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第五章第五章 水水卫生生物学生生物学(P259)(P259)v保保证供供给人人们的生活的生活饮用水必用水必须是是清清洁、安全、安全且且没有病原微生物没有病原微生物。v知道水中有哪些常知道水中有哪些常见的病原微生物。的病原微生物。v学学习检测它它们的方法的方法1-第一第一节水中的微生物及其分布水中的微生物及其分布 包括雨雪水、河流湖泊水、地下水、海水包括雨雪水、河流湖泊水、地下水、海水水中所含微生物来源于空气、土壤、污水、垃圾、死的动物和植物等,所以水中微生物的种类是多种多样的。2-提提问:雨雪中的雨雪中的微生物数量种微生物数量种类与什么有关与什么有关?回答:回答:直接与空气直接与空气的的洁净程度有关程度有关;间接与地面的接与地面的洁净程程度有关度有关3-提提问:河流、湖泊中河流、湖泊中的微生物数量种的微生物数量种类与与什么有关?什么有关?回答:回答:受受纳污水的水的种种类及数量及数量环境影境影响因子响因子例如,受到医院污水、垃圾污染的水体,病原微生物数量将会很大,受到农业土壤污染的水体藻类数量将会猛增。由于微生物不喜欢阳光、喜好附着在固体上,因而水底和岸边的微生物数量高于水面和河、湖中央的微生物。4-提提问:地下水地下水饮用用时的的卫生程度与什么有关?生程度与什么有关?回答:回答:深度及地表水深度及地表水污染染程度程度(由于土壤(由于土壤层层过滤,一,一般微生物很少)般微生物很少)5-提提问:海水中有海水中有能引起人体疾能引起人体疾病的微生物病的微生物(病原微生物)(病原微生物)吗?为什么?什么?回答:回答:没有没有(海水中含海水中含盐量很量很高,一般高,一般3.24%)目前大多数城市集中供水水源目前大多数城市集中供水水源为江河湖泊,江河湖泊,难免免受到各种受到各种污染包括病原微生物染包括病原微生物污染,染,病原微生物病原微生物的的监测与控制与控制责任重大。任重大。6-第二第二节水中的病原微生物水中的病原微生物(P259)水中的微生物水中的微生物虽然很多,然很多,但只有很少但只有很少的的一部分是病原微生物(或称致病微生物)一部分是病原微生物(或称致病微生物)其中只有更少的病原微生物能其中只有更少的病原微生物能经食道食道进入入肠道引起疾病,道引起疾病,为什么?(口腔中有什么?(口腔中有溶菌溶菌酶;正常胃酸;正常胃酸pH3.2pH3.2 )此此类水中病原微生物若水中病原微生物若经水水传播播,在消在消化道滋生化道滋生导致疾病致疾病肠道道传染病染病7-安徽蒙城安徽蒙城发生霍乱疫情生霍乱疫情 健康健康报讯(2010-08-30):2010年年8月月16日,蒙城日,蒙城县城关城关镇发现多起疑似霍乱病例。多起疑似霍乱病例。经当地当地卫生部生部门对患者患者标本本进行行检测,在患者,在患者粪便中便中检出小川出小川型霍乱弧菌,确型霍乱弧菌,确诊为霍乱病例。当地医霍乱病例。当地医疗机构立机构立即即对患者采取了隔离治患者采取了隔离治疗措施。此次疫情措施。此次疫情发现的的病人病人绝大部分症状大部分症状较轻,患者主要表,患者主要表现为无痛性无痛性腹泻、呕吐,无腹泻、呕吐,无发热。截至。截至8月月29日日16时,共,共报告病例告病例33例,目前疫情已例,目前疫情已经得到初步遏制。据得到初步遏制。据专家分析,家分析,这次霍乱疫情可能与患者的不次霍乱疫情可能与患者的不洁饮食有食有关。关。8-9-致病性大肠杆菌伤寒杆菌痢疾杆菌霍乱弧菌伤寒沙门氏菌副伤寒沙门氏菌乙型副伤寒沙门氏菌痢疾杆菌副痢疾杆菌水中的病原水中的病原细菌菌一、水中的病原一、水中的病原细菌菌(P260)10-大大肠埃希菌俗称大埃希菌俗称大肠杆菌(杆菌(E.coli),是最常是最常见的的临床分床分离菌。离菌。(一)致病性大(一)致病性大肠杆菌杆菌11-形形态及染色特性及染色特性 革革兰氏阴性小杆菌,散在或成氏阴性小杆菌,散在或成对,周毛菌,有菌毛。,周毛菌,有菌毛。12-培养特性培养特性1.普通培养基上生普通培养基上生长良好,光滑、良好,光滑、湿湿润、半透明、灰白色菌落;、半透明、灰白色菌落;2.麦康麦康凯琼脂上形成脂上形成红色菌落,色菌落,伊伊红美美蓝琼脂上脂上产生黑色生黑色带金属金属光光泽菌落;菌落;3.致病菌株在致病菌株在绵羊血平板上呈羊血平板上呈型溶血;型溶血;4.生化特性:糖生化特性:糖发酵酵试验(发酵乳糖)酵乳糖)和和IMViC(+-)试验。H2S阴性。阴性。麦康麦康凯培养基培养基伊伊红美美蓝琼脂脂13-IMViC试验:细菌的生化反菌的生化反应用于用于鉴别细菌,菌,尤其尤其对形形态、革、革兰染色反染色反应和培养特性相同或相似和培养特性相同或相似的的细菌更菌更为重要。重要。吲哚(I)、甲基)、甲基红(M)、)、VP(V)、枸)、枸橼酸酸盐利用(利用(C)四种)四种试验常用于常用于鉴定定肠道杆菌,合称道杆菌,合称为IMViC试验。例如大。例如大肠埃希菌埃希菌对这四种四种试验的的结果是果是“+-”,产气气肠杆菌杆菌则为“-+”。14-致病性致病性大大肠杆菌杆菌(Escherichia coli)是条件致病菌。在正常情是条件致病菌。在正常情况下一般不致病。致病性菌株况下一般不致病。致病性菌株Escherichia coli0157:H7能能够引起出血性引起出血性肠炎。炎。给人人类带来来严重危害。重危害。做做为人人类肠道道传染病的致病原,染病的致病原,E.coliO157:H7于于1983年被首次年被首次报告。在暴告。在暴发性出血性性出血性肠炎(炎(HC)患者的)患者的粪便便样本中分离到很少本中分离到很少见的大的大肠杆菌血清型杆菌血清型O157:H7。同年,另一份同年,另一份报告指出了告指出了E.coliO157:H7与腹泻后出血性与腹泻后出血性尿毒症(尿毒症(HUS)的相关性。)的相关性。这是一种由于是一种由于E.coliO157:H7产生的生的细胞毒素所胞毒素所导致的致的肾脏损伤疾病。目前已知,疾病。目前已知,在工在工业化国家化国家约90以上的以上的HUS病因都源于此。病因都源于此。15-几年前,日本几年前,日本许多地区暴多地区暴发流行的大流行的大肠杆菌杆菌O157:H7(E.coliO157:H7)感染,造成了数千名儿童)感染,造成了数千名儿童发病。由病。由于媒体的关注和于媒体的关注和报导,相信,相信许多人至今多人至今对此此还记忆犹新。犹新。E.coliO157:H7是是经食物和水源感染人食物和水源感染人类的。多数病的。多数病例是由于食用了被例是由于食用了被细菌菌污染了的食品,特染了的食品,特别是牛肉和未消是牛肉和未消毒毒过的牛奶。如在美国和北美的牛奶。如在美国和北美过去所去所报告的疫情告的疫情资料就料就显示,感染是因食用了快餐店的示,感染是因食用了快餐店的汉堡所致。然而,最近的堡所致。然而,最近的报告也告也证明,明,EcoliO157:H7可因食用被牛可因食用被牛粪污染了的水果染了的水果和蔬菜而感染。和蔬菜而感染。1996年日本暴年日本暴发的的E.coliO157:H7感染主感染主要与食用了未煮要与食用了未煮过的的萝卜苗有关。卜苗有关。因此,因此,预防感染的最佳方式防感染的最佳方式应从阻断从阻断细菌的感染途径菌的感染途径入手。食物的加入手。食物的加热处理、蔬果的充分洗理、蔬果的充分洗净及用餐前洗手都及用餐前洗手都是必是必须注意的注意的环节。16-种种类:伤寒寒沙沙门氏氏菌菌、副副伤寒寒沙沙门氏氏菌菌和和乙乙型型副副伤寒寒沙沙门氏菌。氏菌。大小:大小:0.60.724m特特征征:周周生生鞭鞭毛毛,革革兰氏氏阴阴性性反反应,无芽,无芽孢和和荚膜膜(二)(二)伤寒杆菌寒杆菌 抵抗力:抵抗力:在地面普通水中在地面普通水中可生存可生存13周周,井水中可,井水中可生存生存约周周,在,在粪坑及坑及污水中可生存水中可生存12个月个月。加加热到到6030min可以可以杀死,死,对5的石炭酸,可抵抗的石炭酸,可抵抗5min。伤寒沙寒沙门氏菌氏菌17-伤寒遍布于世界各地,以热带及亚热带地区为多,在不重视饮食卫生的地区可引起流行。(一)传染源为患者及菌者。全病程均有传染性,以病程第24周传染性最大。少数患者可成为长期或终身带菌者,是我国近年来伤寒持续散发的主要原因。(二)传播途径病菌随患者或带菌者粪便排出,污染水和食物,或经手及苍蝇、蟑螂等间接污染水和食物而传播。水源污染是传播本病重要途径,常酿成流行。(三)人群易感性人对伤寒普遍易感,病后可获得持久性免疫力,再次患病者极少。(四)流行特征1、季节性:本病终年可见,但以夏秋季最多。2、年龄:一般以儿童及青壮年居多。3、流行形式:散发性:多由于与轻型病人或慢性带菌者经常接触而引起。流行性:多见于水型或食物型。18-1414世世纪、1515世世纪、1616世世纪,每一次,每一次伤寒流行寒流行都随都随战争而爆争而爆发,病死率达病死率达4040到到5050,20 20世世纪初,英国医生初,英国医生赖特研制出特研制出伤寒疫苗,寒疫苗,伤寒流行寒流行从此从此销声匿迹,但仍有散在病例。声匿迹,但仍有散在病例。19-(三)(三)痢疾杆菌痢疾杆菌痢疾杆菌可引起痢疾杆菌可引起细菌性痢疾菌性痢疾(与阿米巴痢与阿米巴痢疾不同疾不同)。它有两种:。它有两种:1痢疾杆菌痢疾杆菌(痢疾志痢疾志贺氏菌氏菌Shigelladysenteriae)痢疾杆菌的大小痢疾杆菌的大小为0.4一一0.61.03.0m。所引起的痢疾在夏。所引起的痢疾在夏季最季最为流行,特征是急性流行,特征是急性发作,伴以作,伴以腹泻。有腹泻。有时在某些病例中有在某些病例中有发烧,里,里急后重,通常大便中有血及粘液。急后重,通常大便中有血及粘液。2副痢疾杆菌副痢疾杆菌(副痢疾志副痢疾志贺氏菌氏菌Shigellaparodysenteriae)这种杆菌的种杆菌的大小大小约为0.51.01.5m。所引起疾。所引起疾病的症状与痢疾杆菌引起的急性病的症状与痢疾杆菌引起的急性发作作类似似,但症状一股但症状一股较轻。内毒素内毒素:损害了人体害了人体肠道道细胞,引起胞,引起肠道道痉挛、腹、腹泻等症状。泻等症状。“极易耐极易耐药,预防防为主主”20-痢疾杆菌不生芽孢和荚膜,一般无鞭毛,革兰氏染色阴性,加热到60能耐l0min、对1的石炭酸,可抵抗半小时。痢疾杆菌的传播方式主要由于取食污染的食物和饮用污染的水,以及由于蝇类而传播。21-(四)霍乱弧菌(四)霍乱弧菌霍乱弧菌(Vibrio comma)的细胞呈微弯曲的杆状,大小约0.3一0.61.0一5.0m。细胞可以变得细长而纤弱,或短而粗,具有一根较粗的鞭毛,能运动,革兰氏阴性反应,不生荚膜与芽孢。在60下能耐10min,在1的石炭酸中能抵抗5min,能耐受较高的碱度。22-病症:病症:霍乱霍乱(“最可怕的最可怕的瘟疫瘟疫”)甲甲级传染病(法定隔离)染病(法定隔离)重重呕吐、呕吐、“米米汤样”大便、大便、腹疼和昏迷等腹疼和昏迷等,严重的常常重的常常在症状出在症状出现后后12h内死亡,内死亡,死亡率极高死亡率极高。轻只造成只造成腹泻腹泻。霍乱弧菌可经水及食物传播,与病人或带菌者接触也可能传染,也可由蝇类传播。23-坦桑尼坦桑尼亚59人死于霍乱人死于霍乱2009年10月24日06:21来源:人民网坦桑尼亚卫生部官员当天表示,该国在过去两个月中至少有59人死于霍乱,其中大部分发生在东北部的坦噶省。坦桑尼亚卫生部常务秘书布兰蒂娜恩尤尼说,目前还不断有最新的感染病例报告,其中上周仅在坦噶省就发现60名新患者。她说,在过去两个月中,坦噶省共发现了3454例霍乱病人。布兰蒂娜恩尤尼表示,坦桑尼亚政府本月早些时候已向出现霍乱疫情的地区增派医护人员,并加强了霍乱预防教育。此外,在坦噶省疫情最严重的汉德尼地区,学校将停课至12月份。24-以上以上4种种肠道道传染病菌染病菌对于于氯的抵抗力都的抵抗力都不大,用一般的加不大,用一般的加氯消毒法都可除去。赤痢消毒法都可除去。赤痢阿米巴阿米巴对氯的抵抗力的抵抗力较强,前已述及,需游,前已述及,需游离性余离性余氯310mgL左右,接触左右,接触时间30min才能才能杀灭,但因虫体,但因虫体较大,可在大,可在过滤时除去。除去。杀死炭疽菌死炭疽菌则需更多的需更多的氯量。目前一般水厂量。目前一般水厂的加的加氯量只能量只能杀死死肠道道传染病菌。染病菌。25-病毒的定义:是一类比较原始的、有生命特征的、能够自我复制和严格细胞内寄生的非细胞生物。病毒的特点:形体微小,具有比较原始的生命形态和生命特征,缺乏细胞结构;只含一种核酸,DNA或RNA;依靠自身的核酸进行复制,DNA或RNA含有复制、装配子代病毒所必须的遗传信息;缺乏完整的酶和能量系统;在特定活细胞内寄生。二、水中的病毒二、水中的病毒(P264)26-现在已知的可由饮水传染的病毒性疾病主要是脊髓灰质炎(小儿麻痹症)和病毒性肝炎。此外,柯萨奇病毒(Coxsackievirus)和埃可病毒(ECHO)也是肠道病毒。27-(一一)脊髓灰脊髓灰质炎病毒炎病毒脊髓灰脊髓灰质炎病毒是一种炎病毒是一种圆形的微小形的微小RNA病毒,直病毒,直径径27nm30nm,核衣壳,核衣壳为二十面体立体二十面体立体对称,无包膜称,无包膜,属,属肠道病毒。脊髓灰道病毒。脊髓灰质炎是一种急性炎是一种急性传染病。染病后染病。染病后常常发热和肢体疼痛,主要病和肢体疼痛,主要病变在神在神经系系统,尤以脊髓灰,尤以脊髓灰质损害害显著,部分病人可著,部分病人可发生麻痹,生麻痹,严重者可留有重者可留有瘫痪后后遗症。此病多症。此病多见于小儿,故又名小儿麻痹症。于小儿,故又名小儿麻痹症。感染者的鼻咽分泌物及感染者的鼻咽分泌物及粪便内均可排出此病毒。食便内均可排出此病毒。食物和水有可能被物和水有可能被粪便便污染,所以染,所以经口口摄入是主要的入是主要的传播播途径。如水源被途径。如水源被污染了,可促成染了,可促成较大的流行。大的流行。此病毒在人体外生活力很此病毒在人体外生活力很强,可在水中及,可在水中及粪便中存便中存活数月,低温下可活数月,低温下可长朗保存,但朗保存,但对高温及干燥高温及干燥较敏感。敏感。加加热至至60及紫外及紫外线照射均可在照射均可在0.5一一1h内内灭活。各种活。各种氧化氧化剂、2碘酒、甲碘酒、甲醛、升汞等都能有一定的消毒作、升汞等都能有一定的消毒作用。用用。用0.3一一0.5mgL的余的余氯进行消毒,接触行消毒,接触1h,可,可灭活此病毒。活此病毒。28-脊脊髓髓灰灰质炎炎病病毒毒颗粒粒负染染电镜照照片片29-(二)肝炎病毒病毒性肝炎一般可分为甲型肝炎(传染性肝炎或短潜伏期肝炎)和乙型肝炎(血清性肝炎或长潜伏期肝炎),两者病理变化和临床表现基本相同。主要临床症状有食欲减退、恶心、上腹部不适(或肝区痛)、乏力等,部分病人有黄疽和发热多数肝脏种大,伴有肝功能损害。甲型肝炎病毒主要从粪便中排出体外,经口传染。水源或食物被污染后,可能引起爆发性流行。肝炎病毒对一般化学消毒剂的抵抗力强,在干燥或冰冻环境下能生存数月至数年。以紫外线照射1h或煮沸30min以上可灭活。加氯消毒有一定的灭活作用。30-甲甲型型肝肝炎炎病病毒毒形形态电镜图31-乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒电镜照片照片32-附表附表 乙型肝炎病毒抗原抗体乙型肝炎病毒抗原抗体检测结果的果的临床分析床分析HBsAgHBsAgHBeAgHBeAg抗抗-HBcIgM-HBcIgM抗抗-HBcIgG-HBcIgG抗抗-HBe-HBe抗抗-HBs-HBs结果分析果分析+-急性乙型急性乙型肝炎肝炎 +-+-慢性乙型慢性乙型肝炎(肝炎(传染性染性强)-+乙型肝炎乙型肝炎恢复期恢复期(传染性染性弱)弱)-+曾感染曾感染过HBVHBV或接种或接种过乙肝疫乙肝疫苗苗乙肝病毒具有外衣壳和内衣壳抗原。前者包括乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、前S1抗原和前S2抗原,后者包括乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)。33-(三)其它肠道病毒除脊髓灰质炎病毒和肝炎病毒外,肠道病毒还有柯萨奇病毒和埃可病毒。后两种病毒在世界上传布也极广,主要侵犯小儿。一股夏秋季易流行。它们都具有暂时寄居人类肠道的特点。病毒都较小,一般直径小于30nm,抵抗力较强,能抗乙醚、70乙醇和5煤酚皂液,但对氧化剂很敏感。这两种病毒引起的临床表现复杂多变,同型病毒可引起不同的症候,而不同型的病毒又可引起相似的临床表现。一般症候有以下几种:无菌性脑膜炎、脑炎;急性心肌炎和心包炎;流行性胸痛,疤疹性咽峡炎,出疹性疾病;呼吸道感染,小儿痘泻等。34-三、寄生虫(了解)三、寄生虫(了解)寄寄生生虫虫引引起起疾疾病病的的原原生生动物物(原原虫虫)和和后后生生动物物(蠕蠕虫)虫)寄生虫寄生虫种种类繁多繁多传播方式:播方式:虫卵通虫卵通虫卵通虫卵通过过病人病人病人病人粪粪便便便便污污染水体染水体染水体染水体35-(一)原虫(一)原虫引引起起人人体体疾疾病病的的原原生生动物物又又叫叫原原虫虫,通通过饮水水引引起起疾疾病的原虫病的原虫见下表。下表。36-(二)蠕虫(二)蠕虫引起人体疾病的后生引起人体疾病的后生动物又叫物又叫蠕虫蠕虫,通,通过饮水引起疾水引起疾病的蠕虫病的蠕虫见下表下表37-38-39-防治防治饮用水用水传染病的关染病的关键是是严防水源被防水源被粪便便污染染。如何知道如何知道饮用水是否受到用水是否受到粪便便污染呢染呢?检测肠道病原菌数量道病原菌数量40-第三节 水质生物学指标一、水质生物学指标概述选作水作水质指示生物需要符合的要求指示生物需要符合的要求(P268)(1)这类微生物微生物仅存在于存在于粪便等便等污染源中,且数量染源中,且数量较多;多;(2)于病原微生物的生理特性相似;在外界存活)于病原微生物的生理特性相似;在外界存活时间基基本一致。本一致。(3)在)在洁净水体中不存在,于水体中不存在,于病原微生物在外界的存活能力病原微生物在外界的存活能力相似;相似;(4)在宿主外不繁殖;在宿主外不繁殖;(5)检验技技术较简单。41-1、进行行细菌菌卫生生细菌学菌学检验的目的的目的 保保证水中不存在水中不存在肠道道传染病的病原菌;天然水体中的病原菌很可染病的病原菌;天然水体中的病原菌很可能是受能是受粪便便污染染带入。入。只只检测水中是否有水中是否有肠道正常道正常细菌存在,而不直接菌存在,而不直接检测水中的病原水中的病原菌。菌。2、肠道正常道正常细菌菌 三三类:大大肠菌群菌群 肠球菌球菌 产气气荚膜杆菌膜杆菌是否三是否三类都都检测?如何?如何检测?(一)大肠菌群作为卫生指标的意义二、大肠菌群(P270)42-(1 1)大)大肠菌群的生理菌群的生理习性与病原菌相似,并性与病原菌相似,并且外界存活且外界存活时间基本一致;基本一致;肠球菌在外界存球菌在外界存活活时间比病原菌短;比病原菌短;产气气肠杆菌存活杆菌存活时间时间长。(2 2)大)大肠菌群在人菌群在人粪便中数量很大。便中数量很大。健康人健康人50005000万个万个/克克粪便便 生活生活污水水3 3万个万个/毫升毫升 (3 3)检验技技术不复不复杂。3 3、大、大肠菌群作菌群作为检验水的水的卫生指生指标(P270P270)43-肠球菌的抵抗力弱,生存时间比病原菌短,水中若未检出肠球菌,也不能说明未受粪使污染。产气荚膜杆菌因为有芽孢,能在自然环境中长期生存,它的存在不足以说明水是最近被粪便污染的。44-(二)大肠菌群的形态和生理特性 大肠杆菌大肠杆菌产气杆菌枸椽酸盐杆菌副大肠杆菌大肠菌群1、种种类45-2、各菌的分布、各菌的分布(1)大)大肠埃希氏杆菌(普通大埃希氏杆菌(普通大肠杆菌或大杆菌或大肠杆杆菌)菌)人、温血人、温血动物物肠道。正常的寄生道。正常的寄生细菌。菌。(2)产气杆菌、枸气杆菌、枸橼酸酸盐杆菌杆菌温血温血动物。土壤、冷血物。土壤、冷血动物物肠道。道。(3)副大)副大肠杆菌杆菌痢疾、痢疾、伤寒病人寒病人肠道。冷血道。冷血动物物肠道。道。46-3、形、形态特性特性 革革兰氏阴性菌,无芽氏阴性菌,无芽孢,无无荚膜。有鞭毛。短杆菌,膜。有鞭毛。短杆菌,端部端部钝圆。4、生理特性、生理特性 v 兼性好氧。兼性好氧。v 适宜适宜PH 中性(中性(4.59.0)。)。v 分解葡萄糖、甘露醇、乳糖,分解葡萄糖、甘露醇、乳糖,产酸酸产气。气。v 远腾氏培养基或伊氏培养基或伊红美美兰培养基上形成特征菌落。培养基上形成特征菌落。47-5、用于、用于检测的有机物(人的有机物(人粪便中存在大量的便中存在大量的E.coli.coli)(1)葡萄糖、甘露醇)葡萄糖、甘露醇 温度:温度:43 45 检出:大出:大肠杆菌、副大杆菌、副大肠杆菌杆菌 产气杆菌、气杆菌、枸枸橼酸酸盐杆菌不能杆菌不能检出。出。(2 2)乳糖()乳糖(检验的水的水质安全可靠)安全可靠)温度:温度:37 37 检出:大出:大肠杆菌、杆菌、产气杆菌气杆菌 副大副大肠杆菌不能杆菌不能检出出48-我国各地水厂检验大肠菌群的方法也还没有统一。有的采用含有葡萄糖的培养基,培养温度4345;有的采用含乳糖的培养基,培养温度37。最近中国预防医学中心卫生研究所负责制订了生活饮用水标准检验法GB57502006,该书是与生活饮用水卫生标准GB57492006相配套的。书中采用含乳糖的培养基,也就是在大肠菌群中不包括副大肠杆菌。49-1、水源水水质卫生部生活饮用水集中式供水单位卫生规范中关于生活饮用水水源水质总大肠菌群标准的限值具体规定:地表水经简易净化处理(如过滤)、消毒后即可供生活饮用的水源水,大肠菌群数平均每升不得超过1000个;经常规净化处理(如絮凝、沉淀、过滤、消毒等),其水质即可达到生活饮用水卫生标准GB5749-2006规定,可供生活饮用的水源水,大肠菌群数平均每升不得超过10000个。(三)生活饮用水细菌卫生标准 50-我国地表水环境质量标准(GB3838-2002)中对集中式生活饮用水地表水源地的地表水环境质量标准基本项目标准限值规定如下:类水体(适用于源头水)粪大肠菌群200个/L;类水体(适用于集中式生活饮用水地表水源地一级保护区)粪大肠菌群2000个/L;类水体(适用于集中式生活饮用水地表水源地二级保护区)粪大肠菌群10000个/L。51-我国城市供水水质标准(CJ/T206-2005)中对水源水质要求:选用地表水作为供水水源时,应符合GB3838的要求。52-2、生活饮用水水质生活饮用水卫生标准GB5749-2006规定:表1水质常规指标及限值指标限值1、微生物指标总大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出耐热大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出大肠埃希氏菌(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出菌落总数(CFU/mL)100表2饮用水中消毒剂常规指标及要求消毒剂名称与水接触时间出厂水中限值出厂水中余量管网末梢水中余量氯气及游离氯制剂(游离氯,mg/L)至少30min40.30.0553-三、病毒指示微生物(P272)噬菌体作为细菌病毒,在污水中普遍存在,其数量高于肠道病毒;对自然条件及水处理过程的抗性高于细菌,接近或超过动物病毒;噬菌体对人没有致病性,可以进行高浓度接种和现场试验;检测噬菌体的操作具有简便快速、安全、设备简单等优点。故美国环保局提出用大肠杆菌噬菌体作为病毒指示生物。54-噬菌体可以作为水中病毒的指示生物反映水中细菌和病毒的污染状况。不同的指示噬菌体各有优缺点,不能作为普遍意义上的理想指示物。F-RNA噬菌体在性质上最接近肠道病毒,适宜作为肠道病毒的指示物;SC噬菌体可以反映水的病原微生物污染程度和作为水中肠道病毒存在的指示物;Bfragilis噬菌体能够专门用来反映来自人类粪便的污染程度。噬菌体指示物不能代替传统的细菌指标。55-病毒学标准:关于水的病毒学标准,多针对饮用水。国外有较多研究,我国、中没有规定。但目前认为,如水的浑浊度等于或小于1度,pH值小于8,接触时间为3060分钟,游离余氯在05mgL以上时,则可防止肠道病毒的介水传播。因此,在怀疑水源受肠道病毒污染时,应加强水质处理和消毒,以保证饮水安全。56-四、病原性原生动物指标(P274)我国中规定:蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫被列为非常规检验项目,限值 均为1个10 L,且在检测频率上也有要求。57-第四第四节水的水的卫生学生学检验方法方法一、细菌总数的测定将定量水样接种于营养琼脂培养基中,在37温度下培养24h后,数出生长的细菌菌落数,然后根据接种的水样数量即可算出每毫升水中所含的菌数。58-制作培养基平板定量接种水样37下培养1824h计数菌落倾倒法59-细菌总数测定意义在37营养琼脂培养基中能生长的细菌代表在人体温度下能繁殖的腐生细菌,细菌总数愈大,说明水被污染得也愈严重。因此这项测定有一定的卫生意义,但其重要性不如大肠菌群的测定大。对于检查水厂中各个处理设备的处理效率,细菌总数的测定则有的实用意义,因为如果设备的运转稍有失误,立刻就会影响到水中细菌的数量。60-二、大肠菌群的测定 两种方法:两种方法:发酵法酵法 滤膜法膜法发酵法酵法测定水中的大定水中的大肠菌群数(菌群数(以乳糖作有机物分解以乳糖作有机物分解)三个步三个步骤:初步初步发酵酵试验 平板分离平板分离 复复发酵酵试验61-1 初步初步发酵酵试验 方法:方法:将水将水样置于乳糖液体培养基中,置于乳糖液体培养基中,37培养培养24h,观察察产酸和酸和产气情况气情况 产酸酸产气初步确定有大气初步确定有大肠菌群。菌群。产酸:酸:溴甲酚紫作指示溴甲酚紫作指示剂,培养基,培养基由紫色由紫色变为黄色。黄色。溴甲酚紫溴甲酚紫变色色pH范范围:5.26.8;溴溴甲酚紫甲酚紫颜色色变化化:黄紫:黄紫红 产气:气:杜氏小管杜氏小管顶端有气泡。端有气泡。杜杜氏氏小小管管发发酵法酵法酵法酵法测测定水中的大定水中的大定水中的大定水中的大肠肠菌群数(菌群数(菌群数(菌群数(以乳糖作有机物分解以乳糖作有机物分解以乳糖作有机物分解以乳糖作有机物分解)62-产酸酸产气的菌有:大气的菌有:大肠菌群菌群 厌氧芽氧芽孢杆菌杆菌 好氧芽好氧芽孢杆菌杆菌63-在被粪便严重污染的水中,厌氧芽孢杆菌、好氧芽孢杆菌的数量比大肠菌群的数量要少得多。在此情形下,初步发酵试验一般即可被认为确有大肠菌群存在。在比较清洁的或加氯的水中,由于芽孢的抵抗力较大,其数量可能相对地比较多,所以初步发酵试验即使产酸产气,还不能肯定是由于大肠菌群引起的,必须继续进行试验。64-2 平板分离平板分离(1)将第一步将第一步产酸酸产气的菌落划气的菌落划线接种在伊接种在伊红美美兰固体培养基表面,固体培养基表面,37培养培养24hr,目的阻,目的阻止止厌氧芽氧芽孢杆菌生杆菌生长。(2)革)革兰氏染色氏染色 取有典型菌落特征的取有典型菌落特征的单个菌落个菌落进行革行革兰氏染色。氏染色。大大肠菌群和好氧芽菌群和好氧芽孢杆菌生杆菌生长。同。同时大大肠菌群有特征性菌落出菌群有特征性菌落出现。大大肠菌群:革菌群:革兰氏阴性菌、不生芽氏阴性菌、不生芽孢、好氧。、好氧。好氧芽好氧芽孢杆菌:革杆菌:革兰氏阳性菌、生芽氏阳性菌、生芽孢、好氧、好氧。65-3 复复发酵酵试验将可疑菌落(革将可疑菌落(革兰氏阴性、伊氏阴性、伊红美美兰特征菌落)特征菌落)移接于乳糖液体培养基中,移接于乳糖液体培养基中,37培养培养24h。产酸酸产气者确定气者确定为有大有大肠菌群存在。菌群存在。4 根据有大根据有大肠菌群的阳性管数菌群的阳性管数查表表计算算66-水水样接种接种初步初步发酵酵产酸酸产气气大大肠菌群菌群 厌氧芽氧芽孢杆菌杆菌 好氧芽好氧芽孢杆菌杆菌大大肠菌群菌群 好氧芽好氧芽孢杆菌杆菌阳性管阳性管大大肠菌群菌群 革革兰氏阴性无芽氏阴性无芽孢革革兰氏氏染色染色产生生 典型菌落典型菌落鉴别培培养养基基 平平板板分分离离产酸酸产气气复复发酵酵67-滤滤膜法膜法膜法膜法测测定水中的大定水中的大定水中的大定水中的大肠肠菌群数菌群数菌群数菌群数用发酵法完成全部检验需72h。为了缩短检验时间,可以采用滤膜法。用这种方法检验大肠菌群,有可能在30h左右完成。68-以大肠菌群作为检验指标缺点:目前以大肠菌群作为检验指标,只间接反映出生活饮用水被肠道病原菌污染的情况,而不能反映出水中是否有传染性病毒以及除肠道病原菌外的其它病原菌(如炭疽杆菌)。因此为了保证人民的健康,必须加强检验水中病原微生物的研究工作。69-三、病毒的检测方法 使人致病的病毒都是动物性病毒。动物性病毒的专性寄生性很强。检验这类病毒可采用组织培养法。所选择的组织细胞必须适宜于这类病毒的分离、生长和检验。目前在水质检验中使用的方法是“蚀斑检验法”。70-蚀斑法大致的步骤如下:将猴子肾脏用pH7.48.0的胰蛋白酶溶液处理。胰蛋白酶的作用是能使肾脏组织的胞间质发生解聚作用,因而使细胞彼此分离,用营养培养基洗这些分散悬浮的细胞。将细胞沉积在40mm110mm的细胞瓶(鲁氏瓶)的平面上,并形成一层连续的膜。将水样接种到这层膜上,再用营养琼脂覆盖。水样中若有肠道病毒,病毒就会破坏组织细胞,增殖的病毒紧接着破坏邻接的细胞。在2448h内,这种效果就可以用肉眼看清。病毒群体形成的斑点称为蚀斑。实验表明,蚀斑数和水样中病毒浓度间具有线性关系。根据接种的水样数,可求出病毒的浓度。每升水中无1个病毒蚀班(PFU),饮用才安全。71-第五第五节 水中有害生物的控制(水中有害生物的控制(P282P282)净化化污水水 影响水的物理、化学、生物学性影响水的物理、化学、生物学性质 影响人体健康影响人体健康加以控制加以控制一一、病原微生物的去除、病原微生物的去除 二二、藻、藻类的去除的去除水中微生物的作用:水中微生物的作用:72-一、水中病原微生物的去除(P283)水的消毒水的消毒家庭:水煮沸家庭:水煮沸自来水厂自来水厂加加氯消毒消毒 臭氧消毒臭氧消毒 二氧化二氧化氯消毒消毒 紫外紫外线消毒消毒液液氯 漂白粉(漂白粉(2530%有效有效氯)有效有效氯:凡是化合价高于:凡是化合价高于-1的的氯化物都有氧化能力。化物都有氧化能力。有效有效氯表示表示氯化物的氧化能力。化物的氧化能力。1 加加氯消毒(常用)消毒(常用)73-(1)氯的氧化能力的氧化能力加加氯气后气后Cl2+H2O HOCl+H+Cl-HOClOCl-+H+起氧化作用的是:起氧化作用的是:HOCl 中性,中性,扩散渗透散渗透进入入细胞,胞,氯原子原子杀死死细菌。菌。OCl-负电,细菌菌细胞胞带负电,相斥,相斥,难起消毒作用。起消毒作用。HOCl与与 OCl-量的多少主要取决于水的量的多少主要取决于水的pH值,水温也有一点关系水温也有一点关系。74-pH 越低,所含的越低,所含的HOCl越多,因而消毒效果越多,因而消毒效果较好。好。pH 5,几乎全是,几乎全是HOCl pH 10,几乎全是,几乎全是OCl-水温降低,水温降低,HOCl所占比例增大(所占比例增大(pH不不变时)75-(2)加加氯量量水消毒水消毒时加加氯量分两部分量分两部分:需需氯量:用于量:用于杀死死细菌和氧化有机物等所消耗的菌和氧化有机物等所消耗的氯量。量。余余氯量:加入水中的量:加入水中的氯用于用于杀死死细菌和氧化有机物等消菌和氧化有机物等消 耗后的剩余部分。耗后的剩余部分。保保证一定量的余一定量的余氯的重要性:保的重要性:保证有持有持续的的杀菌能力。菌能力。我国生活我国生活饮用水用水卫生生标准准规定:加定:加氯接触接触30min 后,后,游离性余游离性余氯不不应低于低于0.3mg/L,集中式,集中式给水,除水厂水,除水厂的出水的出水应符合上述要求外,管网末梢水的游离性余符合上述要求外,管网末梢水的游离性余氯不不应低于低于0.05mg/L。该规定适用范定适用范围:只能保:只能保证杀死死肠道道传染病菌染病菌。76-一般,一般,pH=7时,杀死病毒所需余死病毒所需余氯量是量是杀死一般死一般细菌的菌的220倍,并与水温成反比。倍,并与水温成反比。杀死赤痢阿米巴需余死赤痢阿米巴需余氯310mg/L,时间30min。杀死炭疽杆菌需余死炭疽杆菌需余氯量更大。量更大。77-(3)加加氯消毒消毒优缺点缺点优点点:1、经济、有效;、有效;2、有持、有持续杀菌能力菌能力。缺点缺点:1、有异味;、有异味;2、近年来,近年来,发现氯与某些有机物与某些有机物质化合化合可能形成致癌性的有机可能形成致癌性的有机氯化合物化合物。78-2 2 臭氧消毒臭氧消毒臭氧有臭氧有强的的杀菌力。菌力。(1)优点:不需点:不需长时间接触,可接触,可杀死死细菌;菌;对病毒、芽病毒、芽孢有很大的有很大的杀伤效果。效果。不受水中不受水中pH等的影响。等的影响。除除铁、锰,去臭、去味、去色度。,去臭、去味、去色度。目前,法国、瑞士、德国等欧洲国家有的采用目前,法国、瑞士、德国等欧洲国家有的采用臭氧消毒臭氧消毒饮用水。我国上海、北京也在使用。用水。我国上海、北京也在使用。(2)缺点:)缺点:发生装置复生装置复杂,投,投资大,大,费用高。用高。1Kg臭氧耗臭氧耗电1520度。度。在水中不在水中不稳定,易散失。定,易散失。不能不能储藏,藏,边生生产边使用。使用。79-(3)用法:)用法:用于消毒用于消毒过滤水,加量水,加量 1mg/L;去色、除臭味,加量去色、除臭味,加量45mg/L;维持剩余臭氧量持剩余臭氧量0.4mg/L,接触,接触时间15min。80-3 3 二氧化二氧化氯消毒消毒一种一种氯消毒法,效果消毒法,效果优于于氯,次于臭氧。,次于臭氧。(1)优点:不形成致癌物点:不形成致癌物三三氯甲甲烷 pH610范范围内,内,杀菌效果几乎不受菌效果几乎不受PH影响。影响。二氧化二氧化氯有很有很强的除酚能力。的除酚能力。NaClO2较贵,而且,而且ClO2不能不能储存,生存,生产出来立即使用。出来立即使用。只有水源只有水源严重重污染一般染一般氯消毒有困消毒有困难时才采用才采用该法消毒法消毒。(2)缺点:)缺点:2NaClO2+Cl2 2ClO2+2NaCl(3)反)反应:81-4 4 紫外紫外线消毒消毒色度低,色度低,悬浮浮杂质和胶体物和胶体物质少,水深不超少,水深不超出出12 cm,一般,一般仅在特殊情况下小在特殊情况下小规模使用。模使用。能能处理的水:理的水:82-二、藻类的去除 除病原微生物之外,其它微生物对于水质的影响主要表现在物理性质方面。当它们大量繁殖时会使水发生浑浊、呈现颜色或发出不良气味,因而影响工业和生活上的应用。这类微生物包括藻类、原生动物等,其中以藻类更为重要,这是因为一般天然水所含有机物较少,往往不适于异养微生物的繁殖,但却含有足量的无机养料,可供自养型的藻类很好地利用。一般说,当藻类或较高等的植物生长较好,能提供足够的有机养料时,异养型的生物才能比较旺盛地繁殖起来。因此,对于天然水来说,病原微生物以外的各种微生物的控制主要是消除藻类。藻类问题主要发生于水库、湖泊中,因为在这些水体中的水速小,有利于藻类的繁殖。83-1 CuSO4去除藻去除藻类 投加量:投加量:(1)天然水)天然水 0.3 0.5 mg/L(0.30.5ppm),药效效长、效果好,几天、效果好,几天杀死大量藻死大量藻类。但不能去臭。但不能去臭。(2)几个)几个mg/L去除水管、构筑物内去除水管、构筑物内软体体动物。物。2 漂白粉去除藻漂白粉去除藻类 投加量:投加量:0.51 mg/L(0.51ppm),杀藻、去臭。藻、去臭。杀藻常用的药剂有硫酸铜和漂白粉(氯)84-硫酸铜对于鱼类也有毒性,其致命剂量随鱼的种类而异,约自0.152.0mgL。这个数字在灭藻所需剂量范围的附近,但由于计算加药量时一般是根据水库、湖泊上层水(距水面1.53m的深度范围)容积计算的,而非总容积,因此,鱼类可以在施加药剂时躲藏到药量不太多的水体部分。有时在灭藻以后,也会发现水中鱼类大量死亡。这往往是由于死藻的分解,耗尽了水中的溶解氧所致。对于用水者来说,水中硫酸铜量高达12mgL,时,尚不致发生铜中毒。85-复习思考题1大肠菌群包括哪些种类的细菌?它们的习性如何?2为什么大肠菌群可作为水受粪便污染的指标?用大肠菌群作为肠道病菌的指示微生物,有什么缺点?3大肠菌群包括哪些种类的细菌?它们的习性如何?4大肠菌群的发
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