,第84页,干法破坏（ChP）,湿法破坏（USP）,(调到中性),中药和其制剂分析概论,第85页,碱融法破坏,湿法破坏,碱融法,H,+,2),砷盐测定,中药和其制剂分析概论,第86页,4农药残留量 农药起源,惯用农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等,有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等,检验标准：农药不明样品测定总氯量、总磷量，,已知农药样品可采取GC法测定某个农药,量。,总氯量测定,样品细粉+乙腈-水 滤液+石油醚 萃取液,（65:35）,搅拌,过滤,萃取,浓缩,氧瓶燃烧,吸收液：硫氰酸铵比色法,中药和其制剂分析概论,第87页,GC测定取样 萃取农药 柱纯化 GC测定,测定有机氯时，使用电子捕捉检测器（ECD）；,测定有机磷时，使用火焰光度检测器（FPD）。,上法得石,油醚萃取液,总磷量测定,洗脱液,吸收液：磷,钼酸比色法,柱层析,浓缩,氧瓶燃烧,中药和其制剂分析概论,第88页,中国药典中药制剂含量测定所占百分比,版本%,1977,1.48,1985,5.31,1990,8.73,1995,12.81,62.09,（HPLC,36%,TLCS,24%,GC,3%,),含量测定,四、,中药和其制剂分析概论,第89页,测定项目标选定标准,1 首选君药及珍贵药、剧毒药建立,含量测定方法,2 其次考虑臣药及其它味药,3 有效成份明确，可选有效成份,4 成份类别清楚，可测某一类总,成份含量,中药和其制剂分析概论,第90页,5 检测成份应归属某单一药味,6 检测成份应与中医用药功效主,治相近,7 确无法含量测定，可测定浸出,物含量,化学分析法,色谱法,惯用定量方法,分光光度法,中药和其制剂分析概论,第91页,（一）,化学分析法,重量分析法 容量分析法,特点 A、准确度、精密度高,B、抗干扰能力差,例,中药和其制剂分析概论,第92页,（二）,分光光度法,UV法 比色法,特点 A、灵敏度高,B、简便、快速,C、精密度稍低,D、干扰多,中药和其制剂分析概论,第93页,芦丁,黄芩苷,小檗碱,丹皮酚,中药和其制剂分析概论,第94页,（三）,TLCS法,测定薄层板上斑点对单色光吸,收或反射强度而进行定量方法,特点 A、分离效果好,B、适合用于无法用UV、HPLC,法测定组分,C、准确度、精密度低于HPLC,中药和其制剂分析概论,第95页,年版中国药典（年版）薄层扫描法品种,品种数量 TLCS数量 占总数%,534（药材）20 3.74,458（成药）32 6.99,978（总数）52 10.73,中药和其制剂分析概论,第96页,1、,选择测定条件,（1）薄层色谱条件,分离好 不拖尾,（2）检测方法,吸收测定法,荧光测定法,反射法,透射法,（3）扫描方式,单波长,双波长,线性扫描法,锯齿扫描法,外标法,内标法,中药和其制剂分析概论,第97页,扫描方式,：单波长 双波长,测定波长,选在被测组 分最大吸收波长，,参比波长,选在组分无 吸收位置上，若背 景有均匀污染时，可 选择背景光谱中与测 定波长等吸收处。,中药和其制剂分析概论,第98页,（4）散射参数SX,薄层板散射使,Kubelka-Munk方程,中药和其制剂分析概论,第99页,（1）薄层板,均匀、平整,2、,注意事项,（2）点样量,准确,（4）显色剂,均匀、适当,（5）保护斑点,用相同大小洁净玻璃,盖住薄层板，并用透明胶纸封住边缘，,以起固定和隔绝空气作用,（3）斑点,应完全分离，不拖尾,中药和其制剂分析概论,第100页,样 样,对 对,样 样,对 对,样 样,对 对,低,高,低,高,低,高,外标法（两点校正法）,中药和其制剂分析概论,第101页,中药和其制剂分析概论,第102页,（四）,HPLC法,RP-HPLC,色谱柱,ODS,流动相,甲醇-水,PIC,反离子,氢氧化四丁基铵,色谱柱,ODS,RP-PIC,反离子,烷基磺酸盐,无机阴离子,外标法和内标法,中药和其制剂分析概论,第103页,离子对色谱法（PIC）,极性流动相中加入离子对试剂，,与被分析离子生成中性离子对，从而,增加在非极性固定相中溶解度，使,分配系数增大,中药和其制剂分析概论,第104页,年版中国药典（年版）HPLC法品种,品种数量 HPLC数量 占总数%,534（药材）54 10.11,458（成药）48 10.48,978（总数）102 20.59,中药和其制剂分析概论,第105页,应用实例-小青龙合剂,处方,麻黄125g 桂枝125g 白芍125g,干姜125 五味子125g,细辛62g 甘草(蜜炙)法半夏188g,NOTES：合剂是在传统汤剂基础上改进后一个新剂型,生物碱,桂皮醛,芍药甙,挥发油,三萜皂甙,中药和其制剂分析概论,第106页,应用实例-小青龙合剂,制法,以上八味，细辛、桂枝提取挥发油，蒸馏后水溶液另器搜集，药渣与白芍、麻黄、五味子、甘草加水煎煮至味尽，合并煎液，滤过，滤液和蒸馏后水溶液合并，浓缩至约1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏剂项下渗漉法，用70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，漉液浓缩，与上述药液合并，静置，滤过，滤液浓缩至1000ml，加入苯甲酸钠3g与细辛、桂枝挥发油，搅匀，即得。,中药和其制剂分析概论,第107页,性状,本品为棕黑色液体；气微香，味甜、微辛。,功效与主治,解表化饮，止咳平喘。用于风寒水饮，恶寒发烧，无汗，喘咳痰稀。,使用方法与用量,口服，一次10-20ml，一日3次，用时摇匀。,中药和其制剂分析概论,第108页,方药分析,君 麻黄发汗为君,臣 桂枝解表为臣,佐 甘草恐发汗太过,佐以甘草缓之,使 白芍、干姜、细辛、法半夏、五,味子几药协力共为使。,可外发汗，内行水，散表里之邪。,中药和其制剂分析概论,第109页,汉代张仲景伤寒论小青龙汤,近代由重庆桐君阁中药厂改汤剂为合剂,本方治疗伤寒表不解，心下有水气，干呕，发烧而咳。近代也用于慢性支气管炎，支气管哮喘、肺气肿，均见咳、喘、痰白清稀者。,中药和其制剂分析概论,第110页,供试品溶液与阴性对照液制备,取合剂10 ml，石油醚分3次萃取，合并石油醚萃取液油层，浓缩至1ml，为供试品溶液,A,；,水层,用Na,2,CO,3,调PH11-12，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，残渣用1ml甲醇溶解，为供试品溶液,B,；,NOTES：,阴性对照液,如上法同时进行。,中药和其制剂分析概论,第111页,1.桂皮醛判别,取供试品液,A,、阴性对照液、桂皮醛对照液（1ug/ml）15ul，点于同一硅胶G板上，环己烷-乙酸乙酯（17：3）展开，晾干，喷2，4二硝基苯肼乙醇T.S，供试品A与对照品在对应位置上显相同橙色斑点，而阴性对照液无此斑点。,中药和其制剂分析概论,第112页,2.细辛挥发油判别,取供试品液,A,、阴性对照液、细辛挥发油对照液（1：10乙醚液）5ul，点于同一硅胶G板上，环己烷展开，晾干，喷10%香草醛浓硫酸T.S，加热至显色，供试品A与对照品在对应位置上显相同粉红色斑点，而阴性对照液无此斑点。,中药和其制剂分析概论,第113页,3.麻黄碱判别,取供试品液,B,，阴性对照液，麻黄碱对照品液（1mg/ml）各5ul，点于同一硅胶G，氯仿-甲醇-浓氨水（20：5：0.5）展开，晾干，喷茚三酮T.S，加热至斑点显色，供试品B与对照品在对应位置上显相同蓝紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。,中药和其制剂分析概论,第114页,取合剂5ml，上聚酰胺柱，DW洗脱，洗脱液水浴浓缩至干，用1ml甲醇溶解，为供试品溶液,C,；,聚酰胺柱再用95%乙醇洗脱，弃取洗脱液，用3M氨乙醇液洗脱，搜集洗脱液水浴蒸干，1ml甲醇溶解，为供试品溶液,D,。,中药和其制剂分析概论,第115页,4.芍药甙判别,取供试品液,C,、阴性对照液、芍药甙对照液（1mg/ml）10ul，点于同一硅胶G板上，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸-甲酸（8：1：2：0.04）展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热至显色，供试品C与对照品在对应位置上显相同紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。,中药和其制剂分析概论,第116页,5.甘草酸判别,取供试品液,D,、阴性对照液、甘草酸铵对照液（2mg/ml）2ul，点于同一硅胶G板上，乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-蒸馏水（30：2：2：4）展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热至显色，UV灯365nm观察，供试品D与对照品在对应位置上显相同紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。,中药和其制剂分析概论,第117页,含量测定,HPLC法测定芍药甙含量,仪器与色谱条件,BECKMAN 332型高效液相色谱仪,163型可变波长紫外检测仪，220nm,427型统计及数据处理仪,色谱柱为YWGC18,流动相乙腈-水（15：85）,中药和其制剂分析概论,第118页,标准曲线制备 精密称取芍药甙5.08mg，溶于水至50ml量瓶中，定容，分别吸收0.50、1.00、1.50、2.00ml于10ml量瓶中定容。,回收率测定 精密吸收除去白芍制成合剂（,即阴性对照液,）0.3ml与适量芍药甙对照品液，经过0.5g聚酰胺柱，用水洗脱至50ml量瓶中至刻度，依前述条件测定，平均回收率为99.42%，RSD为0.23%（n=3）。,中药和其制剂分析概论,第119页,样品测定,取自制小青龙合剂摇匀，用滤纸过滤，精密吸收0.3ml滤液经过聚酰胺柱，以不一样回收率测定条件进行测定。,中药和其制剂分析概论,第120页,中药和其制剂分析概论,第121页,分析实例万氏牛黄清心丸,处方,牛黄10g,朱砂60g 黄连200g,黄芩120g 栀子120g 郁金80g,中药和其制剂分析概论,第122页,分析实例万氏牛黄清心丸,制法以上六味，除牛黄外，朱砂水飞或粉碎成极细粉；其余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜100-200g制成大蜜丸，即得。,古方为糊丸，亦有水丸,中药和其制剂分析概论,第123页,性状本品为红棕色至棕褐色大蜜丸；气特异，味甜、微涩、苦。,功效主治清热解毒，镇惊安神。用于热邪内闭，烦躁不安，神昏谵语，小儿高热惊厥。,中药和其制剂分析概论,第124页,方药分析 本方起源于明.痘疹世医心法 ，本方为清心开窍剂，主治热邪内陷心包所致窍闭神昏症。,方中牛黄，清心解毒，豁痰开窍为君药；黄连、黄芩、栀子清热泻火，为臣药；朱砂清心，重镇安神，郁金行气开窍共为佐使药，适用以奏透邪泻热，开窍安神之效。,中药和其制剂分析概论,第125页,方药分析,牛黄清热解毒药，主含胆酸类成份。,黄连清热燥湿药，主要为小檗碱。,黄芩清热燥湿药，主要为黄酮类。,栀子清热泻火药，主含栀子甙。,朱砂安神药，主含硫化汞（HgS）。,郁金活血去瘀药，主含挥发油。,中药和其制剂分析概论,第126页,判别,显微判别,郁金糊化淀粉团块几乎无色。,栀子种皮石细胞。,黄芩纤维淡黄色，梭形，厚壁，孔沟细。,黄连纤维鲜黄色，壁稍厚，纹孔显著。,朱砂不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色。,中药和其制剂分析概论,第127页,郁金糊化淀粉团块,栀子种皮石细胞,黄芩纤维,黄连纤维,朱砂不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色,中药和其制剂分析概论,第128页,化学判别,1.朱砂判别,取本品3g，,加水适量，研匀，重复洗去悬浮物，可得少许朱红色沉淀，取出，加入盐酸1ml及铜片少许，加热煮沸，铜片由黄色变为银白色。,HgS+2HCl+Cu,CuCl,2,+Hg+H,2,S,NOTES：,在酸性条件下，朱砂与铜片发生置换反应析出金属汞，在铜片表面形成银白色汞齐。,中药和其制剂分析概论,第129页,2.人工牛黄判别,取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研匀，加氯仿10ml、,冰醋酸0.5ml，加热回流30min,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。,胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成1ml含1mg混合溶液，作为对照品溶液。,中药和其制剂分析概论,第130页,TLC法 CMC-Na，硅胶G,展开剂,醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇,（32:6:1:1）,显色剂,10%磷钼酸乙醇液，,110,0,C,10min,中药和其制剂分析概论,第131页,人工牛黄,供试品,牛黄空白,猪去氧胆酸,胆酸,中药和其制剂分析概论,第132页,3.黄芩判别,供试品溶液制备：取本品3g，剪碎，加硅藻土0.5g，研匀，加甲醇20ml，,加热回流1hr,放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。,对照品溶液制备：黄芩甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液。,中药和其制剂分析概论,第133页,TLC法 CMC-Na，硅胶G （4%醋酸钠）,展开剂 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水,（5:3:1:1）,显色剂 2%三氯化铁乙醇液,使斑点更为集中,-OH与Fe,+3,络合,中药和其制剂分析概论,第134页,黄芩甙,供试品,黄芩空白,中药和其制剂分析概论,第135页,4.栀子判别,供试品溶液制备：取本品3g，加乙醚15ml，,研磨，弃去乙醚。残渣挥干乙醚，加醋酸乙酯30ml，加热回流1hr,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。,对照品溶液制备：栀子甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液。,中药和其制剂分析概论,第136页,TLC法 CMC-Na，硅胶G,展开剂,醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水,（10:7:2:0.5）,显色剂,10%硫酸乙醇,105,0,C,10min,中药和其制剂分析概论,第137页,栀子甙,供试品,栀子空白,中药和其制剂分析概论,第138页,5.黄连判别,供试品溶液制备：取含量测定项下剩下盐酸-甲醇提取液4ml，,水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，使成1ml作为供试品溶液。,中药和其制剂分析概论,第139页,对照药材溶液,制备：黄连对照药材50mg，加甲醇10ml，回流加热15min,滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。,对照品溶液制备：再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含 0.5mg溶液，作为对照品溶液。,中药和其制剂分析概论,第140页,TLC法,硅胶G CMC-Na,展开剂,苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（12:6:3:3:1）,显色剂,UV（365nm）,中药和其制剂分析概论,第141页,盐酸小檗碱,黄连,公式品,供试品,黄连空白,中药和其制剂分析概论,第142页,含量测定,1.朱砂 取本品约5g，,剪碎，精密称定，置250ml凯氏烧瓶中，加硫酸30ml与硝酸钾8g，加热俟溶液至近无色，放冷，转入250ml锥形瓶中，用水50ml分次洗涤烧瓶，洗液并人溶液中，滴加1%高锰酸钾溶液至显粉红色，两分钟内不消失，再滴加2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液滴定，即得。每1ml硫氰酸铵滴定液相当于11.63mg硫化汞。,中药和其制剂分析概论,第143页,硫酸与硝酸钾分解试样及有机破坏,高锰酸钾溶液除去试样分解时产生亚硫酸,粉红色两分钟内不消失亚硫酸可将Hg,2+,还原Hg,+,使含量变低，观察两分钟完全除去亚硫酸,硫酸亚铁溶液除去过量高锰酸钾,滴定反应 Hg,2+,+2CNS,-,Hg(CNS),2,显色反应 CNS,-,(过量)+Fe,3+,Fe(CNS),2,+,(红色),中药和其制剂分析概论,第144页,2.黄连 取本品约4g，剪碎，精密称定，置索氏提取器，盐酸-甲醇（1:100）适量，,加热回流提取至提取液无色，提取液移至50ml量瓶中，用盐酸-甲醇适量稀释至刻度，摇匀，照柱色谱法，精密量取5ml，上AL,2,O,3,柱,25ml洗脱，搜集洗液置50ml量瓶中，乙醇稀释至刻度，精密吸收2ml置50ml量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀。UV345nm测定A。为728,本品含总生物碱按盐酸小檗碱计不得少于1.7%。,中药和其制剂分析概论,第145页,黄连 方中臣药之首,用量最大,有效成份清楚,黄连有效成份为小檗碱，尚含其它少许生物碱，如黄连碱、甲基黄连碱、药根碱、巴马亭等，均为原小檗碱型生物碱。,中药和其制剂分析概论,第146页,硫酸溶液 在酸性条件下，N原子呈共轭体系季铵状态，在345nm处有最大吸收。其它五味药空白提取液在该波优点略有吸收，约相当于0.3%小檗碱，所以测定结果偏高。,本品为蜜丸制剂，其黄连生物碱溶出速率较药材相对迟缓，回流至提取液无色后应放置一段时间。,中药和其制剂分析概论,第147页,五、检验统计,1,要求,：原始资料真实、详细、整齐。2,内容,：送检单位、送检日期、检品名称与规格、批