动物细胞融合及单克隆抗体(学案).doc

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体【学习目标】1、动物细胞融合的过程2、单克隆抗体制备的过程【学习重点和难点】1、教学重点（1）动物细胞融合（2）单克隆抗体的制备过程2、教学难点 单克隆抗体的制备过程【自主学习】（阅读课本52页完成相关内容）1、 动物细胞的融合（1）概念：指 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称为细胞杂交。（2）原理:_ (3) 诱导动物细胞融合的方法有三种：生物方法（ ）、化学方法（ ）、物理方法（ ）。（4）意义：细胞融合技术突破了 得局限，使 成为可能（5）应用：细胞融合技术已经成为研究 等的重要手段，而杂交瘤技术，为制备 开辟了新途径。思考与讨论:1、 A、B两两细胞融合的种类有_种,分别是_2、 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较动物细胞融合植物体细胞杂交原理细胞膜的流动性植物细胞全能性融合前用 使细胞分散后诱导细胞融合用 酶和 酶去除细胞壁后诱导 融合诱导手段物理法（ ）,化学法（ ）用途二、单克隆抗体问题1：抗体由什么细胞产生？长期以来，人们是如何获得抗体的方法？ 问题2：这种抗体有什么缺点？为什么？问题3：如何获得大量性质单一的抗体呢？1概念：由单一B淋巴细胞进行无性生殖形成的细胞所产生的化学性质 、 强的抗体。2.单克隆抗体的制备过程：第一步：将 注射到小鼠体内进行免疫；第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的细胞，与小鼠的细胞在，或聚乙二醇的诱导下融合；第三步：在特定的培养基中，筛选出细胞；第四步：克隆化培养杂交瘤细胞，进行抗体检测，从中挑选出的细胞群，继续培养；第五步：将该杂交瘤细胞在 条件下大规模培养或注射到小鼠 内增殖，然后再从培养液或小鼠腹水中提取，分离纯化单克隆抗体；3.单克隆抗体的应用（1）单克隆抗体的优点：性质单一， 强、 高，大。（2）作为诊断试剂：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞制备的单克隆抗体定位诊断优点： 。（3）用于治疗疾病和运载药物：运用药物与单克隆抗体连接在一起制成 优点： 。3、单克隆抗体和常规抗体的比较单克隆抗体常规抗体分泌杂交瘤细胞各B淋巴细胞特点特异性差，灵敏度低生产产量低,分离困难两个过程： 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程三个“一”： 一个诱导细胞融合的新方法灭活的病毒 一个新细胞杂交瘤细胞 一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势巩固练习：1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞( )AAAaa BAaBb CAabb DBBbb2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 ( )诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞A.B. C.D.3、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是( )A、可以制成诊断盒用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产4、“生物导弹”是指( )A、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞 D、B淋巴细胞巩固练习：1-4、CCDB植物细胞杂交(番茄马铃薯植株)动物细胞融合(单克隆抗体制备)过 程第1步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠的处理(注射灭活抗原)第2步原生质体的融合(物化法)动物细胞融合(物化生法)第3步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选和培养第4步杂种植株鉴定提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)原理/理论基础细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶注射特定抗原法免疫处理正常小鼠促融因子物理法：电刺激、离心、振动化学法：聚乙二醇物化法：与植物相同生物法：灭活的仙台病毒意义和用途(1)克服有性远缘杂交不亲和性障碍(2)培育作物新品种制备单克隆抗体有助于疾病的诊断、治疗、预防【总结归纳】植物体细胞杂交与动物细胞融合比较第 3 页