GMO安全与检测复习题.doc

GMO安全与检测复习题

一、 名词解释
1．生物技术: 是以生命科学为基础，利用生物（或生物组织、细胞及其他组成部分）的特性和功能，设计、构建具有预期性能的新物质或新品系，以及与工 程原理相结合，加工生产产品或提供服务的综合性技术。
2．基因工程：利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离感兴趣的基因，或是用人工合成的方法获取基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反应形成重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程。
3．转基因技术：是指使用基因工程或分子生物学技术(不包括传统育种、细胞及原生质体融合、杂交、诱变、体外受精、体细胞变迁及多倍体诱导等技术)，将遗传物质导入活细胞或生物体中，产生基因重组现象，并使之表达并遗传的相关技术。转基因技术就是指利用基因工程或分子生物学技术，将某些生物的基因转移到其它物种中，改造生物的遗传物质，使遗传物质得到改造的生物在性状、营养和消费品质等方面向人类需要的目标转变。
4．GMO：Genetically Modified Organisms转基因生物，就是将外源 DNA 导入生物体基因组，引起了遗传改变，改变了遗传组成的生物，就是转基因生物。
5．IP：Identity Preservation =身份保持（IP）非转基因产品的“身份保持”（IP）生产体系，是为保持非转基因产品的纯性，防止转基因的污染，而在从非转基因产品作物种植到产品运输、出口、加工的整个生产体系中采用严格的保持非转基因产品“身份”单一的生产系统，通过对整个生产系统的每个阶段的基因成分控制、 评估与检测，确保非转基因产品含有最低的转基因成分，并保持详尽而完整的资料、数据记录及相关证书。
6．生物工程：是应用生物体（包括微生物、动物细胞、植物细胞）或其组成部分（细胞器和酶），在最适条件下，生产有价值产物的生物技术。
7．gene cloning：基因克隆（gene cloning）：或分子克隆,又称为重组ＤＮＡ技术，是应用酶学方法，在体外将不同来源的DNA分子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合分子，并使之在适当的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代DNA分子的过程。
8．转基因产品：含有或生产过程中有转基因生物参与的产品。
9．GMF：“转基因食品”（Genetically Modified Foods)是指用转基因生物制造、生产的食品、食品原料及食品添加物等。是由细胞DNA中经非生殖方法插入了特定外源基因或基因片段，并获得某种良好性状的动物、植物或微生物制成的食品。
10．实质等同性原则：实质等同性原则是指转基因食品及食品成分是否与传统食品具有实质等同性。
11.LAMP：环介导等温扩增技术，是一种新型体外等温扩增特异性核酸片段的技术。该技术主要利用两对特殊设计的引物和具有链置换活性的DNA聚合酶，使反应中在模板两端引物结合处循环出现环状单链结构，从而保证引物可以在等温条件下顺利与模板结合，并进行链置换扩增反应。
12.LMO：改性活生物体” Living Modified Organisms ，简称 LMOs 。LMOs 或 GMOs 就是指凭借现代生物技术获得的遗传材料新异组合的活生物体。
13.RCA：滚环扩增技术（rolling circle amplification, RCA)是1998年建立起来的一种恒温核酸扩增技术。
14.转基因标识：转基因标识是指在转基因产品的包装上加贴标签以说明该产品是否来自转基因生物或者是否含有转基因成分。
15.PCR：聚合酶链式反应简称PCR（英文全称：Polymerase Chain Reaction），在引物指导下由酶催化的对特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。
16.ELISA：酶联免疫吸附剂测定（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay），简称ELISA，指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上，进行免疫反应的定性和定量方法。
17.生物反应器：是利用酶或生物体（如微生物）所具有的生物功能，在体外进行生化反应的装置系统，它是一种生物功能模拟机，如发酵罐、固定化酶或固定化细胞反应器等。即用于生物反应过程的容器总称。
18. 安全性评价：主要包括环境和食品安全性两方面，食品安全性评价：是运用毒理学动物试验结果，并结合人群流行病学调查资料来阐述食品中某种特定物质的毒性及潜在危害，对人体健康的影响性质和强度，预测人类接触后的安全程度。

二、填空
1．基因工程的操作包含以下步骤：获得 目的基因、构造 重组 DNA 分子、 转化或转染、表达和 蛋白质产物的分离纯化。
2．转基因生物包括： 转基因动物、 转基因植物 和 转基因微生物 。
3．转基因动物基因转移方法主要有 化学法 、 物理法 和 生物法 3类
4．PCR-ELISA方法检测转基因产品是将PCR 高灵敏性 和 高效性 与ELISA的 高准确性 相结合，对靶基因进行PCR扩增，再用ELISA方法对PCR产物进行检测。本方法应用于转基因成分的检测，不仅能检测 目的基因 ，也能检测 筛选基因 如CaMV 35S启动子、NOS终止子和NPTⅡ等基因，灵敏度达到0.1％，且适用于批量检测。
5．植物细胞转入的基因成分一般包括 启动子(Promotor) 、 报告基因（Reporter gene) 、 目的基因(target gene) 和 终止子(terminator) 。
6．转基因技术包括下列：转基因的重组子 构建技术 、重组分子导入宿主体内的 转化技术 、转基因在受体细胞染色体上的 稳定整合 、转基因的可控性 表达技术 。（记忆：构、转、整、表）
7．转基因产品包括 植物性转基因食品 、 动物性转基因食品 、 转基因微生物食品 和 转基因特殊食品 。
8．转基因植物基因转移方法主要有 农杆菌介导的基因转移、 直接基因转移 和 种质系统的基因转移 3类。
9．转基因产品的检测方法有鉴定产品中 有无转基因成分 的方法；鉴定产品中 转基因成分性质 的方法；测定产品中 转基因成分含量 的方法。
10．动物细胞转入的基因成分一般包括 顺式作用元件 、 结构基因 、 报告基因(report gene) 和 融合基因 。
11．国外转基因生物安全的管理方式为 行政法规 和 技术标准 相结合。
12．我国对农业转基因生物安全评价按照 植物 、 动物 、 微生物 三个类别， 实验研究 、 中间试验 、 环境释放 、 生产性试验 、 申领安全证书 五个阶段， Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ 、 Ⅳ 四个等级，以科学为依据，以个案审查为原则，实行分级分阶段管理。

三、选择题
1．我国农业部每年组织（ B ）农业转基因生物安全评审。
A 1次 B 2次 C 3次
2．按照对人类、动植物、微生物和生态环境的危险程度，将农业转基因生物分为以下（ C ）等级。
A 2 B 3 C 4
3．外源目的基因表达场所通常称为（ A ）。
A受体 B 载体 C 质粒
4．取自同一批的份样，经过混合而得到的一定数量样品称为（ C ）。
A 试样 B 实验室样品 C 原始样品
5．采用PCR检测方法检测转基因产品时，通常需要设（ B ）个对照。（包括：阳性对照、阴性对照、试剂空白对照和提取空白对照）
A 3 B 4 C 4个以上
6．根据国际通行的做法，在进行农业转基因生物进行风险评估时，一般遵循（ G ）。
A科学透明原则；B预防原则；C个案分析原则；D渐进原则；
E熟悉原则；F实质等同性等原则；G上述所有原则。
7．农业转基因生物安全评价共分为（ B ）步骤。
A 4 B 5 C 6
8．“身份保持”生产体系，是为保持（ B ）产品的纯性，防止转基因的污染，而在从其作物种植到产品运输、出口、加工的整个生产体系中采用严格的保持其产品“身份”单一的生产系统，通过对整个生产系统的每个阶段的基因成分控制、 评估与检测，确保其产品含有最低的转基因成分，并保持详尽而完整的资料、数据记录及相关证书。
A 转基因 B 非转基因 C 转基因和非转基因
9．由原始样品经过混合、缩分得到的一定数量样品称为（ B ）。
A 实验室样品 B 测试样品 C 标准样品
10．转基因植物产品核酸的提取通常采用的方法是（ A ）。
A CTAB法 B 苯酚/氯仿法 C SDS法

四、简答题
1．克隆动物与转基因动物的区别
克隆动物是把体细胞的细胞核移植进一个去掉细胞核的卵细胞中，，组装成一个类似受精卵的细胞，这个组装的细胞发育成“一头小动物”。而转基因动物的研制是将外源基因导入到动物受精卵的核中，然后再注入到母动物体内，发育成小动物，出生后的小动物带有外源基因，就可表达这种外源基因的产物。
克隆动物的价值，在于它的理论意义。因为它突破了有性生殖的柜架，证明高等动物也可以由无性生殖来繁衍。转基因动物的意义在于它的经济价值，因为它可以用来大量廉价地生产珍贵的药物和改良动物品质。
2．简述我国农业转基因生物的安全评价步骤与内容
安全评价的基本步骤为: (1) 确定受体作物的安全等级; (2) 确定基因操作对安全等级的影响; (3)划分转基因生物体的安全等级;(4)转基因产品的安全等级;(5)安全性的综合评价和建议。内容：国家对农业转基因生物安全评价按照植物、动物、微生物三个类别，实验研究、中间试验、环境释放、生产性试验、申领安全证书五个阶段，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个等级，以科学为依据，以个案审查为原则，实行分级分阶段管理。
3．比较ELISA法与PCR法检测转基因产品的优缺点
ELISA检测蛋白质具有灵敏性高、特异性强、定量检测等优点。对于商业化转基因作物原料的检测，采用ELISA方法不仅能得出定性结果而且能得出定量结果。
缺点：由于ELISA只能检测外源目的蛋白和一些选择标记基因表达的蛋白质，检测覆盖率低；由于检测极限问题，应用范围不如PCR方法广泛；由于蛋白质易变性，ELISA不能检测高温加工或深加工产品中的转基因成分。
PCR以其高灵敏性、较好特异性和快速简便性被广泛采用，用于转基因检测时，要求引物特异性高，必要时应设计一对分析内源性基因组DNA引物作阳性对照，以监测体系可靠性。定性PCR能检测所有种类GMO，且能检测深加工产品；但PCR存在问题是基因高效扩增可能产生假阳性结果和难以进行定量检测。
4． 例出至少5个关于转基因生物安全管理国际法规与国内法规
答：国内：《基因工程安全管理办法》《农业生物基因工程安全管理实施办法》
《进出境转基因产品检验检疫管理办法》《转基因植物种子广告审查办法》《种子法》
国外：《重组DNA分子研究准则》《关于转基因生物有意环境释放的（2001/18/EC指令）》《转基因食品标识标准》《关于转基因微生物封闭使用的（98/81/EC指令）》《生物技术管理协调框架》

5．动物克隆的意义
答：1、体细胞与胚胎干细胞的相互转化
2、对传统动物繁殖模式的挑战；（AI、Clone）
3、对社会伦理的挑战
4、保存物种、延续生命、提高人口素质
6．转基因技术与传统技术的区别
答：转基因技术与传统技术是一脉相承的，其本质都是通过获得优良基因进行遗传改良。 但在基因转移的范围和效率上，转基因技术与传统育种技术有两点重要区别：
第一，传统技术一般只能在生物种内个体间实现基因转移，而转基因技术所转移的基因则不受生物体间亲缘关系的限制。 第二，传统的杂交和选择技术一般是在生物个体水平上进行，操作对象是整个基因组，所转移的是大量的基因，不可能准确地对某个基因进行操作和选择，对后代的表现预见性较差。而转基因技术所操作和转移的一般是经过明确定义的基因，功能清楚，后代表现可准确预期。因此，转基因技术是对传统技术的发展和补充。将两者紧密结合，可相得益彰，大大地提高动植物品种改良的效率。

7．转基因产物可能产生危害
1、食物安全性因素
（1）转基因产物的直接影响：包括营养成分、毒性或增加食物过敏
性物质的可能；
（2）转基因间接影响：经遗传工程修饰的基因片段导入后，引发
基因突变或改变代谢途径，致使其最终产物可能含有新的成
分或改变现有成分的含量所造成的间接影响；
（3）植物里导入了具有抗除草剂或毒杀虫功能的基因后，它是否也象 其他有害物质一样能通过食物链进入人体内；
（4）转基因食品经由胃肠道的吸收而将基因转移至胃肠道微生物中，从而对人体健康造成影响
2、环境安全性因素
（1）转基因生物对农业和生态环境的影响；
（2）产生超级杂草的可能；
（3）种植抗虫转基因作物后可能使害虫产生免疫并遗传、从而产生
更加难以消灭的“超级害虫”；
（4）转基因向非目标生物漂移的可能性；
（5）其他生物吃了转基因食物是否会产生畸变或灭绝；
（6）转基因生物是否会破坏生物的多样性等
8． 我国转基因生物安全管理的基本制度有哪些？
答：（1）农业转基因生物安全评价制度
（2）生产许可证制度
（3）经营许可证制度
（4）农业转基因生物标识制度
（5）农业转基因进口安全管理制度
9．影响转基因检测准确性的因素有哪些？
取样方法（sampling）样品制备（sample reparation）检测方法（analytical method）
10． 适合转基因产品检测最佳方法所具备的要素有哪些？
答：检测时间快速 价格便宜 灵敏性、准确性、重复性好 得到定量的结果 国际上广泛接受或认可 能够检测所有已商品化得转基因作物品种 能够筛选出未经许可的转基因生物品种 适用于原材料深加工品的检测 具备认可标准物质

11． 影响转基因取样方案的因素有哪些？
答：转基因成分
生产过程（转基因污染的风险）
产品均一性
产品颗粒的大小
统计学因素
可操作性和经济因素
12． PCR检测的主要步骤？
答：1、运用化学手段对DNA提取；
2、设计并合成引物；
3、进行PCR扩增；
4、克隆并筛选鉴定PCR产物；
5、DNA序列分析。

五、综合题
1．试述转基因产品可能产生的安全性问题
答：1、食物安全性因素
（1）转基因产物的直接影响：包括营养成分、毒性或增加食物过敏性物质的可能；（2）转基因间接影响：经遗传工程修饰的基因片段导入后，引发基因突变或改变代谢途径，致使其最终产物可能含有新的成 分或改变现有成分的含量所造成的间接影响；（3）植物里导入了具有抗除草剂或毒杀虫功能的基因后，它是否也象 其他有害物质一样能通过食物链进入人体内；（4）转基因食品经由胃肠道的吸收而将基因转移至胃肠道微生物中，从而对人体健康造成影响
2、环境安全性因素（1）转基因生物对农业和生态环境的影响；（2）产生超级杂草的可能；（3）种植抗虫转基因作物后可能使害虫产生免疫并遗传、从而产生更加难以消灭的“超级害虫”；（4）转基因向非目标生物漂移的可能性；（5）其他生物吃了转基因食物是否会产生畸变或灭绝；（6）转基因生物是否会破坏生物的多样性等。

2、试述安全性评价的基本原则与方法
答:原则： 科学原则 实质等同性原则 预先防范原则 个案原则 逐步原则 风险效益平衡原则 熟悉性原则
方法：

3、关于转基因水稻在我国通过安全证书之我见现状
答：华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室的转抗虫基因水稻“华恢1号”及杂交种“Bt汕优63”获得了生物安全证书，意味着这两种水稻在未来两三年内就可以大规模商业化种植，社会各界在不断热议
必要性：现阶段，在保证耕地不低于国家红线的情况下，杂交水稻能够满足我国人民的需求，不需要转基因水稻填补粮食缺口。
充分性：现阶段，各国都没有对自己国家的主粮进行转基因商业化种植，连美国都没有，其不敢保证人民天天食用它安全。中国的转基因技术同样做不到，中国的管理转基因水稻的水平也不能保证。现阶段，重点不应该是种植这个问题
应该是如何尽可能的提高和掌握转基因水稻的核心技术，发现更多的功能基因，拥有转基因水稻种子的自主知识产权，在将来想种就种，不被跨国公司所操纵。
（仅供参考）
4、试述转基因检测的现状与发展趋势
答：现状：现在常用的转基因检测方法主要有两类:
1、检测有无来自其他生物的外源结构基因表达出的蛋白质（蛋白质检测）
2、检测有无外源的启动子、终止子、标记基因等（核酸检测）
趋势:1、随着转基因食品商品化进程加速，越来越多的目的基因将被转入种类更加繁多的食品作物中，使用的启动子、终止子也将不再局限于目前的几种。因此，常规PCR检测将可能造成越来越多的假阴性，能同时检测多个启动子、终止子、目的基因、内参照基因的基因芯片将成为必需。2、建立快速可靠的GMF检测手段，也成为卫生监管部门面临的刻不容缓、必须解决的问题。

5、 从食物安全、生物安全、环境安全三方面论述转基因产品的安全性
答：一、转基因产品与食物安全
a. 转基因食物引起食物安全性问题的理由
反对“实质性等同 安全性检测问题 滞后效应 担心出现新的过敏原 担心营养成分的改变 把动物蛋白基因转入农作物，是否侵犯了宗教信仰或素食者的权益
b.不必担心转基因食物安全性的理由
多环节、严谨的安全性评价,可以保证转基因食物的安全 科学家的负责态度可以防止新过敏原的产生 至今尚未发现食用转基因食品而影响人体健康的事例
没能足够的证据证明转基因食物有问题
二、 转基因生物与生物安全
a.引起生物安全的理由
转基因植物可能会扩散到种植区以外，成为杂草
转基因生物可能成为“入侵的外来物种”威胁生态其他生物的生存
外源基因可能与感染转基因生物的某些细菌获病毒杂交，重组出对人类或其他生物有害的病原体。
有可能使杂草成为除不掉的“超级杂草”
b.不引起生物安全的理由
扩散到种植区以外的转基因农作物很快死亡。
转基因农作物要表现出新性状，必须有一定的水、肥等条件，以及配套的种植技术。
由于存在生殖隔离，转基因农作物很难与其他植物杂交
花粉传播的距离有限，时间有限。
三、 转基因生物与环境安全
a. 引起环境安全的理由
打破自然物种的原有界限,改变了生态系统中能量流动和物质循环。
重组微生物在降解某些化合物过程中所产生的中间产物，可能对人类的生活环境造成二次污染
重组DNA与微生物杂交,可能产生有害的病原微生物
转基因植物花粉中的有毒物质可通过蜜蜂进入蜜蜂,再经过食物链传递，有可能进入其他动物和人体内。
b.不引起环境安全的理由:
转基因不会改变生物原有的分类地位,不会破坏生态系统的稳定性。
转基因抗虫作物的种植,减少了农药的使用量。
抗除草剂农作物的种植,减轻了农田管理的负担,保护了农田的土壤环境。
新闻报道不实，增加了公众对转基因农作物的恐惧感。

6. 为什么对转基因生物进行安全性分析？如何对转基因生物进行安全性分析？
答：一、安全性评价的目的
a、为科学决策提供依据b、保障人类健康及生态环境安全c、回答公众疑问
d、促进国际贸易，维护国家权益e、促进生物技术可持续发展
二、 对转基因作物进行全面的安全性评价, 是一项十分复杂而又耗时的系统工程, 它涉及到化学、生理学、分子生物学、遗传学、生态、环保、耕作学、营养学、毒理学等一系列的学科以及大量的分析和试验工作。
三、 安全评价的基本步骤为: (1) 确定受体作物的安全等级; (2) 确定基因操作对安全等级的影响; (3) 划分转基因生物体的安全等级;(4)转基因产品的安全等级;(5)安全性的综合评价和建议