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自身免疫性疾病的免疫学检验ppt课件.pptx

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1、 自身免疫性疾病的免疫学检验自身免疫性疾病的免疫学检验1返回总目录返回总目录目录目录 概述概述 1自身免疫性疾病的免疫学检查自身免疫性疾病的免疫学检查 2自身抗体的检测实验选择的原则自身抗体的检测实验选择的原则 3小结小结42l 自身耐受自身耐受(self-tolerance):正常情况下,免疫系统正常情况下,免疫系统 对宿主自身的组织和细胞不产生免疫应答。对宿主自身的组织和细胞不产生免疫应答。l 自身免疫自身免疫 (autoimmunity):当某种原因使自身耐受当某种原因使自身耐受 性破坏时,免疫系统就会对自身组织成分、细胞成性破坏时,免疫系统就会对自身组织成分、细胞成 分及其产物发生免疫

2、应答。分及其产物发生免疫应答。第一节第一节 概述概述3l 自身免疫病自身免疫病(autoimmune disease,AID):是自身免是自身免疫应答过强或持续时间过久,表现为质和量的异常,疫应答过强或持续时间过久,表现为质和量的异常,所产生的自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞对表所产生的自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞对表达自身靶抗原的细胞和组织发动攻击,导致损伤或达自身靶抗原的细胞和组织发动攻击,导致损伤或功能障碍,并出现相应临床症状。功能障碍,并出现相应临床症状。4一、自身免疫病与风湿性疾病一、自身免疫病与风湿性疾病l 风湿性疾病风湿性疾病(rheumatic diseases)泛指影响骨

3、、关泛指影响骨、关 节及周围软组织等一组疾病,简称风湿病。节及周围软组织等一组疾病,简称风湿病。5l结缔组织病(connective tissue disease,CTD)是指病变主要发生于结缔组织,有组织黏液样水肿、纤维蛋白样变性及坏死性血管炎等基本病理变化的一组疾病。l以往所指的结缔组织病或胶原病是风湿性疾病的一部分,它们和风湿性疾病不可完全等同。61.1.发生与感染、遗传、性激素等因素有关,属发生与感染、遗传、性激素等因素有关,属AIDAID;2.2.结缔组织及血管的慢性炎症为其基本病理变化;结缔组织及血管的慢性炎症为其基本病理变化;3.3.病变可累及多系统、多器官;病变可累及多系统、多

4、器官;4.4.发病情况差异大,为异质性疾病;发病情况差异大,为异质性疾病;5.5.以关节、肌肉、软组织等疼痛为主要症状;以关节、肌肉、软组织等疼痛为主要症状;6.6.血清中可查出多种自身抗体;血清中可查出多种自身抗体;7.7.对糖皮质激素及免疫抑制剂药物治疗有疗效;对糖皮质激素及免疫抑制剂药物治疗有疗效;8.8.病程慢性、反复、进行性,最终可导致残疾或死亡。病程慢性、反复、进行性,最终可导致残疾或死亡。风湿病的临床特点风湿病的临床特点7二、自身免疫病的共同特征二、自身免疫病的共同特征血中测到高效价的自身抗体血中测到高效价的自身抗体/自身应答性自身应答性T淋巴细胞淋巴细胞自身抗体自身抗体/自身应

5、答性自身应答性T淋巴细胞作用于表达自淋巴细胞作用于表达自身抗原的组织细胞,造成其损伤或功能障碍身抗原的组织细胞,造成其损伤或功能障碍动物实验可复制与动物实验可复制与AID相似的动物模型,相似的动物模型,并能通过并能通过血清或致敏的淋巴细胞可使疾病被动转移血清或致敏的淋巴细胞可使疾病被动转移大多数自身免疫病是自发性或特发性的,外因可有大多数自身免疫病是自发性或特发性的,外因可有一定影响一定影响,病情的转归与自身免疫应答强度相关,病情的转归与自身免疫应答强度相关有遗传倾向,反复发作和慢性迁延,部分自身免疫有遗传倾向,反复发作和慢性迁延,部分自身免疫性疾病易发于女性,应用免疫抑制剂治疗有效性疾病易发

6、于女性,应用免疫抑制剂治疗有效 8三、自身免疫病的分类三、自身免疫病的分类 按自身抗原分类按自身抗原分类 器官特异性自身免疫性疾病器官特异性自身免疫性疾病器官非特异性自身免疫性疾病器官非特异性自身免疫性疾病患者的病变常局限于患者的病变常局限于某一特定的器官,由某一特定的器官,由对器官的特异性抗原对器官的特异性抗原的免疫应答引起的免疫应答引起全身性或系统性自身全身性或系统性自身免疫性疾病;患者的免疫性疾病;患者的病变可见于多种器官病变可见于多种器官及结缔组织(结缔组及结缔组织(结缔组织病或胶原病织病或胶原病)9器官特异性器官特异性病病 名名自自 身身 抗抗 原原桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎甲状腺球蛋

7、白和甲状腺微粒体甲状腺球蛋白和甲状腺微粒体甲状腺功能亢进甲状腺功能亢进(Graves病病)TSH受体受体Addison病病肾上腺皮质细胞肾上腺皮质细胞自身免疫性萎缩性胃炎自身免疫性萎缩性胃炎胃壁细胞、内因子胃壁细胞、内因子溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎结肠黏膜细胞结肠黏膜细胞重症肌无力重症肌无力乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体交感性眼炎交感性眼炎眼晶状体蛋白眼晶状体蛋白胰岛素依赖型糖尿病胰岛素依赖型糖尿病胰岛胰岛细胞细胞胰岛素抵抗型糖尿病胰岛素抵抗型糖尿病胰岛素受体胰岛素受体原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化小胆管上皮细胞小胆管上皮细胞10器官非特异性器官非特异性病病 名名自自 身身 抗抗 原原系统性红斑

8、狼疮系统性红斑狼疮细胞核成分、细胞浆成分细胞核成分、细胞浆成分类风湿性关节炎类风湿性关节炎变性变性IgG、类风湿相关的核抗原、类风湿相关的核抗原干燥综合征干燥综合征涎腺上皮细胞涎腺上皮细胞混合性结缔组织病混合性结缔组织病细胞核细胞核(RNP)自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血红细胞红细胞特发性血小板减少性紫癜特发性血小板减少性紫癜血小板血小板特发性白细胞减少症特发性白细胞减少症白细胞白细胞硬皮病硬皮病细胞核蛋白、细胞核染色体着丝点细胞核蛋白、细胞核染色体着丝点多发性肌炎多发性肌炎细胞核蛋白细胞核蛋白11器官特异性和器官非特异性的特征性区别器官特异性和器官非特异性的特征性区别器官特异性器官

9、特异性器官非特异性器官非特异性自身抗体和病变具器官特异性自身抗体和病变具器官特异性自身抗体和病变无器官特异性自身抗体和病变无器官特异性极少量自身抗原与淋巴样系统极少量自身抗原与淋巴样系统接触接触大量自身抗原进入免疫系统大量自身抗原进入免疫系统实质病变可能由实质病变可能由变态反应变态反应或自身抗体所致或自身抗体所致病变由抗原抗体复合物所致病变由抗原抗体复合物所致治疗原则为控制代谢缺陷治疗原则为控制代谢缺陷治疗原则为抑制炎症治疗原则为抑制炎症和抗体形成和抗体形成有发生器官内癌症的倾向有发生器官内癌症的倾向有发生淋巴网状内皮细胞有发生淋巴网状内皮细胞肿瘤的倾向肿瘤的倾向抗原与弗氏佐剂共同免疫动物抗原

10、与弗氏佐剂共同免疫动物可诱导产生器官特异性抗体可诱导产生器官特异性抗体动物被刺激后不产生抗体动物被刺激后不产生抗体12分类分类疾病疾病结缔组织结缔组织系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风湿性关节炎、混合系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风湿性关节炎、混合性结缔组织病性结缔组织病内分泌系统内分泌系统桥本甲状腺炎、桥本甲状腺炎、Graves病、病、Addison病、胰岛素依赖性糖病、胰岛素依赖性糖尿病尿病消化系统消化系统萎缩性胃炎、溃疡性胃炎、原发性胆汁性肝硬化萎缩性胃炎、溃疡性胃炎、原发性胆汁性肝硬化血液系统血液系统恶性贫血、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少恶性贫血、自身免疫性溶血性贫血、特发性血

11、小板减少性紫癜性紫癜心血管系统心血管系统风湿性心肌炎风湿性心肌炎泌尿系统泌尿系统肾小球肾炎肾小球肾炎呼吸系统呼吸系统特发性肺纤维化特发性肺纤维化神经系统神经系统重症肌无力、多发性神经炎重症肌无力、多发性神经炎皮肤皮肤荨麻疹荨麻疹按发病部位的解剖系统分类按发病部位的解剖系统分类1314(一)自身抗原形成(一)自身抗原形成分分子子模模拟拟四、自身免疫病的发病机制四、自身免疫病的发病机制隐蔽抗原的释放隐蔽抗原的释放自身抗原改变自身抗原改变15多克隆激活多克隆激活(二)免疫系统发育和免疫调节异常(二)免疫系统发育和免疫调节异常胸腺胸腺 骨髓骨髓 功能异常功能异常Th1和和Th2细胞功能失衡细胞功能失衡

12、16(三)遗传因素(三)遗传因素171.1.自身抗体的作用自身抗体的作用 (四)(四)AID的病理损伤机制的病理损伤机制l抗血细胞表面抗原的抗体抗血细胞表面抗原的抗体 181.1.自身抗体的作用自身抗体的作用抗细胞表面受体抗体抗细胞表面受体抗体 重症肌无力重症肌无力 19抗细胞表面受体抗体抗细胞表面受体抗体毒性弥漫性甲状腺肿(毒性弥漫性甲状腺肿(GravesGraves病)发病机制示意图病)发病机制示意图20自身抗体自身抗体抗核抗体抗核抗体肾小球、关节、皮肤和肾小球、关节、皮肤和其它多种器官的毛细血管壁其它多种器官的毛细血管壁结合结合循环中的核抗原循环中的核抗原 多部位脉管炎多部位脉管炎 系统

13、性红斑狼疮形成形成可溶性抗原可溶性抗原抗体抗体IC 反复沉积反复沉积1.1.自身抗体自身抗体的作用:的作用:自身抗体与自身抗体与相应抗原形相应抗原形成的免疫复成的免疫复合物合物 212.2.自身应答性自身应答性T淋巴细胞作用淋巴细胞作用 针对自身抗原发生免疫应答的针对自身抗原发生免疫应答的T细胞可引起组织细胞可引起组织 损伤,这类疾病属于损伤,这类疾病属于型超敏反应引起的疾病。型超敏反应引起的疾病。3.3.巨嗜细胞和巨嗜细胞和NK细胞的作用细胞的作用 巨噬细胞在巨噬细胞在AID的组织损伤中也起重要作用。巨的组织损伤中也起重要作用。巨噬细胞被细胞因子激活后,就具有细胞毒作用。噬细胞被细胞因子激活

14、后,就具有细胞毒作用。(四)(四)AID的病理损伤机制的病理损伤机制返回章目录返回章目录22l 抗核抗体(抗核抗体(antinuclear antibody,ANA):):是以是以真核细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称;真核细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称;l 在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质,在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质,激发机体产生许多抗不同核成分的抗体;激发机体产生许多抗不同核成分的抗体;第二节第二节 自身免疫性疾病的免疫学检查自身免疫性疾病的免疫学检查一、抗核抗体测定一、抗核抗体测定23lANA主要是IgG,也有IgM、IgA、IgD和IgE;lANA无器官特异性

15、和种属特异性;lANA主要存在于血清中;l将检出ANA作为AID存在的依据。24 抗抗DNA抗体:抗体:抗抗dsDNA/抗抗nDNA、抗、抗ssDNA/抗抗dDNA等等 抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体(AHA):抗抗H1、抗、抗H2A、抗、抗H2B、抗抗H3、抗、抗H4抗体等抗体等 抗非组蛋白抗体:抗非组蛋白抗体:抗抗nRNP/抗抗U1RNP、抗、抗Scl-70、抗抗SSA、抗、抗Sm、抗、抗SSB、抗、抗Jo-1、抗、抗Rib抗体、抗体、AnuA、抗、抗DNP、抗、抗DE多肽抗体、抗多肽抗体、抗DM53抗体抗体 抗抗RANA抗体、抗着丝点、抗抗体、抗着丝点、抗Ku抗体等抗体等 抗核仁抗体:抗核仁抗

16、体:抗抗PM-Scl抗体、抗抗体、抗Th/To抗体、抗体、抗抗U3-RNP、抗、抗4-6-S-RNA抗体等抗体等(一)(一)ANA的类型和临床意义的类型和临床意义 ANA谱谱25 抗天然抗天然DNA(native DNA,nDNA)抗体抗体,又称抗双,又称抗双链链DNA(double stranded DNA,dsDNA)抗体。抗体。抗变性抗变性DNA(denatured DNA,dDNA)抗体抗体,又称抗单链,又称抗单链DNA(single stranded DNA,ssDNA)抗体。抗体。对对SLE有高特异性有高特异性;SLE诊断标准之一。诊断标准之一。缓解期降低缓解期降低70%70%90

17、%90%SLE活活动期增高动期增高药物疗效药物疗效抗抗dsDNA抗体抗体 抗抗DNA抗体抗体26 抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体(anti-histonic antibody,AHA):由由H1、H2A、H2B、H3和和H4五个亚单位,各自都五个亚单位,各自都 有特异性抗体;有特异性抗体;AHA检检出出百百分分率率抗抗dsDNAdsDNA505070709090100100药物诱导药物诱导性狼疮只性狼疮只能检出此能检出此SLEAHAAHA抗抗组蛋白组蛋白抗体抗体27 可提取性核抗原可提取性核抗原 (extractable nuclear antigen,ENA)是盐水可提取性核抗原的总称,是非组蛋白

18、的核蛋是盐水可提取性核抗原的总称,是非组蛋白的核蛋 白,属酸性核蛋白抗原,由许多小分子量的白,属酸性核蛋白抗原,由许多小分子量的RNARNA和多和多 肽组成。肽组成。抗抗ENA抗体抗体28对风湿病有特异诊断价值的有以下七种:抗nRNP(nuclear RNP,nRNP)抗体;抗Sm抗体;抗SSA抗体;抗SSB抗体;抗Scl-70抗体;抗Jo-1抗体;抗核糖体抗体。29抗抗DNP抗体(抗核蛋白抗体):抗体(抗核蛋白抗体):核蛋白核蛋白(DNP)抗原由抗原由DNA和蛋白质组成。和蛋白质组成。DNP抗原有不溶性抗原有不溶性和可溶性两种,可分别产生相应的抗体。和可溶性两种,可分别产生相应的抗体。检出检

19、出百分百分率率抗抗DNP2020404060608080 SLE非活动期非活动期 SLE活动期活动期抗不溶性抗不溶性DNP抗体抗体抗抗DNP抗抗DNP100100RA滑滑膜液中膜液中抗抗DNP抗可溶性抗可溶性DNP抗体抗体抗抗DNP抗体抗体30 抗核小体抗体抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,AnuA)l 是细胞核染色质的基本单位是细胞核染色质的基本单位;l 细胞凋亡而致核小体大量蓄积,细胞凋亡而致核小体大量蓄积,诱导诱导B细胞产生的细胞产生的AnuA是是SLE 特异性的标志抗体。特异性的标志抗体。抗抗dsDNA抗体抗体 抗核小体抗体抗核小体抗体 抗抗dsDNA和抗

20、和抗Sm阴性的阴性的SLE阳性阳性率为率为60%80%,特异性,特异性97%。抗抗核小体核小体抗体抗体31 常见常见AID的的ANA阳性检出率阳性检出率疾病疾病ANA(%)疾病疾病ANA(%)SLE9595SS70708080MCTD9595PM/DM3030PSS85859595RA2020303032(二)(二)ANA的检测方法的检测方法 l将患者血清先进行稀释,可以做定量试验,在将患者血清先进行稀释,可以做定量试验,在1:801:80稀释仍呈阳性时,对稀释仍呈阳性时,对SLE的诊断有较大的参考价值。的诊断有较大的参考价值。形成胞核基质形成胞核基质ANA抗人抗人Ig FITC1.1.荧光免

21、疫法荧光免疫法33抗核抗体核型与相关疾病抗核抗体核型与相关疾病核型核型荧光图形荧光图形抗体抗体相关疾病相关疾病周边型周边型核周环状荧光核周环状荧光抗抗dsDNAdsDNASLESLE、慢活肝炎、慢活肝炎均质型均质型核呈均质荧光核呈均质荧光抗抗DNADNA、AHAAHA、AnuAAnuASLESLE、RARA、PSSPSS、慢性、慢性肝病肝病斑点型斑点型核内颗粒状荧光核内颗粒状荧光抗抗ENAENAMCTDMCTD、SLESLE、PSSPSS、SSSS、PMPM核仁型核仁型核仁有荧光核仁有荧光抗核仁抗体抗核仁抗体PSSPSS、雷诺现象、雷诺现象、SLESLE着丝点型着丝点型核浆细小相同颗粒核浆细小

22、相同颗粒荧光荧光抗着丝点抗着丝点PSSPSS、CRESTCREST综合征综合征34均质型均质型抗核抗体核型抗核抗体核型着丝点型着丝点型核仁型核仁型斑点型斑点型35例:间接免疫荧光法(例:间接免疫荧光法(IIF法)法)测定抗测定抗dsDNA抗体抗体l 短膜虫的动基体内含有大量纯的短膜虫的动基体内含有大量纯的 dsDNA,无其他抗原干扰,可用,无其他抗原干扰,可用 作基质来测定抗作基质来测定抗dsDNA抗体。抗体。l 短膜虫替换小鼠肝切片或肝印片或短膜虫替换小鼠肝切片或肝印片或 Hep2,制成抗原基质,制成抗原基质抗抗dsDNA抗人抗人IgG FITC,阳性结果可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。

23、阳性结果可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。l 测定抗测定抗dsDNA抗体具有特异性强、敏感性高的优点。抗体具有特异性强、敏感性高的优点。36 用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。2.ELISA法法37SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳待检血清待检血清按分子大小分开不同区带按分子大小分开不同区带 分离分离转印转印NC膜上膜上抗抗ENA与膜上相应抗原带结合与膜上相应抗原带结合抗人抗人IgGHRPNCENA抗抗ENA抗人抗人IgGHRP显色显色3.IBT法法38l 类风湿因子类风湿因子(rheumatoid factor,RF):是抗变性是抗变性IgG

24、的的 自身抗体,为自身抗体,为19S的的IgM,也可见,也可见7S的的IgG和和IgA。与人变性与人变性IgG结合,不与正常结合,不与正常IgG发生凝集反应。发生凝集反应。l RF出现在类风湿性关节炎(出现在类风湿性关节炎(RA)患者中,约)患者中,约70%70%90%90%的血清中和约的血清中和约60%60%的滑膜液中可检出的滑膜液中可检出IgG类类RF;二、类风湿因子测定二、类风湿因子测定39l IgG类抗体与相应抗原结合后,即发生变性;类抗体与相应抗原结合后,即发生变性;l 在炎症过程中也可发生在炎症过程中也可发生IgG变性变性,构成自身抗,构成自身抗 原,刺激免疫系统产生各种抗原,刺激

25、免疫系统产生各种抗IgG抗体;抗体;l 滑膜液中的滑膜液中的IgG类类RF与变性与变性IgG结合形成中等结合形成中等 大小的大小的IC,比血清中,比血清中IgM类类RF更易致病。更易致病。40(一)(一)RF检测方法检测方法1 RF检测最常采用的试验方法。检测最常采用的试验方法。将将IgG吸附在聚苯乙烯胶乳颗粒上作为诊吸附在聚苯乙烯胶乳颗粒上作为诊断试剂,与待检血清中的断试剂,与待检血清中的RF结合,出现胶乳结合,出现胶乳凝集颗粒。但此法的灵敏度和特异性均不高,凝集颗粒。但此法的灵敏度和特异性均不高,而且只能检出血清中的而且只能检出血清中的IgM类类RF。间接胶乳凝集试验间接胶乳凝集试验412

26、 将待检血清稀释成一定浓度,再加入定量变将待检血清稀释成一定浓度,再加入定量变性性IgG诊断试剂,立即用透射比浊或速率散射比诊断试剂,立即用透射比浊或速率散射比浊仪测定血清中的浊仪测定血清中的RF。此法具有速度快、敏感。此法具有速度快、敏感性高(达性高(达ng/L水平)、精密度高(水平)、精密度高(CV5%5%)、)、稳定性好、能定量分析的优点,但仍局限在稳定性好、能定量分析的优点,但仍局限在IgM类类RF的检测。的检测。免疫比浊法免疫比浊法423 IgM、IgG和和IgA类类RF需要用需要用RIA法或法或ELISA法等方法检测,但前者有放射性污染,故临床上法等方法检测,但前者有放射性污染,故

27、临床上多采用多采用ELISA间接法或双抗原夹心法进行测定。间接法或双抗原夹心法进行测定。ELISA法法43(二)临床应用(二)临床应用常见常见AID的的RF阳性检出率阳性检出率疾病疾病RF(%)疾病疾病RF(%)干燥综合征干燥综合征9595结节性多动脉炎结节性多动脉炎5050类风湿类风湿70709090系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮3030硬皮病硬皮病/皮肌炎皮肌炎8080混合性结缔组织病混合性结缔组织病2525RF在诊断在诊断RA患者时并非特异的,也非唯一标准。患者时并非特异的,也非唯一标准。慢性活动性肝炎及老年人均可有不同程度的阳性率。慢性活动性肝炎及老年人均可有不同程度的阳性率。44三、其

28、他自身抗体测定三、其他自身抗体测定自身抗体的类型、检测方法及临床意义自身抗体的类型、检测方法及临床意义自身抗体类型自身抗体类型检测方法检测方法临床意义临床意义抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体(A-TG)荧光免疫法、荧光免疫法、ELISA、RIA桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎抗甲状腺过氧化物酶抗体抗甲状腺过氧化物酶抗体,),)ELISAGraves 病病,桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎抗乙酰胆碱受体抗体抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab)ELISA、RIA重症肌无力重症肌无力抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体(SMA)荧光免疫法、荧光免疫法、ELISA、RIA自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎,慢性活动性肝炎慢性活动性

29、肝炎,原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体抗线粒体抗体(AMA)荧光免疫法、荧光免疫法、ELISA、RIARA,SS,SLE,原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化,慢性活动性肝炎慢性活动性肝炎,持续性肝阻塞持续性肝阻塞抗胃壁细胞抗体抗胃壁细胞抗体荧光免疫法荧光免疫法恶性贫血恶性贫血抗胰岛素抗体(抗胰岛素抗体(IAA)ELISA胰岛素依赖性糖尿病胰岛素依赖性糖尿病抗精子抗体(抗精子抗体(AsAb)ELISA、荧光免疫法、荧光免疫法不育症不育症,不孕症不孕症抗红细胞抗体抗红细胞抗体直接凝集试验、直接凝集试验、Coombs试验试验新生儿溶血新生儿溶血,自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性

30、贫血抗血小板抗体抗血小板抗体ELISA法、法、ABC-ELISA法法原发性血小板减少性紫癜、输血史原发性血小板减少性紫癜、输血史抗心磷脂抗体(抗心磷脂抗体(ACA)RIA、ELISASLE,血栓血栓,自发性流产自发性流产,血小板减少血小板减少抗肾小球基底膜抗体抗肾小球基底膜抗体(GBM-Ab)荧光免疫法荧光免疫法Goodpasture综合征综合征,狼疮肾炎狼疮肾炎返回章目录返回章目录451.1.筛选试验与确诊性试验的合理组合;筛选试验与确诊性试验的合理组合;2.2.结合临床症状选择性检测相关的自身抗体;结合临床症状选择性检测相关的自身抗体;3.3.切忌盲目的全面检测自身抗体。切忌盲目的全面检测

31、自身抗体。4.4.通常以抗核抗体作为筛选试验,通常以抗核抗体作为筛选试验,ANA在许多在许多AID中中 可呈阳性。可呈阳性。5.5.ANA阳性时,再进行针对特异性靶抗原成分的自身阳性时,再进行针对特异性靶抗原成分的自身 抗体的检测,达到明确诊断的目的。抗体的检测,达到明确诊断的目的。第三节第三节 自身抗体的检测实验选择的原则自身抗体的检测实验选择的原则 一、自身抗体检测的一般原则一、自身抗体检测的一般原则46二、实验室方法的选择及结果的确认二、实验室方法的选择及结果的确认IIF法法筛选试验筛选试验 ANA抗抗dsDNAIB法法ELISA法法IFA法法特异性实验特异性实验抗原基质片抗原基质片(H

32、ep-2(Hep-2细胞、细胞、小鼠肝印片小鼠肝印片/切片切片),加入,加入自身抗体后与抗原成分相自身抗体后与抗原成分相结合,再与荧光标记的抗结合,再与荧光标记的抗抗体结合,根据荧光在细抗体结合,根据荧光在细胞上的着色部位进行定位胞上的着色部位进行定位分析。分析。特异性纯化抗原包被载特异性纯化抗原包被载体,检测特异性自身抗体,检测特异性自身抗体;特异性抗原不易纯体;特异性抗原不易纯化或不明确,用化或不明确,用ELISA法和法和IBT法等检测自身法等检测自身抗体会有一定误差。抗体会有一定误差。返回章目录返回章目录47小小 结结 自身免疫病自身免疫病是由于某种原因使自身免疫应答过是由于某种原因使自

33、身免疫应答过强或持续时间过久,表现为质和量的异常,所产强或持续时间过久,表现为质和量的异常,所产生的自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞对表达生的自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞对表达自身靶抗原的细胞和组织发动攻击,导致损伤或自身靶抗原的细胞和组织发动攻击,导致损伤或功能障碍,并出现相应临床症状。功能障碍,并出现相应临床症状。48 风湿病风湿病泛指影响骨、关节及周围软组织等一泛指影响骨、关节及周围软组织等一组疾病。组疾病。结缔组织病结缔组织病是指病变主要发生于结缔组是指病变主要发生于结缔组织,具有组织黏液样水肿、纤维蛋白样变性及坏织,具有组织黏液样水肿、纤维蛋白样变性及坏死性血管炎等基本病理变化的一组疾病。自身免死性血管炎等基本病理变化的一组疾病。自身免疫病的实验室诊断主要依赖抗核抗体和类风湿因疫病的实验室诊断主要依赖抗核抗体和类风湿因子等的测定,其临床意义对不同自身免疫病的患子等的测定,其临床意义对不同自身免疫病的患者有区别,其表现是多样性的。者有区别,其表现是多样性的。返回章目录返回章目录49THANK YOU FOR YOUR ATTENTION!返回总目录返回总目录50

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