药理学实验一离体平滑肌α抗交感活性测定.doc

实验一 离体平滑肌α-抗交感活性测定

【目的】 观察各种药物对去甲肾上腺素引起血管平滑肌收缩作用降低的程度。
【材料】
动物：Pirbring White豚鼠，雌雄均可，体重400±10g。
仪器：器官槽，水平换能器，等张换能器，手术器械。
药物：Krebs－Henseleit缓冲液，10-9-10-5mol/L去甲肾上腺素，待测药
物。
【操作步骤】
将动物击晕放血处死，迅速取下肺动脉或胸主动脉，切成宽1－2mm，长15－20mm的螺旋条，固定在器官槽中，血管条前负荷1g。槽内营养液为含11.5mol/L葡萄糖的Krebs－Henseleit缓冲液，恒温37°C，通入95％O2 ，5%CO2气体。连接等张换能器（测定等长收缩力）或水平换能器（测定血管条长度变化）。平衡60 min，稳定之后开始实验，依次加入10-9-10-5mol/L 去甲肾上腺素，观察血管收缩功能，当达到强弱一致的收缩坪值时，开始加入待测药物(可连续给药)，至该药物的最大效应。
【结果】
1、测定给药前后血管的收缩力。
2、以NA引起的收缩力为100％，计算药物的抑制率。
3、从单个剂量效应曲线上测定IC50值。IC50表示对去甲肾上腺素引起收缩产生50％舒张效应时对应药物剂量。
【注意事项】
1、 若加入代测药物后，血管舒张活性不明显，可加入酚妥拉明（1×10 -7 mol/L）,以测定血管标本的敏感性。
2、 如果化合物具有血管舒张活性，则增加去甲肾上腺素的浓度以逆转血管舒张活性。
3、 Krebs－Henseleit缓冲液组分(mmol/L)：NaCl 118，KCl 4.7，
CaCl 2 2.5，KH2PO4 1.2，NaHCO3 25，MgSO4 1.2和葡萄糖11.5，pH 7.4。