双氧水残留检测方法的验证.doc

清洗水中残留双氧水检测方法的验证
1、 目的： 建立设备清洗水中双氧水残留量限度的检测方法，用于生产车间设备双氧水消毒验证；纯化水储罐、纯化水输送管道系统的双氧水消毒验证；纯化水活性炭过滤器清洗后消毒验证时的清洗效果测定。
2、 依据与原理：
2.1、 依据：参照中国药典2005版；
2.2、 原理：双氧水具有强氧化性，与碘化钾(KI)中典离子（I–）发生氧化还原反应，使电离子还原成典：
H2O2 ＋ KI → I2 ＋ H2O
I2 遇淀粉显蓝色
3、 试剂、试液及配制：
3.1、 碘化钾 分析纯；
3.2、 1﹪淀粉溶液：试剂级淀粉；称取淀粉1.0g淀粉，用纯化水配制成100ml；
3.2、双氧水：市售26-28﹪，药用级；
试液配制：按下述简约公式：100ml:n=X:1%,(n为浓双氧水浓度, X为配制1%浓度双氧水所吸取的浓双氧水毫升数, 100ml为需配制1%双氧水的容积)，准确量取Xml浓双氧水定容至100ml，即得1%浓度的双氧水。用纯化水将此1%浓度双氧水溶液逐步稀释成0.1﹪、0.01﹪、0.001﹪、0.0001﹪、0.00001﹪浓度的标准试液，备用。
4、试验内容、方法：
4.1、 方法灵敏度测试：
用100ml洁净比色管取上述新配制的双氧水试液各50ml，各加碘化钾1.5g，充分摇匀，加3滴1﹪淀粉溶液摇匀，溶液呈梯度蓝色，至0.0001﹪时呈极浅蓝色，0.00001﹪浓度时几乎无色。表明碘化钾、淀粉指示剂对双氧水有灵敏的显色作用。
4.2 、显色稳定性测试：将上述显色液存放于室温，每隔1小时观察溶液颜色，蓝色程度能维持的时间。
4.3 、空白试验：另取用100ml洁净比色管，加纯化水50ml加碘化钾1.5g，充分摇匀，加3滴1﹪淀粉溶液摇匀作空白，观察颜色；
4.4 、双氧水稳定性测试：按3.2 方法配制5组双氧水系列稀释浓度的溶液各100ml，按每2小时检测双氧水浓度（限度）1次，观察双氧水的显色状况，判断双氧水的稳定性。
5、 清洗液的残留量检测试验：
5.1、洗脱液残留量可接受标准：0.001﹪
5.2、测试方法：
用100ml洁净的比色管，纯化水管道消毒后用纯化水清洗，取不同清洗时间的最后洗脱纯化水50ml，加碘化钾1.5g，充分摇匀，加3滴1﹪淀粉溶液摇匀，作测试液；另取100ml洁净的比色管，将市售双氧水配制成0.001﹪，取50ml，加碘化钾1.5g，充分摇匀，加3滴1﹪淀粉溶液摇匀，作对照管；将两比色管置于白色瓷板或白纸上，垂直观察，测试液显色深度不得深于对照管。
在纯化水储罐取样点（MF1）采样检测不显色。

6、检测方法验证结果及评价：
6.1、方法灵敏度：本方法极灵敏，显色由深蓝色至极淡蓝色呈明显的梯度色差，至千万分之一时几乎无色，纯化水显无色；表明本方法很灵敏。结果见表1。
6.2、显色的稳定性：双氧水在稀释状态下不稳定，但形成典与淀粉反应后色泽较稳定，能维持6小时以上，本方法足可以作为消毒验证时的判别方法。结果见表2 。
6.3、空白试验：以生产的纯化水作显色试验，不显色，表明无氧化剂，没有发生氧化还原反应，不干扰本法测定。结果见表1。
6.4、双氧水稳定性测试：双氧水在2小时时色度与初始色度比无变化；第4小时已有原深蓝色（1﹪）变成淡蓝色（0.1﹪）；第6小时已有原深蓝色（1﹪）变成淡蓝色（0.01﹪）；说明双氧水在稀浓度下不太稳定，可以推断，残留双氧水在纯化水管路循环状态下很快破坏，或是自身降价，或是被氧化还原掉。表3
6.5、清洗液的残留量检测：清洗不同时间后的洗脱液显色有明显梯度，当反复用纯化水冲洗后，最后清洗水呈无色，表明本法可以作为设备清洗后双氧水的残留量检测方法。结果见表4.

7、结论：
本检测方法较稳定，可靠，可以作为设备、管道、活性炭用双氧水消毒后检测双氧水残留量。

8、 附件
8.1、附件表1：
8.2、附件表2；
8.3、附件表3；
8.4、附件表4；
8.1 表1 不同浓度呈色反应
双氧水浓度
显色结果
1﹪
深蓝色
0.1﹪
较深蓝色
0.01﹪
浅蓝色
0.001﹪
淡蓝色
0.0001﹪
极淡蓝色
0.00001﹪
几乎无色
纯化水
无色
操作人： 日期： 复核人： 日期：
8.2 表2 显色的稳定性
呈色时间
双氧水浓度
1h
2h
3h
4h
5h
6h
1%
深蓝色
深蓝色
深蓝色
深蓝色
深蓝色
深蓝色
0.1%
较深蓝色
较深蓝色
较深蓝色
较深蓝色
较深蓝色
较深蓝色
0.01%
浅蓝色
浅蓝色
浅蓝色
浅蓝色
浅蓝色
浅蓝色
0.001%
淡蓝色
淡蓝色
淡蓝色
淡蓝色
淡蓝色
淡蓝色
操作人： 日期： 复核人： 日期：
8.3 表3 双氧水稳定性测试
测试时间
双氧水浓度
1h
2h
3h
4h
5h
6h
1%
/
深蓝色
/
较深蓝色
/
浅蓝色
0.1%
/
较深蓝色
/
浅蓝色
/
淡蓝色
0.01%
/
浅蓝色
/
淡蓝色
/
轻淡蓝色
0.001%
/
淡蓝色
/
轻淡蓝色
/
极淡蓝色
操作人： 日期： 复核人： 日期：
8.4表4清洗液的残留量检测
洗脱次数
1
2
3
4
5
纯化水储罐
洗脱液用量
0.5m3
0.5m3
0.5m3
0.5m3
0.5m3
/
色 泽
淡蓝色
极淡蓝色
近乎无色
无色
/
无色
操作人： 日期： 复核人： 日期：