2型糖尿病患者血清钙卫蛋白水平变化与心血管并发症有关.pdf

内科急危重症杂志2 0 2 3年第2 9卷第5期2 型糖尿病患者血清钙卫蛋白水平变化与心血管并发症有关397李军陈弘东谭方潘慧钗徐筱青朱庆文*北京市和平里医院内分泌科,北京10 0 0 13摘要目的：探究2 型糖尿病(T2DM)患者血清钙卫蛋白水平变化及其与心血管疾病发生风险的相关性。方法：选取2 8 3例T2DM患者，根据患者是否发生心血管并发症，将其分为合并心血管并发症组（10 8 例）和未合并心血管并发症组(17 5例）。另纳入30 0 例健康人群作为对照组,比较T2DM组和对照组血清钙卫蛋白水平,并分析影响T2DM患者血清钙卫蛋白水平变化的因素。采用受试者工作特性(（ROC)曲线分析血清钙卫蛋白水平对T2DM患者发生心血管疾病的预测价值。结果:T2DM组患者血清钙卫蛋白水平高于对照组(P0.05）,且性别、吸烟状态、蛋白尿以及每日碳水摄入量被证实是影响血清钙卫蛋白水平升高的独立因素（P均 0.0 5）。Spearman相关分析显示,白细胞计数、中性粒细胞计数、血小板计数、C反应蛋白（CRP）水平与血清钙卫蛋白水平呈正相关（r=0.613,0.632,0.521,0.515;P均 0.0 0 1)。合并心血管疾病T2DM患者血清钙卫蛋白水平高于未合并心血管疾病患者(P0.05）。多因素Logistic回归分析显示，血清钙卫蛋白水平升高是心血管疾病发生几率增加的独立危险因素(0R1.356,95%CI:1.0371.772,P0.001)。血清钙卫蛋白水平用于预测T2DM 患者心血管疾病发生风险的R0C曲线下面积为0.9 7 3（9 5%CI:0.9570.989），截断值为1.7 0 5，敏感度和特异性分别为8 7.0%、9 6.0%。结论：T2DM患者较高的血清钙卫蛋白水平与吸烟状况、碳水摄入量、蛋白尿有关。检测血清钙卫蛋白水平对预测心血管疾病的发生风险可提供临床参考价值。关键词2 型糖尿病；心血管疾病；血清钙卫蛋白；炎症标志物中图分类号R541Serum level of calprotectin in type 2 diabetes patients is associated with cardiovascular complications LI Jun,CHENHong-dong,TAN Fang,PAN Hui-chai,XU Xiao-qing,ZHU Qing-wen.Department of Endocrinology,Bejing HepingliHospital,Bejing 100013,ChinaCorresponding author:ZHU Qing-wen,E-mail:bucm Abstract Objective:To investigate the correlation between serum calprotectin levels and cardiovascular disease risk intype 2 diabetes(T2DM)patients.Methods:A total of 283 T2DM patients were selected and divided into concomitant cardio-vascular disease group(n=108)and non-concomitant cardiovascular disease group(n=175).A total of 300 healthy per-sons served as the control group.The serum calprotectin levels between T2DM group and control group were compared.Thedeterminants of serum calprotectin levels in patients with T2DM were also analyzed.Receiver operating characteristic(ROC)curve was used to analyze the predictive value of serum calprotectin level on cardiovascular disease in T2DM patients.Re-sults:The serum calprotectin level in the T2DM group was higher than that in the control group(P0.05).Sex,smokingstatus,proteinuria,and daily carbohydrate intake were independent factors in the elevation of serum calprotectin levels(P0.05).The analysis of spearman correlation coefficient revealed that white blood cell count(r=0.613,P0.001),neu-trophil count(r=0.632,P0.001),platelet count(r=0.521,P0.001),and C reactive protein(CRP)levels(r=0.515,P0.001)were positively correlated with serum calprotectin levels:The level of serum calprotectin in T2DM pa-tients with cardiovascular complications was significantly higher than that in T2DM patients without cardiovascular complica-tions(P0.05).The multivariate logistic regression analysis showed that the increase of serum calprotectin level was anindependent risk factor for the increased incidence of cardiovascular disease(0R 1.356;95%CI 1.037-1.772,P 0.001).The area under the ROC curve of serum calprotectin level for predicting the risk of cardiovascular disease in T2DMpatients was 0.973(95%Cl:0.957-0.989).The cut-off value was 1.705,and the sensitivity and specificity were 87.0%and 96.0%,respectively.Conclusion:Higher levels of serum calprotectin in T2DM patients were associated with smokingstatus,carbohydrate intake and proteinuria.Detection of serum calprotectin levels also provides practical information forpredicting the risk of cardiovascular disease.Key words Type 2 diabetes;Cardiovascular disease;Calprotectin;Inflammatory markers文献标识码AD0I10.11768/nkjwzzz20230509*基金项目：教育部长江学者和创新团队发展计划（No:IRT0810)*通信作者：朱庆文,E-mail:,北京市东城区和平里北街18 号398心血管疾病（cardiovascular disease,CVD）是2 型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者的主要死亡原因之一 1,早期识别T2DM患者心血管事件的风险因素对于疾病管理非常重要。钙卫蛋白（c a l p r o t e c t i n)是一种损伤相关模式分子 2 ,在胰岛素抵抗者中水平升高 3,并且是健康人群CVD 风险的早期敏感标志物 4。本研究探讨T2DM 患者血清钙卫蛋白水平与 CVD之间的相关性,以期为寻找潜在生物标志物提供证据。资料与方法一般资料2 0 18 年10 月至2 0 2 1年3月在北京市和平里医院内分泌科和心内科连续招募T2DM患者2 8 3例。人选标准：年龄18 岁,基于1999年世界卫生组织（World Health Organization，W H O）标准 5 诊断为 T2DM。排除严重肝、肾功能障碍、急性传染病、恶性肿瘤、精神障碍、自身免疫性疾病者。记录患者的重大急性CVD事件 6.7 ,包括：中风或短暂性脑缺血发作;冠状动脉疾病,包括经冠状动脉造影诊断的心绞痛、心肌梗死或既往冠状动脉血运重建术；外周动脉疾病,包括足部溃疡或坏疽、截肢和下肢血运重建术。对所有受试者进行心电图、颈动脉和下肢动脉超声多普勒扫描等检查。根据是否合并心血管并发症,将患者分为合并心血管并发症组和未合并心血管并发症组。另纳入30 0 例(健康组按1:1 比例纳人,受试者有17 例被排除)健康人群作为对照组,其各项血常规、血生化、尿生化指标检查正常；年龄、性别构成与T2DM 组患者相匹配。排除糖尿病、任何心脑血管疾病、代谢类疾病、自身免疫性疾病等。本研究符合赫尔辛基宣言的原则,且经医院伦理委员会批准，每位参与者签署书面知情同意书。方法饮食评估：采用半定量的17 7 项食物频率调查间卷（semi-quantitative food frequency questionnaire，SQFFQ)8评估患者近1个月内食物、饮料（包括酒精)的摄人量。对于每个项目,频率以每天、每周或每月的时间记录。食用份数以天然单位（例如面包片或苹果)或家庭使用单位(例如杯或匙)表示。饮食数据使用中国食物成分表转换为每日营养素摄入量。血清钙卫蛋白水平检测：在禁食至少10 h后采集外周静脉血样本。采用酶联免疫吸附试验（试剂盒购自美国HycultBiotech公司）检测患者血清钙卫蛋白水平。血清在室温下置于酶标板中孵育 1 h,然后加人示踪抗体和链霉亲和素-过氧化物酶结合的内科急危重症杂志2 0 2 3年第2 9 卷第5期二级抗体。加人3,3,5,5-四甲基联苯胺反应液和终止反应液,在BS-400型微生物分析仪（中国深圳迈瑞公司）上读取450 nm处的吸光度值。其他临床资料收集：由专业的医生使用标准化问卷收集基本信息，包括人口社会学资料，根据国际体力活动短问卷(international physical activity ques-tionnaire-short,IPAQ-S）9 评估体力活动，根据每天的活动时间（min）强度因子计算活动分数。要求患者收集2 4 h尿液,计算尿钠排泄量，作为钠摄人量的客观测量 10)。肾小球滤过率（estimated glomer-ularfiltration rate，e G FR）采用肾脏病饮食改良研究(modification of diet in renal disease,MDRD)公式计算 10 。微量白蛋白尿定义为2 4h尿液中白蛋白水平超过30 mgl。用全自动生化检测仪检测白细胞计数、中性粒细胞计数、血小板计数、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平。统计学分析采用SPSS23.0统计学软进进行分析,符合正态分布的计量资料以（xs)表示，偏正态分布变量表示为M（P2 5,P7 5），计数资料表示为例（%）。组间比较分别采用独立样本t检验、Mann-WhitneyU检验或者卡方检验。Spearman法分析各指标相关性。调整性别后的标准化线性回归系数被用以评估各种决定因素和钙卫蛋白水平间的关系。将单变量分析中P0.1的变量都纳人多元Logistic回归模型中。采用受试者工作特征（receiveroperating characteristic,ROC）曲线分析血清钙卫蛋白水平对T2DM 患者合并心血管疾病的判断效能。以P 0.0 5);T2DM组患者血清钙卫蛋白水平高于对照组（P0.05）,见表1。T2DM组血清钙卫蛋白水平与其临床特征的关系T2DM组患者血清钙卫蛋白水平为1.40(0.7 7,2.04)ng/mL,其中女性患者血清钙卫蛋白水平显著高于男性(P0.05）。吸烟者和伴有蛋白尿患者血清钙卫蛋白水平亦普遍升高（P均 0.0 5），见表2。调整性别因素后,经标准化线性回归系数分析,血清钙卫蛋白水平与既往吸烟史（r=0.165，P=0.022）、现在吸烟（r=0.266,P60岁性别男性女性体重指数正常(18.5 2 4.0 kg/m)超重(2 4.1 2 8.0 kg/m)肥胖(2 8.0 kg/m)吸烟状态非吸烟既往吸烟史现在吸烟饮酒状态不饮酒饮酒体力活动体力活动不足中等体力活动高度体力活动高血压无有胰岛素使用否是微量白蛋白尿否是病程14年14年eGFR120 mL/(min:1.73m)能量摄入量2198.00 kcal/d2198.00 kcal/d399表12 组临床资料比较年龄男性例(%)151(50.33)128(45.23)2.1560.14215612712815540811621351123614413911810857110173101182202811641199215833142141体重指数(kg/m,x s)24.89 3.3225.12 3.460.8230.411血清钙卫蛋白1.49(0.78,2.10)1.34(0.76,1.97)0.80(0.58,1.34)1.93(1.39,2.21)1.52(0.63,2.14)1.40(0.81,2.05)1.39(0.75,2.03)0.79(0.53,1.19)1.80(1.43,2.15)2.39(2.07,2.95)1.39(0.77,2.04)1.45(0.73,2.09)1.40(0.75,2.00)1.37(0.75,2.07)1.51(0.89,2.01)1.41(0.83,2.01)1.40(0.75,2.05)1.50(0.89,2.00)1.38(0.72,2.06)0.95(0.67,1.55)2.15(1.88,2.51)1.43(0.78,2.05)1.40(0.75,2.00)1.51(0.72,2.02)1.39(0.77,2.04)1.29(0.81,2.10)1.36(0.77,1.97)1.50(0.75,2.06)吸烟史例(%141(47.00)154(54.42)2.3270.127饮酒史例(%)ng/mL,M(P25,P75)121(40.33)0.72(0.41,1.02)139(49.12)1.40(0.77,2.04)3.598-10.4370.0580.001X/Z值P值-1.1560.248-9.7590.0010.2240.894157.7820.0011.0390.6010.5930.744-0.3150.753-1.1910.234.-10.451 70.15 g/d尿钠排泄量4199.00 mg/d 4199.00 mg/d多元Logistic回归分析影响T2DM患者血清钙卫蛋白水平的因素在T2DM组中,性别、吸烟状态、蛋白尿以及每日碳水摄人量被证实是影响血清钙卫蛋白水平升高的独立因素（P均 0.0 5）,见表3。T2DM组血清钙卫蛋白水平与炎症标志物的关系Spearman 相关分析显示,血清钙卫蛋白与白细胞计数、中性粒细胞计数、血小板计数、CRP水平呈正相关（r=0.613,0.632,0.521,0.515;P均0.001)。血清钙卫蛋白水平与T2DM患者心血管疾病发生风险的关系2 8 3例T2DM患者中，10 8 例(38.16%）合并心血管疾病。合并心血管疾病T2DM患者血清钙卫蛋白水平高于未合并心血管疾病患者 2.15(1.9 8,2.47)ng/mL us 0.86(0.60,1.34)ng/mL,Z=-13.358,P0.001。经多因素Logistic回归模型分析，在校正年龄、性别、吸烟状态、碳水化合物摄人量、蛋白尿等因素后，血清钙卫蛋白水平升高是发生CVD风险的独立危险因素(HR 1.356,95%CI:1.037 1.772,P 0.001),见表4。与其他炎症指标相比,仅血清钙卫蛋白水平与心血管疾病发生风险有显著相关性(P70.15 g/d=1)变量血清钙卫蛋白血清CRP白细胞计数中性粒细胞计数血小板计数0.60.8图1工血清钙卫蛋白和其他炎症指标预测T2DM患者心血管疾病发生风险的森林图1.070.80.6-0.40.20.0+0.0图2 血清钙卫蛋白水平预测T2DM患者心血管疾病发生风险的ROC曲线白缺乏的小鼠似乎对血管损伤有一定的保护作用，动脉粥样硬化病变较小,斑块炎症较少,再狭窄反应降低 15.2 1。本研究同样证实钙卫蛋白可作为T2DM患者心血管疾病的独立预测因子。在本研究中,在调整吸烟状况和碳水摄人量后，血清钙卫蛋白水平较高与T2DM患者心血管疾病的401表3多元线性回归分析影响T2DM患者血清钙卫蛋白水平的因素单因素分析HR 值(95%CI)10.064(5.789 17.496)30.500(15.886 58.558)32.775(12.648 84.934)2.932(1.585 6.485)表4多元线性回归分析影响T2DM患者发生心血管疾病的因素单因素分析HR 值(95%CI)1.875(1.308 3.708)1.218(1.136 1.306)1.627(1.410 1.876)2.436(1.925 3.082)1.010(1.007 1.013)+血清钙保护素CRP+白细胞计数+中性粒细胞计数血小板计数1.012Beta值(95%CI)0.20.41-特异性多因素分析P值HR 值(95%CI)0.0015.461(2.525 11.812)0.00120.827(9.410 46.094)0.00119.940(6.256 63.551)0.0011.279(1.015 4.325)多因素分析P值HR 值(95%CI)0.0011.356(1.037 1.772)0.0011.093(0.877 1.363)0.0011.248(0.972 1.604)0.0011.219(0.920 1.541)0.0011.026(0.811 1.299)发生风险呈独立正相关,说明钙卫蛋白可能是防治T2DM 患者微血管和大血管并发症的标志物。然而,还需要扩大样本进一步评估其预后和诊断潜力。参考文献1Clovaci D,Fan W,Wong ND.Epidemiology of diabetes mellitus andcardiovascular disease J.Curr Cardiol Rep,2019,21(4):21.1.41.60.6P值0.0010.0010.0010.028P值0.0260.4310.0810.1170.8341.82卫晓菲，沈敏宁.钙卫蛋白与炎症相关疾病 J.生命的化学，2021,41(5):1032-1037.3Calcaterra V,De Amici M,Leonard MM,et al.Serum calprotectinlevel in children:marker of obesity and its metabolic complicationsJ.Ann Nutr Metab,2018,73(3):177-183.4 Kunutsor SK,Flores-Guerrero JL,Kieneker LM,et al.Plasma calpro-tectin and risk of cardiovascular disease:Findings from the PRE-VEND prospective cohort study J.Atherosclerosis,2018,275:205-213.5Gabir MM,Hanson RL,Dabelea D,et al.The 1997 American DiabetesAssociation and 1999 World Health Organization criteria for hypergly-cemia in the diagnosis and prediction of diabetes J.Diabetes 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