革兰阳性球菌.pptx

单击此处编辑母版标题样式,2020/2/10,#,第一节 葡萄球菌属,一、一般特征,形态染色,：,圆形，直径,0.5-1.5um,，排列葡萄串状，有的能形成荚膜，,革兰氏阳性,。没有芽胞，无运动力。,注意：,其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。,金黄色,葡萄球菌,革兰氏染色照片,电子显微镜下的金黄色,葡萄球菌,培养特性：,需氧或兼性厌氧，,28-38,均能生长，致病菌最适温度为,37,，,pH,为,7.2-7.6,，最适为,7.4,。可在普通培养基、血琼脂等生长，,不在麦康凯培养基上生长,。,致病性菌株多能产生黄色或柠檬色素，色素为脂溶性，有氧环境可产生色素，无氧环境不产生色素。,大多数致病菌株耐高浓度,NaCl,（,10-15%,），故对严重污染的病料可用,却蒲曼琼脂,分离细菌。,在肉汤培养基中,24,小时后呈均匀混浊生长,二、分类,葡萄球属根据生理、化学组成分为三类：,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌,。,按产生的色素分为,3,类：金黄色葡萄球菌，白色葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌。,伯吉氏系统细菌学手册,将本属细菌分为,20,多种。,三、金黄色葡萄球菌,1.,培养,在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落，直径,1-2mm,，有时可达,4-5mm,。菌落颜色依菌株而异，初呈灰白色，继而为金黄色。,在血液琼脂平板形成的菌落较大，,产溶血素的菌株多为病原菌,，在菌落周围呈现明显的,溶血,金黄色,葡萄球菌,（,溶,血,),金黄色,葡萄球菌,（,溶,血,),2.,抗原及变异,葡萄球菌细胞壁上的抗原构造比较复杂，含有多糖及蛋白质两类抗原。,蛋白抗原,人源菌株都含有,葡萄球菌蛋白,A(SPA),，,来自动物源菌株则少见。,SPA,能与人、猴 猪、犬及几乎所有哺乳动物的免疫球蛋白的,Fc,端结合，结合后的,IgG,仍能与相应抗原特异性反应。用于免疫学及诊断技术（,协同凝集试验,）。,SPA,与,IgG,结合形成的复合物在机体内具有生物学作用（趋化性、抵抗吞噬、损伤血小板等）。,多糖抗原,具有群特异性，存在于细胞壁，借此可以分群,荚膜抗原：几乎所有金黄色葡萄球菌菌株的表面有荚膜多糖抗原的存在。表皮葡萄球菌仅个别是菌株有此抗原。,3.,生化反应,多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气；,致病性菌株能分解甘露醇,；过氧化物酶阳性,过氧化物酶阳性,3.,抵抗力及药物敏感性,在无芽孢菌中，葡萄球菌的,抵抗力较强,。对磺胺类、青霉素、金霉素、红霉素、新霉素等抗生素敏感，但,易产生耐药性。,4.,致病性及毒力因子,金,色葡萄球菌可产生多种毒素和酶，故致病性强。常引起,化脓性疾病,（创伤感染、脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等）及,毒素性疾病,（被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物的食物中毒性疾病）,。,猪的葡萄球菌性皮炎,毒力因子,：,葡萄球菌蛋白,A,、荚膜、毒素及酶,（,1,）葡萄球菌溶血素多数致病性菌株可产生溶血素。在血平板上菌落周围有溶血环，在试管中出现溶血反应。有四种：,甲型溶血素,（甲型毒素或称为,毒素,）：,37,能溶解家,兔、绵羊及牛,的红细胞，,完全溶血,，其溶血的原理是毒素分子插入红细胞的细胞膜疏水区，形成微孔，而造成细胞溶解。与牛羊的坏疽性乳腺炎有关，它还导致白细胞等崩解。是不耐热蛋白质，来自人的菌株多能产生此型溶血素,。,乙型溶血素,（,溶血素）能溶解,绵羊、牛,的红细胞，不完全溶血，来自动物的菌株多能产生此型溶血素,。,丙型溶血素,能溶解多种动物的红细胞，多与甲型或乙型溶血素同时存在，溶血环较窄，为完全溶血,。,丁型溶血素,在增加,CO2,浓度时才出现溶血现象，人和动物的菌株都能产生。溶血类型不详，可溶解兔、绵羊、人、豚鼠的红细胞。,(2),肠毒素,引致人类食物中毒，表现呕吐、腹泻。肠毒素是结构相似的一组蛋白质，耐热抗酸，能经受,10030min,或胃蛋白酶的水解。,(3),凝固酶,多数致病株能同时产生两种凝固酶，一种分泌于菌体外（,游离凝固酶,）。另一种结合在菌体表面（,结合凝固酶,），它们能使含有抗凝剂的家兔或人的血浆凝固，称为凝固酶。,游离凝固酶采用试管法检测，结合凝固酶则以玻片法测试。,凝固酶有助致病菌株抵御宿主体内吞噬细胞和杀菌物质的作用，同时也使感染局限化。,致病株多数为凝固酶阳性。,另外还有耐热核酸酶、溶纤维蛋白酶、透明质酸酶，又 称为扩散因子。,6,、免疫防治,感染葡萄球菌痊愈后，不产生明显的免疫力，可再次感染。,5.,微生物学诊断,（,1,）涂片染色镜检,取脓汁、渗出液、乳汁、血液，中毒症取剩余食物等。将病料涂片染色镜检,（,2,）分离培养,将病料划线接种于,5,绵羊或兔血液琼脂平板或却蒲曼琼脂，,37,培养,18-24h,，然后据菌落的的形态、溶血、色素 判断可疑菌落。,(3),生化鉴定,进一步鉴定还要做凝固酶试验、分解甘露醇试验，阳性者多为致病菌。,(4),必要时可做动物试验,6.,防治原则,注意卫生，皮肤创伤及时清洗、消毒处理。,发病后选择敏感药物进行治疗，通过抗菌素药敏试验，选择敏感药物，避免滥用抗生素，防止耐药性产生。,加强饲养管理，定期消毒圈舍。,防止医源性感染,第二节 链球菌属,(Streptococcus),一、分类,(1),按溶血性分为,、,、,3,类。,型溶血链球菌,在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未完全溶解，血红蛋白变成绿色。此菌致病力不强，多为条件性菌。,型溶血链球菌,菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。这类菌致病力强，常引起人及动物各种疾病。,型溶血链球菌,菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。,a,溶血菌落周围出狭窄的草绿色溶血环,型溶血形成完全透明的溶血环,(2),根据抗原结构分类,1,）,群特异性抗原,（族特异性抗原简称,C,抗原）根据链球菌细胞壁中氨基糖的种类不同可将链球菌分为,A,、,B,、,C,、,D,等,20,个血清群。,2,）,型特异性抗原,又称表面抗原，是细胞壁表面的蛋白质，可根据此分型，,A,群链球菌有,M,、,R,、,T,等蛋白质抗原，其中,M,抗原为致病的主要毒力因子。,SPG,与,SPG,生物学特性相似。,3,）,核蛋白抗原,属特异性抗原,二、形态与染色,链球菌呈圆形或卵圆形，直径小于,2.0um,，,G,+,，但老龄培养物或被 吞噬后为,G,-,，多有荚膜，无芽胞，多数无鞭毛。常排列成链状或成双。菌链的长短与菌种及生长环境有关，一般来说：,（,1,）致病菌株较长，非致病菌株较短；,（,2,）固体培养基多为短链，液体培养基常为成长链；,（,3,）病料多呈长链，但败血症猪体分离的菌株多为成双或短链,三、培养及生化特性,多为兼性厌氧菌。致病菌,营养要求较高,，普通培养基中生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。,在血液琼脂平板上长成直径,0.1-1.0mm,，灰白色，表面光滑，边缘整齐的小菌落。多数致病菌株有溶血性。,在血清肉汤中培养后，有粘稠或絮状沉淀，上液清朗。,能分解简单的糖类，产酸不产气。,四、致病性,致病性链球菌可产生多种毒素或酶，可致多种动物的很多疾病，化脓感染、肺炎、乳房炎、败血症、脓毒败血症等。人类感染链球菌，可引起猩红热、风湿热、急性肾小球肾炎,等。,溶血素,分为对氧敏感溶血素,O(SLO),和对氧稳定溶血素,S(SLS),两种，呈溶血性。,溶血素,O,（,SLO,），,对氧敏感,，被氧化后暂时失去溶血能力，加入亚硫酸钠或半胱氨酸等还原剂时可恢复溶血作用。,有抗原性,。对心肌有强毒性，破坏中性白细胞、巨噬细胞和神经细胞。静脉注入家兔致死,溶血素,S,（,SLS,），,对氧稳定,，,无抗原性,，对热、酸敏感，也可破坏白细胞、血小板等，静脉注入家兔致死。,2.,致热外毒素,旧名红疹毒素，主要由,A,群链球菌产生，致人,猩红热,，小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹，大剂量注射可致全身红疹。,3.,酶,不同致病菌株，可产生,链激酶,（溶纤维蛋白酶），,透明质酸酶、,DNA,酶,等。,4,.,菌体本身的 成分：,细胞壁脂磷壁酸,(LFA),与菌体吸附于宿主黏膜关。其荚膜成分、,M,蛋白等具有抗吞噬作用,五、抵抗力,本属细菌的抵抗力不强。对青霉素、磺胺类药物敏感，易产生耐药性。,六、免疫性,链球菌的,抗原结构比较复杂，,机体感染后有多种抗体产生，已知抗,M,蛋白的抗体具有保护作用，,M,蛋白有多种抗原型，各型间缺乏有效的交叉保护。,我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。,七、微生物学诊断,1.,取病料,（脓汁、乳汁、血液、组织）,2.,涂片染色镜检,：见革兰氏阳性、具荚膜、成对或链状排列的球菌，可作初步诊断。,3.,分离培养与鉴定,：用血液琼脂平板分离培养，观察菌落、溶血等特征，并进行生理生化试验和动物实验。,用群、型特异性血清作血清学试验，对病原菌定群或定型。,分子生物学方法快速检,猪链球菌,猪链球菌,是,猪链球菌病,的重要致病菌，并可感染人而致死。,我国自,1998,年，我省暴发猪链球菌病，从而再次引起关注。,猪链球菌病的病原，至少有三种：,马链球菌兽疫亚种、猪链球菌,2,型、猪链球菌,1,型,（,1,）马链球菌兽疫亚种：又叫 兽疫链球菌,C,群，,溶血；,对各种动物有致病性；致猪急性败血症及关节炎；,但未见感染人并致死的报道。,（,2,）猪链球菌,致猪败血症、肺炎、脑膜炎、关节炎及心内膜炎；,2,型,R群：或溶血，致病性最强，人畜共患。,1型 S群,