实验五 高锰酸钾吸收光谱曲线的绘制及含量测定.doc

实践五 高锰酸钾吸收光谱曲线的绘制及含量测定

一、实践目的
1、掌握紫外-可见分光光度计的操作方法。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的基本构造及作用。
3、会依据吸收光谱曲线确定最大吸收波长。
4、会用标准曲线法测定高锰酸钾样品溶液的含量。
二、实践原理
高锰酸钾溶液呈紫红色，在可见光区有吸收，利用此可绘制吸收光谱曲线。通过吸收光谱曲线确定最大吸收波长，在最大吸收波长处进行含量测定。因此可以用紫外-可见分光光度法对高锰酸钾溶液进行定性和定量分析。
三、实践仪器、药品和试剂
1、仪器
紫外-可见分光光度计；分析天平；5mL移液管2支；1000mL容量瓶；25mL容量瓶6个；100mL烧杯。
2、药品和试剂
高锰酸钾对照品(固体)；高锰酸钾样品溶液。
四、实践内容
(一) 配制溶液
1、配制标准溶液(125mg/L)
精密称取高锰酸钾对照品0.1250g置100mL烧杯中，溶解后，定量转移1000mL容量瓶中，用纯化水稀释至标线，摇匀，即为高锰酸钾标准溶液(125mg/L)。
2、配制标准系列
分别精密量取1.00、2.00、3.00、4.00和5.00(mL)高锰酸钾标准溶液 (125mg/L)，置于25mL容量瓶中，纯化水稀释至标线，摇匀。标准系列中各标准溶液的浓度依次为5.0、10.0、15.0、20.0和25.0(mg/L)。
3、配制样品溶液
精密量取高锰酸钾样品溶液5.00ml，置25mL容量瓶中，纯化水稀释至标线，摇匀。即为高锰酸钾供试品溶液。

(二) 绘制吸收光谱曲线
以纯化水为空白溶液调节仪器基线后，测定标准系列中溶液浓度为15.0mg/L和高锰酸钾供试品溶液的吸收光谱曲线，并从吸收光谱曲线中确定最大吸收波长，比较二者的吸收光谱曲线和最大吸收波长。
(三) 测定溶液吸光度
1、标准曲线的绘制
在λmax处，以纯化水为空白溶液调节基线后，依次将标准系列各标准溶液放入光路中，测其吸光度A值。以浓度（c）为横坐标，吸光度值（A）为纵坐标，绘制标准曲线。
2.高锰酸钾供试品溶液的测定
在与绘制标准曲线相同的测定条件下，测定高锰酸钾供试品溶液吸光度值(A)。从标准曲线中查A值所对应的高锰酸钾供试品溶液的溶度c样。
(四) 岛津UV2450紫外-可见分光光度计的操作规程
（1） 开机前检查仪器是否正常，如检查样品室内有无挡光物。
（2） 分别开启紫外-可见分光光度计主机和计算机电源，从计算机桌面“UVProbe"进人操作程序。
（3） 点击“连接”进人紫外-可见分光光度计自检系统，自检过程中，切勿开启样品室门，自检无误后进入主工作程序。
（4） 编辑测定方法，输人所需数据。
（5） 用纯化水分别清洗2个石英比色杯(手拿磨砂面)3次，再用空白溶液各洗3次，分别装入2/3的空白溶液，用镜头纸将比色杯外壁溶液吸干。
（6） 打开样品室门，分别将比色杯放入样品池及参比池中，即置各自光路中。关好样品室门。进行零点校正。
（7） 将样品池中空白溶液更换为供试品溶液，置光路中，关好样品室门、测量吸光度值或吸收光谱曲线。
（8） 关闭操作程序、紫外-可见分光光度计和计算机电源。清洗比色杯。
紫外可见分光光度计使用注意事项如下：
（1） 检测器预热时必须等待所有指示灯变为绿色，才可进行下一步操作。
（2） 放人比色杯时务必小心轻放，确保比色杯已完全进人光路中。
（3） 必须扫描基线，空白溶液即未加样品的溶液，必须与样品溶液一致。
（4） 扫描过程中切忌打开或试图打开样品室门。
五、计算公式
c原样=c稀释 ×稀释倍数
六、实践结果
(一) 定性分析
1、高锰酸钾溶液的吸收光谱曲线
（1）标准系列中溶液浓度为15.0mg/L的吸收光谱曲线。
（2）高锰酸钾供试品溶液的吸收光谱曲线。
2、高锰酸钾溶液的最大吸收波长
（1）标准系列中溶液浓度为15.0mg/L的最大吸收波长 。
（2）高锰酸钾供试品溶液的最大吸收波长 。
3、定性分析结论

(二) 定量分析
1、数据记录
项目
1
2
3
4
5
供试品溶液
c/(mg/L)

A
1

2

3

平均值

2、绘制标准曲线（附坐标图）

3、高锰酸钾溶液浓度
（1）高锰酸钾供试品溶液的浓度 。
（2）高锰酸钾样品溶液的浓度 。
七、思考与讨论
1、高锰酸钾溶液在哪个光区范围有吸收？测定时应采用何种光源和比色杯？

2、如何确定最大吸收波长？

3、如何绘制标准曲线？怎样计算样品溶液的浓度？