运动生物化学实验教案.doc

西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第1次
班级
体育系2007级
人数

任课教师

课题
绪论、机能实验的内容、方法和实验报告的撰写
课的
任务
1.了解运动人体机能实验学的基本内容。
2.掌握运动人体机能实验的基本研究方法。
3.了解实验室相关规章制度、实验课程安排及考试要求
重点难点
重点掌握运动人体机能实验学的基本研究方法和研究内容，难点是学生做研究时相关运动模型选择不易掌握。

教

学

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容

及

组

织

教

法

绪论（25分钟）
一、运动生物学科的性质： 实验学科
二、运动生物学科研究的内容：
（一）运动对人体机能的影响（应激与适应）
1、形态；2、机能（生理、生化）；3、身体素质。
（二）运动过程中人体机能变化特征
1、特征；2、影响因素；3、改善措施。
（三）运动选材：不同项目的特点
（四）运动处方：
（五）运动效果的评价： 1、指标体系；2、测试方案；3、评价标准。
三、介绍实验室相关规章制度、实验课程安排及考试要求
第一章 机能实验的内容与方法(60分钟)
第一节 机能实验的基本内容（20分钟）
一、按学科：生理、生化、力学、测量评价。
二、按人体结构系统：循环系统、呼吸系统、内分泌系统。
三、按人体机能系统：运动系统、代谢系统、调节系统。
四、按人体机能状态：定量负荷状态、疲劳状态、恢复状态。
五、按身体素质：力量素质、速度素质。
六、按研究领域：群体、竞体。
第二节 机能实验的基本方法（30分钟）
一、实验的分类
（一）研究对象：人体实验；动物实验。

教

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法

（二）研究方法：急性实验；慢性实验。
（三）研究水平：整体、器官—系统、细胞、分子。
（四）实验场所：现场、实验室。
二、运动人体机能实验的特点
（一）运动负荷（大小、模式），包括：一次性定量负荷运动（定时、力竭）；间歇性负荷运动；递增负荷运动（连续性、间断性）；一次性最大负荷运动等。
（二）实验对象：项目、运动年限、年龄等
三、机能实验与训练周期结合
不同训练周期训练任务不同，因此，测试指标及其的认识应有所不同。
四、机能实验与研究目的结合
（一）理论探讨：一组实验对象。
（二）适应性变化：设立对照组。
（三）训练方法探讨；可分为同一方法和不同方法。设立多个实验组（包括年龄差异、性别差异）。
（四）其它
第三节 实验报告的撰写（15分钟）
一、实验报告的书写格式
1、实验序数和题目
2、实验目的、原理
3、实验器材和药品
4、实验方法或步骤
5、实验结果
6、分析讨论
二、实验报告的书写要求

本
课
小
结

（5分钟）让学生充分了解运动人体机能实验学的学科特点、性质以及学习方法。重点强调这门课程的主要内容。

西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第6次
班级

人数

任课教师

课题
血尿素氮的测定

课的

任务
1、 学习和掌握血尿素氮的测定方法。
2．了解血尿素氮在机能评定中的作用与意义。
重点难点
重点掌握血尿素氮的测定方法。

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血尿素氮的测定
一、实验目的与原理 （10分钟）
（一）实验目的
1、学习和掌握血尿素氮的测定方法；
2、了解血尿素氮在机能评定中的作用与意义。
（二）实验原理
尿素在强酸条件下与二乙酰一月亏 反应生成红色复合物，其显色程度与尿素含量成正比。与经同样处理之尿素标准液比色，即可求出血尿素含量。
二、实验材料 （10分钟）
（一）实验仪器：
722型分光光度仪、恒温水浴箱、离心机、电磁炉。
（二）试剂：
1、10%三氯乙酸。
2、二乙酰一月亏。称取二乙酰一月亏600mg，硫氨脲30mg，加蒸馏水溶解，定溶至100ml，储入棕色瓶中。
3、酸混合液。浓H3PO4（85%~87%）35ml，浓H2SO4（95%~98%）80ml慢慢滴加于800ml蒸馏水中，冷却以后以蒸馏水定溶至1000ml。
4、0.01N H2SO4液。准确吸取0.417ml浓H2SO4（36N）置于预先放入

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法

教

学

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法

约1000ml蒸馏水的1500ml量筒中，蒸馏水定溶至刻度。
5、尿素氮标准储存液（1mg/ml）。将尿素（A.R）置硫酸干燥器内48小时。称取经干燥后的的尿素2.143g，加0.01N硫酸溶解至1000ml。冰箱保存。
6、尿素氮标准应用液。吸取尿素氮标准储存液1ml，置于预先加有少量0.01N硫酸液的100ml容量瓶内，并用0.01N硫酸液定溶至刻度。
7、1% NaF。
三、实验步骤（50分钟）
为观察运动负荷对血尿素氮含量的影响，可选择进行大运动量训练受试者为测试对象（运动内容可为男5000m，女3000m全速跑或长于30min的大运动量教学，训练课）。分别于运动前安静时，运动后第5~10min以及次日晨安静时分三次由受试者耳垂取血0.02ml。操作程序如下表1所示进行：
表1 实验试剂添加表
试管号
试剂与操作
1
运动前
2
运动后
3
次日晨
1% NaF（ml）
0.48
0.48
0.48
耳垂血液（ml）
0.02
0.02
0.02
10%三氯乙酸（ml）
1.5
1.5
1.5
将上述三个管各自混匀，离心（3000r/m）5min分别取上清夜备用。（在吸量管操作技术不熟练的情况下，可将三个试管内上清夜分装另外三个编好号的小试管内）。
再取试管5支，按表2所示添加试剂：

表2 实验试剂添加表
试管号
试剂（ml）
1
运动前
2
运动后
3
次日晨
4
标准
5
空白
上清液
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
尿素氮标准应用液0.01mg/ml

0.5

1% NaF

0.5
二乙酰一月亏
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
立即摇匀
酸混合液
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0
混合各管，沸水浴10min冷却至室温
（四）计算

=

血尿素浓度（mmol/L）=血尿素氮浓度（mg%）0.357
四、结果评定 （20分钟）
血尿素氮正常含量为3.2-7.0mmol/L。剧烈运动时，体内蛋白质分解代谢加强，血尿素含量会增加。血尿素氮含量如超过40mg%，应将血液标本稀释后测定，所得结果乘以稀释倍数。

本
课
小
结

本次课主要使学生学习和掌握血尿素氮的测定方法，了解血尿素氮在机能评定中的作用与意义。

西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第 7次
班级
体育系07级
人数

任课教师

课题
血红蛋白的测定
课的
任务
掌握血红蛋白测试的几种不同方法，掌握血红蛋白在运动实践中的应用
重点难点
重点掌握半自动生化分析仪和722分光光度计测试血红蛋白的方法，难点是末稍血的采集和比色分析法原理的理解和掌握。

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法

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教

法

教

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复习回顾（20分钟）
1.血红蛋白基础知识的回顾
血红蛋白（Hb）是一种结合色蛋白，色素部分是亚铁血红素，蛋白质部分是珠蛋白。1分子的Hb是由4分子的亚铁血红素和1分子的珠蛋白结合而成的。Hb的主要生理功能是：1、运输氧气（O2）和二氧化碳（CO2），2、缓冲作用。每分子的Hb可结合4分子的氧气，在标准的情况下（0℃，1个大气压），每克Hb能结合1.39毫升氧气。HbO2比Hb具有较强的酸性，例如，在红细胞中，1毫摩尔的HbO2能产生1.88毫克当量的氢离子（H+），而1毫摩尔的Hb只能产生1.28毫克当量的H+。因此，在组织中，每放出1毫摩尔O2（体积22.4毫升），就能多结合0.60毫克当量的。因而Hb在调解体内酸碱平衡也有一定的作用。所以，在运动训练和比赛中，Hb不仅能为组织提供氧气，促进物质的有氧代谢和带走CO2，而且也能起中和酸性的作用。
Hb的含量对运动员的运动能力影响很大，对耐力运动员的专项素质尤为重要，因此，定期测定Hb的含量有助于了解运动员的营养、对负荷的适应及身体机能水平等情况。
2.分光光度法的测定原理
有色溶液对光线有选择性的吸收作用，不同物质由于其分子结构不同，对不同波长的光线的吸收能力也不同，因此，每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液，虽对可见光无吸收作用，但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。
分光光度法鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是主要是指利用Lambert和Beer定律。
朗伯－比尔定律：当一束平行单色光垂直通过某溶液时，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度b成正比 : A= εcb
ε——摩尔吸光系数。它表示物质的浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。其单位为L/mol·cm
b——液层光程（cm），常使用1.0cm 的比色皿，b=1cm。
C——样品浓度（mol/L）
血红蛋白的测定
一、实验目的（5分钟）
1.熟悉末梢采血的方法；
2.学习722分光光度计的使用；
3.理解分光光度法的测定原理；
4.掌握半自动生化分析仪测定血红蛋白含量的具体操作方法
5.掌握血红蛋白指标测定的意义及在体育运动中的应用。
二、实验材料（5分钟）
1. 器材：722分光光度计、10毫升 试管、5 ml移液管、一次性采血针、毛细吸血管、酒精棉签、洗耳球等。
2. 试剂：氰化高铁血红蛋白稀释剂：称取高铁氰化钾[K3Fe（CN）6]200mg，氰化钾50mg、碳酸氢钠（NaHCO3 AR）140mg（或磷酸二氢钾—KH2PO4）20mg，用蒸馏水溶解并稀释到1000ml。此试剂呈现透明、蛋黄色，pH7.0—7.4之间。配好后储存于棕色瓶内，紧塞瓶口后保存于冷暗处或冰箱（4℃）保存，可保存数月。
3.对象：体育系学生
三、实验步骤（50分钟）
（一）半自动生化分析仪测定血红蛋白含量步骤
1.在试管中准确加入HiCN稀释试剂5.0ml，做测定管。
2.用血红蛋白吸管准确吸取全血20µl，擦去管端血迹，放进装有HiCN试剂的试管底部，徐徐放出血样，并用上清液吸洗3次，摇匀。
3.放置至少10分钟后，用半自动生化分析仪以540nm波长进行比色， 以蒸馏水或HiCN稀释试剂为空白管，校正光密度到0点，读取测定管光密度乘以36.8，即为血红蛋白的含量（g%）。
计算公式：
血红蛋白浓度（g/100ml）==
（二）722分光光度计测定血红蛋白含量步骤
1. 打开电源，预热10min
2. 依次将待测样品放入暗合，盖好暗合盖。
3.选定波长：调节波长选择钮至所需数值。
4.调0：调节暗电流旋钮，使电流计指针至透光率0。
5.调100%：将空白液置于被测位置，调节光量调节旋钮，使电流计指针至透光率100，此时的光密度为0。
6.移动定位拉杆，分别测量样品，记录光密度值。
7.旋钮移至原位，关闭电源，清洗比色杯，倒置于比色杯架上晾干。
四、实验结果评定（5分钟）
根据测试值判定机体机能状态，联系Hb在运动实践中的应用进行分析。
本
课
小
结
（5分钟）通过本节课的学习，每位同学要熟悉末梢采血的方法；要学会半自动生化分析仪和722分光光度计的使用；要理解分光光度法的测定原理；要掌握血红蛋白指标测定的意义及在体育运动中的应用。

西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第 8 次
专业班级
体育系07级
任课教师

课题
尿液的测定

课的
任务
1.学习尿液十项指标的测定
2.掌握尿液十项指标对机能评定意义。

重点难点

重点掌握尿液十项指标的测定方法及原理。难点是尿液各项指标在运动实践中的应用和意义，为体育教学和运动训练提供合理的指导。

教

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及

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法

教

学

内

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组

织

教

法

尿液的测定
尿液的形成过程：血液流经肾小球时,除了血细胞、大分子蛋白质外,血浆中部分水分、葡萄糖、无机盐、氨基酸、尿酸、尿素都可以通过肾小球过滤到肾小囊腔内形成原尿。
原尿流经肾小管时,全部的葡萄糖、氨基酸,大部分的水,部分的无机盐可以通过肾小管重吸收回血液,而剩下部分水分、无机盐、尿酸、尿素经肾小管、集合管流出,形成尿液.尿液中含有多种人体代谢产物。
尿蛋白、尿胆原是运动机能评定当中经常采用的指标。尿蛋白是蛋白质代谢的产物，可以用来评定运动负荷、机能状态和状态恢复；尿胆原是血红蛋白分解的产物，通常结合血红蛋白评定机能状态和运动负荷。
1、尿糖(U—Glu)
正常参考值:阴性
　　临床意义：阳性，见于糖尿病、甲状腺机能亢进、垂体前叶机能亢进、嗜细胞瘤、胰腺炎、胰腺癌、严重肾功能不全等。此外，颅脑外伤、脑血管意外、急性心肌梗塞等，也可出现应激性糖尿；过多食入高糖物后，也可产生一过性血糖升高，使尿糖阳性。
2、尿酮体(U-Ket)
在肝脏中，脂肪酸的氧化很不完全，因而经常出现一些脂肪酸氧化分解的中间产物，这些中间产物是乙酰乙酸、β-羟基丁酸及丙酮，三者统称为酮体。在饥饿期间酮体是包括脑在内的许多组织的燃料，酮体过多会导致中毒。
正常参考值：阴性
　　临床意义：阳性，见于糖尿病酮症、妊娠呕吐、子痫、腹泻、中毒、伤寒、麻疹、猩红热、肺炎、败血症、急性风湿热、急性粟粒性肺结、惊厥等。此外，饥饿、分娩后摄入过多的脂肪和蛋白质等也可出现阳性。
3、尿胆原(URO或UBG)
正常参考值：弱阳性。
　　临床意义：阳性，见于溶血性黄疽、肝病等。阴性，见于梗阻性黄疽。
4、尿比重(SG)
正常参考值：1-5岁‘1.010-1.014;5-8岁，1.010-1.019；8-14岁，1.010-1.025;14 岁以上至成人，1.002-1.030
　　临床意义：增高，见于急性肾炎、糖尿病、高热、呕吐、腹泻及心力衰竭等。降低，见于慢性肾炎、慢性肾盂肾炎、急慢性肾功衰竭及尿崩症等。
5、尿蛋白(R-PRO)
正常参考值:阴性。
　　临床意义:阳性，见于各种急慢性肾小球肾炎、急性肾盂肾炎、多发性骨髓瘤、肾移植术后等。此外，药物，汞、铺等中毒引起肾小管上皮细胞损伤也可见阳性。
6、红细胞(U—BLO)
正常参考值:显微镜法 阴性或＜2个／HP。仪器法‘阴性。
　　临床意义:阳性或增多 见于泌尿系统结石、感染、肿瘤、急慢性肾炎、血小板减少性紫癌、血友病等。
7、尿白细胞(U—LEU)
正常参考值：＜5个／HP。
　　临床意义：增高：见于急性肾炎、肾盂肾炎、膀肮炎、尿道炎、尿道结核等。
8、尿酸碱度(U—pH)
正常参考值：4.5—8.0，均值为6．5。
　　临床意义:降低，见于酸中毒、痛风、糖尿病、发烧、白血病等。此外，—田氯化铵等药物时也可降低。增高，见于碱中毒、输血后、严重呕吐、膀肮炎等。
9、尿胆红素(U-BIL)
人的红细胞的寿命一般为120天。红细胞死亡后变成间接胆红素（I-Bil），经肝脏转化为直接胆红素（D-Bil），组成胆汁，排入胆道，最后经大便排出。间接胆红素与直接胆红素之和就是总胆红素（T-Bil）。　　
正常参考值：阴性。
上述的任何一个环节出现障碍，均可使人发生黄疸。如果红细胞破坏过多，产生的间接胆红素过多，肝脏不能完全把它转化为直接胆红素，可以发生溶血性黄疸；当肝细胞发生病变时，或者因胆红素不能正常地转化成胆汁，或者因肝细胞肿胀，使肝内的胆管受压，排泄胆汁受阻，使血中的胆红素升高，这时就发生了肝细胞性黄疸；一旦肝外的胆道系统发生肿瘤或出现结石，将胆道阻塞，胆汁不能顺利排泄，而发生阻塞性黄疸。肝炎患者的黄疸一般为肝细胞性黄疸，也就是说直接胆红素与间接胆红素均升高，而淤胆型肝炎的患者以直接胆红素升高为主。
　　临床意义：阳性，见于胆石症、胆道肿瘤、胆道蛔虫、胰头癌等引起的梗阻性黄疸和肝癌、肝硬化、急慢性肝炎、肝细胞坏死等导致的肝细胞性黄疽。
10、尿亚硝酸盐(NIT)
大多当数尿路感染由大肠埃希菌引起的 ，正常人尿液中含有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐，尿液中有大肠埃希菌感染增殖时，将硝酸盐还原为亚硝酸盐。
　正常参考值：阴性。
　临床意义：阳性，见于膀肮炎、肾盂肾炎等
11．白细胞：正常人的尿液中可见少量白细胞，一般沉淀尿镜检白细胞数不大于1个/高倍视野。当清洁中段尿沉渣镜检白细胞数大于5个/高倍视野时，即可诊断为白细胞尿。脓尿即脓细胞尿，所谓脓细胞是指变性或死亡的白细胞。一般认为，区别脓细胞尿与白细胞尿并无实际价值，有价值的是白细胞的数量。 有多种疾病可以出现白细胞尿或脓尿，如肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、肾结核、精囊炎以及某些肾小球疾病等。
（一）实验目的原理：
尿液十项指标是运动机能评定中重要的指标，通常采集运动后15分钟的中段尿液10~15ml，以检测机体对运动负荷强度的反应程度。取晨尿（安静时）中段尿液10~15ml，检测机体的恢复状况。让学生了解尿液十项指标的测定，了解其对机能评定意义。
（二）实验试剂：
使用全自动尿十项自动分析仪专用试剂条
（三）操作步骤：
1．在连接仪器的电源之前，确保试剂条支架和热敏纸放置到位。
2．连接电源，仪器启动，机器进行自检，当试剂条支架回复到原位时，仪器的自检结束。
3．将试剂条完全浸没在新鲜尿液中，浸没时间2秒钟以上。
4．用吸水纸将试剂条背面多余的尿液吸走，将试剂条放在支架上（正面朝上），对齐顶端，按启动键后。指示灯逐个亮起。指示灯全部亮起检测正式开始。
5．检测结束，试剂条支架回复到原位，检测结果自动打印。
6．检测结束，用软纸清洁试剂条支架，关闭电源。
（四）实验结果
1、尿蛋白
（1）尿蛋白的数量可用来评定运动量，尤其是评定运动强度。
（2）尿蛋白与对运动负荷的适应情况。
（3）尿蛋白和机能状态。
（4）恢复状态的监控。
尿蛋白存在明显的个体差异。因此，尿蛋白的测试宜进行系统跟踪观察。
2、尿胆原
（1）尿胆原是体内Hb分解的产物
（2）尿胆原的评定意义
尿胆原与运动负荷关系密切。当运动负荷量增大、机体有疲劳感觉时，尿胆原排除量增加，如尿胆原连续2～3天在安静状态下高于2mg%，则应注意运动负荷量的调整。
3、尿潜血
在显微镜下可见红细胞或仪器可检测出尿中血红蛋白，称为尿潜血。
运动负荷后出现尿潜血，表明运动负荷量过大，机体对训练量不能适应，或机体承受负荷量的能力下降。

本
课
小
结

通过本实验使学生了解尿液十项指标的测定，了解其对机能评定意义。使学生掌握分析与运动负荷强度的关系 。
西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第 10次
专业班级
体育系07级
任课教师

课题
血常规的测试

课的
任务
1．通过实验使学生掌握测试血细胞相关指标的原理、方法及在运动实践中的应用和意义。
2．熟练和掌握BC-3000全自动血细胞分析仪的操作方法。
3. 掌握血液常规的参考值和临床意义。

重点难点

重点掌握测试血细胞相关指标的原理、仪器操作方法。难点是血细胞相关指标在运动实践中的应用和意义。

教

学

内

容

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组

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教

法

教

学

内

容

及

组

织

教

法

血常规的测试
　血液一般检查（血常规）
临床意义
（一） RBC 及 Hb 减：生理性贫血；妊娠中、后期； 婴幼儿、青少年； 老年人 。
病理性贫血： 造血原料不足：造血功能障碍；RBC破坏增多；RBC丢失过多。
（二） RBC 及 Hb 增多
相对性增多： 严重呕吐；频繁腹泻；大量出汗； 大面积烧； 尿崩症
绝对性增多：生理性:高原居民、运动
病理性: 肺气肿；肺心病；紫绀型先心
白细胞分类及功能
n 分类名称 主要功能
n 中性粒细胞 防御和抵抗 病原菌侵袭
n 嗜酸性粒细胞细胞 吞噬作用 (消除过敏原)
n 嗜碱性粒细胞 参与过敏反应
n 淋巴细胞 T淋巴细胞参与细胞免疫功能
B淋巴细胞参与体液免疫功能
n 单核细胞 吞噬清除功能、参与免疫反应
白细胞生成调节、抗肿瘤活性
白细胞计数和白细胞分类计数
WBC计数 成人 4.0 ~ 10.0 × 109 /L
新生儿 15.0 ~ 20.0× 109 /L
WBC分类计数 N St 1 ~ 5 %
Sg 50 ~ 70 %
E 0.5 ~ 5 %
B 0 ~ 1 %
L 20 ~ 40 %
M 3 ~ 8 %
一．实验目的
1．通过实验使学生掌握测试血细胞相关指标的原理、方法及在运动实践中的应用和意义，为体育教学和运动训练提供指导。
2． 熟练和掌握BC-3000全自动血细胞分析仪的操作方法。
二．BC-3000三分类血细胞仪测试血细胞指标的原理
把用等渗电解质溶液（被称为稀释液）稀释的细胞悬液倒入一个不导电的容器中，将小孔管插到细胞悬液中。小孔管是电阻抗法细胞计数的一个重要的组成部分，其内侧充满了稀释液，并有一个内电极，外侧细胞悬液中有一个外电极。检测期间，当电流以接通通后，位于小孔两侧的电极产生稳定的电流。稀释液通过小孔孔管壁上固有的小孔（直径一般<100μm.厚度为75μm左右）向小孔内部流动。因为小孔这壁充满了具有专导性的液体，其电子脉冲是稳定的。
如果供给电流I和阻抗Z是稳定的，根据欧姆定期律通过小孔的电压E也是不变的（这时E=IZ）。当有一个细胞通过小孔时，由于细胞的导电性质比稀释液要低，在电路中小孔感应区内的电阻的增加，于瞬间能上能下起了电压变化而出现一个脉冲信号，自然数为通过脉冲。电压增加的变化的程度取决于非传导的细胞占据小孔感应区的体积，即细胞体积越大，引起的脉冲越，产生的脉冲振幅越高，脉冲信号经过下列步骤，得出细胞计数结果。
利用BC-3000全自动三分类血细胞仪测定血细胞参数：红细胞数（RBC）、血红蛋白（HGB）和红细胞压积（HCT）、平均血红蛋白含量（MCH）、平均血球体积（MCV）、平均血球血红蛋白含量（MCHC）、白细胞数（WBC）、淋巴细胞数（Lymph）、中间细胞数（Mid）、中性粒细胞（Gran）、血小板数（FLT）、血小板分布宽度（PDW）和平均血小板体积MPV (fl)。
三．实验器材与试剂
血细胞相关指标的测试：BC-3000全自动血细胞分析仪、1.5ml离心管、采血针、吸液球、吸血管、移液枪；血液细胞分析仪用溶血剂（V-28CFL无氰溶血剂）、肝素抗凝剂、生理盐水。
四．实验方法与步骤
1．开机前的准备：检查试剂是否足量，有无浑浊变质，试剂管道有无扭结，倒空废液瓶。
2．开机：按下机器后部的开关键，约一分钟后出现计数界面。
3．本底检查：按“开始”键，机器计数本底。本底结果要求 WBC≤0.3 RBC≤0.03 HGB≤1 PLT≤10
4．测量
（1）全血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“全血”。用EDTA二钾作抗凝剂取凝血标本（EDTA二钾用量为1.5－2.2mg/ml血）。混匀抗凝血，让采样针插入抗凝血。按“开始”键测量样本。
（2） 末梢血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“预稀释”。按“稀释液”，按“开始”键，自采样针下取1.6ml稀释液。将毛细吸管采取20μl末梢血标本迅速注入1.6ml稀释液杯中，制成稀释血样（注意针刺得要深，用不起毛的纸巾拭去第一滴血）制好稀释血样要摇匀（用拇指及食指捏住杯上部，用腕部旋转约一分钟左右，注意不要剧烈震荡，否则有可能计数不准），放置5分钟后，再摇匀。将稀释血样放于采样针下，按“开始”键计数。
5． 打印报告单。
6． 关机：每天测试完毕一定要用E-Z液执行“关机”程序。等约一分钟后，屏幕提示可以关闭电源后关掉主机电源。
五． 实验参考方案
主要包括在教师的指导下准备实验，实验对象的选择（不同项目运动员），确定检测指标，确定运动训练方式、强度和持续时间，选择取样时间，确定实验方法与步骤，对实验结果进行分析与讨论，写出实验报告或小论文等。
1．实验结果：血细胞指标方面，运动后红细胞数(RBC)和血红蛋白(HGB)下降，与运动前比较两者差异无统计学意义（P>0.05）。
2． 实验结果分析：关于血细胞指标。由于激烈运动，体内的血液流动加快，红细胞在血管内的流动过程中碰撞、挤压，导致红细胞破坏增加，反映出RBC和HGB减少。也可能由于运动负荷的强度和量均大，细胞内氧合血红蛋白的自动氧化速率增加
六． 注意事项： 采用三分类血细胞仪测试血细胞指标
1． 环境防尘；室内温度15－35℃，应配空调；电源要求稳定，一定要配稳压器，最好配UPS(500W)；电源线应有良好接地，零地电压部大于0.5V；
2． 外接配置的废液桶必须放在低于仪器的水平面上；溶血素桶应和仪器放置在同一水平面上；
3．血样应尽可能新鲜，否则所策数据将不准确；
4．每2个月用蒸馏水清晰溶血素瓶及瓶盖组件，注意防止污染；每个星期请用探头清洗执行一次“探头清洗液浸泡”；如果24小时不关机，请在1天内做一次E－Z液浸泡。

本
课
小
结

通过实验使学生掌握测试血细胞相关指标的原理、方法及在运动实践中的应用和意义，为体育教学和运动训练提供指导。使学生熟练和掌握BC-3000全自动血细胞分析仪的操作方法。

西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第 11次
专业班级

任课教师

课题
血清酶——肌酸激酶的测定

课的

任务
1、 学习离心机的使用方法。
2、 掌握血清肌酸激酶的测定方法。
重点难点
血清肌酸激酶的测定

教

学

内

容

及

组

织

教

法

教

学

内

容

及

组

织

教

法

复习：
血清肌酸激酶概述（5分钟）
1、肌酸激酶（CK）作用是催化三磷酸腺苷和磷酸肌酸之间高能磷酸键可逆性的转移。
2.意义：短时间激烈运动时能量补充和运动后ATP恢复的关键酶，与运动时、运动后能量平衡及转移的关系密切。
3.安静时，血清CK总活性的范围为：
成年男子10～100U/L 成年女子10～60U/L
男运动员10～300U/L 女运动员10～200U/L
血清肌酸激酶
一、实验原理：（5分钟）
磷酸肌酸和二磷酸腺苷（ADP）、肌酸与双乙酰及а—萘酚结合生成红色化合物。在一定范围内，红色深浅与肌酸量成正比，以此可以求得血清中CK活性。Mg2+为激活剂，半胱氨酸供给巯基，氢氧化钡和硫酸锌沉淀蛋白并终止反应。
二、试剂：（5分钟）
1.Tris—HCL缓冲液（PH7.4）
2. 0.012mol/L磷酸肌酸溶液
3.0.004mol/LADP溶液
4. 混合底物溶液
5.50g/L硫酸锌溶液
6. 60g/L氢氧化钡溶液
7.贮存碱溶液
8.δ—萘酚溶液
9.双乙酰溶液
10.1.7mmol/L肌酸标准液
三、实验操作：（60分钟）
1.取试管，按下表所示操作后充分震荡 摇匀、离心（2000r/min）10min
实验试剂添加表
试管
试剂（ml）
测定管
标准管
空白管
血清
肌酸标准液
蒸馏水
底物溶液（37℃预温5min）
1
/
/
0.75
/
0.1
/
0.75
/
/
0.1
0.75
2.混匀37℃水浴箱保温30min
氢氧化钡溶液
硫酸锌溶液
蒸馏水
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
3.充分摇匀、离心（2000R/min）10min，另取3支试管继续如下操作
上清液
δ—萘酚溶液
双乙酰溶液
0.5
1.0
0.5
0.5
1.0
0.5
0.5
1.0
0.5
蒸馏水
2.5
2.5
2.5
4. 混匀37℃水浴15—20min，空白管调0，540nm比色。
计算：
CK单位=（OD测/OD标）x1/标准管肌酸含量（umol）x1/反应时间（h）x1/血清用量（ml）
= （OD测/OD标）x0.17x1/0.5x1/0.1
= （OD测/OD标）x3.4

正常值0.5-3.6单位或8-60U/L。

四、结果评定（10分钟）
1、 血清CK活性的变化可作为评定骨骼肌微细损伤及其适应与恢复的重要生化指标。
2、根据血清CK变化来调节训练强度是科学的，对防止过度疲劳也具有重要意义。

本
课
小
结
（5分钟）
通过对血清肌酸激酶的测定的学习，了解血清肌酸激酶在体育运动中的意义，根据血清CK变化来监控和调节训练强度，防止过度疲劳的发生。

西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第12 次
专业班级

任课教师

课题
视野的测试

课的
任务
学习视野的测定方法，了解体育运动对不同颜色视野的影响。

重点难点

重点掌握视野的概念和测定方法，影响视野的大小因素和体育运动对不同颜色视野的影响。

教

学

内

容

及

组

织

教

法

教

学

内

容

及

组

织

教

法

视野测试
一、实验目的（5分钟）
学习视野的测定方法，了解体育运动对不同颜色视野的影响。
二、实验原理（5分钟）
视野是眼球固定注视正前方时所能看到的全部空间范围。视野的大小取决于视网膜上视觉细胞的分布情况、人的面部骨骼结构以及视觉中枢的机能状态。通过检查视野可以了解整个视网膜的感光功能，并有助于判断视觉传导通路以及视觉中枢的机能。正常人的视力范围在鼻侧和额侧的较窄，在颞侧和下侧的较宽。在相同的条件下，白光的视野最大，依次为黄光、蓝光、红光，绿光视野最小。不同颜色视野的大小，不仅与面部结构有关，更主要的是取决于不同感光细胞在视网膜上的分布情况。有训练的运动员，绿色视野比一般人大。
三、实验器材（5分钟）
器材为视野计、各色视标、视野图表、笔
四、步骤和方法（70分钟）
1、观察视野计的结构和熟悉使用方法
视野计的样式颇多，最常用的是弧形视野计。他是一个安在支架上的半圆弧型金属板，可围绕水平轴旋转360°。该圆弧上有刻度，表示由点射向视网膜周边的光线与视轴之间的夹角。视野界线即以此角度表示。在圆弧内面中央装一个固定的小圆镜，其对面的支架上附有可上下移动的托颌架。测定时，受试者的下颌至于托颌架上。托颌架上方附有眼眶托，测定时附着在受试者眼窝下方。此外，视野计附有各色视标，在测定各种颜色的视野时使用。
2、在明亮的光线下，受试者下颌放在托颌架上，眼眶下缘靠在眼眶托上，调整托架高度，使眼与弧架的中心点在同一条水平线上。遮住一眼，另一眼凝视弧架中心点，接受测试。
3、实验者从周边向中央缓慢移动紧贴弧架的白色视标，直至受试者能看到为止。记下此时视标所在部位的弧架上所标之刻度。退回视标，重复测试一次，待得出一致的结果以后，将结果标在视野图的相应经纬度上。同法测出对侧相应的度数。
4、依次旋转半圆弧，继续检查30°、60°、90°、120°、150°、180°、210°、240°、270°、300°、330°、360°各方位的视野。检查完毕后，将所测各点连接起来就构成视野图。
5、按照相同的操作方法，测定红、黄、绿各色视觉的视野。
6、依同样方法，测定另一眼的视野。
【注意事项】
1、在测试中，要求被测眼一直注视圆弧型金属架中心固定的小圆镜。
2、测试视野时，以被测者确实看到视标颜色为准，不要发生猜测的现象。
3、在实验过程中受试者可略休息，避免眼睛疲劳而影响实验结果。

本
课
小
结
（5分钟）
让学生掌握视野的测试方法以及在运动实践中的应用

西 安 体 育 学 院 授 课 教 案
课次
第 14 次
专业班级
体育系07级
任课教师

课题
磷酸原供能能力的评定

课的
任务
1.学习和掌握磷酸原供能能力的评定
2.学习和掌握血乳酸仪的使用

重点难点
掌握10秒最大负荷测试法