凝血试剂应用手册(2010-4).doc

Dade® Behring 血栓/止血试剂使用说明

PT 凝血酶原时间

一、 名称：PT凝血酶原时间。

二、 原理：在受检血浆中加入过量的因子 III（人胎盘的浸出液）和 Ca2+，使凝血酶
原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，血浆凝固所需要的时间即为
PT。它是外源性凝血系统常用筛选试验之一。

三、 试剂：Thromborel S 试剂，为人胎盘浸出液和 Ca2+的混合试剂，试剂说明书中包
含本试剂用在不同型号、不同方法学的仪器上的国际敏感度指数（ISI）。试剂溶解 时分别按包装用 10ML 或 4.0ML 的蒸馏水复溶。

四、 仪器品牌：日本进口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤：SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是散射光比浊，百分比检测，监测
样品凝集开始到凝集完全的散射光强度的变化，50%凝集时所对应的时间即为凝血 酶原时间。
1、 将 PT 的试剂按照说明溶解好以后，放到确定的位置上。
2、 将样本离心准备好以后，放到样本架上，样本架放到自动进样器上。
3、 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单，设好 ID 号，及要检测的项目，一切准备好便可 按 START 开始。

六、 参考值： PT 9-13 秒

七、 临床意义：PT 延长：先天性见于因子 II、V、VII、X 缺乏和无（或）低纤维蛋白原血症；获 得性见于弥散性血管内凝血、原发性纤溶症、维生素 K 缺乏症、肝脏疾病；血循 环中有抗凝物质，如肝素、FDP、以及抗因子 II、V、VII、X 的抗体存在等情况。 PT 缩短：见于因子 V 增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。 口服抗凝剂的监测：凝血酶原时间是监测口服抗凝剂的常用指标，中国人 INR 在1.5~2.5 用药较为安全和有效。

八、 标本制备：9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝，立即混匀，3000r/min×15min，血浆可在 15-25℃保存 4 小时，在-20℃至少可以保存 24 小时。

九、 注意事项：试剂溶解后，可在 15℃放置 8 小时，2-8℃可保存 5 天。复溶要充分，
溶解后的试剂最好不要在低温冷冻保存。

十、 编写者：VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献：[1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳，翟笺才，临床检验仪器学，北京：人民卫生出版社，2001
[3] 姚泰，生理学（第六版），北京：人民卫生出版社，2003
[4] 赵桂芝，临床检验学，成都：四川科学技术出版社，1997
[5] 陆永绥，李清华，张伟明，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江：浙江大学出版社，2006

十二、 科室主任：

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APTT 部分凝血活酶时间

一、 名称：APTT部分凝血活酶时间。

二、 原理：在 37℃下，以鞣花酸为激活剂活化凝血因子 XII 和 XI，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面，在 Ca2+的参与下，观察贫血小板血浆凝固所需要的时间。APTT 测定是内源性凝血系统较为敏感、简便和常用的筛选试验。

三、 试剂：Actin 试剂（鞣花酸做为激活剂，磷脂为兔脑粉），及 CaCl2 试剂，试剂为 液体不需复溶。2-8℃可保存到效期。

四、 仪器品牌：日本进口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤：SYSMEX 的 CA血凝仪采用的是散射光比浊，百分比检测，监测 样品凝集开始到凝集完全的散射光强度的变化，50%凝集时所对应的时间即为凝血酶原时间。
a) 将 APTT 的试剂和 CaCl2 放到确定的位置上。
b) 将样本离心准备好以后，放到样本架上，样本架放到自动进样器上。
c) 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单，设好 ID 号，及要检测的项目，一切准备好便可 按 START 开始。

六、 参考值： APTT 20-40 秒

七、 临床意义： a)APTT 延长：
1、 因子 VIII、IX 和 XI 血浆中水平减低，如血友病 A、B 及凝血因子 XI 缺乏症；因
子 VIII 减少还见于部分血管性血友病患者；
2、 严重的凝血酶原、因子 V、因子 X 和纤维蛋白原缺乏，如肝脏疾病、阻塞性黄疸、 新生儿出血症、肠道灭菌综合症、吸收不良综合征、口服抗凝剂、应用肝素以及纤 维蛋白原缺乏血症等；
3、 纤溶活性增强，如继发性、原发性纤溶亢进及循环血液中有纤维蛋白（原）降解产 物（FDP）;
4、 血循环中有抗凝物质，如抗因子 VIII 或 IX 抗体，狼疮抗凝物质等。
b)APTT 缩短：
1、 高凝状态，如弥散性血管内凝血的高凝期、促凝物质进入血流以及凝血因子的活性
增高等；
2、 血栓性疾病，如心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑血管病变、糖尿病伴血管病变、肺 梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合征和肾病综合征以及严重的灼伤等。

八、 标本制备：9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝，立即混匀，3000r/min×15min，血浆可在 15-25℃保存 4 小时，在-20℃至少可以保存 24 小时。

九、 注意事项：APTT 试剂为液体试剂无需复溶，需要在 2-8℃下保存，切勿冻存。

十、 编写者：VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献：[1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳，翟笺才，临床检验仪器学，北京：人民卫生出版社，2001
[3] 姚泰，生理学（第六版），北京：人民卫生出版社，2003
[4] 陆永绥，李清华，张伟明，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江：浙江大学出版社，2006

十二、 科室主任：

FBG 纤维蛋白原测定

一、 名称：FBG纤维蛋白测定。

二、 原理：采用 Clauss 凝固法原理，根据纤维蛋白原与凝血酶作用最终形成纤维蛋白
的原理。以国际标准品为参比血浆制作标准曲线，用过量的凝血酶来测定血浆凝固 时间，所得凝固时间与血浆中纤维蛋白原浓度呈负相关，从而得到纤维蛋白原的含 量。

三、 试剂：Thrombin 试剂（凝血酶冻干品），1ml 的蒸馏水复溶。Owen’s Buffer 缓冲液，注意试剂是否结晶会影响结果。

四、 仪器品牌：日本进口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤：SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是散色光比浊，百分比检测，监测
样品凝集完全的散射光强度的变化，50%凝集时所对应的时间即为凝血酶时间。
1.将 FBG 试剂按照说明溶解好以后，放到确定的位置上。
2.将样本离心准备好后，放到样本架上，样本架放到自动进样器上。
3.在屏幕上进入 WORK LIST 菜单，设好 ID 号，以及要检测的项目，一切准备好后 可按 START 开始。

六、 参考值： FBG：2-4g/l

七、 临床意义：FBG 含量增高：见于糖尿病及其酸中毒，动脉粥样硬化，急性传染病，急性肾炎 尿毒症，骨髓瘤，休克，外科术后及轻，度肝炎等。
FBG 含量减低：见于 DIC，原发性纤溶症，重症肝炎，肝硬化等。

八、 标本制备：9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝，立即混匀，3000r/min×15min，血浆可在 15-25℃保存4小时，在-20℃至少可以保存 24 小时。

九、 注意事项：试剂溶解后，可在 15℃放置 10 小时，2-8℃可放 7 天。复溶要充分，复溶好的试剂可冷冻分装保存

十、 编写者：VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献：
[1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳，翟笺才，临床检验仪器学，北京：人民卫生出版社，2001
[3] 姚泰，生理学（第六版），北京：人民卫生出版社，2003
[4] 赵桂芝，临床检验学，成都：四川科学技术出版社，1997
[5] 陆永绥，李清华，张伟明，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江：浙江大学出版社，2006

十二、 科室主任：

TT 凝血酶时间

一、 名称：TT凝血酶时间。

二、 原理：待测血浆加入标定的凝血酶溶液，纤维蛋白原转变为纤维蛋白，测定凝固所
需的时间，即为待测血浆凝血酶时间。

三、 试剂：Test Thrombin 试剂（凝血酶冻干品。）。试剂溶解时用 TT 特有的缓冲液
以 5ml 复溶。

四、 仪器品牌：日本进口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤：SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是散色光比浊，百分比检测，监测样品凝集完全的散射光强度的变化，30%凝集时所对应的时间即为凝血酶时间。
1. 将 TT 试剂按照说明溶解好以后，放到确定的位置上。
2. 将样本离心准备好后，放到样本架上，样本架放到自动进样器上。
3. 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单，设好 ID 号，以及要检测的项目，一切准备好后可按 START 开始。

六、 参考值： TT 14-21 秒

七、 临床意义：TT 延长：见于肝素增多或类肝素物质存在，SLE，肝病，肾病，低（无）纤维蛋白 原血症，异常纤维蛋白原血症，FDP 增多等疾病。

八、 标本制备：9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝，立即混匀，3000r/min×15min，血浆可在 15-25℃保存 4 小时，在-20℃至少可以保存 24 小时。

九、 注意事项：试剂溶解后，可在 15℃放置 10 小时，2-8℃可放 7 天。复溶要充分，复溶好的试剂可冷冻分装保存。

十、 编写者：VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献：
[1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
[2] 曾照芳，翟笺才，临床检验仪器学，北京：人民卫生出版社，2001
[3] 姚泰，生理学（第六版），北京：人民卫生出版社，2003
[4] 赵桂芝，临床检验学，成都：四川科学技术出版社，1997
[5] 陆永绥，李清华，张伟明，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江：浙江大学出版社，2006

十二、 科室主任：

抗凝血酶 III 检测（ATIII）

一、 名称：抗凝血酶III测定。

二、 原理：ATIII 是血液凝固的一种主要抑制剂，其功能分析依赖于血浆中有肝素存在
的情况下降低凝血酶活性的能力。样本中的 ATIII 在肝素的存在下与未激活的凝血酶形成凝血酶抗凝血酶复合物。剩余的凝血酶与试剂中的底物结合，在 405nm 波长下检 测吸光度的变化。以国际标准品为参比血浆作浓度与吸光度的曲线。所测样本的吸光 度将会根据曲线得到样本的浓度。

三、 试剂：
Thrombin Reagent 6 X15ml （凝血酶试剂 用 15ml 的缓冲液复溶）
Substrate Reagent 6X3 ml （底物 用 3ml 的去离子水复溶）
uffer Solution 1X100ml （缓冲液 液体用于复溶凝血酶试剂）

四、 仪器品牌：日本进口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自动血凝仪。

五、 操作步骤：SYSMEX 的 CA 系列血凝仪采用的是发色底物法来检测 ATIII。

1. 将 AT III 试剂盒中所有试剂按照说明溶解好以后，放到确定的位置上。
4. 将样本离心准备好后，放到样本架上，样本架放到自动进样器上。
5. 在屏幕上进入 WORK LIST 菜单，设好 ID 号，以及要检测的项目，一切准备好 后可按 START 开始。

六、 参考值： ATIII 75—125%

七、 临床意义：定量测定血浆中抗凝血酶Ⅲ（ATIII）的活性，能用于诊断ATIII合成减少或消耗增加性疾病，和监测替代治疗效果。ATIII 缺乏主要见于肝脏疾病、弥散性血管内凝血、败血症、肺栓塞、肾病综合症、中风及深静脉血栓等。

八、 标本制备：9 份静脉血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝，立即混匀，3000r/min×15min，在 60 分钟以内分离血浆，分离血浆时用塑料吸头、且用塑料试管储存血浆。分析血浆标本在 2 小时内完成；另外，冰冻保存，融化使用等。

九、 注意事项：凝血酶试剂溶解后，使用时在 15℃--25℃-孵育 30 分钟。凝血酶试剂复溶后在原始瓶中可冰冻 5 次，底物可冰冻 10 次。缓冲液 2-8℃可保存 6 个月。2-8℃凝血酶稳定 4 周。底物稳定 6 周。-20℃凝血酶可稳定 3 个月，底物 6 个月。

十、 编写者：VASTEC公司血栓止血临床应有技术专员 陈中超

十一、 参考文献：
1. [1] SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL
2. [2] 曾照芳，翟笺才，临床检验仪器学，北京：人民卫生出版社，2001
3. [3] 姚泰，生理学（第六版），北京：人民卫生出版社，2003
4. [4] 赵桂芝，临床检验学，成都：四川科学技术出版社，1997
5. [5] 陆永绥，李清华，张伟明，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江：浙江大学出版社

十二、 科室主任：