NY∕T 3879-2021 饲料中25-羟基维生素D3的测定(农业).pdf

ICS 65.120 CCS B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准NY /T 3879-2021 饲料中25-挂基维生素D3的测定Determination of 25- Hydroxy Vitamin D3 in feeds 2021-05-07发布2021-11-01实施气缸中华人民共和国农业农村部发布NY/T 3879-2021 本文件111农业农村i;jl畜牧i:.1町iVJ:J:o本文ii11i-1:1叫饲料工收标准化技术委11会的C/TC76)flll 0 牛:x:11赳们lyl位，UfiJ l :药饲料价训11所、叶iJVr维生才!(Ui川有限公，;1，斗1:x: 1 1 t:发起草人1，i1:*耳、商平、H虫、张仍然、Tp.IJ ,1 J札、华贤辉、!(1)I!i、IlIt江、州去i!;、吴gJl1、徐iJ、J、页松松、张ill、王l庞然、民忻111j、ili、1;.、石;:i 0 NY /1 3879-2021 饲料中25-挂基维生素。3的测定范围本文fIFj!了饲料I25 l时lt什I:!r 1)，测定的高效液桐l色谱法;flli位tll色i普:IJ1fA质语法。水文fli陌生虫lHU色Ml;适用于材大r2 mg/k目的添加剂预削什饲料中25J切，仁维生素D:茧的训IJj!，酬包it-*联质i昔法适用f配1tiiJ年革jj1-wikIlPJ1!小l哼r2 mg/ kg (I(J添Jm剂加li1斗饲料i25-1;，基维生东I);茧的测定。本文flj:j放液相色的法1j )干:+1段Effl挝、 1配合饲料。1110g/kg，M古JJIi开IJ2 下列文fl 1仪i主H立;付。3 GB/丁6GB/丁204 高效液相鸪4.1 原理芝F试样依次!J脉教胆舵，世伊4. 2 试剂或材i气飞，4. 2. 1 7(, C l:l/T 48 级工4.2 2 11111(, 仆i普通;，6.4.2.3 85%ljI即浴i液，1t9l.mL1 限为1.0mg/kgo在非1色lHh 5g/kg.主izt吐|琅4.24 标flfjhI付手液(1，南r.I.画也:科I;P电tfM凡在联品权-17卜 A霸r-I，().CAS号6328:，:,6-3, 纯度不低于98%)25mg.IfUVil髦市)Jll日:吁吁电25III百哺吧容tJ:JIl母娘IfJ11陈(.2. 2)i1ifrifi容。二200C下似1f.有效WJ:7:J2个片。4.25 标刷叫1叶小忖忖|尸忖川川I川叩哺jI阳问l日可丁可引1120 m叫1计I阜布i包￥容F4材1吐t扫j瓶阪I中f扣.用l叩jI目醉乎(什1.2. 2幻)定非容￥。于4oC冷藏保存，有放则为2用。4.26 标1fI:l IHJ浴液11(25 f，g/mL)，fI确移取标1fi: 1问f-i液1(1.2. 5)5. 00 mL于20mL棕色有力一i瓶1 .JJj甲醇(1.2.2)定容。II:i月1现配。4. 2 7 标fI系列济液分)11ifllifl自移取标fj:lj问浓浓川(.2.6)适4甘于棕色谷t，-tmi 1 .丹j85% 111醉i容液(4.2.3)衍料定容阳已成怀fI:系列浴液，浓Jjt分别为0.05flg/ mL, 0. 5 Vg/mL,1 g/mL，5 f，g/mL、10g/mL、25g/mLoIliiJIIJli。4. 2 8 微孔剧院，0.22fm.有机系。4. 3 仪器设备4.3. 1 高效H1 1包前仪。阿1J紫外检由!IJf，N/二极管|吗，;IJ检测报目NY/T 3879-2021 4. 3. 2 分析Jd，.，!i)I挝O.I01g平:11O . 01 O1Ro 4. 3. 3 ;t.心机转速不低f9 000 r/01ino 4.3.4 起i111波仪:OJ韦小低于280W。4. 4 样品投GB/l20195的规定和l备试样.罕.少200g，粉伴攸W吁书通过0.420101孔价的分析筛.f，分lil-J , 装入!如门JfIii .避光仇，(-(.备用。4. 5 试验步骤4. 5 1 试样溶液的制备平行做2份试峻。称收试样3g，叫Uif(J写写0.0001日，7日50mL，.尚t与l心官货iE吕i;中1扣，j)川JI川11/水11 克句千克(mg/kg)。p, 从标1fi11I1线查得的政科浴il支25辰J，f川-片J)J flq质量浓度的数fIl.单位7-1微先句也JI(同1m!.)，V, 试样的泌的体积的数1.Y.-f.主J.1R:JI(mJ.), 1/ J付1济浓的稀释1t1敛，川l式样l贝-Id飞的数缸，11.1为此(g)。-，1 , 八试中I济液中A.一一标lfI浴液中5 2 5. 2 1 5.22 5. 2 3 5. 2. 4 5.2.50.1%ljll主IjJ5. 2. 6 o. 1 % 1 jI眼前i位，1 527 W有被85n、LO . 1 528 标IfH，的-(;干部液(1mg/ mlJ , j且不低于98%)25mg.lfI;硕1至0.01mg. i 下保存.有放WJ为2个月。(2) Jt11术平均JI.j,2 1欠独立llll6)衍l料?f100 mL，棍匀。(), H,O.CASJ),63283-36 3，t也, . JTJI jI部(5.2.3)浴ff.将.f-20C 5. 2 9怀捕1li 1浓浓(1/ig/mLl叫1ifO移取25J.-? Jnfro生素。可-1，1、1111ih千;-I恰IIU(5 .2.R)1.00 mL J J 000 mLtj、包容地瓶中.闸门ljli(5.2.:n定容。f4 C玲i般保齐，有效JJJ11 j.q。5.2 10 内标1i打伤部液(50/1g/mJ.)称lIi25-J刊，fI:tlc:/;-J),-d6衍;1fUr!，(CAS,78782 98 6.HJ.且不低于98%)2. 5 mg.削阶罕O.01 mg. , r 50 m L棕也有-!-;tmi巾.).11 l if( 5. 2. 3li如liif定料。r一20C下保存.有效期为2个川。5.2. 11 内抓了111阳被(1g/mU削价移l内fiJ;ih价部fU(5.2.10)LOOmL于50mLt;、包容挂瓶1. )TIIII由于(5.2.3)稀粹主主容。I恼HIJjt肥。5.212 、111系州市液州确移Jlx适销标泊中间的被(5.2. 9);fJlI)才标工作浴液(5.2.11)于你也容+;tJai1 . 3 NY/ T 3879-2021 川n和液(5.2. 711有iff.主容，配J&.f，lfI 系夕IJi衍!.浓j立分别为2ng/mL.5 ng/m1.、10ng/m1.、50n日/mL、1011 ng/m1.、500ng/ m 1.0 I!q标浓l立为100ng/ m1.o Ilif，HD丑!阳。5. 2 13 微孔刷出口。22m.有机系。5. 3 仪器设备5.3. 1 在相包i汗:1:股民谱仪:陀l .1贞穿南子源.5.3.2 分析夭平1:&-1;:(o. 1 mg 刷1O . 01 mgo 5. 3. 3 向心相LiOJ主不低于9000r/ mino 5 3. 4 振荡#揣片拍振民荡药拟5束f不低氏r1 500 r/川m川11川1111门川n53.5 1，涡芮版旋:川Ilt介2揣吕札 5.3.6 1k(11X仪。5. 4 样品位(GB/T20195的规定制备试样.军少200g.粉碎使其全;i11边过0.42mm孔役的分析筛，fc.分1M6.) 税人!拷l二1I阳1，il，O(;保存，备用。5. 5 试验步骤5.5. 1 试样溶液的制备5. 5. 1. 1 配合饲料试样溶液制备平行做2份i验。称取试样2g，1fj确至0.0001 g，叫于50时Jyk心管11，1!UifflJm人20011.1人l.f，工作WI被(5.2.11)和5rnl. 水，涡旋ile匀JI气，于1500 r/min振荡仪Jli(20 min，削阶)JII人20.00时，MTI3E (5. 2. 2) ，混匀.继绒服份提取20 min，于9000r/min芮心5min，削阶移取土i，ifIO.OOm1.1二ni心l;111, 500C主(1次至|二。HI确)m人1.00 m1. Ui将被(5.2.7)复持.过0.221川、旅膜，待七机。5.5. 1.2 浓缩饲料试样溶液和l备、|人行做2份试份。*fJ;取试样2g，1fI确至0.0001g,jv(-r50 m1.离心笆1.1fI确!JII入40011.1).1标工作的;性(5.2.11) ,f11 5 m1.水，涡放说匀后.丁I500 r/rnin振荡提 取20min，叫u内)111人20.00时，MTI汪(5.2.2)混匀纳纹振荡提取20rnin，干9000r/ min Tf.心5min，lfHiffl移取上7， n也10.00mL于同心价中，50 C1k(1次至二|二。IfH内川l入2.00mL复浴被(5.2.7lU梢，过O.22m iJt.1段，将|机。5.5.1.3 添加剂预混合饲料试样溶液和l备.11.行放2份W!J击。称取试r(，2 g, I!Hiffl写-o. 000 1 g，i于50mL 7心4号1.1f1确川人401.内标fi市街?在ifH5.2. 10),f11 5 m1.水.11阳在ili匀后，干1500 r/min振荡挝Jlit20 min.1II矿。)JII人20.00m1. MTI汪(5.2.2)，il苍生j继续振荡提取20min. r 9 000 r/ min I勾心5min, IfHif自;fJ;llitL!，i液1.00 m1.于1坷，1二、1;rl-1, 50 oC 1!i(气l次罕千。l1Uiffl)m人1.00 m1.主i1年液(5.2.7)复浴，过0.221，m泌l隙，刽1.机。5. 2夜榈色i昔参考条件已i苦柱WalCI只I-ISS13 C18料，氏100mm.I),!11 2. 1 mm.粒径1.8111.域性能相当者。在I:i且30C . 流动相，A桐1:;1;0.1%甲酸背币!(5.2. 6), B相声10.1%11.1阪1醉浓浓(5.2. 5) ，f，1lJ支洗脱税!JI，表2.表2梯度洗脱程序II.tlhj.min 八相1.%1相.%0.00 15 85 1. 00 15 85 :l. 00 o 100 6.00 。100 10.00 15 85 川、v川巳rsH陆r:JIIIJHI1沃特l仕(W;ltcr叶公司捉快的也泊位向idr .约LUl主-f, J,Ul!i J.J丁1Ni水部分的f川手.)j不N./J、对I生产III (y.)认叫.且Jl他哼效产品J!.(，桐II， iJ(l效果.则IIf!l!川i主些非效产品.NY / T 3879-2021 流速，0.:1ml./ min. i芷何一+;L101.。5. 5. 3 质谱参考条件电Tl方式1:I:!.Ift3问:!.11 iE tti子极式(1二句l丁。检J!IJ方式多反应lfi圳IJ(MRM) 。离子源温度:150C。第化部温度350.C. !包;o;:rI:lF!，:，3.5kV.多反I.lyW!IJ ( M R M)肉子川、透倪1l!.J-!;及(H阜自ETII见表3。表325经基维生素)3的多反应监测(MRM)离子对、透镜电压及碰撞能量的参考值被测物名品、检测离于对透镜屯月1碰缸能力i川/zV cV 401.3257. 1 00 11 25段基封1:生;KD.I 1 01. 33S:l. 2 90 11 401. 3:165. 3 90 11 25控，维生1;1 d6 107.2371. 6 03 10 a 为1盐肉r.5.5.4 测定5.5.4.1 标准系列溶液和试样溶液测定在仪片片的:lI1:上条例下.分);IJil.f; 1lI系列浴液(5.2.12)和试样济液(5.5.l)上机拍!IJ;:i二。25句f2，W4!1)，平1125控基维生素)d日的定主r勾子包i作|冬|见附录B.5.5.4. 2 定性在相同试盼条件下，试样院液与标lfI系列前￥液中25-登基维生素队的似阳时间非II;(.J偏差应在+2.5%之内。根据表3选择的定ttTl子对.比较试桥附阁125- )军基维生东)3定性121子的相对121子二1:)立与浓度核近的标准系列浴液小对应(19.ii性Tk子的才1-x,t ，2.子工|眩，若偏差不超过表4规定的范l叫.j!11可判定为样品中存在对I.的25- )宝玉fI*东叭。相对句子丰!且%w:.k允内偏差%5. 5. 4. 3 定量表4定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差50 上20 20-50 土25 10-20 士:lO以25泾i维生东1).(19浓度:lml标.25-f:基维生素)3与25登基维生素I工d6包m.峰llf)(比值为纵坐标，绘制中4月jllIl线，标lfI1111绒的相关系数战斗二低于O.99。试样溶液与标1111有副主125 )妇1LjK), (I(J响应值均应在仪器检测的线卡|也11;1内，直IIMin范|啊，应将试样部液ff1u陷浓(5.2.7)做才111 ;7. Tft;释后置新测定。单点校叫1):tt时，试样悄浓125辰1kl:紊D，(1浓度与标111溶液浓)互相主斗、超过30%。5.6 试验数据处理试样中25- )登基w叶=东I)，(CHO， 1-1，0)含扯以质fIf分数讨。多校月1按公式(3)汁17，frIjlt校巾，内标法按公式(4)计好。也主主己卫1JI X V1 式叶tw, 试样1125归主f生京1)(C.1.7 1-1,., (), 1-1，0)含量的数俏，单位为微克创千克(J)g/kg); 向一一-从标准1111线查仰的iJy样溶液25段基w生东1)3质-ht浓度的敛丘，单位为纳克句247|(ng/mlahV，一一提取浴液(MTI:l巳)体积的数们，lY位为宅f+1忆l6 附录A(资料性)25瓷基维生素)，标准溶液(5g/mL)液相色谱图25 P千基维生芳n标Iflm液(51g/mU副主利l色，113再l见|￥IA.l . 同向1血11(，AU 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 。00。2 -7.191 4 6.00 8创10.00 12.00 14田16回图.125瓷基维生素)，标准溶液(5问/mL)液相色谱图NY/T 3879-2021 1820.00 l,min 7 NY/T 3879-2021 附录日(资料性)25-瓷基维生素1)3标准溶液(50ng/mL)定量离子色i昔图25-)于1ft1:京l标月1持i由(50ng!mL)液中u也i刮到见|每II:l. I 0 日10 l,rlllll NON-mh凹同MZ9峰3峰rl1因农业CltJjcT!T中J阿113:叫1邮政编码100125|呵111:Vww. ccap. :0111. cn) 北京印川厂clJlI;11新华.:gm_I);t发行所发行各地新华HJ.II经创说1i1 1 半数20千千2021年10Jl Jt京Zl11(欠印刷IJx 川-js:880mmX 12Omm 1/16 2021年10月那l版IFj., 16109. 8671 定价，32.00元x 版权专有侵权必究举报电话[phone] NY/T