超声造影定量参数联合血清circCELSR1检测诊断早期卵巢癌价值及与淋巴结转移关系.pdf

临床分析超声造影定量参数联合血清c i r c C E L S R 检测诊断早期卵巢癌价值及与淋巴结转移关系徐小园刘卫民湖北省潜江市中心医院()摘要目的:探讨超声造影定量参数联合血清c i r c C E L S R 检测在早期卵巢癌中的诊断价值及其与淋巴结转移的关系.方法:收集 年月 年 月本院收治的 例卵巢癌患者临床资料为卵巢癌组,根据是否发生淋巴结转移分为淋巴结转移组 例和无淋巴结转移组 例;选取同期卵巢良性肿瘤患者 例作为良性肿瘤组.采用彩色超声诊断仪对两组患者进行超声造影检查,获取始增时间、达峰时间、灌注时间、增强强度,采用实时荧光定量P C R法测定血清c i r c C E L S R 水平;采用多因素l o g i s t i c回归分析检验超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平与卵巢癌的关系;绘制受试者工作特征(R O C)曲线检验超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平对卵巢癌的诊断价值.结果:卵巢癌组始增时间、达峰时间低于良性肿瘤组,增强强度及血清c i r c C E L S R 水平高于良性肿瘤组,且均与卵巢癌发生有关(均P).始增时间、达峰时间、增强强度、血清c i r c C E L S R 水平及项联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AU C)分别为 、.卵巢癌组淋巴结转移患者的始增时间、达峰时间低于无淋巴结转移患者,增强强度及血清c i r c C E L S R 水平高于无淋巴结转移患者(均P).结论:采用超声造影定量参数联合血清c i r c C E L S R 水平检测可提高卵巢癌诊断效能,且各指标水平与淋巴结转移有关,可为临床诊疗提供依据.关键词卵巢癌;超声造影;c i r c C E L S R;淋巴结转移;诊断V a l u eo f c o n t r a s t e n h a n c e du l t r a s o u n dq u a n t i t a t i v ep a r a m e t e r s c o m b i n e d t h e s e r u mc i r c C E L S R d e t e c t i o n f o r e a r l yd i a g n o s i n go v a r i a nc a n c e ro fp a t i e n t sa n d i t s c o r r e l a t i o nw i t ht h e l y m p h a t i cm e t a s t a s i so fo v a r i a nc a n c e rX UX i a o y u a n,L I U W e i m i nQ i a n j i a n gC e n t r a lH o s p i t a l,H u b e iP r o v i n c e,A b s t r a c t O b j e c t i v e:T o i n v e s t i g a t e t h e v a l u e o f c o n t r a s t e n h a n c e du l t r a s o u n dq u a n t i t a t i v ep a r a m e t e r s c o m b i n e d t h e s e r u mc i r c C E L S R d e t e c t i o nf o re a r l yd i a g n o s i n go v a r i a nc a n c e ro fp a t i e n t s,a n dt os t u d yi t sc o r r e l a t i o nw i t ht h el y m p h a t i cm e t a s t a s i so fo v a r i a nc a n c e r M e t h o d s:T h ec l i n i c a ld a t ao f p a t i e n t sw i t ho v a r i a nc a n c e r(i ns t u d yg r o u p)f r o m M a y t oO c t o b e r w e r e c o l l e c t e d,i n c l u d i n g p a t i e n t sw i t ht h e l y m p h a t i cm e t a s t a s i s i ng r o u pAa n d p a t i e n t sw i t h o u t t h e l y m p h a t i cm e t a s t a s i s i ng r o u pBa c c o r d i n g t ow h e t h e r t h e l y m p h a t i cm e t a s t a s i so c c u r r e do rn o t p a t i e n t sw i t ho v a r i a nb e n i g n t u m o r sw e r e s e l e c t e d i nc o n t r o l g r o u p T h ep a t i e n t s i n t h e s eg r o u p sw e r e e x a m i n e db yc o l o ru l t r a s o u n dd i a g n o s t i c a p p a r a t u s t oo b t a i n t h e s t a r t i n g t i m e,t h ep e a kt i m e,t h ep e r f u s i o n t i m e,a n d t h e e n h a n c e m e n ti n t e n s i t yo f t h ec o n t r a s tm e d i u m T h es e r u mc i r c C E L S R l e v e lo f t h ep a t i e n t s i nt h e s eg r o u p sw a sm e a s u r e db yr e a l t i m e f l u o r e s c e n t q u a n t i t a t i v eP C R M u l t i v a r i a t eL o g i s t i c r e g r e s s i o na n a l y s i sw a su s e d t oa n a l y z e t h e c o r r e l a t i o nb e t w e e nt h eq u a n t i t a t i v ep a r a m e t e r so f c o n t r a s t e n h a n c e du l t r a s o u n da n dt h es e r u mc i r c C E L S R l e v e lo f t h ep a t i e n t sa n dt h e i ro v a r i a nc a n c e ro c c u r r e n c e R e c e i v e ro p e r a t i n gc h a r a c t e r i s t i c(R O C)c u r v ew a sd r a w nt oa n a l y z e t h ed i a g n o s t i cv a l u eo ft h eq u a n t i t a t i v ep a r a m e t e r so f c o n t r a s t e n h a n c e du l t r a s o u n da n d t h e s e r u mc i r c C E L S R l e v e l o f t h ep a t i e n t s f o r t h e i r o v a r i a nc a n c e r R e s u l t s:T h es t a r t i n gt i m ea n dt h ep e a kt i m eo f t h ec o n t r a s tm e d i u mo f t h ep a t i e n t s i nt h es t u d yg r o u pw e r es i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a nt h o s eo f t h ep a t i e n t s i nt h ec o n t r o l g r o u p,a n dt h ee n h a n c e m e n t i n t e n s i t yo f t h ec o n t r a s tm e d i u ma n d t h e s e r u mc i r c C E L S R l e v e l o f t h ep a t i e n t s i n t h e s t u d yg r o u pw e r e s i g n i f i c a n t l yh i g h e r,a n db o t ho fw h i c hD O I:/j i s s n 收稿日期:修回日期:中国计划生育学杂志 年月 第 卷 第期C h i nJF a mP l a n n,V o l ,N o ,A u g u s t w e r ea s s o c i a t e dw i t ht h eo v a r i a nc a n c e ro c c u r r e n c e(a l lP)T h ea r e au n d e rt h ec u r v e(AU C)o ft h es t a r t i n gt i m e,t h ep e a kt i m e,t h ee n h a n c e m e n t i n t e n s i t y,a n dt h es e r u mc i r c C E L S R l e v e l,a n dt h ec o m b i n e do f t h ec o n t r a s tm e d i u ms t a r t i n gt i m e,p e a kt i m e,e n h a n c e m e n t i n t e n s i t y,a n dt h es e r u mc i r c C E L S R l e v e l o f t h ep a t i e n t s f o rd i a g n o s i n go v a r i a nc a n c e rw e r e ,a n d ,r e s p e c t i v e l y T h es t a r t i n gt i m ea n dt h ep e a kt i m eo ft h ec o n t r a s tm e d i u mo f t h ep a t i e n t s i ng r o u pAw e r es i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a nt h o s eo f t h ep a t i e n t s i ng r o u pB,a n dt h ee n h a n c e m e n t i n t e n s i t yo f t h ec o n t r a s tm e d i u ma n d t h e s e r u mc i r c C E L S R l e v e l o f t h ep a t i e n t s i ng r o u pAw e r e s i g n i f i c a n t l yh i g h e r(a l lP)C o n c l u s i o n:T h eq u a n t i t a t i v ep a r a m e t e r so fc o n t r a s t e n h a n c e du l t r a s o u n dc o m b i n e dw i t ht h ed e t e c t i o no f s e r u mc i r c C E L S R l e v e l o f t h ep a t i e n t s f o r t h eo v a r i a nc a n c e r c a n i m p r o v e t h e i r d i a g n o s t i c e f f i c a c y,a n da l l o fw h i c ho f t h ep a t i e n t s a r e r e l a t e d t o t h e i r l y m p h a t i cm e t a s t a s i s,a n dw h i c hc a np r o v i d e e v i d e n c e s f o r t h e c l i n i c a l d i a g n o s i sa n dt r e a t m e n to fo v a r i a nc a n c e r K e yw o r d s O v a r i a nc a n c e r;C o n t r a s tu l t r a s o u n d;c i r c C E L S R;L y m p h a t i cm e t a s t a s i s;D i a g n o s i s卵巢癌是世界范围内女性癌因死亡的第八大常见原因,其中高级浆液性卵巢癌是最常见和最致命的亚型.因缺乏特定的早期临床症状,超过 的卵巢癌患者被诊断为晚期.因此,早期诊断并规范治疗是提高卵巢癌患者生存率和预后的关键.术前超声鉴别卵巢肿瘤的良恶性有助于临床选择合适的治疗方案,然而肿瘤组织和正常血管的新生血管结构在血管直径、基底膜行走和血管网络形态等方面存在差异,二维超声检查存在局限性.超声造影可对组织血流灌注等明确观察,对卵巢等各部位疾病做出诊断.近期研究表明,c i r c C E L S R 在卵巢癌患者中上调,但相关机制及临床作用尚不清楚.本研究拟将超声造影定量参数与血清c i r c C E L S R 水平检测进行联合,旨在分析各指标联合在卵巢癌诊断及淋巴结转移中的价值.资料与方法一般资料选择 年月 年 月本院收治的 例卵巢癌患者为卵巢癌组,年龄()岁(岁),其中 例发生淋巴结转移(淋巴结转移组),例未发生淋巴结转移(无淋巴结转移组);选取同期卵巢良性肿瘤患者 例作为良性肿瘤组,年龄()岁(岁).纳入标准:符合卵巢癌诊断标准,经病理组织确诊,且单侧首次发病;纳入研究时未进行过免疫抑制药物或放化疗治疗;对超声造影检查无禁忌证,对造影剂无过敏症状者.排除标准:有血液系统、内分泌系统等其他严重系统性疾病;哺乳期或妊娠期;有其他部位恶性病变;心、肝、肾功能不全.本研究经本院伦理委员会审核通过,患者均签署知情同意书.血清c i r c C E L S R 水平检测取研究对象晨空腹静脉血,采用实时荧光定量P C R法 测 定 血 清c i r c C E L S R 水 平.血 清 中 总R NA提取按照T r i z o l试剂盒(上海齐源生物科技有限公司)说明书进行,N a n o d r o p c微量分光光度计检测浓度和纯度后根据反转录试剂盒(上海吉至生化科技有限公司)方法合成c D NA,引物序列见表,引物由北京华大基因公司合成.反应体系:c D NA模板l,正反向 引物各l,R e a lT i m eM a s t e rM i x(江苏天净沙基因诊断技术有限公司)l,d d HO补足至 l.反应条件:m i n;s,m i n;s,循环 次.采用 C T法计算血清c i r c C E L S R 相对表达量.表q R T P C R引物序列基因上游引物 下游引物 c i r c C E L S R GA C G GA C G T C G T C T A T G GA CC C T A C GAG G C T A G C T C G G T A GGA P DHA G C G C T G T C GA GA C C A GA C G CC C G C T A TA G C T GA GA C C T A T G G超声造影检查由本院同一超声医师采用美国G E公司生产的G EE 彩色超声诊断仪检查,探头频率 MH z.适度充盈膀胱取仰卧位,先行常规超声检查,确定卵中国计划生育学杂志 年月 第 卷 第期C h i nJF a mP l a n n,V o l ,N o ,A u g u s t 巢病变大小、位置、形态、数目、边界等情况.之后切换到造影模式,经肘静脉推注m l造影剂,持续观察整个造影过程,启动计数器储存动态图像.造影结束后采用Q o n t r a s t定量分析软件进行定量分析,选取病灶部位感兴趣区,获取始增时间、达峰时间、灌注时间、增强强度等参数.统计学处理采用S P S S 数据分析.计数资料采用()表示,采用卡方检验;计量资料采用(xs)表示,采用独立样本t检验;采用多因素l o g i s t i c回归分析检验超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平与卵巢癌的关系;绘制受试者工作特征(R O C)曲线,检验超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平对卵巢癌的诊断价值.P 表示差异有统计学意义.结果超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平卵巢癌组始增时间、达峰时间低于良性肿瘤组,增强强度及血清c i r c C E L S R 水平高于良性肿瘤组(P);两组灌注时间无差异(P).见表.表两组超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平比较(xs)组别例数始增时间(s)达峰时间(s)灌注时间(s)增强强度(d B)c i r c C E L S R 良性肿瘤组 卵巢癌组 t P l g i s t i c回归分析超声造影及血清水平与卵巢癌关系将卵巢癌是否发生(是,否)作为因变量,以超声造影定量参数始增时间、达峰时间、灌注时间、增强强度及血清c i r c C E L S R 为自变量进行l o g i s t i c回归分析.结果显示,超声造影定量参数始增时间、达峰时间、增强强度及血清c i r c C E L S R 均与卵巢癌具有相关性(P).见表.表 l o g i s t i c回归分析超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平与卵巢癌关系因素S EW a l dPO R C I始增时间短 达峰时间短 灌注时间短 增强强度高 c i r c C E L S R 高 超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平对卵巢癌的诊断价值以超声造影定量参数始增时间、达峰时间、增强强度及血清c i r c C E L S R 水平为检验变量,卵巢癌是否发生为状态变量绘制R O C曲线分析超声造影定量参数及血清c i r c C E L S R 水平对卵巢癌的诊断价值,结果显示,始增时间、达峰时间、增强强度、血清c i r c C E L S R 水平及项联合诊断卵巢癌均有价值,但各指标单独诊断AU C均低于项联合诊断AU C(Z 、,均P).卵巢癌患者淋巴结有无转移与超声造影及血清指标淋巴结转移组始增时间、达峰时间低于无淋巴结转移组,增强强度及血清c i r c C E L S R 水平高于无淋巴结转移组(P);两组灌注时间比较无差异(P).见表.中国计划生育学杂志 年月 第 卷 第期C h i nJF a mP l a n n,V o l ,N o ,A u g u s t 表各指标诊断卵巢癌价值指标AU C C I敏感度()特异度()截断值始增时间 s达峰时间 s增强强度 d Bc i r c C E L S R 项联合 表卵巢癌患者淋巴结转移与超声造影及血清指标关系(xs)淋巴结例数始增时间(s)达峰时间(s)灌注时间(s)增强强度(d B)c i r c C E L S R 无转移 转移 t P 讨论卵巢癌可能起源于卵巢的任何组织学部分,包括上皮、间质或生殖细胞.卵巢癌的标准治疗方法包括一期去瘤手术,铂基化疗或新辅助化疗,之后进行间隔去瘤手术和术后附加化疗.然而,卵巢癌治疗方法仅对少数患者有效,部分患者预后仍然较差,总体年生存率为 .卵巢癌的临床治疗和预后主要取决于癌症分期,而淋巴结转移是卵巢癌的重要转移途径,与卵巢癌预后差密切相关.探寻早期诊断方法是卵巢癌临床关注重点.超声检查具有重复性、安全性、简便、无创、可靠等优点,目前已广泛应用于疾病的临床诊断和随访观察.超声不仅可以从形态学角度观察病变的内部回声、边界和形态,还可以通过血流动力学特征来确定病变的性质.然而,二维超声只能提供肿瘤大血管的信息,宏观评估病变内部的血液供应和分布,对于某些微循环和小血管的探查和显示结果较差.随着超声造影和相关成像技术的发展,从组织微循环的灌注水平研究疾病成为可能,并大大提高了超声诊断的准确性.郑瑞莲等 研究显示,超声造影定量分析联合血清指标检测诊断卵巢癌淋巴结转移的效能较高,可为卵巢癌临床治疗提供参考依据.X u等 研究结果表明,超声造影在卵巢性索间质瘤良恶性鉴别诊断中的敏感性、特异性可达、.本研究结果中,发生淋巴结转移的卵巢癌患者超声造影定量参数始增时间、达峰时间较短,增强强度较高,与马艳红等 研究结果基本一致.分析认为:恶性肿瘤的血管密度相对较高、通透性较高,管径粗,易形成血管网,血管壁薄,造影剂注射后恶性肿瘤病灶血管中的微泡流速快,因此始增时间、达峰时间较短,增强强度高.可特征性显示卵巢癌患者的血流特性,本文l o g i s t i c回归分析同样显示参数始增时间、达峰时间、增强强度均与卵巢癌有关,表明超声造影可为卵巢癌及其淋巴结转移的初步筛查提供参考.c i r c R NA是一组最终形成连续环且无自由 和 端的非编码R NA,在调节各种癌症的肿瘤发生和侵袭性中发挥重要作用.本研究结果中,发生淋巴结转移的卵巢癌患者血清c i r c C E L S R 高表达,与Z h a n g等 研究结果一致.基于既往研究推测,c i r c C E L S R 可能通过调控卵巢癌细胞的增殖和淋巴结转移参与卵巢癌疾病进展,是诊断卵巢癌的潜在生物标志物.本研究R O C曲线结果验证了c i r c C E L S R 在卵巢癌中的诊断价值,其诊断特异性为.将血清c i r c C E L S R 与超声造影定量参数联合使用后诊断特异性增加,其诊断途径不同,可能起到优势互补作用,联合使用可为疾病诊断提供更有价值的参考信息.中国计划生育学杂志 年月 第 卷 第期C h i nJF a mP l a n n,V o l ,N o ,A u g u s t 综上,卵巢癌患者超声造影扫描参数具有特征性改变,联合血清c i r c C E L S R 检测可提高对卵巢癌诊断效能.血清c i r c C E L S R 表达异常可能参与了卵巢癌的发生发展,其具体生物机制有待进一步基础研究证实.参考文献X i a oY,B iM,G u oH,e t a l M u l t i o m i c sa p p r o a c h e s f o rb i o m a r k e rd i s c o v e r yi ne a r l yo v a r i a nc a n c e rd i a g n o s i sJ E B i o M e d i c i n e,():H a r t e rP,M o u r e t R e y n i e rMA,P i g n a t aS,e ta l E f f i c a c yo fm a i n t e n a n c eo l a p a r i bp l u sb e v a c i z u m a ba c c o r d i n gt oc l i n i c a lr i s ki np a t i e n t sw i t hn e w l yd i a g n o s e d,a d v a n c e do v a r i a nc a n c e ri nt h ep h a s eI I IP AO L A /E NGO T o v t r i a lJ G y n e c o lO n c o l,():L i uX,W a n gT,Z h a n gG,e t a l T w o d i m e n s i o n a l a n dt h r e e d i m e n s i o n a lT w e i g h t e di m a g i n g b a s e dr a d i o m i cs i g n a t u r e sf o rt h e p r e o p e r a t i v e d i s c r i m i n a t i o n o f o v a r i a n b o r d e r l i n et u m o r sa n d m a l i g n a n tt u m o r sJ JO v a r i a nR e s,():H uR,S h a h a iG,L i uH,e ta l D i a g n o s t i cV a l u eo fT w o D i m e n s i o n a lT r a n s v a g i n a lU l t r a s o u n dC o m b i n e dw i t hC o n t r a s t E n h a n c e d U l t r a s o u n di n O v a r i a n C a n c e rJF r o n tS u r g,():Z e n gX Y,Y u a nJ,W a n gC,e ta l c i r c C E L S R f a c i l i t a t e so v a r i a nc a n c e rp r o l i f e r a t i o na n d m e t a s t a s i sb ys p o n g i n g m i R t oa c t i v a t eB R D s i g n a l sJ M o lM e d,():A r m s t r o n gD K,A l v a r e zR D,B a c k e sF J,e ta l N C C NG u i d e l i n e sI n s i g h t s:O v a r i a nC a n c e r,V e r s i o n J JN a t lC o m p rC a n cN e t w,():K h a n l a r k h a n iN,A z i z iE,Am i d iF,e ta l M e t a b o l i cr i s kf a c t o r so fo v a r i a nc a n c e r:ar e v i e wJ J B R A A s s i s tR e p r o d,():D u r n oK,P o w e l lME T h er o l eo fr a d i o t h e r a p yi no v a r i a nc a n c e rJ I n t JG y n e c o lC a n c e r,():S i e g e lR L,M i l l e rK D,F u c h sHE,e ta l C a n c e rS t a t i s t i c s,J C AC a n c e r JC l i n,():L h e u r e u xS,G o u r l e yC,V e r g o t eI,e ta l E p i t h e l i a lo v a r i a nc a n c e rJ L a n c e t,():R o d r i g u e sT e i x e i r aF,V e r t e m a t t i d eC a s t r oV,e t a l I m p a c to f l y m p hn o d es t a g i n g i np r e s u m e de a r l y s t a g eo v a r i a nc a r c i n o m aJ E u r JO b s t e tG y n e c o lR e p r o dB i o l,():D a v e n p o r tC F,R a iN,S h a r m aP,e ta l D i a g n o s t i cM o d e l sC o m b i n i n gC l i n i c a l I n f o r m a t i o n,U l t r a s o u n da n dB i o c h e m i c a lM a r k e r sf o rO v a r i a nC a n c e r:C o c h r a n eS y s t e m a t i cR e v i e wa n dM e t a A n a l y s i sJ C a n c e r s(B a s e l),():W e nB,K o n gW,Z h a n gY,e t a l A s s o c i a t i o nB e t w e e nC o n t r a s t E n h a n c e d U l t r a s o u n d C h a r a c t e r i s t i c sa n d M o l e c u l a rS u b t y p e so fB r e a s tC a n c e rJ JU l t r a s o u n d M e d,():郑瑞莲,金晶,魏云,等超声造影定量分析与血清S I R T,HMG B 水平对卵巢癌淋巴结转移的预后价值J中国计划生育学杂志,():X uY,X u eN,Z h a n gS,e ta l T h ev a l u eo fc o n t r a s t e n h a n c e du l t r a s o n o g r a p h y i nd i f f e r e n t i a l d i a g n o s i s o f b e n i g na n dm a l i g n a n to v a r i a ns e xc o r ds t r o m a l t u m o r sJ G l a n dS u r g,():马艳红,阮青青,梁志,等超声造影定量参数联合血清微小R NA p,微小R NA a检测在卵巢浆液性囊腺癌病人中应用价值J安徽医药,():刘致新,孙文洲,李佳欣,等 c i r c R NA的生物学功能及其在卵巢癌中的研究进展J癌症进展,():Z h a n gS,C h e n gJ,Q u a nC,e ta l c i r c C E L S R(h s a_c i r c_ )C o n t r i b u t e st o P a c l i t a x e lR e s i s t a n c eo f O v a r i a nC a n c e rC e l l sb yR e g u l a t i n gF O X R E x p r e s s i o nv i am i R J M o lT h e rN u c l e i cA c i d s,():责任编辑:董琳中国计划生育学杂志 年月 第 卷 第期C h i nJF a mP l a n n,V o l ,N o ,A u g u s t