肠杆菌科1教学文案.ppt

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放大,10000,倍,12,2,、营养要求不高,普通琼脂平板：圆形凸起,灰白色,S,型菌落；,肠道鉴别培养基：有色菌落,(,S,培养基,),13,3.发酵葡萄糖、乳糖等多种糖类，产酸产气,糖发酵管,14,常用分离培养或鉴别肠道菌的培养基,SS,琼脂培养基,中国兰培养基,双糖铁培养基等,15,挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定,SS,培养基,中国兰培养基,发酵乳糖菌落,大肠杆菌,不发酵乳糖菌落,肠道致病菌,分离培养,16,初步鉴别,观察指标：葡萄糖、乳糖发酵、,H,2,S,、动力,上层固体斜面：乳糖,+,指示剂,下层半固体：葡萄糖,+,指示剂,+FeSO,4,双糖铁培养基,17,未接种管,大肠杆菌,生长管,记录：,葡萄糖,乳糖,动力,+,H,2,S ,+,+,18,进一步鉴别,19,右,20,阴,21,枸橼酸盐利用实验,左：大肠埃希菌（阴性）,右：产气杆菌（阳性）,22,吲哚,甲基红,VP,枸橼酸盐利用试验,（,IMViC,：,+-,）,23,4.,抗原构造,:,O,、,H,、,K,(,组,1,和组,2,）,抗原,血清型表示法，如,O157:H7,24,二、致 病 性,25,(,一,),致病物质,1,.,黏附素,(,菌毛等,):,黏附作用,2.K,抗原,:,抗吞噬作用,二、致 病 性和免疫性,26,3.,外毒素：,肠毒素,（,ETEC,）,志贺毒素（,Shiga toxin,，,Stx-I/II,）,（,EHEC,）,溶血素,A,：,是尿路致病性大肠杆菌,（,UPEC,）主要致病物质,不耐热肠毒素（,LT-I/II,）,（,heat labile enterotoxin,）,耐热肠毒素（,STa/b,）,（,heat stable enterotoxin,）,27,(,二,),所致疾病,1.,肠道外感染：,化脓性感染,(,败血症、新生儿脑膜炎）,泌尿道感染,（,UPEC,）,等,2.,肠道内感染：外源性感染,肠,产毒性,大肠杆菌,(E,T,EC),肠,侵袭性,大肠杆菌,(E,I,EC),肠,致病性,大肠杆菌,(E,P,EC),肠,出血性,大肠杆菌,(E,H,EC),肠,集聚性,大肠杆菌（,E,A,EC,）,28,肠产毒素性大肠埃希菌（,enterotoxigenic E.coli,ETEC,）,5,岁以下婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌,致病物质：,肠毒素（,LT,ST,）,定植因子,（,colonization factor antigen,CFA-,）,CFA,抗原性强，其抗体可阻抑细菌的粘附，因此可制备,CFA,疫苗,29,加热,6530,分钟失活,不耐热肠毒素,（,heat labile enterotoxin,LT,）,A,亚单位,毒素活性中心，激活肠黏膜细胞上,的腺苷酸环化酶，使,ATP,转化为,cAMP,；,与霍乱弧菌肠毒素氨基酸有,75%,同源性,B,亚单位,毒素结合中心，与小肠黏膜上皮,细胞上的,GM1,神经节苷脂受体结合，引导,A,亚单位进入细胞内,30,LT,化学结构,与致病机理,A1,B,亚单位,A2,受体,GM1,细胞膜,腺苷环化酶,ATP,cAMP,分泌亢进,重吸收受阻,腹泻,腹泻,腹泻,31,耐 热 肠 毒 素,（,heat stable enterotoxin,ST,）,加热,10020,分钟不失活,与霍乱弧菌肠毒素无同源性,两型：,STa,、,STb,32,鸟苷酸环化酶,cGMP,腹泻,腹泻,腹泻,水电解质平衡率乱,STa,化学结构,与致病机理,STa,33,ETEC,引起的水样腹泻,34,肠侵袭性大肠埃希菌,(enteroinvasive E.coli,EIEC),似菌痢，有发热、脓血便、里急后重等症状,致病机理,不产生肠毒素,侵袭结肠粘膜上皮并繁殖,细菌死亡后释放内毒素，引起炎症,侵犯较大的儿童和成人,35,肠致病性大肠埃希菌,(enteropathogenic E.coli,EPEC),婴幼儿腹泻,致病机理,不产生肠毒素和其他外毒素，无侵袭力,粘附上皮细胞和破坏肠粘膜微绒毛,上皮细胞排列紊乱，功能受损，导致腹泻,A/E,组织病理损伤,36,肠出血性大肠埃希菌（,enterohemorrhagic E.coli,EHEC,）,出血性结肠炎、溶血性尿毒综合征的病原体,志贺毒素,(shiga toxins,stx),Stx A,亚单位：,(,毒性部分,),终止蛋白质合成,B,亚单位：,(,结合部分,),糖脂受体,结合,肠绒毛结构破坏 吸收分泌 腹泻,肠毒性,细胞毒性,37,1977,年首次提出大肠埃希菌可引起出血性腹泻,1983,年命名为肠出血性大肠,埃希,菌（,EHEC,）,1982,年美国首次分离,O157,：,H7,大肠埃希菌最具代表性人类因食入消毒不完全的牛奶、牛肉等而感染,38,1999,年至,2000,年在我国江苏、安徽、河南等省发生了较大规模的暴发流行,1996,年日本大坂地区暴发流行,目前,O157,感染已成为一个世界性的卫生问题，美 国、加拿大、日本、瑞典及我国等国家先后将其作为,法定报告传染病,新现传染病（,emerging infectious disease,）,O157,：,H7,大肠埃希菌,39,临床表现,-1,出血性结肠炎,鲜血样便,腹部痉挛性疼痛,低烧或不发烧,40,临床表现,-2,溶血性尿毒综合症,（,hemolytic uremic syndrome,，,HUS,）,血小板减少,溶血性贫血,急性肾功能衰竭,多数发生于儿童和老人急性腹泻数天或,1-2,周后,41,E.coli,42,肠集聚性大肠埃希菌,(enteroaggregative E.coli,EAEC),婴儿和旅行者持续性水样腹泻,致病原理,质粒介导呈砖块状集聚性黏附上皮细胞，阻止液体吸收,刺激粘液分泌,43,引起胃肠炎的大肠埃希菌,菌株,作用部位,疾病与症状,致病机制,常见,O,血清型,ETEC,小肠,旅行者腹泻；婴幼儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，腹痛，低热,质粒介导,LT,和（或）,ST,肠毒素，大量分泌液体和电解质,6,、,8,、,15,、,25,、,27,、,78148,、,159,EIEC,大肠,水样便，继以少量血便，腹痛，发热,质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞,28ac,、,29,、,112ac,、,124,、,136,、,143,、,144,、,152,、,164,、,167,EPEC,小肠,婴儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，发热,质粒介导粘附和破坏上皮细胞绒毛结构导致吸收受损和腹泻,2,、,55,、,86,、,111,、,114,、,119,、,125,、,126,、,127,、,128,、,142,、,158,EHEC,大肠,水样便，继以大量出血，剧烈腹痛，低热或无，可并发,HUS,、血小板减少性紫癜,溶原性噬菌体编码,Stx-I,或,Stx-,，中断蛋白质合成,157,、,26,、,111,EAEC,小肠,婴儿腹泻；持续性水样便，呕吐，脱水，低热,质粒介导集聚性粘附上皮细胞，阻止液体吸收,42,、,44,、,3,、,86,等,44,三、微 生 物 学 检 查,45,（一）肠外感染：分离培养：,鉴定：,IMViC,（,+-,）,注：尿路感染除确定大肠杆菌外，还要计数中段尿细菌总数，,每毫升尿含菌超过,10,万，,诊断为尿路感染。,（二）肠内感染：,ETEC,：用,ELISA/,基因探针,查毒素,EIEC,：用,Senery,试验（,+,）,EPEC,：用,O.H,已知抗体测未知细菌（抗原）,EHEC,：,VT,毒素用,ELISA/PCR,方法,EAggEC,：液体培养,集聚试验：检测受菌的粘附性,46,在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标,3个大肠菌群/,1L,饮水,5个大肠菌群/100,ml,瓶装汽水、果汁 100个细菌总数/1,ml,饮水,3.,卫生细菌学,大肠菌群指数,每1000,ml,水中大肠菌群数,我国的卫生标准：,细菌总数,每1,ml,或1,g,样品中细菌总数,47,在分子生物学和基因工程实验中,重要的实验材料和研究对象,也是重要的实验材料和研究对象,大肠杆菌是现代生物学中研究最多的一种细菌，作为一种模式生物，其基因组序列已全部测出。用分子生物学方法在大肠杆菌得出的结论可用于其它生物的研究。此外，在生物工程中,，大肠杆菌被广泛用于基因复制和表达。,48,1,、抗生素治疗应在药敏试验的指导下进行；,2,、充分烹饪可减少,ETEC,、,EHEC,感染；,3,、菌毛疫苗、毒素,B,亚单位疫苗,。,四、防 治 原 则,49,第二节 志 贺 菌 属,(Shigella),50,1.G,直杆菌,有菌毛,无鞭毛,动力,-,(,痢疾杆菌,),动力,+,(,大肠杆菌,),一、生 物 学 性 状,51,2.,葡萄糖,+,（产酸不产气）,乳 糖,-,（宋内氏迟缓发酵）,不产生,H,2,S,葡萄糖发酵管,乳糖发酵管,52,SS,琼脂培养基,志贺菌形成无色半透明菌落,53,KIA,培 养 基,：大肠埃希菌,：志贺菌,：对照管,结果：,葡萄糖,+,乳糖,-,动力,-,H,2,S -,54,55,3.,抗原构造,K,抗原,O,抗原,:,分,4,群,40,余型,A,群，痢疾志贺氏菌,10,个型,B,群，,福氏志贺氏菌,13,个型,C,群，鲍氏志贺氏菌,18,个型,D,群，,宋内志贺氏菌,1,个型,症状重,易转为慢性,轻型感染,56,57,二、致病性与免疫性,1,、侵袭力：,菌毛,有利于菌粘附回结肠粘膜,2,、毒 素：,加重局部和全身症状,内毒素,作用于肠壁,通透性增加,粘膜炎症、溃疡,局部,全身,内毒素血症,外毒素（,A,群,1,、,2,型）,与内毒素协同作用,致 病 物 质,肛门括约肌,溶血性尿毒综合征,(HUS),58,1,：志贺菌侵入,M,细胞；,2,：诱导巨噬细胞吞噬；,3,4,：从巨噬细胞中逃逸；,5,7,：从粘膜上皮细胞基底部侵入胞浆中并增殖；,8,10,：侵入邻近粘膜上皮细胞胞浆中，并生长繁殖。,志贺菌侵袭肠粘膜上皮细胞过程,59,临床表现,急性细菌性痢疾,急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重,非急性典型：小儿,中毒型,成人,易误漏诊,慢性细菌性痢疾：病程迁移二月以上,传染源,:,患者与带菌者,所 致 疾 病,免疫力,:SIgA,60,中毒性痢疾病人,61,及时送,/,暂用,30%,甘油缓冲水保存,SS,平板（无色透明小菌落）,血清学反应（玻片凝集）,检 测 报 告,分离培养,新鲜脓血便,/,肛拭,双糖培养基（生化反应）,快速诊断,荧光菌球试验,协同凝集试验,三、微 生 物 学 检 查,PCR,、基因探针,62,侵袭力测定,-Sereny,试验,63,药敏试验,非特异性预防以人为主,口服减毒活疫苗,更有效的疫苗还在研制中,四、防 治 原 则,64,问答题,根据其不同的血清型别、毒力和所致临床症状不同,可将致泻的大肠埃希菌分为哪五类,?,课后复习题,65,鉴别肠道致病菌和非致病菌常选用,A.,吲哚试验,B.,菊糖分解试验,C.,葡萄糖发酵试验,D.,乳糖发酵试验,E.,甘露醇发酵试验,【,答案,】D,引起出血性结肠炎的细菌是,A.,伤寒沙门菌,B.,金黄色葡萄球菌,C.,霍乱弧菌,D.,肠出血型大肠埃希菌（,O157,：,H7,）,E.,副溶血性弧菌,【,答案,】D,66,此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢,