血浆游离mtDNA在急性肺栓塞中的诊断价值及其与病情严重程度及临床常用指标的相关性.pdf

作者简介:谭娇娜,女,技师,主要从事线粒体D NA与疾病的相关性研究.通信作者,E m a i l:z e h u a y c o m.论著D O I:/j i s s n 血浆游离m t D NA在急性肺栓塞中的诊断价值及其与病情严重程度及临床常用指标的相关性谭娇娜,杨泽华山西医科大学第一临床医学院,山西太原 ;山西医科大学第一医院检验科,山西太原 ;摘要:目的探讨血浆游离线粒体D NA(m t D NA)水平在急性肺栓塞(A P E)中的诊断价值及其与病情严重程度和临床常用指标的相关性.方法选取 年月至 年 月山西医科大学第一医院呼吸与危重症医学科收治的 例首次经C T肺动脉造影(C T P A)确诊的A P E患者为研究对象,分为高危组、中危组、低危组,每组 例,选择同期年龄相似的健康体检者 例作为健康组.记录所有研究对象一般资料,采集所有研究对象入院第天未经治疗的血浆和全血标本,对其进行血常规、D 二聚体(D D)、纤维蛋白(原)降解产物(F D P)、心肌肌钙蛋白T(c T n T)、N末端脑钠肽前体(NT p r o B N P)等指标检测;提取上述所有受试者血浆游离m t D NA,应用实时荧光定量聚合酶链反应标准曲线法检测血浆游离m t D NA水平,比较各组m t D NA及其他临床常用指标,并分析m t D NA与其他临床常用指标的相关性;使用受试者工作特征(R O C)曲线评价血浆游离m t D NA和其他临床常用指标对A P E的诊断价值.结果健康组、低危组、中危组、高危组血浆游离m t D NA水平分别为 ()、()、()和 ()c o p i e s/m L,m t D NA水平在高危组、中危组、低危组和健康组中依次降低,两两比较,差异均有统计学意义(P ).A P E患者血浆游离m t D NA水平与白细胞计数(WB C)、D D、F D P、c T n T、NT p r o B N P呈正相关(r 、,P );与R B C、血红蛋白(H b)、红细胞体积分布宽度(R DW)、血小板计数(P L T)无相关关系(P );m t D NA诊断A P E的R O C曲线下面积为 ,灵敏度为,特异度为,c u t o f f值为 c o p i e s/m L.结论A P E患者血浆游离m t D NA水平升高,并与疾病危险分层有关;血浆游离m t D NA水平有助于诊断A P E,m t D NA也可作为预测A P E病情严重程度的一种标志物.关键词:线粒体D NA;急性肺栓塞;疾病危险分层中图法分类号:R 文献标志码:A文章编号:()T h ed i a g n o s t i cv a l u eo fp l a s m af r e em t D N Ai na c u t ep u l m o n a r ye m b o l i s ma n di t s c o r r e l a t i o nw i t hd i s e a s e s e v e r i t ya n dc o mm o nc l i n i c a l i n d i c a t o r sT ANJ i a o n a,Y ANGZ e h u aT h eF i r s tC l i n i c a lM e d i c a lC o l l e g eo fS h a n x iM e d i c a lU n i v e r s i t y,T a i y u a n,S h a n x i ,C h i n a;D e p a r t m e n t o fC l i n i c a lL a b o r a t o r y,t h eF i r s tH o s p i t a l o fS h a n x iM e d i c a lU n i v e r s i t y,T a i y u a n,S h a a n x i ,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h ed i a g n o s t i cv a l u eo fp l a s m af r e em i t o c h o n d r i a lD NA(m t D NA)i na c u t ep u l m o n a r ye m b o l i s m(A P E)a n d i t s c o r r e l a t i o nw i t ht h es e v e r i t yo f t h ed i s e a s ea n dc o mm o nc l i n i c a l i n d i c a t o r s M e t h o d s At o t a l o f p a t i e n t sw i t hA P Ed i a g n o s e df o r t h e f i r s t t i m eb yC Tp u l m o n a r ya r t e r i o g r a p h y(C T P A)i nt h eD e p a r t m e n to fR e s p i r a t o r ya n dC r i t i c a lC a r eM e d i c i n eo ft h eF i r s tH o s p i t a lo fS h a n x iM e d i c a lU n i v e r s i t y f r o m M a r c h t oD e c e m b e r w e r e s e l e c t e da s t h e s t u d ys u b j e c t s,i n c l u d i n gh i g h r i s kg r o u p,m e d i u m r i s kg r o u pa n dl o w r i s kg r o u p,w i t h c a s e s i ne a c hg r o u p At o t a lo f h e a l t h ys u b j e c t so fs i m i l a ra g ew e r es e l e c t e da st h eh e a l t h yg r o u p G e n e r a ld a t ao fa l ls u b j e c t sw e r er e c o r d e d,u n t r e a t e dp l a s m aa n dw h o l eb l o o ds a m p l e sw e r ec o l l e c t e df r o ma l l s u b j e c t so nt h ef i r s td a yo fa d m i s s i o n,a n db l o o dr o u t i n e,D d i m e r(D D),f i b r i nd e g r a d a t i o np r o d u c t(F D P),c a r d i a c t r o p o n i nT(c T n T),N t e r m i n a lb r a i nn a t r i u r e t i cp e p t i d ep r e c u r s o r(NT p r o B N P)w e r ed e t e c t e d P l a s m af r e em t D NA w a se x t r a c t e df r o ma l l t h ea b o v es u b j e c t s,a n dt h ep l a s m a f r e em t D NAl e v e lw a sd e t e c t e db yr e a l t i m ef l u o r e s c e n c eq u a n t i t a t i v ep o l y m e r a s ec h a i nr e a c 检验医学与临床 年月第 卷第 期L a bM e dC l i n,A u g u s t ,V o l ,N o t i o ns t a n d a r dc u r v em e t h o d,t h em t D NAa n do t h e rc o mm o nc l i n i c a li n d i c a t o r sw e r ec o m p a r e di nd i f f e r e n tg r o u p,t h ec o r r e l a t i o n sb e t w e e no t h e rc o mm o nc l i n i c a l i n d i c a t o r sa n dm t D NAw e r ea n a l y z e d R e c e i v e ro p e r a t i n gc h a r a c t e r i s t i c(R O C)c u r v ew a su s e dt oe v a l u a t et h ed i a g n o s t i cv a l u eo fp l a s m af r e em t D NAa n do t h e rc o mm o nc l i n i c a l i n d i c a t o r s i nA P E R e s u l t s P l a s m a f r e em t D NAl e v e l s i nh e a l t h yg r o u p,l o w r i s kg r o u p,m e d i u m r i s kg r o u pa n dh i g h r i s kg r o u pw e r e (),(),()a n d ()c o p i e s/m Lr e s p e c t i v e l y T h e l e v e l so fm t D NA w e r es u c c e s s i v e l yd e c r e a s e di nh i g h r i s kg r o u p,m e d i u m r i s kg r o u p,l o w r i s kg r o u pa n dh e a l t h yg r o u p,t h ed i f f e r e n c e sw e r es t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n t(P )T h el e v e l so fp l a s m af r e em t D NAi n A P Ep a t i e n t sc o r r e l a t e dp o s i t i v e l yw i t h WB C,D D,F D P,c T n T,NT p r o B N P(r ,P ),t h e r ew a sn oc o r r e l a t i o nw i t hR B C,H b,R DWa n dP L T(P )T h ea r e au n d e rR O Cc u r v e f o rm t D NAd i a g n o s i so fA P Ew a s ,t h es e n s i t i v i t yw a s,t h es p e c i f i c i t yw a s,a n dt h ec u t o f fv a l u ew a s c o p i e s/m L C o n c l u s i o n T h e l e v e l o f p l a s m a f r e em t D NAi n c r e a s e s i nA P Ep a t i e n t s a n dc o r r e l a t e dw i t ht h e s e v e r i t yo f d i s e a s e r i s ks t r a t i f i c a t i o n T h e l e v e l o f f r e em t D NAi np l a s m ai sh e l p f u l f o r t h ed i a g n o s i so fA P Ea n dm t D NAc a na l s ob eu s e da sam a r k e r t op r e d i c t t h es e v e r i t yo fA P EK e yw o r d s:m i t o c h o n d r i a lD NA;a c u t ep u l m o n a r ye m b o l i s m;d i s e a s er i s ks t r a t i f i c a t i o n急性肺栓塞(A P E)是以各种栓子阻塞肺动脉或其分支为发病原因的一组疾病或临床综合征的总称,发病率和病死率较高,是继急性心肌梗死和脑卒中之后心血管死亡的第三大常见原因,给家庭和国家带来了沉重的疾病负担.目前,确诊A P E的金标准为多层螺旋C T肺动脉造影(C T P A),但存在费用昂贵和一定程度的不便捷性.线粒体D NA(m t D NA)是来自线粒体双链分子的小D NA片段,正常生理情况下,m t D NA被包裹在线粒体的双层膜结构中,故这些分子在健康人的外周血中以非常低的水平循环,当组织出现氧化应激或者缺氧等损伤时,组织内线粒体双层膜结构遭到破坏,m t D NA便从凋亡、坏死的细胞中释放入血,导致外周血游离m t D NA水平增加.本研究旨在探讨血浆游离m t D NA的变化,分析其与A P E患者病情严重程度、临床常用指标间的相关性,并探讨其对A P E的诊断价值,从而为A P E的临床诊治提供帮助.资料与方法 一般资料收集 年月至 年 月就诊于山西医科大学第一医院(以下简称本院)呼吸与危重症医学科 例首次经C T P A确诊的A P E患者作为研究对象.()纳入标准:A P E的诊断符合A P E指南;发病到入院时间小于 h;入组前未经抗凝或溶栓治疗;临床资料完整.()排除标准:年龄 岁;患者住院时间不满 h;临床资料不完整;处于终末期心脏或肾衰竭;合并可能与血浆m t D NA水平升高相关的疾病(肿瘤、多发性创伤、脑卒中、严重脓毒症或感染性休克、急性心肌梗死、心脏骤停)等;存在免疫功能低下或免疫缺陷、免疫抑制.按照欧洲心脏病学会(E S C)和欧洲呼吸学会(E R S)共同制定的 急性肺栓塞诊断和治疗指南,根据A P E患者的血流动力学指标、临床症状、肺栓塞 风 险 评 分(P E S I)、肺 栓 塞 严 重 指 数 简 化 版(s P E S I)评分、是否存在右心功能不全和心脏生物标志物异常,将 例患 者分为低危 组、中危组、高 危组,每组 例.选取同期年龄匹配的健康体检者 例作为健康组.所有研究对象或其家属签署知情同意书,本研究符合医学伦理学标准,并通过了本院伦理委员会的批准(批件号KY L L ).仪器与试剂使用仪器主要包括美国Q u a n t S t u d i oTM实时荧光定量聚合酶链反应(P C R)仪、全自动血常规分析仪(日本S y s m e xX N )、全自动凝血分析仪(日本S y s m e xC S )、全自动化学发光仪(中国万泰生物C a r i s )、不同型号离心机、各种规格移液器等.使用试剂盒主要包括 实时荧光定 量P C R试剂盒(大连T a K a R a公司)、寡核苷酸引物(大连宝生物工程有限公司)、D NA提取试 剂盒(中 国Om e g a B i o T e k公司,S EB l o o dD NA K i t).使用O l i g o 设计特异性引物,根据所设计引物的碱基序列合成引物(由大连宝生物工程有限公司完成).寡核 苷 酸 引 物 序 列 为 S r R NA F:A C T T T G C AAG GAGAG C C AAA ;S r R NA R:T G GA C AA C C AG C T AT C A C C A .方法 临床资料收集收集患者性别、年龄、出入院时间、入院诊断、既往基础疾病,严格记录患者心率、呼吸、血压、脉搏、体温、动脉血氧饱和度(S a O)等一般资料,记录患者的超声心动图、C T P A检查结果,同时观察患者治疗过程中有无心脏骤停、梗阻性休克、持续性低血压等血流动力学不稳定状况.检验医学与临床 年月第 卷第 期L a bM e dC l i n,A u g u s t ,V o l ,N o 血浆游离m t D NA提取采集所有研究对象入院第天未经治疗的肘静脉血m L,经乙二胺四乙酸二钾(E D T A K)抗凝(紫管),将所有标本于 m i n内经 g离心 m i n,吸取上清液 L于高压灭菌的E P管中;再将上清液于高速离心机室温 g离心 m i n,轻轻吸取上清液 L于新的E P管中,冰箱冻存,用于血浆游离m t D NA检测.严格按照D NA提取试剂盒说明书提取m t D NA.其他临床常用指标检测采集所有受试者m L未经抗凝或溶栓治疗的肘静脉血于紫管(含E D T A K抗凝剂)中,使用日本S y s m e xX N 全自动血常规分析仪进行血常规检测;同时采集m L肘静脉血于淡蓝管(含枸橼酸钠抗凝剂)中,使用日本S y s m e xC S 全自动凝血分析仪并采用免疫比浊法进行D 二聚体(D D)、纤维蛋白(原)降解产物(F D P)检测;另外采集m L肘静脉血于金黄色管(含促凝剂)中,采用中国万泰生物C a r i s 全自动发光仪(磁微粒法)进行心肌肌钙蛋白T(c T n T)和N末端脑钠肽前体(NT p r o B N P)检测.所有试剂均使用原装配套试剂,操作严格按照试剂说明书及相关标准操作规程进行.标准曲线的制备通过分光光度计测定并计算得到质粒的浓度为 c o p i e s/m L,用灭菌去离子水依次倍比稀释,得到浓度分别为 、c o p i e s/m L的个标准品,使用美国Q u a n t S t u d i oTMP C R仪制备标准曲线.P C R反应体系为 L,预变性 s,变性s,退火s,延伸 s,共 个循环.标准曲线回归方程为Y X (R ),其中X为模板拷贝数以 为底的对数值,Y为C t值.统计学处理采用S P S S 统计软件进行数据处理及统计分析.呈正态分布的计量资料以xs表示,多组间比较采用单因素方差分析;不符合正态分布的计量资料以中位数(四分位数间距)M(Q R)表示,多组间比较采用K r u s k a l W a l l i sH检验,两组间比较采用W i l c o x o n秩和检验;计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用检验或F i s h e r确切概率法;相关分析采用S p e a r m a n秩相关;采用受试者工作特征(R O C)曲线评估各项指标对A P E的诊断价值,根据约登指数 即(灵敏度特异度)确定c u t o f f值,计 算变量的灵 敏度和特异 度,并计算 其 可信区间(C I).以P 为差异有统计学意义.结果 各组基线资料比较各组年龄、性别比较,差异无统计学意义(P );高危组住院天数明显多于低危组,差异有统计学意义(P ),高危组心率明显快于低危组与健康组,差异有统计学意义(P );高危组、中危组和低危组S a O均低于健康组,差异有 统 计 学 意 义(P );高 危 组 的 收 缩 压(S B P)明显低于中危组、低危组和健康组,高危组的舒张压(D B P)明显低于低危组和健康组,差异有统计学意义(P ).见表.各组血常规及其他临床常用指标比较各组红细胞体积分布宽度(R DW)、血小板计数(P L T)水平比较,差异无统计学意义(P );高危组白细胞计数(WB C)、D D、F D P、c T n T水平明显高于中危组、低危组和健康组,差异有统计学意义(P );高危组红细胞计数(R B C)、血红蛋白(H b)水平明显低于健康组,差异有统计学意义(P );高危组NT p r o B N P水平明显高于低危组和健康组,差异有统计学意义(P ).见表、.表各组基线资料比较n/n或M(Q R)组别n性别(男/女)年龄(岁)住院时间(d)心率(次/分)S a O()S B P(mm H g)D B P(mm H g)低危组 /()()()c ()()中危组 /()()()c ()()高危组 /()a ()a c ()c ()a b c ()a c健康组 /()()()()/F/H P 注:为无数据;与低危组比较,aP ;与中危组比较,bP ;与健康组比较,cP .各组血浆游离m t D NA水平比较实时荧光定量P C R结果显示,高危组、中危组、低危组、健康组的血浆游离m t D NA水平分别为 ()、()、()、()c o p i e s/m L.血浆游离检验医学与临床 年月第 卷第 期L a bM e dC l i n,A u g u s t ,V o l ,N o m t D NA水平在高危组、中危组、低危组和健康组依次降低,两两比较,差异有统计学意义(P ).A P E患者血浆游离m t D NA水平与其他临床常用指标之间的相关性双变量S p e a r m a n秩相关分析结果显示,A P E患者入院第天血浆游离m t D NA水平与WB C、D D、F D P、c T n T、NT p r o B N P呈正相关(r 、P ;r 、P ;r 、P ;r 、P ;r 、P ),与R B C、H b、R DW、P L T无相关性(r 、P ;r 、P ;r 、P ;r 、P ).血浆游离m t D N A水平及其他临床常用指标对A P E的诊断效能血浆游离m t D NA诊断A P E的曲线 下 面 积(AU C)为 ,c u t o f f值 为 c o p i e s/m L,其 灵 敏 度 为,特 异 度 为.见表.表各组血常规及其他临床常用指标比较M(Q R)组别nWB C(/L)R B C(/L)H b(g/L)R DW()P L T(/L)低危组 ()()c ()()()中危组 ()()()()()高危组 ()a b c()c ()c ()()健康组 ()()()()()H P 注:与低危组比较,aP ;与中危组比较,bP ;与健康组比较,cP .表各组D D、F D P、c T n T、N T p r o B N P水平比较M(Q R)组别nD D(m g/L)F D P(g/m L)c T n T(n g/L)N T p r o B N P(p g/m L)低危组 ()()()()中危组 ()()()()高危组 ()a b c ()a b c ()a b c ()a c健康组 ()()()()H P 注:与低危组比较,aP ;与中危组比较,bP ;与健康组比较,cP .表不同生物学指标对A P E的诊断效能项目AU CAU C的 C I灵敏度()特异度()c u t o f f值约登指数()Pm t D NA c o p i e s/m L WB C /L D D m g/L F D P g/m L c T n T n g/L N T p r o B N P p g/m L c T n TN T p r o B N P 注:为无数据.讨论纵向研究显示,A P E的发病率逐年升高,可能成为威胁人类健康的重要疾病之一 .A P E患者的病情严重程度各不相同,表现为从轻微症状到右心功能障碍甚至心源性休克.已有研究表明,不同危险分层的患者预后截然不同,高危组患者病死率较高,预后差,因此早期识别死亡风险较高的亚组有助于根据疾病的严重程度尽早给予抗凝和溶栓等精准的治疗和重症护理支持,从而降低病死率 .肺栓塞的发病机制涉及多个环节,大多数学者认为内皮损伤和炎症在肺栓塞的发生、发展过程中起着重要作用.目前研究发现,A P E患者的肺组织内易出现氧化应激、氧自检验医学与临床 年月第 卷第 期L a bM e dC l i n,A u g u s t ,V o l ,N o 由基的增加和缺血再灌注损伤.m t D NA是位于线粒体基质中的一个小基因组,对氧化磷酸化(O X P HO S)极为重要.m t D NA在线粒体基因中的个数被称为m t D NA的 拷 贝 数.人 体 大 多 数 细 胞 包 含 c o p i e sm t D NA并保持相对稳定,这对于维持体内平衡非常重要.研究认为循环m t D NA水平是严重创伤后全身炎症反应和肺损伤的潜在生物标志物 .迄今为止,m t D NA已用于肿瘤、心脑血管疾病、炎症、烧伤 等多种危重疾病的研究,但m t D NA在A P E发病过程中的作用在我国目前研究较少,深入研究m t D NA在A P E发生和发展过程中的水平变化及具体作用,不仅可以为寻求新的治疗靶点奠定基础,而且有望成为一种新的生物学标志物用于A P E的诊断.本研究对所有受试者肘静脉血采用实时荧光定量P C R进 行 检 测,结 果 显 示,A P E患 者 血 浆 游 离m t D NA水平与疾病危险分层关系密切,随着疾病危险分层进展血浆游离m t D NA水平逐渐升高.血浆游离m t D NA水平在高危组、中危组、低危组和健康组依 次 降 低,两 两 比 较 差 异 有 统 计 学 意 义(P ).A R NA L I CH等 在一项前瞻性队列研究中发现,高危组A P E患者m t D NA和核D NA(n D NA)水平明显高于非高危组A P E患者,并且m t D NA是A P E患者死亡的独立预测因子.线粒体作为O X P HO S反应中心,可产生大量的氧自由基,并通过细胞凋亡的内在途径导致细胞死亡.由于m t D NA缺乏组蛋白的保护,修复能力有限,因此m t D NA判断氧化损伤的敏感性约为n D NA的 倍.已有研究表明,A P E发生时,由于肺动脉发生栓塞,其支配的肺组织由于血流中断或血流受阻而发生坏死及肺梗死,从而引起大面积的组织缺氧,进而降低线粒体氧的可用性,不仅导致患者S a O下降,且导致AT P快速耗尽.此时全身再灌注损伤可能引发类似严重败血症的全身炎症反应,导致线粒体的双层膜受损,m t D NA从受损的细胞中释放,从而检测到A P E患者血浆游离m t D NA水平增加.F D P是纤维蛋白(原)降解碎片的总称,其中D D是最常见、最简单的纤维蛋白降解产物,其水平升高表明机体处于血液高凝状态和继发性纤溶系统亢进,在评价血栓性疾病方面具有重要价值.国外研究发现,高危组A P E患者血栓负荷程度与D D水平呈正相 关,血 栓 负 荷 越 重,D D水 平 越 高.G E I S S E N B E R G E R等 研究发现,A P E患者血浆D D水平越高,越容易发生低血压、休克、心肌肌钙蛋白升高、心功能受损等表现,故认为D D水平可能与A P E的严重程度有关.血浆c T n T和NT p r o B N P水平升高与右心室功能障碍相关,已有研究证明上述两项指标对A P E患 者 的 危 险 分 层 及 预 后 具 有 重 要 的 价值.在一项大型回顾性队列研究中发现,A P E患者入院时WB C水平与 d内病死率有关,当A P E患者入院WB C /L时,A P E患者 d内病死率最高,因此WB C升高,A P E患者预后较差;L I U等 研究发现WB C水平是中危A P E患者住院期间不良结局的独立危险因素.本研究发现,高危组血浆中c T n T、NT p r o B N P、D D、F D P、WB C水平明显高于低危组和健康组,但在诊断A P E时,m t D NA的灵敏度高于c T n T、NT p r o B N P、D D、F D P、WB C、c T n TNT p r o B N P.同时本研究还发现A P E患者血浆游离m t D NA水平与WB C、D D、F D P、c T n T、NT p r o B N P呈 正 相 关(r 、,P ),这 一 结 果 表 明 血 浆 游 离m t D NA水平同WB C、D D、F D P、c T n T、NT p r o B N P一样与A P E疾病密切相关.采用R O C曲线评 估m t D NA和临床常用指标对A P E的诊断价值,结果显示血浆游离m t D NA诊断A P E的AU C为 ,c u t o f f值为 c o p i e s/m L,其灵敏度为,特异度为;在A P E诊断方面,血浆m t D NA显示出比其他临床常用指标更好的辨别力.因此,m t D NA在诊断A P E时,具有较高的灵敏度与特异度,可以成为A P E诊断的一种新型生物标志物.当然,本研究仍存在不足之处.本研究为单中心研究,样本量较少,可能存在偏倚等误差,需要在今后的实验中进行多中心、大样本量研究;血浆m t D NA的过度积累部分原因可能归因于清除能力降低,但目前其清除机制尚不清楚,还需要进一步的研究来了解肾功能和肝功能受损患者血浆游离m t D NA降低的机制.随着分子生物学的不断发展,新型冠状病毒感染疫情加速了基层P C R实验室的建成,经过对P C R技术人员的大量培训,P C R技术更加成熟.因此,有望将m t D NA作为一项常规生物学指标,对疾病做出精准的评估.综上所述,A P E患者血浆游离m t D NA水平升高,并与疾病危险分层严重程度有关;血浆游离m t D NA水平检测有助于诊断A P E,m t D NA也可作为预测A P E病情严重程度的一种标志物.参考文献KAHNSR,D EW I TK P u l m o n a r ye m b o l i s mJ NE n g lJM e d,():韩志莹,王建国,张娇肺血栓栓塞面积与凝血功能指标的相关性分析J医学综述,():G R A B U S CHN I GS,B R ONKHOR S T AJ,HO L D E N R IE D E RS,e ta l P u t a t i v eo r i g i n so fc e l l f r e eD NAi nh u 检验医学与临床 年月第 卷第 期L a bM e dC l i n,A u g u s t ,V o l ,N o m a n s:ar e v i e wo fa c t i v ea n dp a s s i v en u c l e i ca c i dr e l e a s em e c h a n i s m sJ I n t JM o lS c i,():KON S TAN T I N I D E SSV,ME Y E RG,B E C A T T I N IC,e ta l E S C G u i d e l i n e sf o rt h ed i a g n o s i sa n d m a n a g e m e n to f a c u t ep u l m o n a r ye m b o l i s md e v e l o p e di nc o l l a b o r a t i o nw i t ht h eE u r o p e a nR e s p i r a t o r yS o c i e t y(E R S)JE u rH e a r t J,():MA R T I N E ZLC,MC C UR D Y C M,MA L D ONA D O SM,e t a l C u r r e n tm a n a g e m e n t o f a c u t ep u l m o n a r ye m b o l i s mJ A n nT h o r a cC a r d i o v a s cS u r g,():安海玲 N L R、P L R与急性肺血栓栓塞症危险分层的相关性分析D银川:宁夏医科大学,KON S TAN T I N I D E SSV,ME Y E RG,B E C A T T I N IC,e ta l E S C G u i d e l i n e sf o rt h ed i a g n o s i sa n d m a n a g e m e n to f a c u t ep u l m o n a r ye m b o l i s md e v e l o p e di nc o l l a b o r a t i o nw i t ht h eE u r o p e a nR e s p i r a t o r yS o c i e t y(E R S):t h et a s kf o r c e f o r t h ed i a g n o s i sa n dm a n a g e m e n t o f a c u t ep u l m o n a r ye m b o l i s mo ft h eE u r o p e a nS o c i e t yo fC a r d i o l o g y(E S C)J E u rR e s p i r J,():O S P E LJM,HO L O D I N S KYJK,G OYA L M M a n a g e m e n to fa c u t ei s c h e m i cs t r o k ed u et ol a r g e v e s s e lo c c l u s i o n:J A C CF o c u sS e m i n a rJ JAm C o l lC a r d i o l,():Z HAN GJ,Z HU Y,WU Y,e ta l S y n e r g i s t i ce f f e c t so fEMP sa n dPMP so np u l m o n a r yv a s c u l a r l e a k a g e a n d l u n gi n j u r ya f t e ri s c h e m i a/r e p e r f u s i o nJ C e l lC o mm u nS i g n a l,():R O B I N E D,WONG R M i t o c h o n d r i a lD NA m o l e c u l e sa n dv i r t u a ln u m b e ro fm i t o c h o n d r i ap e r c e l l i nm a mm a l i a nc e l l sJ JC e l lP h y s i o l,():G ANL,Z HON GJ,Z HAN GR,e ta l T h e i mm e d i a t e i n t r a m e d u l l a r yn a i l i n gs u r g e r yi n c r e a s e dt h em i t o c h o n d r i a ld n ar e l e a s et h a ta g g r a v a t e ds y s t e m i ci n f l a mm a t o r yr e s p o n s ea n dl u n gi n j u r yi n d u c e db ye l d e r l yh i pf r a c t u r eJ M e d i a t o r s I n f l a mm,:HE R NAN D E Z B E E F T I NKT,GU I L L E