第五章-质量标准及稳定性PPT课件.ppt

第五章第五章 质量标准研究质量标准研究n药品质量标准是国家对药品质量及检验方法所药品质量标准是国家对药品质量及检验方法所作的技术规定，是药品生产、经营、使用、检作的技术规定，是药品生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据。验和监督管理部门共同遵循的法定依据。我国国家药品标准：我国国家药品标准：n中华人民共和国药典中华人民共和国药典，现行版是，现行版是20102010版，版，分为一部和二部。一部收载常用中药材和中成分为一部和二部。一部收载常用中药材和中成药等传统药；药等传统药；n部颁药品标准部颁药品标准,中国生物制品规程中国生物制品规程、药品卫生标准药品卫生标准以及所有未收载入药典的药以及所有未收载入药典的药品标准。品标准。1中药新药质量标准研究的技术要求中药新药质量标准研究的技术要求n质量标准中的各项内容都应做细致的考察质量标准中的各项内容都应做细致的考察及试验，各项试验数据要求准确可靠，以及试验，各项试验数据要求准确可靠，以保证药品质量的保证药品质量的可控性可控性和和重现性重现性。2中药质量标准中药质量标准原料（药材）的质量标准原料（药材）的质量标准原料（药材）的质量标准原料（药材）的质量标准中药制剂质量标准中药制剂质量标准中药制剂质量标准中药制剂质量标准3质量标准研究质量标准研究一质量标准设计原则一质量标准设计原则（一）同步进行原则（一）同步进行原则1.1.制剂用原料研究与质量控制同步：制剂用原料研究与质量控制同步：原料为药材，级别不同，质量不同。原料为药材，级别不同，质量不同。42.2.制备工艺研究与质量控制同步：制备工艺研究与质量控制同步：根据各工艺阶段中所含的有效成分，根据各工艺阶段中所含的有效成分，建立质量监控方法，用来考察药物提建立质量监控方法，用来考察药物提取是否完全，分离、纯化工艺条件是取是否完全，分离、纯化工艺条件是否合适。否合适。5（二）样品要有代表性（二）样品要有代表性1.1.原料的代表性：药材品种不同，质量不原料的代表性：药材品种不同，质量不同；产地不同，含量不同；还有药用部位同；产地不同，含量不同；还有药用部位、采收季节、加工炮制方法、储藏条件等、采收季节、加工炮制方法、储藏条件等因素均对质量有影响。因素均对质量有影响。2.2.质量标准所制定的指标应有代表性：质量标准所制定的指标应有代表性：所所制制定定的的指指标标项项目目皆皆应应与与功功能能主主治治相相符符，方能保证质量标准所制订的指标具有代表性。方能保证质量标准所制订的指标具有代表性。63.3.质量标准具有可控性质量标准具有可控性:它与临床疗效、它与临床疗效、安全有关，必须对处方中的药材、工艺安全有关，必须对处方中的药材、工艺 中的半成品、成品进行监控。中的半成品、成品进行监控。4.4.质量标准所采用的对照物要可靠性：质量标准所采用的对照物要可靠性：对照物、对照药材注意与制剂研究中的对照物、对照药材注意与制剂研究中的 原料一致。原料一致。7（三）对照试验原则（三）对照试验原则 1.1.设设立立对对照照：所所有有试试验验项项目目（鉴鉴别别、含含量量测定）必须设立阴性和阳性对照。测定）必须设立阴性和阳性对照。2.2.对对照照的的等等量量性性：供供试试品品与与阳阳性性、阴阴性性对对照照应应为为量量化化对对照照（样样品品的的标标示示量量与与对对照照品品取取量量要要一致）。一致）。8（四）重复性原则（四）重复性原则 研研究究过过程程中中质质量量控控制制内内容容需需要要有有良良好好的的重重复复性性：同同一一人人在在不不同同时时间间、不不同同仪仪器器上均能重复实验结果。上均能重复实验结果。9设计方案设计方案查阅资料查阅资料研究内容研究内容制定草案制定草案反复试验反复试验修改完善修改完善名称名称处方处方制法制法性状性状检查检查浸出物浸出物含量测定含量测定功能主治功能主治用法用量用法用量注意注意规格规格贮藏贮藏二、质量标准研究程序二、质量标准研究程序 质质 量量 标标 准准 研研 究究 路路 线线方方 法法方方 法法 学学 考考 察察HPLCTLCSGC分光光度法分光光度法提取条件提取条件分离分离 纯化纯化测定条件测定条件线性范围线性范围稳定性稳定性精密度精密度重复性重复性回收率回收率鉴别鉴别10质量标准的制定质量标准的制定一一、性性状状：成成品品的的颜颜色色、外外形形、气气味味等等依依次次描描述述。即即药药品品内内在在质质量量的的外外在体现。在体现。11二、二、鉴别鉴别 （一一）目目的的、意意义义：中中药药制制剂剂多多为为复复方方，通通过过鉴鉴别别项项的的检检测测来来确确定定复复方方中中药药材材的的存在、真伪、纯度。存在、真伪、纯度。12（二二）影影响响因因素素：药药材材品品种种、药药材材产产地地、药用部位、炮制方法。药用部位、炮制方法。（三三）项项目目选选择择原原则则：君君药药、贵贵重重药药、毒毒药应首选。药应首选。（四四）鉴鉴别别方方法法：经经验验鉴鉴别别、显显微微鉴鉴别别、理化鉴别、色谱鉴别理化鉴别、色谱鉴别131 1色谱鉴别的优点：色谱鉴别的优点：（1 1）应用量大，适用面广。应用量大，适用面广。（2 2）信息量大、效率高。信息量大、效率高。（3 3）设备简单、操作方便、成本低。设备简单、操作方便、成本低。（4 4）时间短、分离能力强。时间短、分离能力强。（5 5）样品用量少，不需要特别纯化。样品用量少，不需要特别纯化。（6 6）文献多，可参考。文献多，可参考。（7 7）吸附剂和显色剂选择性大。吸附剂和显色剂选择性大。142.2.薄层板的制备薄层板的制备（1）吸吸附附剂剂的的种种类类：硅硅胶胶、氧氧化化铝铝、活活性性炭炭、聚聚酰胺等。酰胺等。（2 2）吸附剂选择原则：）吸附剂选择原则：A.A.亲脂性化合物选用硅胶、氧化铝亲脂性化合物选用硅胶、氧化铝 B.B.亲亲水水性性化化合合物物选选用用纤纤维维素素、离离子子交交换换树树脂脂、硅藻土、聚酰胺硅藻土、聚酰胺 C.C.酸酸性性物物质质首首选选硅硅胶胶，碱碱性性物物质质首首选选氧氧化化铝铝，中性物质两者都可以。中性物质两者都可以。D.D.含酚羟基的化合物，可选硅胶，聚酰胺更好。含酚羟基的化合物，可选硅胶，聚酰胺更好。153.3.展开剂的选择展开剂的选择A A对待测组分有良好的溶解性对待测组分有良好的溶解性B B可使待测组分与杂质分开可使待测组分与杂质分开C C待测组分待测组分R Rf f值在值在0.20.20.80.8之间之间D D不与待测组分与吸附剂发生化学反应不与待测组分与吸附剂发生化学反应E E沸点适中，黏度较小沸点适中，黏度较小F F展开后斑点圆且集中展开后斑点圆且集中G G混合溶剂最好临用前新鲜配制混合溶剂最好临用前新鲜配制164.4.试试验验方方法法：先先用用单单一一溶溶剂剂逐逐个个试试验验，再再用用混合溶剂系统。混合溶剂系统。溶溶剂剂系系统统是是由由基基础础溶溶剂剂和和洗洗脱脱溶溶剂剂两两部部分分组组成成，基基础础溶溶剂剂常常是是非非极极性性溶溶剂剂，洗洗脱脱溶溶剂剂是是极极性性较较大大的的。两两种种溶溶剂剂的的比比例例常常用用9 9：1 1，可可根根据据吸吸附附剂剂的的活活性性和和RfRf值值的的大大小小调调整整，并并加加入第三种以上的溶剂。入第三种以上的溶剂。175斑点的检视：斑点的检视：（1 1）被被测测物物质质本本身身有有颜颜色色，可可展展开开后后直直接观察斑点。接观察斑点。（2 2）可可在在紫紫外外灯灯下下观观察察荧荧光光，254254nm,nm,365nm 365nm。18（3 3）对对本本身身不不具具有有荧荧光光物物质质，可可在在荧荧光光板板GF254GF254展展开开后后，紫紫外外下下底底版版有有荧荧光光，被被测测物物质质斑斑点点呈呈暗暗色色。有有些些物物质质虽有荧光，但不强，喷一定物质后，荧光加强。虽有荧光，但不强，喷一定物质后，荧光加强。（4 4）薄薄层层鉴鉴别别的的判判断断：选选用用对对照照品品（或或对对照照药药材材）与与样样品品的的薄薄层层色色谱谱相相比比较较，在在与与对对照照品品（或或对对照照药药材材）相相对应的位置上，显相同颜色的斑点。对应的位置上，显相同颜色的斑点。与与对对照照品品相相比比，使使用用对对照照药药材材做做鉴鉴别别，增增加加整整体体专专属性，新药典中，使用对照药材的占属性，新药典中，使用对照药材的占61.6%61.6%。19陈皮与枳壳的薄层色谱陈皮与枳壳的薄层色谱20 三、三、检查检查（一一）通通则则：水水分分、pHpH值值、相相对对密密度度、灰灰份份、重量差异、崩解时限等。重量差异、崩解时限等。（二二）灰灰份份、炽炽灼灼残残渣渣：控控制制原原料料加加工工或或储储存存过程中其他无机物污染或掺杂。过程中其他无机物污染或掺杂。21（三）重金属及砷盐的检查：（三）重金属及砷盐的检查：重重金金属属1010ppmppm，不不列列入入正正文文，10 10 ppmppm，要求检查。要求检查。砷砷盐盐22ppmppm，不不列列入入正正文文，2 2ppmppm，要求检查。要求检查。（四四）农农药药残残留留的的检检查查：有有机机氯氯，有有机机磷磷。（半衰期长）（半衰期长）一般采用一般采用GCGC方法。方法。22（五）有毒物质的检查：（五）有毒物质的检查：1 1.内服酒、酊剂检查甲醇。内服酒、酊剂检查甲醇。2 2.卫卫生生学学检检查查：对对非非灭灭菌菌药药物物制制剂剂（包包括括药药材材与与中中成成药药）的的生生物物性性污污染染都都有有考考察察。项项目目包包括：细菌总数、霉菌、活螨。括：细菌总数、霉菌、活螨。3 3.中中药药复复方方制制剂剂中中所所用用原原料料（有有效效成成分分、有有效效部部位位）或或半半成成品品，在在提提取取分分离离、精精制制纯纯化化过过程程中中有有可可能能引引入入有有害害的的有有机机溶溶剂剂时时，应应进进行行有机溶剂残留量的检查。有机溶剂残留量的检查。23四四、浸浸出出物物：复复方方中中一一个个有有效效成成分分不不能能代代表表全全方方的的功功能能主主治治，或或有有效效成成分分含含量量太太低低（小小于于万万分分之之五五），可可增增加加浸浸出出物物测测定定。根根据据有有效效成成分分的的性性质质选选择择不不同同溶溶剂剂为为浸浸出出物物测测定定的的溶溶剂。剂。溶剂：水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙醚等。溶剂：水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙醚等。24五五、含量测定含量测定（一）指标的选择（一）指标的选择1.1.主主药药（君君药药及及臣臣药药）有有效效成成分分清清楚楚的的，应针对有效成分定量。应针对有效成分定量。2.2.主药有效成分不清楚的，应进行研究，主药有效成分不清楚的，应进行研究，找出有效成分，建立定量方法或选特征找出有效成分，建立定量方法或选特征成分定量。成分定量。25 3.3.主主药药大大类类成成分分清清楚楚的的，测测定定总总成成分分（总总黄酮、总皂甙）黄酮、总皂甙）4.4.全全组组方方主主药药有有效效成成分分或或特特征征成成分分不不清清楚时，做总有效部位的限量。楚时，做总有效部位的限量。26（二）含量测定方法（质量标准的核心）：（二）含量测定方法（质量标准的核心）：1.1.HPLCHPLC法法定定量量：快快速速、准准确确、灵灵敏敏、可可排排除干扰、性能好除干扰、性能好 。常常用用方方法法：外外标标法法，被被测测样样品品某某组组分分的的峰峰面面积积（峰峰高高）与与对对照照品品的的峰峰面面积积直直接接比比较较进行定量。进行定量。27外标一点法：标准曲线通过原点外标一点法：标准曲线通过原点 外标二点法：标准曲线不通过原点外标二点法：标准曲线不通过原点 C=b x+a a=0 C=b x+a a=0 时时 一点法，一点法，当当b/a 100b/a 100时，可近似认为时，可近似认为a a 值很小，值很小，可用一点法。可用一点法。28（1 1）HPLCHPLC法的步骤法的步骤 A:A:文文献献查查阅阅：首首选选君君药药、臣臣药药。该该药药或或有有效效成成分分是是否否有有文文献献报报道道，药药典典、部部颁颁有有否否报报道道，是是否否有有法法定定对对照照品品（供供含含量量测定用）测定用）B B：色色谱谱柱柱：首首选选ODSODS柱柱（C18C18）、然然后后硅胶、腈基、氨基柱。硅胶、腈基、氨基柱。29C C：流流动动相相：反反相相首首选选甲甲醇醇水水，少少用用缓缓冲冲盐盐流动相，试剂要用色谱纯。流动相，试剂要用色谱纯。D D：用流动相配制供制品，避免出现溶剂峰。用流动相配制供制品，避免出现溶剂峰。E E：一一般般用用UVUV检检测测器器，选选最最佳佳波波长长，没没有有紫紫外外吸收的采用蒸发光检测器。吸收的采用蒸发光检测器。30（4 4）方法学研究：）方法学研究：a.a.标标准准曲曲线线（对对照照品品溶溶液液的的配配制制、曲曲线线方程、线性、测量范围）方程、线性、测量范围）b.b.样样品品供供试试品品溶溶液液的的制制备备(提提取取方方法法、提提取取溶溶剂剂、溶溶剂剂用用量量、提提取取时时间间、pHpH值值、精制纯化除杂方法等精制纯化除杂方法等)31e.e.稳稳定定性性试试验验：考考察察不不同同时时间间是是否否对对测测定定方方法法和和测测定定结结果果有有影影响响，用用同同一一被被测测样样品品的的供供试试液液在在不不同同间间隔隔时时间间用用同同一一测测定定方方法法所所得得到到的的测测定定结结果果，计计算算含含量量的的平平均均值值，RSD%3%RSD%3%，时时间间考考察察，一一般般要要求求在一个工作日内。在一个工作日内。32f.f.加加样样回回收收率率试试验验（准准确确度度试试验验）：至至少少5 5次次或或3 3组组平平行行试试验验。指指对对照照品品加加入入样样品品（已已知知量量）中中，从从供供试试液液（前前处处理理）制制备备起起，至至含含量量测测定定所所得得到到的的值值，计计算算回回收收率率，一一般般要要求求回回收收率率在在95%95%105%105%。33测得量测得量-样品量样品量 加样回收率（加样回收率（%）=*%*%对照品量对照品量 h.h.样品测定：样品测定：1010批样品、批样品、2020个数据。个数据。i.i.含含量量限限度度的的制制定定：根根据据1010批批样样品品测测定数据制定，数据应在定数据制定，数据应在20%20%范围内。范围内。342 2.分光光度法（可见分光光度法（可见-紫外、比色法）紫外、比色法）可可见见-紫紫外外分分光光光光度度法法：灵灵敏敏度度1010-4-4-10-10-7-7，可定性、定量。可定性、定量。注注意意的的问问题题：定定量量要要排排除除干干扰扰，一一般般采采用用薄层色谱洗脱法，或柱色谱洗脱法。薄层色谱洗脱法，或柱色谱洗脱法。35第六章第六章 稳定性试验稳定性试验n中药的稳定性是指中药（原料或制剂）的化中药的稳定性是指中药（原料或制剂）的化学、物理及生物学特性发生变化的程度。学、物理及生物学特性发生变化的程度。n通过稳定性试验，考察在不同环境条件（如通过稳定性试验，考察在不同环境条件（如温度、湿度、光线等）下药品特性随时间变温度、湿度、光线等）下药品特性随时间变化的规律，以认识和预测药品的稳定趋势，化的规律，以认识和预测药品的稳定趋势，为药品生产、包装、贮存、运输条件的确定为药品生产、包装、贮存、运输条件的确定和有效期的建立提供科学依据。和有效期的建立提供科学依据。36 研究内容：研究内容：1.1.影影响响因因素素试试验验:在在剧剧烈烈条条件件下下探探讨讨药药物物的的稳稳定定性性、了了解解影影响响其其稳稳定定性性的的因因素素及及所所含含成成份份的的变变化化。为为制制剂剂处处方方设设计计、工工艺艺筛筛选选、包包装装材材料料和和容容器器的的选选择择、贮贮存存条条件件的的确确定定、有有关关物物质质的的控控制制提提供供依依据据。并并为为加加速速试试验验和长期试验应采用的温度和湿度等条件提供参考。和长期试验应采用的温度和湿度等条件提供参考。2.2.加加速速试试验验:在在加加速速条条件件下下进进行行的的稳稳定定性性试试验验，其其目目的的是是在在较较短短的的时时间间内内，了了解解原原料料或或制制剂剂的的化化学学、物物理理和和生生物物学学方方面面的的变变化化，为为制制剂剂设设计计、质质量量评评价价和和包包装装、运运输输、贮贮存存条条件件等等提提供供试试验验依依据据，并并初初步步预预测测样样品品的的稳定性。稳定性。3 3.长长期期试试验验:在在接接近近药药品品的的实实际际贮贮存存条条件件下下进进行行的的稳稳定定性试验，为制订药物的有效期提供依据。性试验，为制订药物的有效期提供依据。37（一）影响因素试验（一）影响因素试验1.1.高温试验：高温试验：供试品置密封洁净容器中，在供试品置密封洁净容器中，在6060条件下条件下放置放置1010天，于天，于0 0、5 5、1010天取样检测。与天取样检测。与0 0天天比较，若供试品发生显著变化，则在比较，若供试品发生显著变化，则在4040下同法进行试验。如下同法进行试验。如6060无显著变化，则无显著变化，则不必进行不必进行4040试验。试验。382.2.高湿试验高湿试验:n供试品置恒湿设备中，于供试品置恒湿设备中，于2525、RH92.5RH92.55 5条件下放置条件下放置1010天，在天，在0 0、5 5、1010天取样天取样检测。检测项目应包括吸湿增重等。若吸湿检测。检测项目应包括吸湿增重等。若吸湿增重在增重在5%5%以上，则应在以上，则应在2525、RH75RH755 5下同法进行试验；若吸湿增重在下同法进行试验；若吸湿增重在5%5%以下，且以下，且其他考察项目符合要求，则不再进行此项试其他考察项目符合要求，则不再进行此项试验。验。393.3.强光照射试验强光照射试验:n供试品于照度为供试品于照度为4500lx4500lx500lx500lx条件下放置条件下放置1010天，在天，在0 0、5 5、1010天取样检测。天取样检测。n此外，根据药物的性质必要时应设计其他此外，根据药物的性质必要时应设计其他试验，探讨试验，探讨pHpH值、氧及其他条件（如冷冻值、氧及其他条件（如冷冻等）对药物稳定性的影响。等）对药物稳定性的影响。40（二）加速试验（二）加速试验 加速试验一般应在加速试验一般应在404022、RH75RH755 5条件下进行试验，在试验期间第条件下进行试验，在试验期间第0 0、1 1、2 2、3 3、6 6个月末取样检测。若供试品经检测不个月末取样检测。若供试品经检测不符合质量标准要求或发生显著变化，则应符合质量标准要求或发生显著变化，则应在中间条件下，即在在中间条件下，即在303022、RH65RH655 5条件下进行试验。条件下进行试验。41（三）长期试验（三）长期试验 长期试验是在接近药品的实际贮存条件长期试验是在接近药品的实际贮存条件下进行的稳定性试验，建议在下进行的稳定性试验，建议在252522、RH60RH601010条件下，分别于条件下，分别于0 0、3 3、6 6、9 9、1212、1818个月取样检测，也可在常温条件下个月取样检测，也可在常温条件下进行。进行。42（四）药品上市后的稳定性考察（四）药品上市后的稳定性考察 药品注册申请单位应在药品获准生产上药品注册申请单位应在药品获准生产上市后，采用实际生产规模的药品进行留样市后，采用实际生产规模的药品进行留样观察，以考察上市药品的稳定性。根据考观察，以考察上市药品的稳定性。根据考察结果，对包装、贮存条件进行进一步的察结果，对包装、贮存条件进行进一步的确认或改进，并进一步确定有效期。确认或改进，并进一步确定有效期。43n申报临床研究的新药，应提供至少申报临床研究的新药，应提供至少6 6个月的个月的长期试验考察资料和长期试验考察资料和6 6个月的加速试验资料。个月的加速试验资料。有效成份及其制剂还需提供影响因素试验有效成份及其制剂还需提供影响因素试验资料。资料。n申请生产的新药，应提供全部已完成的长申请生产的新药，应提供全部已完成的长期试验数据，应包括加速试验期试验数据，应包括加速试验6 6个月和长期个月和长期试验试验1818个月以上的研究数据，以确定药品个月以上的研究数据，以确定药品的实际有效期。的实际有效期。44（二）稳定性研究结果评价（二）稳定性研究结果评价 n药品稳定性的评价是对有关试验（如影响因素、加速试验、药品稳定性的评价是对有关试验（如影响因素、加速试验、长期试验）的结果进行的系统分析和判断。长期试验）的结果进行的系统分析和判断。1.1.贮存条件的确定贮存条件的确定 应综合加速试验和长期试验的结果，同时结合药品在流通应综合加速试验和长期试验的结果，同时结合药品在流通过程中可能遇到的情况进行综合分析。选定的贮存条件应过程中可能遇到的情况进行综合分析。选定的贮存条件应按照规范术语描述。按照规范术语描述。2.2.包装材料包装材料/容器的确定容器的确定 一般先根据影响因素试验结果，初步确定包装材料或容器，一般先根据影响因素试验结果，初步确定包装材料或容器，结合稳定性研究结果，进一步验证包装材料和容器的合理结合稳定性研究结果，进一步验证包装材料和容器的合理性。性。3.3.有效期的确定有效期的确定 药品的有效期应根据加速试验和长期试验的结果分析确定，药品的有效期应根据加速试验和长期试验的结果分析确定，一般情况下，以长期试验的结果为依据，取长期试验中与一般情况下，以长期试验的结果为依据，取长期试验中与0 0月数据相比无明显改变的最长时间点为有效期。月数据相比无明显改变的最长时间点为有效期。45