CDKL5基因相关难治性癫痫的临床表型及基因特征分析.pdf

论著（收稿日期：2 0 2 3-0 3-0 7）600脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期Alzheimers diseaseJJ.Neural Regen Res,2019,14(9):1626-1634.21 Al Mamun A,Rahman MM,Zaman S,et al.Molecular insight intothe crosstalk of UPS components and Alzheimers diseaseJ.CurrProtein Pept Sci,2020,21(12):1193-1201.22 Huang P,Liu W,Chen J,et al.TRIM31 inhibits NLRP3inflammasome and pyroptosis of retinal pigment epithelialcells through ubiquitination of NLRP3JJ.Cell Biol Int,2020,44(11):2213-2219.CDKL5 基因相关难治性癫痫的临床表型及基因特征分析郭静李花董晓立彭凯【摘要】目的探讨CDKL5基因突变患者的临床及分子遗传学特点。方法分析2 0 17 年8 月至2020年8 月就诊于广东三九脑科医院癫痫中心，并经全外显子基因测序发现的7 例CDKL5基因阳性患者的临床资料，对CDKL5基因阳性患者的临床表现及分子遗传学特征进行归纳总结。结果7 例CDKL5基因阳性患者大多为女性，男：女=1:6，均为杂合新生突变（男性为半合子），其中4例为错义突变，3例为截短突变。3例有家族史，4例无家族史。所有患者出生史均正常，但精神运动发育均重度迟缓，主要为语言表达及理解明显落后、双手刻板样动作或失用，大多数患者眼神交流少、追光追物差。7 例CDKL5基因阳性患者发作频率均为每日发作，发作形式以痉挛、强直为主，均对生酮饮食、抗癫痫药物、激素等治疗效果差，但其中4例患者治疗过程中有治疗蜜月期（6 个月至2 2 个月不等的无发作期），除1例至今仍无发作外，其余6 例均再次出现每日频繁发作。丙戊酸钠、拉莫三嗪及氯巴占或氯硝西泮可能对治疗部分有效。结论CDKL5好发于女性患者，常常与难治性癫痫有关。患者均有重度精神运动发育迟缓，主要表现在对语言发育的影响，并存在双手刻板样动作或失用，眼神交流少。癫痫发作表型多样，治疗上可能出现治疗蜜月期，但一段时间后会再次出现频繁发作，对多种治疗方式无效，但丙戊酸钠、拉莫三嗪及氯巴占或氯硝西洋可能部分有效。【关键词】CDKL5基因；难治性癫痫；精神运动发育迟缓；治疗蜜月期中图分类号：R742.1文献标识码：A文章编号：10 0 6-351X（2 0 2 3）10-0 6 0 0-0 8Clinical and genetic characteristics of CDKL5 gene related intractable epilepsyGuo Jing,Li Hua,Dong Xiaoli,Peng KaiEpileptic Centre,the Guangdong 999 Brain Hospital,Guangzhou 510510,ChinaCorre1CAbstract Objective To investigate the clinical and molecular genetic characteristics of patients withCDKL5 gene mutation.Methods Retrospectively analyze the clinical data of 7 patients with CDKL5 gene mutationfrom August 2017 to August 2020,and the clinical manifestations and molecular genetic characteristics of thesepatients were summarized.Results Most of the 7 patients with CDKL5 gene mutation were female,male:female=1:6.All of them were heterozygous de novo mutations(1 male was hemizygous),and among which were 4 missensemutations and 3 truncated mutations.3 cases had family history,and 4 cases had no family history.All the patients hadnormal birth history,but their psychomotor development was severely retarded,and the obvious backward mainly inlanguage expression and understanding,hand stereotypies or apraxia,less eye contact and poor light and object pursuitin most patients.The seizure frequency of all 7 patients with CDKL5 gene mutaiton was daily seizure,and the typies基金项目：广州市科技计划项目（2 0 2 10 2 0 8 0 42 7）作者单位：510 510 广州，广东三九脑科医院癫痫中心601脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期of the seizure were mainly spasm and tonic.The treatment effect of ketogenic diet,antiepileptic drugs and steroidswas very poor.However,4 patients had honeymoon period(6 months to 22 months of seizure free period)during thetreatment.But except 1 patient who still had no seizure,the frequency of seizures in the other 6 patients were still dailyseizures again.Valproate,lamotrigine,clobazam or clonazepam may be partially effective.Conclusion CDKL5 is morecommon in female patients and is often associated with intractable epilepsy.All of the patients had severe psychomotorretardation,and mainly manifested in the language development.Besides,the patients also had hand stereotypiesor apraxia and less eye contact.The phenotypes of epileptic seizures are various.Honeymoon period may occur intreatment,but frequent seizures will occur again after a period of time,which is ineffective to a variety of treatmentmethods.However,valproate,lamotrigine,clobazam or clonazepam may be partially effective.Key wordsCDKL5 gene;Intractable epilepsy;Psychomotor retardation;Treatment honeymoonCDKL5基因位于X染色体短臂（Xp22）上，属于丝氨酸苏氨酸激酶家族的蛋白质翻译产物。CDKL5基因突变所引起的主要临床表现为癫痫发作及精神运动发育迟缓。癫痫发作通常在出生后的前3个月内出现，对抗癫痫药物治疗反应不佳 2-3。同时，植物神经功能障碍、手部刻板动作、眼神接触不良、呼吸障碍、睡眠障碍和胃肠道问题是少见的特征性症状。本研究7 例CDKL5基因阳性患者的临床资料及基因特征进行分析，对 CDKL5基因相关癫痫患者进行详细的临床及分子遗传学特征总结。资料和方法研究对象本研究运用回顾性分析的方法，选择2 0 17 年8月至2 0 2 0 年8 月就诊于广东三九脑科医院癫痫中心，并经全外显子基因测序发现的7 例CDKL5基因阳性患者作为研究对象，二、方法收集7 例CDKL5基因阳性患者的临床资料，包括：性别、出生日期、起病年龄、出生史及生长发育史、有无癫痫家族史、发作类型、发作频率、治疗情况、神经系统体格检查、实验室检测结果（常规抽血及血、尿遗传代谢）及辅助检查结果视频脑电图（videoelectroencephalogram，VEEG）、影像学、心电图、心脏彩超等；此外，收集患者及其家系成员全外显子基因测序结果。随访7 例CDKL5基因阳性患者的治疗及预后情况、临床特点及分子遗传学特征。结果、一般情况、基因结果及临床特点（表1）表17 例CDKL5患者一般临床资料家族起病治疗蜜月期例序性别突变位点发作频率发作形式ASMs类别VEEG头颅MRI史年龄及方案既往每日6种+甲强龙2019-8至2 0 2 1-6双侧大脑半球脑c.532CG1岁挛、短暂例1男无发作，目+丙球+生酮无发作（VPA、弥漫性放电室周围白质异常p.Arg178Cly8月性强直前无发作饮食LTG、C LB)信号曾有6 个月无发c.617AG挛、短暂香5种+ACTH+高幅失律；弥漫性慢波；双侧脑室周围白例2 女有4岁每日发作作（VPA、LT G、p.Asp206Cly性强直生酮饮食弥漫性放电质信号增高CNZ)c.73GA挛、局灶例3女有2 月每日发作4种无多脑区放电未见明显异常p.Gly25Arg性发作未见明显后头部节律；高双侧额叶欠饱c.1364_1365dupCT挛、强直、7 种+甲强龙例4女无2月每日发作无幅失律；爆发一抑制；弥满，脑白质髓鞘p.Gly456fs局灶性发作+丙球+生酮漫性放电；多脑区放电化迟缓待排2020-12至未见明显后头部节律；高c.1423CT挛、局灶7 种+甲强龙2021-6无大发作例5女有2 月每日发作幅失律；弥漫性慢波；弥p.Cln475Ter性发作+生酮(CLB+LTG),漫性放电；多脑区放电仅有小发作曾有8 个月无发生理节律减弱；弥漫性慢白质偏少并髓鞘c.1227delA挛、强直、8 种+ACTH+例6 女无5月每日发作作（VPA、T PM、波；高幅失律；弥漫性放化不良可能、脑p.Clu410fs肌阵挛生酮LTG、CNZ)电；多脑区放电组织发育欠饱满c.1851delT挛、局灶5种+ACTH+未见明显后头部节律；弥例7 女无2 月每日发作无未见明显异常p.D618Tfs*3性发作生酮漫性慢波；多脑区放电注释：ACTH：促肾上腺皮质激素；VPA：丙戊酸钠；LTG：拉莫三嗪；CLB：氯巴占；CNZ：氯硝西洋；TPM：托吡酯；VEEG：VEEG3岁4月y602脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期7例CDKL5基因阳性患者大多为女性患者，男：女=1:6，癫痫起病年龄为生后2 月4岁。所有突变均为杂合新生突变（例1男性为半合子）,其中4例（例1、例2、例3、例5）为错义突变，3例（例4、例6、例7）为截短突变（图1）。2.0001,5001,000500例1c.532CGp.（A r g 17 8 Cl y），半合子，denovo，可疑致病变异210220GGGCGTGGCGCC例2 c.617AGp(Asp206Cly)，h e t，d e n o v o，可疑致病变异150160GGGCCGGTTGTC例3c.73GAp.(Gly25Arg)，h e t，d e n o v o，可疑致病变异CGTTTTCCA例4c.1364_1365dupCT，p.G l y 456 f s，d e n o v o，致病变异例5c.1423CT，p.G l n 47 5T e r，h e t，d e v o n o，可疑致病变异320330340GCG例6 c.1227delA，p.(G l u 410 f s)，h e t，d e n o v o，致病变异ATGTGACCCGTAACAAATGGAAAA例7 c.1227delA，p.(G l u 410 f s)，h e t，d e n o v o，致病变异图17 例CDKL5基因阳性患者突变位点基因测序图3例患者（例2、例3、例5）有家族史（图2）：例2 患者父亲的堂兄弟18 岁开始癫痫发作，服药后未再出现发作；例3患者的表哥3岁4月开始有癫痫发作，经医学外显子检测发现基因突变位点：TPP1 c.617GA,het，来源于母亲；c.1551+1GT,het,来源于父亲，诊断“神经元蜡样脂褐质贮积症；进行性肌阵挛性癫痫”；例5患儿父亲的表兄弟2 岁左右起病，幼时有过数次全身强直阵挛发作，成年后无发作。另外4例患者无癫痫家族史。口30yrs例2患者家系图（例2 患者4岁起病，目前7 岁；父亲的堂兄弟18岁起病日前3 0 岁8yrs例3患者家系图（例3患者2 月龄起病，目前2 岁；表哥龄起病，日前830yrs例5患者家系图（例5患者2 月龄起病，目前3岁6 月龄；父亲的表兄弟2 岁左右起病，目前30 岁）图2例2、例3及例5患者家系图所有7 例CDKL5基因阳性患者除例1至末次随访目前已2 2 个月无发作外（例1发作控制前发作频率为每日发作），其余患者均表现为药物难治性癫痫，603脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期发作频率均为每日发作。发作形式以挛及强直发作为主，也可出现局灶性发作、肌阵挛及失张力发作，所有患者均使用过4种以上的抗癫痫药物，但均对生酮饮食、抗癫痫药物、激素等治疗效果差。随访10个月至3年10 个月不等，发现其中4例患者（例1、例2、例5、例6）病程中有治疗蜜月期（6 个月至2 2 个月不等的无发作期），除1例（例1）至最后一次随访仍无发作外，其余6 例均再次出现每日频繁发作。4例治疗中有蜜月期的患者均在使用丙戊酸钠、拉莫三嗪及氯巴占或氯硝西洋时出现无发作的情况，考虑上述药物可能对CDKL5基因突变患者有部分疗效。一、生长发育情况（表2）表2 7 例CDKL5患者发育情况例序年龄运动发育语言发育双手刻板运动或失用肌张力眼神交流及追视能独立行走，上下楼梯，可以跑，例16岁7 月不会言语，不理解语言反复做甩玩具的动作正常眼神交流少动作欠协调能独立行走，可以跑跳，动作欠例27岁1月简单言语，不理解语言反复将双手放进嘴巴正常基本正常协调只会抬头、翻身，不会坐，不会例32岁不会言语，不理解语言反复起双手肌张力低不追光追物扶站，不会走例41岁8 月不会抬头，不会翻身，不会独坐不会言语，不理解语言双手失用肌张力增高追光追物差例53岁6 月能竖头、翻身，独坐不稳不会言语，不理解语言双手失用肌张力低偶可追光追物能竖头、翻身、独坐，可扶站，例66岁8 月不会言语，不理解语言左手活动较右手少肌张力低可追光追物，但眼神交流少但不能独立行走左手活动较右手少，双例72岁9 月竖头不稳，不能翻身，不会坐不会言语，不理解语言肌张力低不追光追物，无眼神交流手反复揉眼睛、捂脸所有患者出生史均正常，但精神运动发育均迟缓。例1及例2 患者目前可独立行走，可上楼梯及跑跳，但大运动欠协调。其余5例患儿运动发育明显迟缓。所有患者语言表达及理解均明显落后，除例2 能简单言语外，其余患者均不会言语，不能理解家人语言。7 例患者均有双手刻板样动作或双手失用（例如表现为喜欢反复做甩玩具的动作、反复将双手放进嘴巴、反复抬起双手以及双手反复揉眼睛、捂脸，或不用双手做任何事情），其中例6 及例7 左手活动较右手少。7 例患者中例1及例2 肌张力正常，其余5例均有肌张力改变，以肌张力降低为主。除例2 眼神交流基本正常外，大多数患者眼神交流少、追光追物差。二、辅助检查1.VEEGG（图3）A：例4患者VEEG：高幅失律及爆发-抑制604脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期B：例5患者VEEG：痉挛发作、失张力发作C：例6 患者VEEG：肌阵挛发作、挛-强直发作图3部分CDKL5阳性患者VEEG表现7例患者中3例（例4、例5、例7）未见明显后头部节律，1例（例6）生理节律减弱。其中5例患者（例2、例4、例5、例6、例7）慢波活动增多，4例患者（例2、例4、例5、例6）有高幅失律，1例（例4）VEEG合并有爆发-抑制。间歇期放电以弥漫性放电和多脑区放电为主。7 例患者VEEG记录到的发作期有痉挛发作、强直发作、失张力发作、肌阵挛发作及局灶性发作等多种形式。2.头MRI（图4）7例患者中有1例（例5）因患者家属不同意，未行头颅MRI检查。余6 例患者中2 例（例3、例7）头颅MRI未见明显异常，4例患者（例1、例2、例4、例6）主要表现为白质信号异常、白质偏少或髓鞘化发育不良。B例13岁半时头颅MRI，提示双侧大脑半球脑室周围白质异常信号（图A及B箭头所示）B例2 5岁时头颅MRI，提示双侧脑室周围白质信号增高，右侧为著（图A及B箭头所示）B例410 月龄时头颅MRI，提示双侧额题叶欠饱满，脑白质髓鞘化迟缓待排（图A及B箭头所示）B例6 4岁时头颅MRI，提示白质偏少并髓鞘化不良、脑组织发育欠饱满（图A及B箭头所示）图4部分CDKL5阳性患者头颅MRI表现3.其他检查例3及例7 曾出现一过性肝功能异常，余患者血液学检查未见明显异常。所有患者血、尿遗传代谢正常，心电图、腹部超声及心脏彩超均未见明显异常。605脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期讨论CDKL5（细胞周期依赖激酶样蛋白5）缺乏症（CD K L5d e f i c i e n c y d i s o r d e r，CD D）是一种罕见的神经疾病，其特征是在出生后的几周到几个月内癫痫发作，精神运动发育明显迟缓 5-7 。也被称为CDKL5脑病、CDKL5 癫痫性脑病或 CDKL5 相关癫痫。如患者有正常的出生史、早发性癫痫、典型的手部运动、严重的精神运动发育障碍和肌张力减退，作者可以通过检测杂合子CDKL5基因突变来证实患者是否患有CDD。CD D 在活产婴儿中发病率约为1/40 0 0 0 至1/6000018，是儿童早发性癫痫非常常见的遗传原因之一。CDKL5蛋白分为两个区域，即ATP结合区一决定正常激酶功能的催化结构域；以及长的C-末端结构域一负责调节蛋白质的催化活性和通过活性核转运调节激酶的细胞内分布 19-10 。O到目前为止，已有超过2 6 5种CDKL5基因的致病性变体被报道。大约50%的变异是点突变，其中错义突变最常见（38%），但只有2 7%的突变位点被认为有致病性，许多突变与催化结构域有关。本研究7 例患者中例1、例2、例3、例5及例7 致病性评级为可疑致病突变，例4及例6 致病性评级为致病突变。上述突变中例1、例2 及例3突变位点（Arg178Gly、A s p 2 0 6 G l y 及Gly25Arg）在OMIM数据库中已经有报道，但例4、例5、例6 及例7 患者的突变位点（Gly456fs、G l n 47 5T e r、G l u 410 f s 及D618Tfs*3）目前尚未见报道。移码突变是CDKL5基因中最具致病性的突变，这种变异存在于大约13%的患者中。我们的队列中有3例患者(例4、例6、例7)突变位点为移码突变，从而进一步导致了蛋白截短，这3例患者的精神运动发育情况似乎也较其他4例更严重。由于CDKL5位于X染色体上，女性的患病率是男性的四倍，X染色体失活程度似乎是决定女性症状严重程度的最重要因素之一112 。一般来说，男性的病程要严重得多，有报道显示患病的男孩往往会在生命的第一或第二个十年导致死亡 2 。然而，我们的队列中的男性患者症状较轻微，截止末次随访已2 2 个月无发作，但由于仅1例男性，并没有足够的力度来证实与既往其他研究的不同。与CDD相关的癫痫常常为难治性癫痫 3。CDKL5患者的癫痫病程可分为三个阶段：早期癫痫发作；早发型癫痫性脑病（EE）伴婴儿痉挛；晚期多灶性和肌阵挛性癫痫 14。这些阶段经常被“蜜月期”打断。蜜月期是指治疗后的癫痫无发作期，这种情况最常发生在2 岁，平均持续6 个月（从数周至6 年1315-16 。不幸的是，虽然患者可以有蜜月期，但这种蜜月期很少长期维持 15。在本研究中的7 例患者中，截止末次随访，4例患者（例1、例2、例5、例6）分别有6 2 2 个月不等的治疗蜜月期，但仅有1例患者（例1）至末次随访尚无发作。虽然这些患者有治疗蜜月期，但进行性发育恶化（progressive developmental deterioration，PD D）是持续的。更长的蜜月期与更好的癫痫治疗效果相关，而发育落后则独立进行。Bahi-Buisson等 14 研究所有的患者在癫痫发作时出现了严重的发育迟缓，无论癫痫后期病程如何，这种情况都会持续。此外，Mller等 13 发现，即使癫痫发作显著减少，患者也没有表现出认知功能的改善。CDKL5突变患者的言语障碍比粗大运动的发育落后更严重17-18 。在我们的研究中，7 例患者中有4例（例1、例2、例5、例6）有治疗蜜月期，但这4例患者中均有发育的严重落后，尤其表现在语言的发育方面，几乎所有患者均在语言表达及语言理解方面重度发育迟缓。虽然例1及例2 的大运动发育尚可，但运动协调能力及精细运动仍明显欠佳，其余5例也分别表现出了运动发育的严重迟缓。此外，眼神交流少、双手刻板动作或双手失用也是本研究中CDKL5基因阳性患者的突出特点。皮质视觉障碍在CDD中属于常见症状，发生在8 0%的患者。临床上主要表现为缺乏注视和眼睛跟随物体能力不佳。40.6%的患者避免目光接触，这也是自闭症的特征之一。较少见的症状包括旋转性或水平性眼球震颤 19 。8 5.7%的患者出现手部刻板动作，是最常见的伴随症状之一，在女孩中的发生率是男孩的6 倍，把手放在嘴里和鼓掌是最常见的现象。症状通常出现在生命的第一年，随着时间的推移，症状会更加严重 2 0 。除了发现在基因末端有截短突变的女性中可能有更好的精神运动发育情况外，对精神运动发育迟缓和基因型之间关系的研究没有得出有效的结论 15。出生后几个月的头颅MRI很少显示任何异常，有报道称大约50%的6 岁儿童出现神经影像学改变，主要与额叶脑萎缩和白质增强有关。一些患者还表现为脑沟增宽，脑室系统扩大，或小脑萎缩 2 1。这些变化严重程度不同。因此，不能作为诊断、鉴别诊断或预后的依据。值得注意的是，神经影像学异常的频率以及临床症状的严重程度也与性别有关。606脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期在52.9%的受检男孩中，MRI发现了脑萎缩的症状，而这种现象在女孩中几乎少了一倍（2 5.7%）2-2 3。在作者的研究中，也印证了上述论断，7 例患者中6例做了头颅MRI检查，其中2 例头颅MRI未见明显异常，4例（例1、例2、例4、例6）结果提示异常的患者均表现为白质的异常，其中2 例（例4、例6）合并有脑组织发育欠饱满。但因为患儿年龄较小，随访时间较短，需进一步随访观察患者头颅MRI变化。CDD患者对抗癫痫药的耐药率高达8 4%。Jakimiec 等 2 1 发现，6 9%的患者在开始抗癫痫治疗后3个月内癫痫发作频率下降了50%；第6 个月占45%；一年后只有2 4%。最显著的疗效最初出现在服用丙戊酸钠、拉莫三嗪、氨已烯酸（vigabatrin，VGB）氯巴占、唑尼沙胺（zonisamide，ZNS）非氨酯或类固醇的患者身上。然而，这些药物的有效性随着时间的推移而下降。Muller等 13强调，只有不到三分之一的患者在治疗后出现痫性痉挛频率降低50%以上的情况，并且在几个月后会迅速失去疗效。Melikishvili等 2 4 推测，VGB和ZNS的联合使用可能有效，VGB和ZNS组合的有效性可能是由于作用于皮质纹状体环路的两个组成部分：VGB作用于纹状体，而ZNS作用于产生痫性痉挛的过量NMDA传递 2 5。而在我们的研究中，通过对患者蜜月期使用药物的分析，发现丙戊酸钠、拉莫三嗪及氯巴占或氯硝西泮的联合使用对发作控制部分有效。综上所述，CDKL5相关癫痫主要好发于女性患者，以新发突变为主，癫痫发作起病年龄早，发作形式以痉挛及强直为主，常常表现为难治性癫痫，且精神运动发育明显迟缓，对多种抗癫痫药物治疗效果不佳，虽部分患者有治疗蜜月期，但维持时间短，仅有极少数患者可维持较长时间的无发作期。尽早的识别CDKL5相关癫痫对患者的预后判断及治疗选择有一定的指导作用。利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突作者贡献声明郭静、董晓立、彭凯：负责文章资料收集；李花：负责文章设计及审校等参考文献1Tao J,Van Esch H,Hagedorn-Greiwe M,et al.Mutations in theX-linked cyclin-dependent kinase-like 5(CDKL5/STK9)gene areassociated with severe neurodevelopmental retardationJ.Am J HumGenet,2004,75(6):1149-1154.2 Fehr S,Wilson M,Downs J,et al.The CDKL5 disorder isan independent clinical entity associated with early-onsetencephalopathyJJ.Eur J Hum Genet,2013,21(3):266-273.3 Bahi-Buisson N,Bienvenu T.CDKL5-related disorders:from clinicaldescription to molecular geneticsJ.Mol Syndromol,2012,2(3-5):137-152.4Olson HE,Demarest ST,Pestana-Knight EM,et al.Cyclin-dependent kinase-like 5 deficiency disorder:clinical reviewJ.Pediatr Neurol,2019,97:18-25.5Moseley BD,Dhamija R,Wirrell EC,et al.Historic,clinical,andprognostic features of epileptic encephalopathies caused by CDKL5mutationsJ.Pediatr Neurol,2012,46(2):101-105.6Weaving LS,Christodoulou J,Williamson SL,et al.Mutationsof CDKL5 cause a severe neurodevelopmental disorder withinfantile spasms and mental retardationJ.Am J Hum Genet,2004,75(6):1079-1093.7Jahn J,Caliebe A,Von Spiczak S,et al.CDKL5 mutations as a causeof severe epilepsy in infancy:clinical and electroencephalographiclong-term course in 4 patientsJJ.J Child Neurol,2013,28(7):937-941.8Kothur K,Holman K,Farnsworth E,et al.Diagnostic yield oftargeted massively parallel sequencing in children with epilepticencephalopathyJ.Seizure,2018,59:132-140.9Russo S,Marchi M,Cogliati F,et al.Novel mutations in the CDKL5gene,predicted effects and associated phenotypesJ.Neurogenetics,2009,10(3):241-250.10 Bahi-Buisson N,Villeneuve N,Caietta E,et al.Recurrent mutationsin the CDKL5 gene:genotype-phenotype relationshipsJ.Am J MedGenet A,2012,158A(7):1612-1619.11Krishnaraj R,Ho G,Christodoulou J.RettBASE:rett syndromedatabase updateJ.Hum Mutat,2017,38(8):922-931.12 Liang JS,Huang H,Wang JS,et al.Phenotypic manifestationsbetween male and female children with CDKL5 mutationsJJ.BrainDev,2019,41(9):783-789.13 M u ller A,Helbig I,Jansen C,et al.Retrospective evaluation oflow long-term efficacy of antiepileptic drugs and ketogenic diet in39 patients with CDKL5-related epilepsyJ.Eur J Paediatr Neurol,2016,20(1):147-151.14Bahi-Buisson N,Kaminska A,Boddaert N,et al.The threestages of epilepsy in patients with CDKL5 mutationsJ.Epilepsia,2008,49(6):1027-1037.15 Fehr S,Wong K,Chin R,et al.Seizure variables and theirrelationship to genotype and functional abilities in the CDKL5disorderJJ.Neurology,2016,87(21):2206-2213.16Fehr S,Leonard H,Ho G,et al.There is variability in the attainmentof developmental milestones in the CDKL5 disorderJ.J NeurodevDisord,2015,7(1):2.17Fehr S,Downs J,Ho G,et al.Functional abilities in childrenand adults with the CDKL5 disorderJ.Am J Med Genet A,2016,170(11):2860-2869.论著607脑与神经疾病杂志2 0 2 3年第31卷第10 期18Frullanti E,Papa FT,Grillo E,et al.Analysis of the phenotypes inthe Rett networked databaseJ.Int J Genomics,2019,2019:6956934.19Artuso R,Mencarelli MA,Polli R,et al.Early-onset seizure variantof Rett syndrome:definition of the clinical diagnostic criteriaJ.Brain Dev,2010,32(1):17-24.20Saitsu H,Osaka H,Nishiyama K,et al.A girl with early-onsetepileptic encephalopathy associated with microdeletion involvingCDKL5J.Brain Dev,2012,34(5):364-367.21Jakimiec M,Paprocka J,Smigiel R.CDKL5 deficiency disorder-Acomplex epileptic encephalopathyJJ.Brain Sci,2020,10(2):107.22Mei D,Marini C,Novara F,et al.Xp22.3 genomic deletions involvingthe CDKL5 gene in girls with early onset epileptic encephalopathyJ.Epilepsia,2010,51(4):647-654.23Melani F,Mei D,Pisano T,et al.CDKL5 gene-related epilepticencephalopathy:electroclinical findings in the first year of lifeJJ.DevMed Child Neurol,2011,53(4):354-360.24 Melikishvili G,Epitashvili N,Tabatadze N,et al.New insightsin phenomenology and treatment of epilepsy in CDKL5encephalopathyJJ.Epilepsy Behav,2019,94:308-311.25 Velisek L,Jehle K,Asche S,et al.Model of infantile spasms inducedby N-methyl-D-aspartic acid in prenatally impaired brainJJ.AnnNeurol,2007,61(2):109-119.（收稿日期：2 0 2 2-0 9-2 0）从炎症机制探讨Notch通路抑制剂对小鼠脑缺血模型的神经保护作用刘捷钱爱丽刘桂阳孙菁妮李严霜【摘要】目的探讨Notch通路抑制剂对小鼠脑缺血模型的神经保护作用。方法7 8 只成年BALB/c小鼠按简单随机抽样方法分为Sham组、二甲基亚砜（DMSO）组、-分泌酶抑制剂（DAPT）组，每组2 6 只；线栓法制作小鼠脑缺血模型，其中Sham组小鼠接受相同手术，但未插人缝线；DAPT组小鼠在大脑中动脉闭塞前3h腹腔注射DAPT溶液（5mLkg），Sh a m组、二甲基亚砜（DMSO）组小鼠注射等剂量DMSO溶液，将Longa评分1 3分的小鼠作为实验小鼠；应用尼氏染色及TUNEL/NeuN免疫荧光双标染色鉴定右额叶皮质神经元，免疫荧光检测缺血半脑右半脑皮质Notch1、胶质纤维酸性蛋白（CFAP）阳性细胞，Wes