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培养基大全
三联菌体 2009-12-03 13:33:15 阅读30 评论0 字号：大中小
1．营养肉汤
成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。
2．营养琼脂培养基
成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。
制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。
3．MRS培养基
成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。
4．脱脂乳培养基
成分：牛奶，蒸馏水。
制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。
5．培养基A
成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。
6．PTYG培养基
成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。
盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。
7．豆芽汁液体培养基
成分：豆芽汁10mL，磷酸氢二铵1g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，琼脂20g。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色5.2~6.8紫色）作为指示剂，115℃灭菌20min。
豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽200g洗净，在1000mL中煮沸30 min，纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。
8．麦芽汁琼脂培养基
成分：优质大麦或小麦，蒸馏水，碘液。
制法：取优质大麦或小麦若干，浸泡6~12h，置于深约2cm的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干。
称取300g麦芽磨碎，加1000mL水，38℃保温2h，再升温至45℃，30min，再提高到50℃，30min，再升至60℃，糖化1~1.5h。
取糖化液少许，加碘液1~2滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤。如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约20mL调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至10倍，调pH5~6，用于酵母菌培养；稀释至5~6倍，调pH7.2，可用于培养细菌，121℃灭菌20min。
9．查（察）氏培养基
成分：NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4. 7H2O 0.5g，KCL 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，蔗糖30g，琼脂15~20g，蒸馏水1000mL，pH值自然。
制法：加热溶解，分装后121℃灭菌20min。
10．马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）
成分：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，水1000mL。
制法：pH值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取200g加入1000mL蒸馏水，煮沸20min，用纱布过滤，滤液补足水至1000mL，再加入糖和琼脂，溶化后分装，121℃灭菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000mL培养基中，分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。
11．PY基础培养基
成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨 (Trypticase) 0.5g，盐溶液Ⅱ 4.0mL，蒸馏水1000mL。
盐溶液Ⅱ成分：CaCL2 0.2g，MgSO4.7H2O 0.48g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，NaHCO3 10.0g，NaCL 2.0g，蒸馏水1000mL。
制法：加热溶解，分装后121℃灭菌20min。
12．甘露醇琼脂培养基（MSA）
成分：牛肉浸膏1g，月示胨NO.3（Difco）10g，D-甘露醇10g，NaCL 75g，琼脂约13g，酚红0.025g，水1000mL，pH7.2~7.6
制法：按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调pH至7.4±0.2。加1%的酚红溶液2.5mL，混匀。121℃高压灭菌15min
13．高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）
可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCL 0.5g，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.2~7.4，121℃灭菌20min。
14．淀粉铵盐培养基 （主要用于霉菌、放线菌培养）
可溶性淀粉10g，（NH4）2SO4 2g，K2HPO4 lg，MgSO4.H2O lg，NaCL 1g，CaCO3 3g，蒸馏水1000mL，pH7.2~7.4，121℃灭菌20min。若加入15~20g琼脂即成固体培养基。
15．麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）
葡萄糖1.0g，KCL 1.8g，酵母汁2.5g，醋酸钠8.2g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH自然，0.7kg/cm2灭菌30min。
16．高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用)
硝酸钠2g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁（MgSO4 7H2O）0.5g，氯化钾 0.5g，硫酸亚铁0.01g，氯化钠60g，蔗糖30g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，115℃灭菌30min。
注：①分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。②分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。
17．糖、醇类发酵基础培养基
（1）一般细菌常以休和利夫森二氏培养基
蛋白胨5g，NaCL 5g，K2HPO4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g，琼脂5~6g，1％溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝）3mL，蒸馏水1000mL，pH7.0~7.2，分装试管，培养基高度约4.5cm，115℃灭菌20min。
（2）芽孢菌培养基
(NH4)2HPO4 1.0g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，酵母膏0.2g，琼脂5~6g，糖或醇类10.0g，蒸馏水1000mL，溴甲酚紫（0.04％）15mL，pH7.0~7.2，分装试管，培养基高度约4~5cm，112℃灭菌30min。
（3）乳酸菌培养基
蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐温80（Tween 80）0.5mL，糖或醇10g，琼脂5~6 g，蒸馏水（自来水）1000mL，加入1.6％溴甲酚紫溶液约1.4mL。以上调pH6.8~7.0，分装试管，112℃灭菌30min。
18．硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验用）
蛋白胨5.0g，KNO3 0.2g, 蒸馏水1000 mL，pH7.4，每管分装4~5mL，121℃灭菌15~20min。
吲哚实验培养基：1％胰蛋白胨，调pH7.2～7.6，分装1/3~1/4试管，115℃灭菌30min。
19．硫化氢试验（纸条法）培养基
蛋白胨10g，NaCL 5g，牛肉膏10g，半胱氨酸0.5g，蒸馏水1000mL，pH7.0～7.4，分装试管，每管液层高度4~5cm，112℃灭菌20~30min。另外将普通滤纸剪成0.5~1cm宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用5％~10％的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。
20．尿素培养基(尿酶试验)
成分：蛋白胨1.0g，葡萄糖1.0g，NaCL 5.0g，KH2PO4 2.0 g，0.4％酚红3.0mL，琼脂20.0g，20％尿素100.0mL，pH7.1~7.4。
制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH值，加入琼脂，加热熔化并分装于三角瓶，121℃灭菌15min，冷却至50~55℃，加入过滤除菌的尿素溶液，分装于灭菌试管内，摆成琼脂斜面备用。
21．氮源利用基础培养基
KH2PO4 1.36g，NaH2PO4 2.13g，MgSO4 7H2O 0.2g，FeSO4.7H2O 0.2g，CaCL2 0.5g，葡萄糖10.0g，蒸馏水1000mL。
将需要测定的氨基酸、氨态氮（如磷酸氢二氨）、硝态氮（如硝酸钾）加入到上述基础培养基中，使其终浓度为0.05~0.1％，如测定菌不能利用葡萄糖为碳源，可用其它碳源代替（终浓度为0.2~0.5％），另做一份不加氮源的空白对照，调pH7.0~7.2，分装于试管，每管4~5mL，112℃灭菌20~30min，制备出的培养基要求无沉淀。
22．甲基红培养基（M.R及V-P试验用）
蛋白胨7.0g，葡萄糖5.0g，K2HPO4（或NaCL）5g，水1000mL，pH7.0~7.2，每管分装4~5mL，115℃灭菌30min。
23．动力、靛基质、尿素（MIU）综合培养基 （用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用）
蛋白胨（含色氨酸）30 g，KH2PO4 2g、NaCL 5g、琼脂3 g、0.2%酚红酒精溶液2mL、尿素20g、蒸馏水1000mL。分装于小试管，112℃灭菌15min，灭菌后液体应呈淡黄色。
24．半固体培养基（用于细菌的动力试验）
牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，琼脂3~5g，蒸馏水1000mL，pH7.2~7.4，熔化后分装试管（8mL）121℃灭菌15min，取出直立试管待凝固。
25．M17琼脂培养基（分离、培养乳球菌等的选择培养基）
植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗坏血酸0.5g，牛肉膏2.5g，MgSO4 7H2O 0.01g，ß-甘油磷酸二钠19g，蒸馏水1000mL，121℃灭菌15min。
26．蛋白胨水溶液（靛基质试验用）
蛋白胨20.0g，NaCL 5.0g，蒸馏水1000mL，pH7.4，121℃灭菌15min。
27．精氨酸双水解酶实验培养基
成分：蛋白胨1g，氯化钠5g，K2HPO4 0.3g，L-精氨酸10g，琼脂10g，酚红0.01g，蒸馏水1000mL。
制法：除酚红外，将以上各成分溶解，调节pH7.0~7.2，加入指示剂，分装试管，培养基高约4~5cm，121℃灭菌20min备用。
28．葡萄糖氧化发酵培养基
成分：蛋白胨2g，氯化钠5g，1％溴百里酚蓝水溶液3mL，琼脂5~6g，K2HPO4 0.2g，葡萄糖1％，蒸馏水1000mL。
制法：除溴百里酚蓝外，溶解以上各成分，调节pH值为6.8~7.0，分装试管，用115℃灭菌20min备用。
29．假单胞菌选择培养基（PSA）
基础成分：多价胨16g，水解酪蛋白10g，硫酸钾10g，氯化镁1.4g，琼脂11g，甘油10mL，蒸馏水1000mL，pH7.1±0.2。
CFC选择添加物：溴化十六烷基三甲胺10mg/L，梭链孢酸钠10mg/L，头孢菌素50mg/L。
制法：先将基础成分加热煮沸使之完全溶解，121℃，15min条件下灭菌。冷却到50℃备用。当基础培养基冷却到50℃后加入溶解后过滤除菌的CFC补充物，完全混合后倒平板备用。
30．乳糖胆盐发酵培养基
成分：蛋白胨20g，猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10mL，并放入一个小倒管，115℃，15min高压灭菌.
注：双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。
31．伊红美兰琼脂培养基
成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g，琼脂17g，2%伊红Y溶液20mL，0.65%美兰溶液10mL，蒸馏水1000mL，pH7.1。
制法：将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，高压灭菌121℃，15min备用。
临用时，加入乳糖，并加热溶化琼脂，冷至50～55℃，加入伊红和美兰溶液，摇匀，倾注平板。
32．乳糖发酵培养基
成分：蛋白胨20g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：将蛋白胨、乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装30mL、10mL或3mL，并放入一个小倒管，115℃，15min高压灭菌。
33．胰酪胨大豆肉汤
成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化钠100g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000mL。
制法：将上述成分混合，加热并轻轻搅拌溶液，分装后121℃15min高压灭菌。最终pH7.3±0.2。
34．7.5%氯化钠肉汤
成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠75g，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，121℃15min高压灭菌。
35．豆粉琼脂
成分：牛心消化汤1000mL，琼脂20g，黄豆粉浸液50mL，pH 7.4~7.6。
制法：将琼脂加在牛心消化汤中，加热溶解，过滤。加入黄豆粉浸液，分装每瓶100mL，121℃15min高压灭菌。
36．血琼脂平板
成分：豆粉琼脂100mL，脱纤维羊血（或兔血）5~10mL。
制法：加热融化琼脂，冷至50℃，以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装灭菌试管，摆成斜面。
37．aird-Parker氏琼脂平板
成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏1g，丙酮酸钠10g，甘氨酸12g，氯化锂（LiCL·6H2O）5g，琼脂20g，蒸馏水950mL，pH7.5。
增菌剂的配法：30~50%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存在冰箱内。
制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至25℃，矫正pH。分装每瓶95mL，121℃高压灭菌15min。临用时，加热融化琼脂，冷至50℃，每95mL加入预热至50℃的卵黄-亚碲酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。
38．肉浸液
成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH 7.4～7.6。
制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后矫正pH7.4～7.6煮沸并过滤，分装烧瓶，121℃，30min高压灭菌。
39．兔血浆
成分：柠檬酸钠0.106 mol/L（31.3g Na3C6H5O7·2H2O溶于1L蒸馏水中）
制法：一份加兔血9份混合后离心2000rpm，10min吸取上清液即为兔血浆。
40．肠毒素产毒培养基
成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化钠5g，磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，硫酸镁0.2g，菸酸0.01g，蒸馏水1000mL，琼脂10~12g（固体透析培养用），pH7.2~7.4。
41．葡萄糖肉浸液肉汤
成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，葡萄糖10g，蒸馏水1000mL，pH7.4～7.6。
制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，121℃30min高压灭菌。
42．牛心浸液
成分：绞碎牛心500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH7.4～7.6。
制法：将绞碎牛心500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，121℃，30min高压灭菌。
43．匹克氏肉汤
成分：含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL，1：25000结晶紫盐水溶液10mL，1：800三氮化钠溶液10mL，脱纤维兔血（羊血）10mL。
制法：将上述已灭菌的各种成分，无菌依次混合，分装于无菌试管内，每管2mL，保存冰箱内备用。
44．胰蛋白胨大豆胨琼脂（TSA）
成分：胰蛋白胨15g，大豆胨5g，氯化钠5g，琼脂约13g，蒸馏水1000mL，pH7.1～7.5。
制法：按量将各成分溶解，加热使完全溶解，调pH值，121℃，15min灭菌。
45．缓冲蛋白胨水(BP)培养基
成分：蛋白胨l0g，NaCL5g，Na2HPO4.12H20 9g，H2PO4 1.5g，蒸馏水1000mL，pH7.2。
制法：121℃灭菌15min，沙门氏菌前增菌使用。
46．氯化镁孔雀绿(MM)增菌液
成分：
甲液：胰蛋白胨5g，NaCL 8g，KH2P04 1.6g，蒸馏水1000m1
乙液：MgCL2 40g，蒸馏水100mL
丙液：0.4％孔雀绿水溶液
制法：分别按上述成分配好后，121℃灭菌15min备用。临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL以无菌操作混合即成。
47．四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液
成分：多胨或胨1g，CaCO3 10g，Na2S203 30g，蒸馏水1000m1。
制法：将各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100m1。分装时应随时振荡，使其中的CaCO3混匀。121℃灭菌15min备用。临用时每100m1培养基中加入碘溶液2m1、0.1％煌绿1m1。
48．亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液
成分：蛋白胨5g，乳糖4g，亚硒酸氢钠4g，Na2HPO4 5.5g，KH2PO4 4.5g，L—胱氨酸0.01g，蒸馏水1000m1，pH7.0。
制法：将除亚硒酸氢钠和胱氨酸以外的各种成分溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却，以无菌操作与上液混合。再加入1％L-胱氨酸—氢氧化钠溶液1m1。分装于灭菌瓶中，每瓶l00mL。
49．亚硫酸铋琼脂(BS)培养基
成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g，FeSO4 0.3g，Na2HPO4 4g，煌绿0.025g，柠檬酸铋铵2g，Na2SO4 6g，琼脂20g， 蒸馏水1000mL，pH7.5。
制法：将前5种成分溶解于300mL蒸馏水中，再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50m1蒸馏水溶解。将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷至80℃左右。将以上三液合并，补充蒸馏水至1000m1，校正pH，加0.5％煌绿水溶液5mL ；摇匀。冷却至50~55℃，倾注平板。
注：此培养基不需高压灭菌。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。
50．DHL琼脂培养基
成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g，乳糖10g，蔗糖10g，去氧胆酸钠1g，Na2S203 2.3g，柠檬酸钠1g，柠檬酸铁铵1g，中性红0.03g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.3。
制法：除中性红和琼脂外，将其他成分溶解于400m1蒸馏水中，校正pH值。再将琼脂溶于600mL蒸馏水中，两液合并，加0.5％中性红水溶液6mL，待冷至50~55℃，倾注平板。
51．HE琼脂培养基
成份：月示 胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖２g，水杨素2g，胆盐20g，NaCL 5g，琼脂20g，蒸馏水1000m1，0.4％溴麝香草酚蓝溶液16mL，Andrade指示剂20mL，甲液20mL，乙液20m1。
制法：将前七种成分溶解于400mL蒸馏水中。作为基础液，加入甲液和乙液，校正pH值为7.5，再加入指示剂；将琼脂溶于600m1蒸馏水中。二者合并，待冷至50~55℃，倾注平板。
注：①此培养基不可高压灭菌；②Andrade指示剂：酸性复红0.5g，1M NaOH溶液16m1，蒸馏水100mL。制法为：将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如果复红退色不全，再加氢氧化钠溶液1~2mL。③甲液：Na2S203 34g，柠檬酸铁铵4g，蒸馏水100m1。④乙液：去氧胆酸钠10g，蒸馏水100mL。