微藻抑制病原菌研究.doc

微藻对于病原菌 之抑菌实验

1. I. galbana活藻抑制病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106cell/ml 的 I. galbana 活体细胞抑制 103CFU/ml病原菌。
实验结果显示出I. galbana在不同浓度下皆有抑制病原菌生长之成效，并且在 72
小时发现104的组别其菌量已下降至0，随后在96小时发现105 及106的组别其菌量亦下降
至0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组
(p＜0.05)，并且105的组别其菌量显着低于106的组别(p＜0.05)；添加菌液48小时，各处理组
的菌量皆显著低于对照组 (p＜0.05)，但是各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)；
添加菌液72小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组 (p＜0.05)，并且104的组别其菌量
显著低于105、106 的组别(p＜0.05)，而 104的组别，其菌量已达到0；添加菌液96小时，
各处理组的菌量皆显著低于对照组 (p＜0.05)，且104、105、106 的组别，其菌量皆达到0 。

2.I. galbana 细胞内产物抑制病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106 cell/ml 的 I. galbana 细胞内产物抑制103CFU/ml 病原菌，
实验结果显示出 I. galbana 在 48-96 小时，105、106 的组别皆有抑制 病原菌 生长之
效果。实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液 24 及 48 小时，104的组别其菌量显著高
于 对照组及 105、106的组别(p＜0.05)， 105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而
106的 组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105的组别其菌量
显著低于104 、106的组别(p＜0.05)，而 106的组别其菌量又显著低于104的组别(p＜0.05)；添加
菌液72小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而 105、106的组别其菌量显著低于

对照组(p＜0.05)。在各处理组中，104的组别其菌量显著高于 105、106的组别(p＜0.05) ，
而106的组别其菌量亦显著高于 105的组别(p＜0.05)；添加菌液 96 小时，104的组别其菌量
显著高于对照组(p＜0.05)，而 105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理
组中， 104的组别其菌量显著高于 105、106 的组别(p＜0.05)，而 105、106 的组别之间
其菌量没有显著差异(p＞0.05) 。

3. C. muelleri 活藻抑制病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106 cell/ml 的 C. muelleri 活体细胞抑制103 CFU/ml 病原菌，实验结果显示出 C. muelleri 在不同浓度下皆有抑制 病原菌 生长之成效，并且在 72 小时，各处理组其菌量已下降至 0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，104、105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而 106 的组别与对照组及 104 与 105的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液 48 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液 72 小时及96 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，而各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)，并且各处理组的组别其菌量已达到 0 。

4.C. muelleri 细胞内产物抑制 病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106cell/ml 的 C. muelleri 细胞内产物抑制 103 CFU/ml 病原菌，实验结果显示出 C. muelleri 在 48-96 小时，105的组别有抑制 病原菌 生长之效果，期间亦可发现106的组别其菌量有明显下降之趋势。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，104、 106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105的组别其菌量显著低于 104、 106的组别(p＜0.05)，而 104、 106的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液 48 小时，104、 106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，105 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中， 105的组别其菌量显著低于 104、 106的组别(p＜0.05)，而 104 组别其菌量亦显著低于 106的组别(p＜0.05)；添加菌液 72 小时，104、 106组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而 105 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105 组别其菌量显著低于 104、 106 组别(p＜0.05)，而 104、 106的组别之间没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液 96 小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＞0.05)，而 105、106 的组别其菌量显著低于对照组(p＞0.05)。在各处理组中，105、 106组别其菌量显著低于104的组别(p＜0.05)，而 105 组别其菌量亦显著低于 106 的组别(p＜0.05) 。

5.S. costatum 活藻抑制病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106cell/ml 的 S. costatum 活体细胞抑制 103CFU/ml 病原菌，实验结果显示出 S. costatum 在不同浓度下皆有抑制 病原菌 生长之成效，而在 72 小时，106的组别其菌量已下降至 0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05) ，并且各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05) ；添加菌液 48 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05) ，并且 106的组别其菌量显著低于104、105 的组别(p＜0.05) ；添加菌液 72 小时及 96 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，而 106 的组别其菌量显著低于104、105的组别(p＜0.05)，并且菌量已达到 0 (Table 6)、(Fig. 21)。

6.S. costatum 细胞内产物抑制病原菌 实验：
本实验利用 104、105、106 cell/ml 的 S. costatum 细胞内产物抑制 103 CFU/ml 病原菌，实验结果显示出 S. costatum 在各处理组中皆能降低 病原菌 生长。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05) ，而 104的组别与对照组及 105、106 的组别间并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液 48 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于 104 的组别(p＜0.05)，而 105 的组别其菌量亦显著低于 106 的组别(p＜0.05)；添加菌液 72 小时， 105、106组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而104 的组别其菌量与对照组并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于 104 的组别(p＜0.05)，而 105、106 的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液 96 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05) ，并且 105、106的组别其菌量显著低于104 的组别(p＜0.05)，而 105、106的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05) 。

7. N. oculata 活藻抑制病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106 cell/ml 的 N. oculata 活体细胞抑制103 CFU/ml 病原菌，实验结果显示出 N. oculata 在不同浓度下皆有抑制 病原菌 生长之成效，并且在 72 小时， 106的组别其菌量已下降至 0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时及48 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05) ，并且106
的组别其菌量显著低于 104、105 的组别(p＜0.05) ；添加菌液 72 小时及 96 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，而 106的组别其菌量显著低于104、105 的组别(p＜0.05)，并且菌量已达到0 。

8.N. oculata 细胞内产物抑制病原菌 实验：

本实验利用104、105、106cell/ml 的 N. oculata 细胞内产物抑制 103 CFU/ml 病原菌，实验结果显示出 N. oculata 在浓度 105、 106 cell/ml 环境下 72 小时以后有降低 病原菌 生长的现象。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时， 106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而 104、105 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中， 104、105组别其菌量显著低于 106的组别(p＜0.05)，且 104、105的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液 48 小时，104、106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而 105的组别与对照组之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中， 104、105的组别其菌量显著低于 106的组别(p＞0.05)，而105 的组别其菌量亦显著低于 104 的组别；添加菌液 72 小时，104、106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而 105的组别其菌量显著低于对照组(p＞0.05)。在各处理组中，105的组别显著低于 104、106的组别(p＜0.05)，而 104的组别其菌量亦显著低于 106的组别(p＜0.05)；添加菌液 96 小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而 105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于 104的组别(p＜0.05)，而 105的组别其菌量亦显著低于 106 的组别(p＜0.05) 。

9.T. chui 活藻抑制病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106cell/ml 的 T. chui 活体细胞抑制103 CFU/ml 病原菌，实验结果显示出 T. chui 在不同浓度的组别下皆有抑制 病原菌 生长之成效，并且在 24 小时，104 的组别其菌量已下降至 0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05) ，并且 104 的组别其菌量显著低于 105、 106的组别(p＜0.05)，而 104 的组别其菌量已达到 0；添加菌液 48 小时、72 小时及 96 小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，104 的组别其菌量显著低于105 、 106的组别(p＜0.05)，且 104的组别其菌量已达到 0。而 106的组别其菌量亦显著低于 105的组别(p＜0.05) (Table 10)、

9.1.T. chui 细胞内产物抑制 病原菌 实验：

本实验利用 104、105、106cell/ml 的 T. chui 细胞内产物抑制103 CFU/ml 病原菌。实验结果显示出 T. chui 在 72-96 小时，106组别可达到抑制 病原菌 生长之效果，其他处理组则否。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，各处理组的菌量皆显著高于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，104、106的组别其菌量显著低于 105组别(p＜0.05)，而 106 的组别其菌量亦显著低于 104的组别(p＜0.05)；添加菌液 48 小时，104、105 的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而 106的组别其菌量与对照组并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，104、106的组别其菌量显著低于 105的组别(p＜0.05)，而 106的组别其菌量亦显著低于 104的组别(p＜0.05)；添加菌液 72 小时，104 的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而 105的组别与对照组之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于 104组别(p＜0.05)，而 106的组别其菌量亦显著低于105 的组别(p＜0.05)；添加菌液 96 小时，106 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而 104、105的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于 104的组别(p＜0.05)，而 106的组别其菌量亦显著低于 105的组别(p＜0.05)。

交叉比较五种微藻抑制病原菌 之成效

1. 活藻细胞

1 1×104 cell/ml：

实验结果显示出在 104的组别中五种微藻皆有抑制 V.alginolyticus 生长之效果，抑制效果以 T. chui 的组别为最佳，其菌量在 24 小时以后下降至 0；其次是 I. galbana 以及 C. muelleri 的组别，其菌量在 72 小时下降至 0。实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液 24 小时，T. chui、I. galbana 以及 S. costatum 的组别其菌量显着低于对照组(p＜0.05)，而 N. oculata 以及 C. muelleri 的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。而在各处理组中，T. chui 的组别其菌量显著低于 N. oculata、I. galbana、C. muelleri、S. costatum的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至 0，I. galbana 以及 S. costatum 的组别其菌量显著低于 N. oculata 以及 C. muelleri 的组别(p＜0.05)，而N. oculata 与 C. muelleri 的组别及 I. galbana 与 S. costatum 的组别之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液 48 小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，T. chui 的组别其菌量显著低于 N. oculata、I. galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至 0，I. galbana 的组别其菌量显著低于 N.oculata 的组别(p＜0.05)，而 N. oculata 与 C. muelleri、S. costatum 的组别以及 I. galbana 与 C. muelleri、S. costatum 的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液 72 小时及 96 小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，T. chui、I. galbana、C. muelleri 的组别其菌量显著低于 N. oculata、S. costatum 的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至 0，而 N. oculata 与 S. costatum 的组别其菌量并无显著差异(p＞0.05) (Table 12)、(Fig. 27)。

2 1×105cell/ml：

实验结果显示五种微藻皆有抑制 病原菌 生长之在 72 小时以后下降至 0。
实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液 24 小时，各处理组其菌量显著低于
对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，I. galbana 的组别其菌量显著低于 N. oculata
的组别以及 C.muelleri 的组别(p＜0.05)，而与 T. chui 以及 S. costatum 的组别之间
其菌量没有显著差异(p＞0.05)，T. chui、N. oculata、S. costatum 的组别之间其菌量亦
无显著差异(p＞0.05)；添加菌液 48 小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。
而在各处理组中，I. galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别其菌量显著低于 T. chui
和 N. oculata的组别(p＜0.05)，且三者之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)。而 N.oculata
的组别其菌量亦显著低于 T. chui 的组别(p＜0.05)；添加菌液72 小时，各处理组其菌量
显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中， C. muelleri 的组别其菌量显著低于 T. chui、
N. oculata、 I.galbana、S. costatum 的组别(p＜0.05)，且 C. muelleri 的组别其菌量已下
降至 0。其余四种微藻之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液 96 小时，各处理组
其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，I. galbana、C. muelleri 的组别其菌量
皆显著低于 T.chui、N. oculata、S. costatum 的组别(p＜0.05)，且 I. galbana、C.muelleri
的组别其菌量已下降至 0，而 N. oculata、S. costatum 的组别其菌量亦显著低于
T. chui(p＜0.05)，且两者之间并无显著差异(p＞0.05) (Table 13)、。

3 1×106cell/ml：

实验结果显示出在 106的组别中五种微藻皆有抑制 V.alginolyticus 生长之效果，抑制效果以 C. muelleri、S. costatum、N.oculata 的组别为最佳，其菌量在 72 小时以后下降至 0；其次是 I.galbana 的组别，其菌量亦在 96 小时下降至 0。实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液 24 小时，T. chui、N. oculata、I. galbana、S. costatum 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，C. muelleri 的组别其菌量与对照组没有显著差异 (p＞ 0.05)。而在各处理组中， T.chui、N. oculata、S. costatum 的组别其菌量显著低于 I. galbana、C.muelleri 的组别(p＜0.05)，且三者的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而 I. galbana 的组别其菌量亦显著低于 C. muelleri 的组别(p＜0.05)；添加菌液 48 小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，五种微藻之间其菌量皆无显著差异(p＞0.05)；添加菌液 72 小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，N. oculata、C. muelleri、S. costatum 的组别其菌量显著低于 T. chui、I. galbana 的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至 0，而 T. chui、I. galbana 的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液 96 小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，N. oculata、I. galbana、C. muelleri、S. costatum的组别其菌量皆显著低于 T. chui 的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至0 (Table 14)、(Fig. 29)。4 五种微藻在活体细胞下之抑菌效果统合实验结果显示出五种微藻在不同浓度活体细胞与病原菌共生之环境下皆能够降低 病原菌 生长，其中又以 I.galbana、C. muelleri 的组别为最佳，两者在不同浓度下达到完全抑制 病原菌 生长，而 S. costatum、N. oculata 的组别在浓度 106cell/ml 以及 T. chui 的组别在浓度 104 cell/ml 亦可完全抑制 V.alginolyticus 生长 。

10. 细胞内产物

1 1×104 cell/ml：

实验结果显示出在此浓度下除了 S. costatum 的组别以外，其余 4 种微藻皆无法有效抑制 病原菌 生长。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，T. chui、I. galbana、C. muelleri的组别其菌量显著高于 N. oculata、S. costatum 的组别及对照组(p＜0.05)，并且 T. chui、I. galbana、C. muelleri 的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而 S. costatum 的组别与对照组之间其菌量无显着差异 (p＞ 0.05)， N. oculata 的组别其菌量显著低于对照组 (p＜0.05)；添加菌液 48 小时及 72 小时，T. chui、I. galbana、C. muelleri的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，N. oculata 的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而 S. costatum 的组别其菌量显着低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，S. costatum 的组别其菌量显著低于 T. chui、N. oculata、I. galbana、C. muelleri 的组别(p＜0.05)，而 T. chui、N. oculata、I. galbana、C. muelleri 的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液 96 小时，T. chui、N. oculata、I. galbana、C. muelleri 的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，S.costatum 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中， S. costatum 的组别其菌量显著低于 T. chui、 N. oculata、 I.
galbana、C. muelleri 的组别(p＜0.05)，而 T. chui 与 N. oculata 的组别其菌量亦显著低于 I. galbana 与 C. muelleri 的组别(p＜0.05)。(Table16)
2 1×105cell/ml：

实验结果显示出 T. chui 的组别无法抑制 病原菌 生长，而 I. galbana、C. muelleri、S. costatum、N. oculata 的组别虽不能完全抑制 病原菌 滋生，但已有降低菌量现象。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液 24 小时，T. chui 的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，N. oculata、I. galbana、C. muelleri、S. costatum的组别其菌量显著低于对照组 (p＜ 0.05)，其中各处理组中， I.galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别其菌量显著低于 T. chui、N. oculata 的组别(p＜0.05)，且三者之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而 N. oculata 的组别其菌量亦显著低于 T. chui 的组别(p＜0.05)；添加菌液 48 小时，T. chui 的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，I. galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)、而 N. oculata 与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。而在各处理组中，I. galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别其菌量显著低于 T. chui、 N. oculata 的组别 (p＜ 0.05)，且 I.galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而 N. oculata 的组别其菌量亦显著低于 T. chui 的组别(p＜0.05)；添加菌液 72 小时，I. galbana、C. muelleri、S. costatum、N.oculata 的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，T. chui 的组别与对照组之间其菌量没有显著差异 (p＞ 0.05)。而在各处理组中， I.galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别其菌量显著低于 T. chui、N. oculata 的组别，且 I. galbana、C. muelleri、S. costatum 的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而 N. oculata 的组别其菌量亦显著低于 T. chui 的组别(p＜0.05)；添加菌液 96 小时，N. oculata、I.S. costatum 的组别其菌量显著低于 N. oculata、I. galbana、C. muelleri的组别(p＜0.05)，且两者之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而 I.galbana 的组别其菌量显著低于 N. oculata、C. muelleri 的组别(p＜0.05)，C. muelleri 的组别其菌量亦显著低于 N. oculata 的组别(p＜0.05)；添加菌液 96 小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，T. chui、I. galbana、S. costatum 的组别其菌量显著低于 N. oculata、C. muelleri 的组别(p＜0.05)，而 T. chui、I. galbana、S. costatum 的组别以及 N. oculata、C. muelleri 的组别其菌量并无显著差异(p＞0.05) 。4 五种微藻之细胞内产物的抑菌效果统合实验结果显示出五种微藻在 104 cell/ml 细胞内产物与病原菌共生之环境下除了 S. costatum 的组别以外，其余四种微藻皆无法降低 病原菌 生长；I. galbana、C. muelleri、S.costatum 、 N. oculata 的 组 别 在 浓 度 105 cell/ml 中 可 降 低 V.alginolyticus 生长，T. chui 的组别则否；五种微藻在浓度 106cell/ml 环境下皆能够降低 病原菌 生长。

讨 论

1、生长曲线

实验结果发现细胞大小与细胞数目呈现反比关系。细胞型态由大到小为 Skeletonema costatum (15-25μm)、Tetraselmis chui (8-16μm)、Chaetoceros muelleri (6-9μm)、Isochrysis galbana (3-7μm)、Nannochloropsis oculata (2-5μm)；而指数生长期最高之细胞数目由高至低为 N. oculata (2.1×107 cell/ml)、I. galbana (3.6×106 cell/ml)、C. muelleri (2.4×106 cell/ml)、T. chui (9.4×105 cell/ml)、S. costatum(4.3×105 cell/ml)。由结果可知微藻在同一环境下，细胞型态越大者在短时间内可达到生长阶段之高峰期，随即达到平稳期后接着进入死亡期。其中以 S. costatum 细胞最大，则在培养第 8-9 天为高峰期，而以 N. oculata细胞为最小，则在培养第 23-27 天为高峰期。

2、抑菌实验

在现场养殖中，微藻为一种非常重要的饵料生物，主要是因为其中含有许多的不饱和脂肪酸，可提供鱼虾苗作为生长发育的营养来源。另外在许多的研究报告当中指出， Isochrysis spp.、Chaetoceros spp.、Skeletonema spp.、Nannochloropsis spp.、Tetraselmisspp.此五株微藻对于养殖池水中的病原菌有抑制效果，可与病原菌在营养盐及空间上做竞争，以达到生物防制中抑制病原菌之能力(Austin and Day, 1990；Austin et al., 1992；Rico-Mora et al., 1998；Naviner et al., 1999；Salvesen et al., 2000)。

2.1 活藻实验：
本实验发现，五种微藻 N. oculata、I. galbana、C. muelleri、T. chui、S. costatum 皆能达到降低 病原菌 生长，其中以 T. chui抑制 病原菌 生长效果最为明显，即浓度 104 cell/ml 环境中在24 小时已完全抑制 病原菌 生长。但是随着 T. chui 浓度的增加，反而无法达到完全抑制 病原菌 生长的效果，而在浓度105 cell/ml 环境中发现，24 小时后的菌量有上升之趋势，因此推断三种浓度在相同体积下，由于低浓度 104 cell/ml 培养出来年轻的藻体细胞较 105 cell/ml、106 cell/ml 为多，以致于其活性最佳，进而与病 原 菌 在 同 一 水 体 中 相 互 竞 争 下 短 时 间 内 可 达 到 抑 制 V.alginolyticus 的生长；添加 I. galbana 的抑菌实验中，可发现在三种浓度下皆可达到完全抑制 病原菌 生长之效果，其中以浓度 104 cell/ml 培养环境中较佳，72 小时可达到完全抑制 病原菌生长；添加 C. muelleri 的抑菌实验中，可发现在三种浓度下皆可降低 病原菌 生长之效果，并且三种浓度皆在 72 小时可达到完全抑制 病原菌 生长之效果；添加 S. costatum 抑菌实验中，可发现在三种浓度下皆可降低 病原菌 生长之效果，且浓度106cell/ml 环境下在 72 小时即可达到完全抑制 病原菌 生长之效果；添加 N. oculata 抑菌实验中，可发现三种浓度皆可降低 V.alginolyticus 生长，其中以浓度 106 cell/ml N. oculata 环境下的效果最佳，在 72 小时达到完全抑制 病原菌 生长。Nieman (1954)和 Galbraith and Miller (1973a,b,c)指出，微藻的抑菌活性取决于脂肪酸碳链的长短，当脂肪酸连接 10 个以上的碳原子，会使细菌的活性降低，而在后期的研究报告亦证实了微藻的抗菌活性取决于脂肪酸链的长短 (Duff et al., 1966 ； Aubert et al.,1968a,b；Aubert and Gambarotta, 1972；Berland et al., 1972；Aubert etal., 1979；Gauthier, 1980；Cooper et al., 1983；Findlay and Patil, 1984；Pesando, 1985；Visco et al., 1987；Kellam et al., 1988)，另外苏 (1999)指出五种微藻 N. oculata、I. galbana、C. muelleri、T. chui、S.costatum 皆富含高度不饱和脂肪酸(DHA 及 EPA)，故推论本实验结果中的五种微藻皆会抑制 病原菌 生长的原因，可能是其所含有的不饱和脂肪酸皆为碳原子 10 以上，所以有抑制 V.alginolyticus 生长的效果。Kogure et al. (1979)指出，利用不同的光度培养微藻 S.costatum (700、3000、9000 Lux)对于病原菌抑制的效果，其中以 3000Lux 抑制效果最佳，另外赵等 (2002)指出此五种微藻的最适培养光照为 3000～4000 Lux，这其中意味着当微藻在最适光照环境下，其生长速率较快，对于病原菌的抑制效果也最好。另外，研究报告也指出微藻在指数生长期间可有效的抑制病原性弧菌的生长(Waksman et al., 1938；Droop and Elson, 1966；Sieburth., 1968；Bell and Mitchell, 1972；Simidu et al., 1977)。而本实验所设置 5 种微藻的培养光照范围为 2500~3500 Lux，并且实验初期所接种的微藻皆为指数期的藻种，而在此条件下所培养的微藻对于病原性弧菌 病原菌 的抑制皆有良好的效果，推测可能是因为此光照适合五种微藻在指数期的生长，而其生长速率上升会与病原性弧菌 病原菌 竞争营养盐及生长空间，进而达到抑制弧菌的效果。另外在本实验当中亦发现，将五种微藻震碎后，其细胞内产物亦有抑制病原性弧菌 病原菌 的效果，而本实验在活体抑制试验当中，所使用的微藻为指数期的活藻，但其中还是会有些许的的藻类会提早老化死亡，这些藻类死亡后所释放出来的胞内产物，可能对于病原性弧菌 病原菌 有抑制的效果，但有待进一步的实验来探讨其抑制的机制。比较五种微藻 S. costatum、C. muelleri、I. galbana、T. chui、N. oculata 对于病原性弧菌 病原菌 的抑制效果中发现，S.costatum 及 N. oculata 对 病原菌 生长抑制效果不如 T. chui、I. galbana、C. muelleri (Table. 15)。虽然 S. costatum 及 N. oculata 皆有抑制 病原菌 生长之效果，但是却要在最高的浓度 106cell/ml 才有最佳的抑制效果，而 T. chui、I. galbana 及 C. muelleri 只要在低浓度的情况下就有抑制 病原菌 的生长，而在现场养殖环境中，若藻色过浓，常会有倒藻、清晨溶氧不足及底部缺氧的情况发生，故在抑制病原性弧菌 病原菌 生长的前提之下，建议以较低浓度的 T. chui、I. galbana 及 C. muelleri 三种微藻来做水，对于养殖池的管理较为容易。

2.3 细胞内产物实验：

微藻之细胞内产物抑制病原性弧菌的实验