甲胎蛋白测定.doc

甲胎蛋白测定（AFP）
1.方法：双抗体夹心法
2.原理：采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步：10μl标本、生物素化的抗AFP单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗AFP单克隆抗体混匀形成夹心复合物。
·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
3.仪器及参数：
Elecsys 2010技术参数
系统 30个标本位
15个试剂位
最大吸样头上载量为 360个
最大反应杯上载量为180只
标本类型 血清和血浆
控制单元 触摸屏
系统接口 双向串型RS232接口
4.应用试剂：
4.1.瑞士罗氏
4.2.直接上机使用
4.3 试剂组成：M： 链霉亲和素包被的微粒。
R1：生物素化的抗AFP单克隆抗体。
R2：Ru(bpy)2+标记的抗AFP单克隆抗体。
5.操作方法：
详见 Elecsys 2010电化学发光仪操作规程
6.临床意义：
6.1检测范围：0.500─1000IU/ml 或 0.605-1210 ng/ml
参考值646名健康人测定结果
95%<=5.8IU/ml或<=7.0ng/m
100%<=11.3IU/ml或<=13.6ng/ml
6.2 意义：AFP来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道。70－95%的原发性肝癌患者的AFP升高，越是晚期，AFP含量越高。但尚未发现AFP含量与肿瘤大小、恶性程度等有关系。AFP含量显著升高一般提示原发性肝细胞癌。在转移性肝癌中，AFP一般低于350-400 IU/ml。AFP中度升高也常见于酒精性肝硬化、急性肝炎以及HBsAg携带者。不推荐将AFP用于普通人群的癌症筛查。孕妇血清或羊水AFP升高提示胎儿脊柱裂,无脑症,食管atresia或多胎,AFP降低(结合孕妇年龄)提示未出生的婴儿有Down's综合征的危险性.
6.3标本采集与要求:
血清：按标准常规方法采集。
血浆：肝素、EDTA－K3或枸橼酸钠抗凝。
其中用枸橼酸钠抗凝的血浆，测定结果需+10%。
标本在2－8 度 可稳定7天，-20度 可稳定3个月。
含沉淀的标本使用前需离心。不要加热灭活标本。
标本和质控品禁用叠氮钠防腐。
7.注意事项：
7.1 甲胎蛋白（AFP）测定值的高低与所采用的检测方法密切相关。因此检测报告应注明所采用的方法。用两种方法测出的含量不能相互直接比较，以免出错。在疗效观察过程中，如因检测方法改动引起的含量变化，必须用原法同时测定核实过。
7.2干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素<65mg/dl）、溶血（血红蛋白<2.2g/dl）、脂血（脂质<1500mg/dl）和生物素<60ng/ml等干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干（1500U/ml）。
37种常用药物经试验对本测定无干扰。AFP浓度高达1百万IU/ml（1.21百万ng/ml）也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或诊断的病人会出现假阳性反应。Elecsys AFP测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。

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