资源描述
一、名词解释
1、顺式作用元件:是转录调整因子的结合位点或DNA序列,包括开启子、增强子和抑制子。
2、增强子:就是远离转录起始点、决定组织特异性体现、增强开启子转录活性的特异DNA序列,其发挥作用的方式与方向、距离无关。
3、同位酶:识别相同的序列但切割位点不一样样的酶。
4、顺反子:产生一条多肽链或功效RNA所必需的所有核苷酸序列。
5、回复突变:一个等位基因能够突变为其相正确另一个等位基因,反之,另一个等位基因也能够突变为本来的基因,这种突变叫作回复突变。
6、衰减子:在色氨酸操纵子中的一个区域,此区域以形成不一样二级结构的方式,利用原核生物转录与翻译的偶联对转录进行调整。此区域只存在于原核生物合成代谢的操纵子中。
7、切刻平移:用DNA聚合酶I在有缺刻的DNA双链上一面进行5′→3′的外切,一面进行DNA合成,使缺刻在DNA上发生平移的过程。此过程也是制备放射性探针的一个措施。
8、减色效应:变性DNA复性后,在260nm的吸取值减少的现象称为减色效应。
9、巢式PCR:是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。 在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。
10、核受体:细胞内受体分布于胞浆或核内,本质上都是配体调控的转录因子,均在核内开启信号转导并影响基因转录,统称核受体。
11、增色效应:当核酸变性后,其260nm的紫外吸取增加的现象。
12、负超螺旋:两股以右旋方向缠绕的螺旋在外力向松缠的方向捻转时,产生一个右旋的超螺旋以解除外力捻转导致的胁迫,这么形成的超螺旋为负超螺旋。
13、限制性内切核酸酶:是一类能识别和切割双链DNA分子中特定碱基次序的核酸内切酶。
14、复制子:含有一个起点的复制单位。其长度等于相邻两个复制起点间的距离。
15、半保存复制:在DNA复制过程中亲代DNA分子的两条链首先解螺旋和分离,然后以每条链为模板,按碱基互补配对标准,合成两条与模板链互补的新链。这么从亲代的一个双螺旋DNA分子形成了两个与原先的碱基序列完全相同的两个子代DNA分子。每个子代DNA分子中有一条链来自亲代,另一条链是新合成的,这种的复制方式称为半保存复制。
16、密码子:mRNA上每3个相邻的核苷酸编码蛋白质多肽链中的一个氨基酸,这三个核苷酸就称为一个密码子或三联体密码。
17、质粒:细胞染色体以外的,能自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。
18、Holliday 结构:是以英国生物学家Robin Holliday的姓氏命名的一个发生在DNA分子之间的"交叉"(Crossing-Over)结构。
19、Pribnow box:在细菌开启子结构中,从起点上游约-10处找到6bp的保守区域,其保守序列为TATAAT。
20、转录:以DNA分子中的一条链为模板,按照碱基配对标准,合成出一条与模板DNA链互补的RNA分子的过程。
21、RNA拼接:是指把hnRNA中的内含子切除而把外显子连接起来产生成熟的mRNA分子的过程。
22、分子杂交:互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,能够依照所使用的探针己知序列进行特异性的靶序列检测。
23、同源重组:同源重组又称一般性重组。由两条同源区的DNA分子,通过配对、链断裂和再连接,而产生的片段间互换过程。
24、基因组:基因组是指生物体或细胞中,一套完整单体的遗传物质的总和;或指原核生物染色体、质粒、真核生物的单倍体染色体组、细胞器、病毒中,所含有的一整套基因,包括基因和基因之间区域的所有DNA。
25.逆转录转座子:一类移动因子在转座过程中需要以RNA为中间体,通过逆转录过程再分散到基因组中。
26.断裂基因:断裂基因是指基因的编码序列在DNA分子上不是连续排列的,而是被不编码的序列所隔开。
27.C值:真核生物单倍体基因组所包括的所有DNA量称为该物种的C值。
28.内含子:存在于初始转录产物hnRNA中,但在成熟的RNA中并不存在的DNA序列。或者说在不连续基因中无编码功效的区段称为内含子
29.Klenow片段:DNA聚合酶I被蛋白酶切开得到的大片段称为Klenow片段。
30.终止因子:协助RNA聚合酶识别终止信号的蛋白因子称为终止因子。
31.操纵基因:编码合成那些参加基因体现调控的RNA和蛋白质的特异DNA序列。
32.翻译跳跃:核糖体跳过一大段mRNA后继续翻译称为翻译跳跃。
33.结构基因:结构基因是编码蛋白质或RNA的基因。
34.回环模型:当两条链同时复制时,后随链模板通过复制叉的部位就形成一个回环,以适应双链同时向前行进,这种复制模型称为回环模型。
35.阻遏蛋白:阻遏蛋白是负调控系统中由调解基因编码的调解蛋白,它自身或与辅阻遏物一起结合于操纵基因,阻遏操纵子结构基因的转录。
36.开启子:开启子指确保转录精准而有效地起始的DNA序列。
37.复制子:基因组内能够独立进行复制的单位称为复制子或复制单位
38.外显子:在不连续基因中有编码功效的区段称为外显子
39.转座子:转座子(Tn)是在基因组中能够移动的一段DNA序列。
40. 转座:转座子由基因组的一个位置转移到另一个位置称为转座。
41.核酶:具备催化功效的RNA分子称为核酶
42.可读框(ORF):从起始密码子起到终止密码子的区域,由计算机识别出也许的编码区域。当没有已知蛋白产物时,称可读框(潜在的编码区)。
43.基因突变:基因突变是在基因内的遗传物质发生可遗传的结构和数量的变化,一般产生一定的表型。
44.抑癌因子:也叫抑癌基因,是一类抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因。对于正常细胞,调控生长的基因(如原癌基因等)和调控抑制生长的基因(如抑癌基因等)的协调体现是控制细胞生长的重要机制之一。常见的抑癌基因:P53、Rb、Pl6、APC、DCC等。
45.受体:受体是细胞表面或亚细胞组分中的一个分子,能够识别并特异地与有生物活性的化学信号物质(配体)结合,从而激活或开启一系列生物化学反应,最后导致该信号物质特定的生物效应。
二、填空题
1.DNA是由 脱氧核糖核苷酸 为基本组成单元以 3′,5′-磷酸二酯 键连接形成的长链分子。
2.转座子基因可编码 转座 酶,该酶能够使转座子从DNA跳到 另一DNA位置 。
3.真核生物翻译时,起始氨基酸为甲硫氨酸,核糖体为80S。
4.DNA复制时,一条链连续合成,称之为 前导 链,另一条链间断合成叫 随即 链。
5.基因工程常用载体有 质粒 和 噬菌体 。
6.真核生物RNA转录后加工包括5′端 形成特殊的帽子结构 和3′端 添加多聚腺嘌呤苷酸(polyA)尾巴 。
7.原核生物开启子的-10区的功效是 紧密结合部位 ;-35区的功效为 RNA聚合酶的识别部位 。
8.DNA变性后紫外线吸取值增加称为增色 效应。变性后氢键 键断裂。
9.核糖体从5′端到3′端连续阅读mRNA上的密码子,从而决定蛋白质从N端到C端的序列。
10.证明DNA是遗传物质的知名试验有肺炎球菌感染小鼠 和T2噬菌体感染大肠杆菌 。
11.光复活作用能直接修复DNA损伤,它需要在 光 条件下,由 光激活 酶参加完成修复。
12.DNA双螺旋结构中碱基配对方式是 A-T 、 G-C 。
13.动物体含量最多的蛋白质是 胶原蛋白 ,它具备较多的 丙氨酸,因此有很好的弹性。
14.原核生物开启子具备 -10 序列和 -35 序列,前者为解旋序列,后者是开启子识别序列。
15.蛋白质是由 氨基酸 为基本结构单元以 肽 键连接起来的长链大分子。
16.转化试验证明了 DNA是遗传物质 。它采取 肺炎双球 菌在小鼠体内接种。
17.基因组是指 一个生物体整套单体的的遗传物质 。二倍体细胞的基因组是能维持配子和配子体正常功效的最低数目标一套染色体(或全套基因)。
18.位点特异性重组和转座均需特异性酶参加,分别称为 整合酶和 转座 酶。
19.真核生物mRNA需要加工后才能进行翻译,加工方式包括5′加帽、3′端添加多聚腺嘌呤苷酸(polyA)尾巴 、 剪切内含子,拼接外显子 三种。
20.tRNA依托自身的 反密码子识别mRNA上的 密码子 来特异性转运氨基酸。
21.原核细胞核糖体的 小 亚基上的 16S rRNA 协助识别起始密码子。
22.B-DNA为 右手 螺旋,Z-DNA为 左 手螺旋。
23.在大肠杆菌中,DNA聚合酶II重要参加 DNA损伤修复 。DNA聚合酶III重要参加 DNA复制 。
24.环状DNA双链的复制方式重要能够分为θ 型复制;滚动式复制 ; D环复制 三种类型。
25.真核生物核糖体由__40S_小亚基和__60S_大亚基组成。
26.原核细胞的起始氨基酸是__甲酰甲硫氨酸_,起始氨酰-tRNA是___fMet-tRNAfmet_。
27.原核生物的核糖体由___30S_小亚基和__50S__大亚基组成。
28.蛋白质合成的起始密码子是AUG 。
29.当DNA复制时,一条链是连续的,另一条链是不连续的,称为 半不连续 复制。
30.复制得到的子代分子,一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种方式叫 半保存 复制。
31.DNA的Tm值与 DNA的均一性 , G-C碱基正确含量和 介质中离子强度 等原因有关。
32.依照对DNA序列和所需蛋白质因子的要求,能够把重组分为4类 同源重组 , 位点特异重组 , 转座重组 ,和 异常重组 。
33.RNA聚合酶在RNA转录中起重要作用,它是在 DNA模板 的指引下,以 脱氧三磷酸核苷酸(dNTP)为底物,沿5′→ 3′方向催化合成新生的RNA链。
34.大肠杆菌有两类终止子,一类是不依赖ρ因子的终止子(简单终止子);另一类是 依赖ρ因子的终止子 。
35.原核生物翻译终止时有 RF-1 、 RF-2 和 RF-3 三种释放因子。
36.肽链的延伸过程由3个步骤,① 进位 反应,② 转肽 反应,③ 移位 反应。
37.蛋白质的生物合成是以mRNA为模板,以 氨酰—tRNA为原料直按供体,以核糖体 为合成杨所。
38.生物界共有64个密码子,其中编码氨基酸的有61个。
三、单项选择题 (每题1分,共10分)
1.紫外线引起的DNA损伤可直接修复,该修复机制称为 [ A ]
A.光复活 B.切除修复 C.重组修复 D.SOS作用
2.真核生物基因组中的高度重复序列是 [ D ]
A.结构基因 B.外显子 C.调整基因 D.卫星DNA
3.DNA复制时的引物是 [ D ]
A.蛋白质 B.核酶 C.DNA D.RNA
4.乳糖操纵子中直接控制结构基因转录的DNA结构是 [ C ]
A.开启子 B.调整基因 C.操纵序列 D.乳糖
5.RNA合成的特性不包括 [ A ]
A.以4种dNTPs为原料 B.RNA聚合酶催化
C.只需要一条DNA链为模板 D.从5′向3′,端延伸
6.天然DNA的重要结构是 [ B ]
A.A双螺旋 B.B双螺旋 C.C双螺旋 D.Z双螺旋
7.识别RNA上的密码子重要靠哪种RNA_12的反密码子 [ C ]
A.mRNA B.rRNA C.tRNA D.snRNA
8.原核生物转录终止时重要依托 [ A ]
A.ρ蛋白对终止区的识别 B.终止的茎环结构 C.σ因子的作用 D.RNA与DNA的相互作用
9.下面哪种分子的紫外吸取值最大 [ D ]
A.单链DNA B.双链DNA C.RNA D.核苷酸混合物
10.密码子的性质不包括 [ D ]
A.不一样位置碱基有特异性 B.不间断阅读 C.通用 D.阅读方向与mRNA编码方向相反
11.如下哪一个具备260nm的最大吸取值 [ B ]
A.双链DNA B.单核苷酸 C.RNA D.蛋白质
12.大肠杆菌和真核生物染色体的共同点是 [ D ]
A.环状DNA B.有核小体 C.位于核内 D.DNA形成负超螺旋
13.大肠杆菌复制的原点是 [ B ]
A.RecA B.OriC C.attP D.DnaB
14.遗传密码的特性是 [ A ]
A.简并性、无逗点、几乎通用 B.简并性、重叠、通用
C.不简并、无逗点、通用 D.不简并、无逗点、几乎通用
15.大肠杆菌释放因子识别 [ A ]
A.UAA B.AUG C.GUU D.UUA
16.RNA转录不需要 [ D ]
A.模板 B.NTP C.RNA聚合酶 D.引物
17.卫星DNA属于 [ D ]
A.单拷贝序列 B.少许重复序列 C.中度重复序列 D.高度重复序列
18.核酶的化学成份是 [ A ]
A.DNA B.RNA C.蛋白质 D.多糖
19.如下哪个是亚氨基酸 [ A ]
A.脯氨酸 B.赖氨酸 C.色氨酸 D.组氨酸
20.在真核细胞中肽链合成的终止原因是 [ D ]
A.已达成mRNA分子的尽头 B.具备特异的tRNA识别终止密码子
C.终止密码子自身具备酯酶作用,可水解肽酰与tRNA之间的酯键
D.终止密码子被终止因子(RF)所识别
21.严格来说,下列哪种氨基酸属于亚氨基酸 [ C ]
A.天冬氨酸 B.谷氨酸 C脯氨酸 D.亮氨酸
22.组蛋白和非组蛋白与DNA结合方式分别是 [ C ]
A.特异性结合 特异性结合 B.非特异性结合 非特异性结合
C.特异性结合 非特异性结合 D.非特异性结合 特异性结合
23.Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于 [ B ]
A.A型 B.B型 C.Z型 D.E型
24.真核DNA和原核DNA的复制方式分别是 [ A ]
A.半保存方式 半保存方式 B.半保存方式 全保存方式
C.全保存方式 半保存方式 D.全保存方式 全保存方式
25.噬菌体ΦX174的DNA复制模型是 [ D ]
A.θ单向 B.θ双向 C.D环 D.滚环
26.DNA变性后,如下哪条键断裂 [ D ]
A.肽键 B.糖苷键 C.磷酸二酯键. D.氢键
27.胶原蛋白重要的氨基酸组成是 [ A ]
A.丙氨酸 B.脯氨酸 C. 色氨酸 D.蛋氨酸
28.测定DNA序列的酶法又叫 [ B ]
A.水解法 B.末端终止法 C化学法 D.外切法
29.下列属于原核生物基因特点的是 [ A ]
A.单一序列 B有核小体 C.有内含子 D.结构复杂
30.Shine—Dalgarno次序(SD-次序)是指 [ D ]
A.在mRNA分子的起始码上游4-13个核苷酸处的次序
B.在DNA分子上转录起始点前4-13个核苷酸处的次序
C.16srRNA 3′端富含嘧啶的互补次序 D.开启基因的次序特性
31.E.coliDNA复制时重要的聚合酶是 [ C ]
A.DNA聚合酶I B.DNA聚合酶Ⅱ C.DNA聚合酶Ⅲ D.拓扑异构酶Ⅱ
32.紫外线对DNA的损伤可通过哪种方式直接修复 [ A ]
A.光激活作用 B.切除修复 C.重组修复 D.SOS作用
33.RNA聚合酶β亚基的作用重要是 [ C ]
A.识别开启子 B.结合DNA C.催化聚合 D.与聚合酶形成全酶有关
34.乳糖存在时,有关酶的浓度的变化为 [ B ]
A.增大 B.减少 C.不变 D.无法确定
35.下列点突变中, 不属于碱基替代中的颠换 [ C ]
A.T → C B.G → T C.C → G D.A → C
36.在E.coli的RNA聚合酶中,负责识别DNA分子上RNA合成起始信号的亚基是 [ D ]
A.α B.β C.β′ D.σ
37.在真核生物基因组中,卫星DNA属于 [ D ]
A.单拷贝序列 B.低度重复序列 C.中度重复序列 D.高度重复序列
38.在真核基因体现调控中,增强子和缄默子属于哪一水平调控 [ B ]
A.DNA水平 B.转录水平 C.转录后水平 D.翻译水平
39.通过转基因创造动植物优良新品种过程中,常采取的载体是 [ B ]
A.克隆载体 B.体现载体 C.转移载体 D.探针载体
40.DNA限制性内切酶酶切片段的排列次序是 [ B ]
A.遗传图谱 B.物理图谱 C.转录图谱 D.全长序列图
41.核糖核酸酶H作用的对象是 [ C ]
A.双链DNA分子 B.双链RNA分子
C.DNA-RNA杂合分中的RNA D.DNA-RNA杂合分子中的DNA
42.在有Mg2+而无C02+存在情况下,末端转移酶能在如下哪种分子末端加上单核甘酸 [ C ]
A.双链DNA分子缩进去的3′-OH B.双链DNA分子平头末端的3′-OH
C.双链DNA分子凸出的3′-OH D.以上均可
43.多个密码子编码一个氨基酸的现象,称为密码子的 [ B ]
A.复杂性 B.简并性 C.多形性 D.不可知性
44.下列有关TATA盒(Hognessbox)的论述,哪个是正确的 [ B ]
A.它位于第一个结构基因处 B.它和RNA聚合酶结合 C.它编码阻遏蛋白 D.它和反密码子结合
45.有关DNA链的描述哪条不对?(D)
A.DNA是由诸多脱氧单核苷酸形成的多核苷酸 B.DNA的5′ 端是-OH基,3′ 端是磷酸
C.单核苷酸之间通过磷酸二酯键相连 D.DNA的一级结构是指dAMP,dGMP,dCMP,dTMP的排列
46.真核细胞mRNA的加工修饰不包括:(A)
A.除去非结构信息部分 B.在mRNA的3′ 末端加polyA尾巴
C.通过较多的甲基化过程 D.在mRNA的5′ 末端形成帽子结构
47.基因体现产物是( D )。
A. 是DNA B. 是RNA C. 是蛋白质 D. 大多是蛋白质,有些是RNA
48.下面哪些原因可预防DNA上的一个点突变表目前蛋白质的一级结构?( D )
A.DNA的修复作用 B.密码的简并性 C.核糖体对mRNA的校正 D.以上都正确
49.蛋白质生物合成中多肽的氨基酸排列次序取决于( C )
A.对应tRNA的专一性 B.对应氨酰tRNA合成酶的专一性
C.对应mRNA中核苷酸排列次序 D.对应tRNA上的反密码子
50.对应于mRNA中密码子AGG的tRNA反密码子三联体是( B )
A.AGT B.CCU C. GCA D.TGC
51.tRNA参加的反应有( D )。
A.转录 B.复制 C.反转录 D.翻译
52.细菌核糖体由( B )亚基组成
A.20S,40S B.30S,50S C.40S,60S D.50S,70S
53.如下哪个不是遗传密码的特性?( A )
A.密码子与氨基酸的数量相同 B.密码子并非在任何物种中都通用
C.某些氨基酸由多个密码子编码 D.密码子是简并的
54.基因组是( D )
A.一个生物体内所有基因的分子总量 B.一个二倍体细胞中的染色体数
C.遗传单位 D.生物体或细胞中,一套完整单体的遗传物质的总和
55.从一个复制起点能够分出几个复制叉?( A )
A.2 B.3 C.4 D.4个以上
56.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码子?( C )
A.苯丙氨酸; B.酪氨酸; C.甲硫氨酸; D.S-腺苷蛋氨酸
四、多项选择题
1.DNA复制包括 [ ABC ]
A.引物形成 B.有冈崎片段产生 C.半保存复制
D.一条链沿5′向3′方向合成,另一条链则相反 E.DNA聚合酶Ⅱ是重要聚合酶
2.位点特异性重组的特性有 [ ABDE ]
A.有同源序列 B.在特定位点重组 C.RecA蛋白参加
D.整合酶是重要的重组酶 E.有Holliday结构形成
3.真核生物的多聚A尾有多个功效 [ ABCD ]
A.稳定RNA B.与RNA穿过核膜有关 C.与翻译调控有关
D.与翻译起始时核糖体的结合有关 E.确保RNA的活性
4.核糖体的成份包括 [ AD ]
A.蛋白质 B.多糖 C.DNA D.RNA E.脂肪
5.有关病毒的遗传物质,不正确的是 [ ABCE ]
A.蛋白质 B.DNA C.RNA D.DNA和RNA E.DNA或RNA
6.细胞膜具备 [ ABCDE ]
A.磷脂双层结构 B.丰富蛋白质 C.流动性 D.不对称性 E.选择性通透
7.DNA变性包括 [ ABE ]
A.氢键断裂 B.分开为两条单链 C.DNA骨架分解 D.变为单核苷酸 E.紫外吸取增加
8.载体应具备 [ ABCE ]
A.能自我复制 B.有识别标志 C.尽也许小 D.特性明确 E.有克隆位点
9.Z-DNA的特点有 [ ABE ]
A.呈锯齿状 B.嘌呤嘧啶单一交替序列 C.螺旋每圈有11个核苷酸
D.天然DNA中不含Z-DNA E.也许与基因调控有关
10.cDNA: [ ABDE ]
A.不含内含子 B.可用mRNA反转录合成 C.有割裂基因
D.合成时需要dNTP E.克隆时两端需要加接头
11.Crick最初提出的中心法则包括 [ ACE ]
A.DNA复制 B.RNA复制 C.转录 D.逆转录 E.翻译
12.DNA生物合成中需要如下哪些酶参加 [ ABCDE ]
A.引物合成酶 B.解旋酶 C.解链酶 D.DNA连接酶 E.DNA聚合酶
13.目标基因的制备措施有 [ CDE ]
A.DNA复制 B.RNA转录 C. mRNA逆转录 D.化学合成法 E.限制性内切酶切取
14.真核细胞mRNA的加工修饰包括如下内容 [ ABDE ]
A.切除内含子,连接外显子 B.5′端接上“帽子”
C.3′端接上CCA D.3′端添加多聚(A)尾 E.碱基甲基化
15.蛋白质生物合成中的终止密码子是 [ ADE ]
A.UAA B.UAU C. UAC D. UAG E.UGA
16.如下哪些是遗传密码的特性?( BCDE )
A.密码子与氨基酸的数量相同 B.密码子并非在任何物种中都通用
C.某些氨基酸由多个密码子编码 D.密码子是简并的 E.阅读是有方向性的
17.下面哪些碱基对能在双链DNA中发觉?( CE )
A.U-A B.G-A C. G-C D. G-T E. T-A
18.滚环复制:( BDE )
A.是细菌中重要的复制机制。 B.允许起始复制子的扩增。 C.总是生成原初复制子的双链环状拷贝。 D.是细菌噬菌体DNA复制的通用机制。 E.在复制子内存在切口的蛋白的基因是自调控的。
19. 同功受体是:( CD )
A.多个tRNA能够识别同义的密码子(第二个碱基简并)。 B.多个tRNA可与一密码子作用。
C.对应同一氨基酸的多个tRNA。 D.可被同一 氨酰-tRNA合成酶识别的多个tRNA。
E.识别同一终止密码的多个tRNA ,由此导致通读。
20. 选出所有正确的论述。( AC )
A.外显子在基因组和cDNA中次序相同。 B.内含子一般被翻译。
C.人体中的所有细胞含有相同的一套基因。 D.人体中的所有细胞体现着相同的一套基因。
E.人体中的所有细胞均按相同的方式拼接每个基因的mRNA。
五、简答题
1、简述(原核生物)蛋白质生物合成的重要过程。
答:蛋白质的合成大体分为四个阶段:
(1)氨基酸的活化。 在氨酰—tRNA合成酶的催化下,氨基酸与对应的tRNA结合生成氨酰—tRNA。
(2)肽链合成的起始。 在起始因子的参加下识别mRNA上的起始信号,并与核糖体亚基和起始氨酰—tRNA组装成70S的起始复合物。
(3)肽链的延伸。 通过进位、转肽和移位三个步骤的循环延长肽链。
(4)肽链合成的终止与释放。当遇到终止密码子时,肽链从核糖体上释放出来。然后,tRNA脱落,核糖体解离。
2、简述(双脱氧)末端终止法测定DNA序列的原理。
答:利用双脱氧末端终止法测定DNA序列,首先要合成与其互补的带标识末端的单链DNA。
合成DNA所用的底物是4种 2′-脱氧核苷三磷酸,在DNA链中核苷酸以3′,5′-磷酸二酯键连接。2′,3′ddNTP的核糖3’位缺乏羟基,因此当ddNTP通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中时,因为没有3′羟基,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,即发生碱基特异性链终止。因此,在4组独立酶反应中分别采取4种不一样的ddNTP,成果将产生4组长度不一的、相差一个碱基的寡核苷酸链,它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。
用聚丙烯酰胺凝胶电泳,使相差一个碱基的单链DNA分离,读出待测模板DNA的核苷酸序列。
3、写出5种参加DNA复制的酶或蛋白质(或蛋白因子)及其作用。
答:(1)DNA聚合酶: 当有底物和模板存在时,DNA聚合酶可将脱氧核糖核酸逐一地加上具备3′-OH末端的多核苷酸链上形成3′,5′-磷酸二酯键。
(2)引物酶 和引起体:引物合成酶也叫引起酶,以DNA为模板合成一段RNA,这段RNA作为合成DNA的引物。引起前体与引起酶结合组装成引起体,识别起始位点。
(3) DNA连接酶:连接酶催化双链DNA中一条链上的缺口共价连接。缺口上的3′-OH与5′-磷酰基必须相邻。它是DNA复制、损伤修复和重组中不可缺乏的重要酶类。
(4)DNA解螺旋酶:将DNA的两条链打开。
(5)拓扑异构酶:兼具内切酶和连接酶活力,能使DNA超螺旋担心状态与松驰状态相互转化。
(6)单链结合蛋白:结合在解开的DNA单链上,预防重新形成双螺旋。
4、写出5种体外扩增技术所有聚合酶及其特点。
答:(1)聚合酶链式反应(PCR)。 Taq DNA聚合酶,耐热。特点有特异强;灵敏度高;简便、迅速;对标本的纯度要求低等。
(2)链替代扩增技术。用DNA聚合酶(如cxo-Klenow)。特点:①无外切核酸酶活性;②于缺口处开启反应;③可利用dNTPas;④具备链置换活性。
(3)连接酶链式反应(LCR)。Taq连接酶具备特异性,即Taq连接酶是否仅连接与靶序列完全互补的引物。Taq连接酶的非特异活性是较低的(1%)。、
(4)依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)是一项连续、等温、基于酶反应的核酸扩增技术。该技术使用反转录酶、核糖核酸酶H、噬菌体T7核糖核酸聚合酶三种酶。特点:扩增效率高于PCR,特异性好。
(5)Qβ复制。Qβ复制酶是一个RNA指引的RNA聚合酶。特点:①不需引物就可开启RNA的合成。②能特异地识别RNA的折叠结构。③在Qβ复制酶天然模板的非折叠结构区插入核酸探针不影响该酶的复制。
5、简述cDNA文库的概念及其构建过程。
答:某生物基因组经转录和逆转录产生的各种cDNA片段分别与克隆载体连接,通过转化(转导)贮存在一个受体菌的群体中。把这种某生物基因组所有基因cDNA的受体菌群落(一套克隆)称为该生物的cDNA文库。
构建过程:
(1)从生物体或细胞中获取mRNA。提取总RNA,然后进行mRNA的分离与纯化。是构建一个高质量的 cDNA 文库的核心。
(2)cDNA第一链的合成。用反转录酶合成 cDNA 第一链。
(3)cDNA第二链的合成。在DNA聚合酶的作用下,以第一条链为模板,用适当引物合成第二条链。
(4)cDNA与载体组成重组分子,并导入宿主进行扩增。
6、简述原核生物基因组的特点。
答:①基因组较小,为一条环状双链DNA。
②只有一个复制起点,一个基因组就是一个复制子。
③染色质是裸露的DNA,不与组蛋白结合。
④重复序列和不编码序列较少。
⑤功效亲密有关的基因常高度集中。
⑥基因一般是连续的,无内含子。
7、怎样证明DNA是半保存复制?
答:用同位素15N标识大肠杆菌DNA示踪加氯化铯密度梯度离心技术试验,证明DNA是半保存复制。
将15N标识的大肠杆菌转移到含14NH4Cl的培养基中培养,取每一代细胞抽提的DNA。
用氯化铯密度梯度离心技术,可使15N-DNA和14N-DNA分离成两个区带,然后用紫外吸取检测分离成果。
把每一代细胞抽提的DNA,进行氯化铯密度梯度离心,成果表白,培养一代之后, DNA只出现一条带,位置在15N-DNA与14N-DNA之间,表白这是15N-DNA/14N-DNA杂合分子。培养二代后,DNA出现两条带,一条带为15N-DNA/14N-DNA杂合分子,另一条带为14N-DNA,两条带等量出现。继续培养,14N-DNA分子逐渐增多,15 N-DNA/14N-DNA杂合分子对应地减少。该试验证明了DNA的半保存复制。
8、真核生物基因体现调控的方式有哪些?
答:(1)基因体现DNA水平的调控; (2)基因体现转录水平的调控;
(3)转录后水平的调控; (4)翻译水平的调控;
(5)翻译后水平的调控
9、DNA双螺旋结构特点及生物学意义是什么?
答:特点:(1)两条反向平行的多核苷酸链绕同一个“中心轴”形成有规律的双螺旋结构。
(2)碱基位于螺旋的内侧,碱基平面与中心轴垂直;磷酸和脱氧核糖位于螺旋的外侧,糖环平面与中心轴平行。
(3)双螺旋直径为2nm,相邻碱基平面间的垂直距离为0.34nm,每10对碱基沿中心轴旋转一周,螺距为3.4nm。
(4)碱基互补配对。即按A—T,G—C配对;A与T之间形成二个氢键,G与C形成三个氢键。
生物学意义:该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特性,最有价值的是确认了碱基配对标准,这是DNA复制、转录和反转录的分子基础,亦是遗传信息传递和体现的分子基础。该模型的提出是本世纪生命科学的重大突破之一,它奠定了生物化学、分子生物学和分子遗传学乃至整个生命科学飞速发展的基石。
10、简述癌症发出的机制。
科学家们在癌症发生的机理上提出了4种假说:即基因突变说、免疫监视说、细胞反分化说及依照α·β态理论的幼稚细胞分化受阻说。目前比较公认的是基因突变致使细胞反分化说,取得重大进展的便是癌基因的发觉。
癌基因首先发觉于致癌逆转录病毒,因此又将病毒中的癌基因叫作病毒癌基因,将存在于人及生物正常细胞中的癌基因称为原癌基因或细胞癌基因。近年来不停有新癌基因发觉。据报道,目前发觉的人癌基因已达百余个。在正常情况下,虽然每个人体内都含有癌基因,但处在静止或低体现实状况态,不但对细胞无害,并且对维持细胞正常功效具备重要作用,并不会使人患癌症。假如外来原因,诸如环境原因(膳食和营养原因、化学致癌物质)、某些病毒、放射线等致癌原因侵入人体,就会激活细胞中的癌基因,致使正常细胞恶化变成癌细胞。
11、大肠杆菌RNA聚合酶亚基的组成及功效。
答:组成:大肠杆菌RNA聚合酶的全酶由五个亚基组成(α2ββ'σ),即2个α亚基、1个β亚基、1个β'亚基和1个σ亚基。
功效:β'亚基可与DNA模板结合,还与转录的终止有关;β亚基有与NTP单体结合部位,与RNA合成的引起和链延伸有关;α亚基含有β亚基结合位点,详细功效不详;σ亚基有开启子结合部位,参加特定基因转录的起始。
12、简明阐明基因工程的操作步骤。
答:(1)目标基因的获取 (2)DNA分子的体外重组 (3)DNA重组体的导入
(4)受体细胞的筛选 (5)基因体现。
13、分子生物学信息数据库重要有哪4大类?
答:①基因组数据库 ②核酸和蛋白质一级结构序列数据库 ③生物大分子三维构象数据库
④由以上三种数据库和文献资料为基础构建的二级数据库
14、转座子转座的特性有哪些方面?
答:①转座不依赖靶序列的同源性 ②转座后靶序列重复 ③转座子的插入具备专一性 ④转座具备排它性 ⑤转座具备极性效应(指一个基因上发生的突变可抑制操纵子内邻近的非突变基因的体现) ⑥活化临近的缄默基因 ⑦区域性优先
15、分子生物学的研究内容包括哪些?
答:①基因与基因组的结构与功效 ②DNA的复制、转录和翻译 ③基因体现调控的研究 ④DNA重组技术 ⑤结构分子生物学
16、真核生物基因组与原核基因组相比,有何特点?
答:①分子量大。 ②有多条呈线状的染色体,每条上有多个复制起点。 ③细胞核DNA与蛋白质稳定结合,形成染色体的复杂高级结构。 ④真核细胞被核膜分开,转录在核内,翻译在细胞质内。 ⑤基因组DNA有大量重度序列。 ⑥蛋白质基因一般以单拷贝形式存在,转录产物为单顺反子。 ⑦存在能够移动的DNA序列 ⑧绝大数真核基因含有内含子,基因编码是不连续的。
17、什么是RNA编辑?RNA编辑有什么重要的生物学意义?
RNA的编辑(
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