动物细胞融合及单克隆抗体(学案).doc

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
【学习目标】
1、动物细胞融合的过程
2、单克隆抗体制备的过程
【学习重点和难点】
1、教学重点
（1）动物细胞融合
（2）单克隆抗体的制备过程
2、教学难点
单克隆抗体的制备过程
【自主学习】（阅读课本52页完成相关内容）
1、 动物细胞的融合
（1）概念：指 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称为细胞杂交。
（2）原理:____________________
(3) 诱导动物细胞融合的方法有三种：生物方法（ ）、化学方法（ ）、物理方法（ ）。
（4）意义：细胞融合技术突破了 得局限，使 成为可能
（5）应用：细胞融合技术已经成为研究 等的重要手段，而杂交瘤技术，为制备 开辟了新途径。
思考与讨论:
1、 A、B两两细胞融合的种类有___________种,分别是________________________
2、 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较

动物细胞融合
植物体细胞杂交
原理

细胞膜的流动性
植物细胞全能性
融合前
用 使细胞分散后诱导细胞融合
 用 酶和 酶去除细胞壁后诱导
融合
诱导手段

物理法（
）
,化学法（ ）
用途

二、单克隆抗体
问题1：抗体由什么细胞产生？长期以来，人们是如何获得抗体的方法？
问题2：这种抗体有什么缺点？为什么？
问题3：如何获得大量性质单一的抗体呢？
1．概念：由单一B淋巴细胞进行无性生殖形成的细胞所产生的化学性质 、 强的抗体。
2.单克隆抗体的制备过程：
第一步：将　　　 　注射到小鼠体内进行免疫；
第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的　　　　　　　细胞，与小鼠的　　　　　　　　　细胞在　　　　　　　，或聚乙二醇的诱导下融合；
第三步：在特定的　　　　　培养基中，筛选出　　　　　细胞；
第四步：克隆化培养杂交瘤细胞，进行抗体检测，从中挑选出　　　　　　　　的细胞群，继续培养；
第五步：将该杂交瘤细胞在 条件下大规模培养或注射到小鼠　 　　　内增殖，然后再从培养液或小鼠腹水中提取，分离纯化单克隆抗体；
3.单克隆抗体的应用
（1）单克隆抗体的优点：性质单一，          强、          高，           大。
（2）作为诊断试剂：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞制备的单克隆抗体定位诊断．优点：
。
（3）用于治疗疾病和运载药物：①运用药物与单克隆抗体连接在一起制成＂ ＂．②优点： 。
3、单克隆抗体和常规抗体的比较

单克隆抗体
常规抗体
分泌
杂交瘤细胞
各B淋巴细胞
特点

特异性差，灵敏度低
生产

产量低,分离困难

两个过程：
动物细胞融合过程
单克隆抗体制备过程
三个“一”：
一个诱导细胞融合的新方法———灭活的病毒
一个新细胞————————杂交瘤细胞
一个优势—————————单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势

巩固练习：
1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞 ( )
A．AAaa B．AaBb C．Aabb D．BBbb
2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 ( )
①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同 ④都能形成杂种细胞
A.①② B.①③ C.②④ D.③④
3、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是 ( )
A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断
B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗
C、可以利用基因工程技术生产
D、可以在生物体内生产，不能体外生产
4、“生物导弹”是指 ( )
A、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体
C、杂交细胞 D、B淋巴细胞

巩固练习：1---4、CCDB

植物细胞杂交(番茄马铃薯植株)
动物细胞融合(单克隆抗体制备)
过   程
第1步
原生质体的制备(酶解法)
正常小鼠的处理(注射灭活抗原)
第2步
原生质体的融合(物化法)
动物细胞融合(物化生法)
第3步
杂种细胞的筛选和培养
杂交瘤细胞的筛选和培养
第4步
杂种植株鉴定
提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)
原理/理论基础
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
细胞膜的流动性、细胞增殖
融合前处理
酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶
注射特定抗原法免疫处理正常小鼠
促融因子
物理法：电刺激、离心、振动
化学法：聚乙二醇
物化法：与植物相同
生物法：灭活的仙台病毒
意义和用途
(1)克服有性远缘杂交不亲和性障碍(2)培育作物新品种
①制备单克隆抗体
②有助于疾病的诊断、治疗、预防
【总结归纳】植物体细胞杂交与动物细胞融合比较

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