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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,溶血性链球菌检验,分布,溶血性链球菌在自然界中分布较广,存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中,可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染,被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。引起化脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病,生物学性状,1,形态结构,2,培养特性,3,分类,4,生化反应,5.,抵抗力,形态与染色,球形或卵圆形,直径,0.5,1 m,,链状排列,链长短不一,短者,4,8,个细胞组成,长者,20,30,个,无芽胞,无鞭毛,培养早期(,24h,)形成透明质酸的荚膜,培养特性,需氧或兼性厌氧,营养要求较高,,需补充血液、血清、葡萄糖等,在血清肉汤中易形成长链,管底呈絮状沉淀,在血琼脂平板上,不同菌株溶血不一,最适生长温度为,37,,最适,pH,为,7.4-7.6,培养特性,-,血平板,血平板上菌落为灰白色,半透明或不透明,表面光滑,有乳光,直径约,0.5,0.75 mm,,为圆形突起的细小菌落,乙型溶血链球菌周围有,2,4 mm,界限分明、无色透明的溶血圈,生化反应,分解葡萄糖,产酸不产气。对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异,一般不分解菊糖,不被胆汁溶解,触酶阴性,(,与葡萄球菌相区别,),毒素及侵袭性酶,链球菌溶血素,致热外毒素:曾称红疹毒素或猩红热毒素,透明质酸酶:又称扩散因子,溶解细胞间质,链激酶,:又称链球菌纤维蛋白溶酶,能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶,具有增强细菌在组织中的扩散作用,该酶耐热,,10050,分钟仍可保持活性。,链道酶:又称链球菌,DNA,酶,杀白细胞素:能使白细胞失去动力,抵抗力,该菌抵抗力一般不强,,6030min,即被杀死,对常用消毒剂敏感,在干燥尘埃中生存数月,乙型链球菌很少有耐药性,微生物学检查,溶血性链球菌检测流程,(,GB/T4789.11,),25g(ml),样品,+225,ml,无菌生理盐水,葡萄糖肉浸液肉汤,或匹克氏肉汤,血平板,血平板,(,分纯培养,),杆菌肽敏感试验,链激酶试验,观察溶血,革兰氏染色,报告,36,+,1,24h,36,+,1 24h,36,+,1 24h,鉴定步骤,溶血及菌落形态的观察,革兰氏染色,链激酶试验,杆菌肽敏感试验,链激酶试验,-,原理,致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶,(,即溶纤维蛋白酶,),,此酶能激活正常人体血液中的血浆蛋白酶原,使成血浆蛋白酶,而后溶解纤维蛋白,链激酶试验,-,方法,吸取草酸钾血浆,0.2mL,,加,0.8mL,灭菌生理盐水,混匀,加入链球菌,18-24h36,肉浸液肉汤培养物,0.5mL,及,0.25%,氯化钙,0.25mL,,混匀,置于,36,水浴,10min,血浆混合物自行凝固,观察凝块,重新完全溶解的时间,,完全溶解为阳性,如,24h,后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照,用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。,杆菌肽敏感试验,取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上,用灭菌镊子夹取每片含有,0.04,单位的杆菌肽纸片置于上述平板上,,36,培养,18-24h,,如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做对照,结果报告,在,25g(ml,)样品中检出或未检出溶血性链球菌,谢 谢,
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