久实牌蝙蝠蛾被毛孢菌丝体对改善睡眠的作用.doc

久实牌蝙蝠蛾被毛孢菌丝体对改善睡眠的作用
青海久实公司突破了青藏高原上难以再生、难以重现、难以复制珍贵稀有可食动植物资源的历史，拥有国家级发明专利技术的自主知识产权——中国被毛孢菌粉的生产方法（专利申请 号：200710050273.7）。公司“久实宝”系列产品生产所用菌种，经过国家权威机构中国科学院微生物研究所的检测，鉴定结果为冬虫夏草唯一无性 型中国被毛孢[鉴定号：（2007）微检字第101号]，同时被中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的要求该产品菌种列入收藏（保藏中心登记入册 编号GMCCNo.2126）。冬虫夏草（Coydyceps Sinensis）仅分布于我国青藏高原及其边缘地区海拔3000-6000米的高寒草甸阴湿地区。是寄生于蝙蝠蛾幼虫上的真菌——中国被毛孢 （Hirsutella sinensis）。独特的地理、生态、气候环境；独特的生物物种；独特的滋补和药用价值，成为中华医药千年传承的传奇珍品。冬虫夏草富含四十多种人体必 需的营养成分。虫草多糖、虫草素、虫草酸、D-甘露醇、腺苷、尿苷和SOD（超氧化物歧化酶），四种有机酸：软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸，具有降血脂作 用，对血压进行双向调节。五种维生素：VB1、VB2、VB12、VE、VK补充人体必需的维生素。六种肽类化合物，有效增强人体免疫活性。八种微 量元素：钠、钾、钙、铁、锌、硒、锰、铜，是新陈代谢的物质基础。十八种氨基酸是增强免疫的物质基础。历代医药典籍将冬虫夏草药性药效归纳为，“性温， 甘，平。归肺、肾经；温而不澡，补而不滞；阴阳并补；补肺益肾，止血化痰。用于久咳虚喘，久涝咯血，肾虚遗精，腰膝酸痛，理诸虚百损”。是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。现代医学从功能上将其归为免疫调节。进一步映证了传统中医 “理诸虚百损” 的功效。冬虫夏草不但对人体各种脏器的功能具有调节作用，还存在某些直接抗病功能。现代药理药效研究表明冬虫夏草具有： 1、可迅速增强机体免疫力，双向调节内分泌； 2、改善心血管功能； 3、有降血糖、降血脂的作用； 4、有雄性激素样作用。对性功能低下、减退、淡漠有改善作用； 5、抗肿瘤作用； 6、有抗肾衰、抗肾炎作用； 7、抗疲劳、抗衰老作用； 8、对术后病人有抗炎症、促愈合作用； 9、抗器官移殖后的排异作用； 10、对各种免疫功能失调造成的症状有缓解作用。
本试验初步探讨了以人工发酵工艺生产的蝙蝠蛾被毛孢菌丝体(Hirsutella hepiali Chert el Shen mycelia)对小鼠睡眠的改善作用。
1材料与仪器
蝙蝠蛾被毛孢菌丝体，为土黄色粉末状(杭州赐富生物技术有限公司提供，批号20040906)；戊巴比妥钠(北京通县育才精细化工厂，批号20040427)；巴比妥钠(国药集团化学试剂有限公司，批号20040428)；健康清洁级雌性ICR种小鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，体重18～22 g，合格证号：SCXK(沪)2004-0005号。动物饲养环境合格证号：SYXK(苏)2002—0004)。
2方法与结果
2．1剂量与分组受试物蝙蝠蛾被毛孢菌丝体推荐的人体每日摄入量为500 nag，按8．3 rng,k91·d1计。根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范b(2003年版)规定之方法，各项实验均设阴性对照组和42，83，250 mg·kg。·d。13个受试物剂量组，分别相当于该受试物人体推荐摄入剂量的0，5，10，30倍。动物按体重随机分成12组，每组12只，每项实验使用4组。各剂量组受试物用二次纯化水配制，经口灌胃给予小鼠，阴性对照组给予二次纯化水，连续30 d后进行测试。2．2统计方法使用SPSS统计软件。所有计量资料先进
行正态检验和方差齐性检验，均满足正态分布和方差齐的要求，用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。入睡个数等计数资料用z：检验进行分析。2．3直接睡眠实验每天各组动物给予受试物或二次纯化水后，对其进行一般行为学观察，并以翻正反射消失为指标观察动物是否出现睡眠现象。结果显示，每天给予受试物后，未发现各组小鼠的异常反应及受试物直接诱导睡眠的作用。2．4延长戊巴比妥钠睡眠时间试验各组动物均于末次灌胃15 rain后腹腔注射戊巴比妥钠55 mg·k91·d～，以小鼠
翻正反射消失和恢复为指标，观察受试样品能否延长戊巴比妥钠睡眠时间。结果显示，对照组和低、中、高剂量组睡眠时间分别为(47±12)rain，(52±10)rain，(5《)±10)min和(52±10)rain，方差分析显示各剂量组睡眠时间与对照组无显著性差异(P>0．05)，表明在本试验受试剂量下该受试物对小鼠戊巴比妥钠睡眠时间无明显影响。2．5巴比妥钠阈下剂量催眠试验各组动物均于末次灌胃15 rain后腹腔注射巴比妥钠140 rng·kg。1·d～，以小鼠翻正反射消失为人睡标准，记录在30 rain内各组入睡的小鼠个数。结果显示，对照组和低、中、高剂量组小鼠入睡数(率)分别为4(30％)，7(58．3％)，8(66．7％)和12(100％)，高剂量组入睡小鼠个数与对照组有极显著性差异(P<o．01)，提示该受试物可增强巴比妥钠阈下剂量催眠作用。2．6 巴比妥钠睡眠潜伏期试验各组动物均于末次灌胃15rain后腹腔注射巴比妥钠215 mg·k91·d～，以小鼠翻正反射消失为指标，记录各组动物睡眠潜伏期。结果显示，对照组和低、中、高剂量组小鼠睡眠潜伏期分别为(14．8±2．2)rain，(13．1±2：5)rain，(12．2±1．8)rain和(12．7±1．7)min，各剂量组与对照组相比均有统计学显著性差异(P<o．05，P<o．01)，表明该受试物可缩短小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期。3讨论冬虫夏草的药用价值早已为世人所公认，现代医药学研究证明，冬虫夏草具有非常广泛的治疗、保健作用。为了使这一稀缺而珍贵的生物资源能最大限度地造福于民，人们相继开发了各种虫草替代品，利用人工发酵工艺大规模生产虫草菌丝体则是较有社会和商业价值的一种方式。替代品具有与天然虫草相似的化学成分和药理作用是大力开发利用的前提。大量报道称天然虫草对中枢神经系统具有镇静、催眠、抗惊厥的作用，本试验就人工发酵生产的蝙蝠蛾被毛孢菌丝体对实验动物小鼠的改善睡眠作用进行了初步研究。本试验中受试物未显示出直接诱导睡眠的作用，与以往报道相符。
实验结论：本试验发现，蝙蝠蛾被毛孢菌丝体可增强巴比妥钠阈下剂量的催眠作用，缩短巴比妥钠诱导的睡眠潜伏期，提示该受试物与巴比妥钠有明显的协同作用，与天然虫草的功效相似。梁永录等分别以天然虫草和人工虫草菌丝体水煎剂给小鼠皮下注射，发现两者均能延长戊色比妥钠的睡眠时间，人工虫草茵丝体的作用弱于天然虫草。我们所用的蝙蝠蛾被毛孢菌丝体验在本试验受试剂量下却未能明显延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间，可能与给药途径不同有关。