NY∕T 3101-2017 肉制品中红曲色素的测定 高效液相色谱法(农业).pdf

ICS 67.120.10 X22 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3101一2017肉制品中红曲色素的测定高效液相色谱法Determination of monascus pigments in meat products-HPLC method 2017 -06-12发布2017 -10 -01实施中华人民共和国农业部发布剧昌本标准按照GB/T1. 1一2009给出的规则起草。本标准由农业部农产品加工局提出。本标准由农业部农产品加工标准化技术委员会归口。NY/T 3101-2017 本标准起草单位:农业部肉及肉制品质量监督检验测试中心(江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所)、江西省知识产权服务中心。本标准主要起草人:胡丽芳、董秋洪、周瑶敏、储怡士、李伟红、李瑞丽、魏爱花、尹德凤。I NY/T 3101-2017 肉制品中红曲色素的测定高效液相色谱法1 范围本标准规定了肉制品中红斑红曲胶、红曲玉红胶、红曲素、红斑红曲素和红曲玉红素含量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于熏煮火腿类、灌肠类、熏烤鸡鸭类、酱鸭类和脑腊类肉制品中红斑红曲胶、红曲玉红胶、红曲素、红斑红曲素和红曲玉红素含量的测定。本标准方法检出限为0.18rng/烛，定量限为0.5rng/峙。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理试样中红曲色素用甲醇一乙酸乙醋(2+8，体积比)提取，提取液浓缩后，采用凝胶色谱净化，浓缩定容后，用高效液相色谱测定，外标法定量。4 试剂和材料除非另有规定，以下试剂均为分析纯。水应符合GB/T6682规定的一级水要求。4. 1 甲醇:色谱纯。4. 2 乙睛:色谱纯。4. 3 乙酸乙醋。4.4 环己烧。4. 5 抗坏血酸。4. 6 磷酸。4. 7 元水硫酸铀:于450.C蜡烧4h，冷却后于干燥器储存，备用。4.8 标准品:红斑红曲胶(CAS号:514-66-9)、红曲玉红胶(CAS号:3627-51-8)、红曲素(CAS号:21516 -68 -7)、红斑红曲素(CAS号:514-67-0)和红曲玉红素(CAS号:13283 -90 -的，纯度均大于等于98%。4. 9 甲醇一乙酸乙醋溶液:分别取200rnL甲醇和800rnL乙酸乙醋，混合均匀，备用。4. 10 乙睛一水溶液:分别取700rnL乙腊和300rnL 水，混合均匀，备用。4. 11 磷酸溶液:量取1000rnL水，用磷酸(4.6)调pH2.5:1:0.3。4. 12 乙酸乙醋一环己烧溶液:分别取500 rnL乙酸乙醋和500rnL环己烧，混合均匀，备用。4. 13 标准储备液O.0 rng/ rnL) :准确称取各标准品(4.8)10. 0 rng于10rnL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，置于棕色干燥器中，4.C冰箱中避光保存。4. 14 标准中间液(0.1 rng/ rnL) :准确吸取各标准储备液(4.13) 1. 0 rnL于10rnL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，置于棕色干燥器中，4.C冰箱中避光保存。1 NY/T 3101-2017 4.15 混合标准工作液:分别准确吸取各标准中间液(4.14)0.02 mL、0.05mL、0.20mL、0.50mL、1.0mL、2.0mL，用甲醇稀释并定容至10mL，配置浓度分别为0.20g/mL、0.50g/mL、2.0g/mL、5.0g/ mL、10.0g/mL、20.0g/mL的海合标准系列工作液，置于棕色干燥器中，4.C冰箱中避光保存，现配现用。5 仪器和设备5. 1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。5.2 分析天平:感量0.01mg和感量0.01g。5.3 组织均质器:转速不低于10000r/ 5. 4 超声波清洗仪。5. 5 离心机:转速不低于105.6 氮气吹干装置。5. 7 5.8 5. 9 离心管:50硫酸铀(4.7)另一个50mL40.C下氮气7. 2 净化7. 1和7.2操7. 3 液相色谱条件a) 色谱柱C18,250 mm b) 流动相:乙睛和磷酸溶液(4.c) 流速:1. 0 mL/ min; d) 柱温:30.C;e) 检测波长:400nm; f) 进样量:20L。表1液相色谱梯度洗脱条件2 时间，mlnO 5 乙脯，%70 70 备操作过，加入无水上清液转入并上清液，乙酸乙醋环己磷酸溶液，%30 30 NY/T 3101-2017 表1(续)20 30 乙脯，%90 70 磷酸溶液，%10 30 时间，ml07. 4 标准曲线绘制将混合标准系列工作液(4.15)依次按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。7.5 测定根据保留时间定性，外标法合标准溶液液相色谱图参见C, 释后测定。5种红曲色素混7.6 空白试验除不加试样外，8 结果计算、/1,A /飞、. . . . . . . . . . 式中:X A V A, m 计算以重复多点校正按式中:Cx一一标准曲线上计算结果应扣除空白以重复性条件下获得的29 精密度在重复性条件下，获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。在再现性条件下，获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。3 附录(资料性附录)红曲色素混合标准溶液液相色谱图A NY/T 3101-2017 红曲色素混合标准溶液液相色谱图见图A.l。mAV 30 寸l寸mE.AMmu-川咀凹.m山-lmm.n ml咀的.m卢25 20 Ni咀【.m15 10 5 16 t,min 14 12 4一一红斑红曲素;5 红曲玉红索。10 8 6 4 2 。说明:1 红斑红曲胶32一-红曲玉室工胶;3一一红曲素;红曲色素混合标准溶液液相色谱图图A.l4 NY /T 3101-2017 中华人民共和国农业行业标准肉制品中红曲色素的测定高效液相色谱法NY/ T 3101- 2017 长争e兴中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码100125网址.ccap. corn. cn) 北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销* * 长开本880rnrnX1230rnrn 1/16 印张O.75 字数15千字2017年9月第1版2017年9月北京第1次印刷书号16109 4246 定价18.00元版权专有侵权必究举报电话[phone]