微波辐射和浸种对华山松种子生活力和发芽的影响.pdf

DOI:10.11929/j.swfu.202207023引文格式：张合瑶,马福仙,李莲芳,等.微波辐射和浸种对华山松种子生活力和发芽的影响 J.西南林业大学学报（自然科学）,2023,43(5):2330.微波辐射和浸种对华山松种子生活力和发芽的影响张合瑶马福仙李莲芳顾梦刘娴李小军周冬梅（西南林业大学林学院，云南昆明650233）摘要：为了解微波辐射和清水 2 因素不同水平组合对华山松种子吸水、生活力和种仁发芽率的影响，以及微波辐射结合清水和 GA3溶液浸种 3 因素对华山松种子发芽率的影响，采用 L9(34)正交设计开展试验实施。结果表明：微波辐射和清水浸种处理组合的种子生活力、种子、种仁和种壳吸水率 分 别 为 75.3%88.0%（CK 的 为 94.7%）、6.63%10.44%、15.00%23.80%和 0.98%4.87%，处理组合间种子和种仁吸水率均具有极显著的差异（P0.01）；影响生活力的主导因子是微波辐射和清水浸种时间的交互作用，影响种子和种仁吸水率的则是清水浸种时间；测定（TTC 法）的和未测定生活力的种仁发芽率分别为 4.0%22.8%和 52.7%90.0%，CK 的为4.7%和 60.0%，微波辐射是影响种仁发芽率的主导因子。微波辐射结合清水和 GA3溶液浸种的组合，种子场圃发芽率为 56.0%71.6%（CK 的为 56.0%），清水和 GA3浸种的交互作用是影响种子场圃发芽率的主导因子。微波辐射和清水浸种的组合降低种子生活力。清水浸种 8h 时，种子吸水基本达到饱和；微波辐射 15s，清水浸种 12h 后 0.05g/LGA3溶液浸种，提高华山松种子场圃发芽率，可应用于生产实践。关键词：华山松；微波辐射；浸种；生活力；种子吸水；发芽率中图分类号：S791.241文献标志码：A文章编号：20951914(2023)05002308EffectsofMicrowaveRadiationandSeedSoakingonSeedViabilityandGerminationofPinus armandiiZhangHeyao,MaFuxian,LiLianfang,GuMeng,LiuXian,LiXiaojun,ZhouDongmei(CollegeofForestry,SouthwestForestryUniversity,KunmingYunnan650233,China)Abstract:Inordertounderstandtheeffectsofdifferentlevelswithwhichtreatmentcombinations(TCs)ofthe2factorsofmicrowaveradiationandclearwateronwaterabsorptionandviabilityofseeds,involvedgermina-tionrateofseedkernel.AndtheeffectsofmicrowaveradiationcombinedwithclearwaterandGA3seedsoakingongerminationrateofseedsfor Pinus armandii.TheL9(34)orthogonaldesignwasappliedtoimplementtheex-periments.Theresultsshowthattheseedviability,waterabsorptionratesofseed,kernelandseedshellfortheTCs of microwave radiation and water soaking were 75.3%88.0%(94.7%of the control),6.63%10.44%,15.00%23.80%and0.98%4.87%,respectively,andwithsignificantdifferencesinseedandkernelwaterabsorp-tionbetweentheTCs(P 0.01).Thedominantfactoraffectingviabilitywastheinteractionbetweenmicrowaveradiationandwatersoakingtime,andthewaterabsorptionofseedsandkernelswasaffectedbythesoakingtimeofseedsinclearwater;thegerminationratesofseedswithandwithoutviabilitymeasured(TTCmethod)were收稿日期:20220713；修回日期:20220829基金项目:国家“十三五”重点研发计划项目（2017YED0600500）资助。第 1 作者:张合瑶（1998），女，硕士研究生。研究方向：森林培育。Email:。通信作者:李莲芳（1964），女，博士，教授，博士生导师。研究方向：森林培育。Email:。第43卷第5期西南林业大学学报Vol.43No.52023年9月JOURNALOFSOUTHWESTFORESTRYUNIVERSITYSep.20234.0%22.8%and52.7%90.0%,respectively,andthoseofthecontrolwere4.7%and60.0%.Microwaveradi-ationwasthedominantfactoraffectingthegerminationrate.Nurserygerminationratesofseedsradiatedwithmi-crowavecombinedseedssoakedwithwaterandGA3were56.0%71.6%(56.0%ofthecontrol),withtheinterac-tionbetweenwaterandGA3soakedseedswasthedominantfactoraffectingthegerminationrate.Thecombina-tionofmicrowaveradiationandsoakingseedsinwaterreducedseedviability.Whentheseedsweresoakedinwa-terfor8hours,thewaterabsorptionoftheseedsbasicallyreachedsaturation.Soakingseedsinmicrowaveradi-ationfor10s,andclearwaterfor8hafter0.05g/LGA3solutioncouldimprovethegerminationrateofP.ar-mandiiseeds,whichcouldbeappliedtoproductionpractice.Key words:Pinus armandii；microwaveradiation；seedsoaking；viability；waterabsorption；germinationrate华山松（Pinus armandi）是松科（Pinaceae）松属（Pinus）树种，是中国特有的常绿针叶乔木，其分布广泛，在西南地区集中生长，分布至山西、陕西、河南、甘肃、湖北等地的气候温凉而湿润地带13。华山松果材兼用，在西南地区，其林下野生食用菌资源丰富，属多功能树种。华山松苗木培育主要以实生苗繁殖为主，种子生活力和发芽是培育壮苗的基础45。微波辐射植物种子，通过植物细胞内的极性分子物质吸收电磁，从而改变生物大分子结构，影响植物生理生化特征，进而加速种子发芽6。王永强等7指出，低功率微波辐射（160W 和 480W）15s 促进华山松种子发芽，高功率微波辐射（640W）则抑制；赵铎等8指出，650W 微波辐射，可提高云南松（P.yunnanensis）种子发芽率；郑书绿等9和鲍雪纤等10研究表明，适宜的微波辐射时间可促进云南松和滇青冈（Cyclobalanopsis glaucoi-des）种子发芽。一般地，适宜强度和时间微波辐射林木种子，可促进其发芽。浸种可有效促进种子吸水和发芽11。已有研究表明，清水浸种促进马 尾 松（P.massoniana）12、湿 地 松（P.elli-ottii）13、柴胡（Bupleurum chinese）14和腊肠树（Cassia fistula）15种子的发芽。赤霉素（Gibberellin,GA3）可促进植物体内生长素的合成，提高种子胚内酶的活性和代谢活动，诱导植物的基因表达，控制酶蛋白的合成和分泌，促进植物内多种生理生化代谢反应，并对受到破坏的细胞膜进行修复，从而提高种子活力并促进其发芽16。李超等17指出，100mg/LGA3溶液浸种 24h 可促进灯笼树（Enkianthus chinen-sis）种子发芽；黄宁等18的研究表明，在 50400mg/L 浓度范围内，枫香（Liquidambar for-mosana）种子发芽性状随 GA3溶液浸种浓度的增加而提高；杨楠等19研究不同浓度 GA3溶液浸种对山樱桃（Cerasus serrulata）种子发芽的影响，发现在 1001500mg/L 浓度范围内，增加 GA3溶液浓度和浸种时间（24h 和 48h）可提高种子发芽率，但 GA3溶液浓度过高则抑制种子发芽。以上文献指出适宜浓度和时间的 GA3溶液浸种，促进林木种子发芽。目前，已有研究多集中于华山松种子发芽4,2022，而关于微波辐射及清水浸种对华山松种子生活力、种仁和种子吸水及其种仁发芽的研究较少。基于此，本研究开展微波辐射，结合清水和GA3溶液浸种（种仁和种子）试验，了解试验因素的不同水平及其组合对华山松种子生活力、种仁和种子吸水率及其发芽的影响，为华山松壮苗培育的种子处理提供科学依据和参考。1 试验区概况华山松种子吸水、生活力和种仁发芽试验，以及种子场圃发芽试验分别在位于昆明的西南林业大学林学院森林培育学实验室和苗圃的塑料大棚内开展。昆明地处中国西南部，云贵高原中部，属北亚热带气候，海拔约 1891m，年均温约为 15，最热和最冷月平均气温分别为 25 和3，年平均降水量 1000.5mm，明显分为干（11月至次年 4 月）、湿（510 月）两季23。在昆明，华山松天然小面积或成片分布于海拔 1800m 以上的沟谷、阴坡或半阴坡立地条件优越的地段24。2 试验方法 2.1 微波辐射和清水浸种对种子吸水和生活力及种仁发芽率的影响试验2.1.1试验设计根据郑书绿等9、鲍雪纤等10和陈振生等12的研究结果，本研究采用 L9(34)正交设计试验，包括微波辐射时间（A）和清水浸种时间（B）24西 南 林 业 大 学 学 报第43卷2 因素，每因素 3 水平，测定种子生活力、吸水量（包括种子、种壳和种仁）及种仁发芽率。因素 A 和 B 分别排列于 1 和 2 列，第 3 列为 A 和B 的 交 互 作 用（A B；表 1）。试 验 增 加1 个空白对照（CK），共 10 个处理组合，3 次重复，每处理组合 150 粒种子，共 4500 粒。表 1 微波辐射和清水浸种的因素水平和 L9(34)正交设计Table1FactoriallevelsandtheL9(34)orthogonaldesignofmicrowaveradiationandseedsoakingwithclearwater因素水平表L9(34)正交试验设计水平A微波辐射时间/sB清水浸种时间/h处理组合号ABAB空处理组合处理组合的实施方案110411111A1B1微波辐射10s后清水浸种4h21222A1B2微波辐射10s后清水浸种8h31333A1B3微波辐射10s后清水浸种12h215842123A2B1微波辐射15s后清水浸种4h52231A2B2微波辐射15s后清水浸种8h62312A2B3微波辐射15s后清水浸种12h3201273132A3B1微波辐射20s后清水浸种4h83213A3B2微波辐射20s后清水浸种8h93321A3B3微波辐射20s后清水浸种12h2.1.2种子吸水率的测定方法将种子分为 30 组（每处理组合 150 粒，其中 3 组为对照），种子净度 99.8%，千粒质量374.1g，浸种前，用 1/10000 的电子天平分别每组称其质量。称重后，在 2450MHz 的微波强度下，按试验设计进行微波辐射（10、15、20s），之后置于清水中浸泡（4、8、12h），浸种结束后，分别称其吸水后的质量。测定吸水量后的种子，用松子夹夹开（包括 CK）种壳，取出种仁，立即称质量，即为种仁吸水后的质量（CK未浸种，故作为未吸水的种仁基础质量），种子吸水量减去种仁吸水量获得种壳吸水量。处理组合的种子、种仁和种壳吸水率计算公式如下：Wpi=(WiW0)/W0100%（1）式中：Wpi为吸水率，Wi为吸水后的质量，W0为吸水前的质量。2.1.3种子生活力和种仁发芽率的测定方法经吸水测定后的种仁，采用 2,3,5氯化三苯基氯化四氮唑（2,3,5triphenyltetrazoliumchloride,TTC）染色法测定种子生活力。具体地，测定吸水量的种仁，每处理组合分出 100 粒（包括对照），浸入 0.5%的 TTC 溶液中，并置于 25 的烘箱染色 30h 后，取 50 粒种仁用于观测和统计生活力，另 50 粒置床于垫有 5 层经 130 高温烘箱消毒 2h 的卫生纸的饭盒中，测定 TTC 染色后的种仁发芽率；测定吸水量后每处理组合剩余的 50 粒种仁，与 TTC 染色后相同的方法测定未染色种仁发芽率。生活力和发芽率的计算公式如下：SV=n/N100%（2）式中：SV 为种子生活力，n 为被染色的种子数，N 为测定生活力的种子数。GR=n/N100%（3）式中：GR 为发芽率，n 为测定时间内正常发芽粒数，N 为置床的种子数。2.2 种子场圃发芽率对微波辐射及清水和 GA3溶液浸种的响应试验2.2.1试验设计根据郑书绿等9、鲍雪纤等10、陈振生等12和李超等17的研究结果，试验包括不同微波辐射时间（A）、清水浸种时间（B）和 GA3溶液浸种浓度（C），每因素 3 水平，采用 L9(34)正交设计开展试验实施；因素 A、B 和 C 分别排列于1、2 和 3 列，第 4 列为 B 和 C 的交互作用（BC；表 2）。试验共 10 个处理组合（含 1 个对照），3 次重复，每处理组合 30 个管状容器，每容器播种 5 粒种子，共 4500 粒。第5期张合瑶等：微波辐射和浸种对华山松种子生活力和发芽的影响25表 2 微波辐射及清水和 GA3的因素水平和 L9(34)正交设计Table2FactoriallevelsandtheL9(34)orthogonaldesignofmicrowaveradiationandseedsoakingwithclearwaterandGA3sulution因素水平表L9(34)试验正交设计水平A微波辐射时间/sB清水浸种时间/hCGA3浓度/(gL1)试验号ABCBC处理组合处理组合的实施方案11040.0511111A1B1C1微波辐射10s，清水浸种4h，0.05g/L的GA3浸种21222A1B2C2微波辐射10s，清水浸种8h，0.20g/L的GA3浸种31333A1B3C3微波辐射10s，清水浸种12h，0.35g/L的GA3浸种21580.2042123A2B1C2微波辐射15s，清水浸种4h，0.20g/L的GA3浸种52231A2B2C3微波辐射15s，清水浸种8h，0.35g/L的GA3浸种62312A2B3C1微波辐射15s，清水浸种12h，0.05g/L的GA3浸种320120.3573132A3B1C3微波辐射20s，清水浸种4h，0.35g/L的GA3浸种83213A3B2C1微波辐射20s，清水浸种8h，0.05g/L的GA3浸种93321A3B3C2微波辐射20s，清水浸种12h，0.20g/L的GA3浸种2.2.2试验实施播种前 10d，苗床深翻约 30cm 后，将管状容器埋入苗床中，管状容器口与苗床平齐。以苗圃土作为基质装入容器中，采用 0.5%的 KMnO4溶液浇透基质对苗床进行消毒，在阳光下晾晒 2d，待播种。播种前 1d，先将 30 份（150 粒/份）华山松种子分别用纱布包裹好，用带有标签的长绳绑扎纱布，并标记重复与处理组合，浸泡于 0.5%KMnO4溶液中消毒 0.5h，用清水冲洗干净；根据试验设计，对种子顺序进行微波辐射、清水（分别按试验设计时间）和 GA3（2h）溶液浸种；之后，按预先随机抽签的重复和处理组合将其播入相应的容器中。播种结束后，用 0.5%KMnO4浇透基质，结合消毒完成第 1 次浇水，并于苗床上搭建塑料小拱棚保温。种子发芽期间，苗床保持湿润卫生，温度过高时，将温棚两侧打开通风，保持有益于发芽的温度。从发芽之日开始，每天记录种子发芽粒数，计算其发芽率，发芽率计算同种仁的。2.3 数据处理采用 Excel2003 和 SPSS25.0 进行数据整理和分析，并计算各指标的变异系数（CV），计算公式如下：CV=SD/M100%（4）式中：CV 为变异系数，SD 为标准差，M 为平均值。根据方差的齐性要求，任一组百分数出现70%的现象，先进行反正弦转换后再做方差分析，若处理组合间和因素水平间呈现显著或极显著的差异，则采用邓肯氏（Duncans）法25进行多重比较，结果以平均值标准误差表示。3 结果与分析 3.1 种子生活力的分析处理组合的种子生活力为 75.3%88.0%，低于 CK 的 94.7%（表 3），表明微波辐射和清水浸种的组合在一定程度上降低华山松种子生活力，因此，生产实践中，此 2 因素组合的种子处理方式需要在试验证实有效的前提下再进行应用。微波辐射和清水浸种的交互作用（AB）是影响种子生活力的主导因子；微波辐射 15s 的生活力略高于10s 和20s，与CK 的相比较低（81.3%84.0%vs.94.7%），表明微波辐射整体降低种子生活力；总体上，随着清水浸种时间的延长，种子生活力呈略微下降趋势（表 4）。随微波辐射和清水浸种时间的延长，种子生活力均呈下降趋势，同时交互作用亦导致生活力下降，即单一因素和二者的组合处理均降低种子生活力。种子生活力的理论优水平组合为 A2B1（微波辐射 15s 后清水浸种 4h），与实际生活力最高的处理组合 4 相一致（不包括 CK），表明试验结果的可靠性。虽然微波辐射和清水浸种的组合降低华山松种子生活力，但若其导致生活力较弱的种子失去生活力，则其可作为优良品质种子筛选的措施。26西 南 林 业 大 学 学 报第43卷表 3 处理组合的种子生活力Table3Seedviabilityofthetreatmentcombinations(TCs)处理组合平均/%CV/%186.03.0556.2282.710.34921.7375.34.66710.7488.05.29210.4580.09.16519.8684.04.1638.6782.04.1638.8877.38.19218.3987.32.6675.3CK94.70.6671.2总计83.71.86112.2表 4 种子生活力随因素水平的变化及其极差分析Table4Variationofseedviabilitywithchangeoffactorlevelsanditsrangeanalysis类目A/%B/%AB/%X181.385.382.4X284.080.086.0X382.282.279.1极差值/%2.75.36.9优水平A2B1-主次顺序ABBA理论优水平组合A2B1实际试验最高组合A2B1 3.2 种子吸水分析处理组合的种子、种仁和种壳吸水率分别为6.63%10.44%、15.00%23.80%和0.98%4.87%，处理组合 2、3 和 59 的种子吸水率极显著高于处理组合 1、4（P0.01），处理组合 3、5、9 的种仁吸水率极显著高于除处理组合 2、6、8 以外其余处理组合的（P0.01），虽然种壳吸水率未呈现显著差异，但处理组合间亦不同（表 5）。表明微波辐射和清水浸种的组合处理，通过改变种仁和种壳吸水量而改变华山松种子的吸水量，即可通过此 2 因素的最佳组合处理，改善种子吸水，促进其提早发芽和发芽整齐性。影响种子和种仁吸水率的主导因子均是清水浸种时间（B），影响种壳吸水率的则是微波辐射（A）；微波辐射主要促进种壳吸水，清水浸种 8h 后，种子和种仁吸水率极显著高于浸种4h 的（P0.01），即浸种 8h 时，华山松种子吸水基本饱和（表 6），浸种 8h 后，种子吸水率略微下降。因此，生产实践中对华山松种子催芽的清水浸种以浸种 8h 最佳。种子和种壳吸水率的理论最优水平组合均为 A3B2，种子吸水率实际最优的是 A2B2（处理组合 5），二者不相一致，主要是因素水平的交互作用导致的；种壳吸水率实际最优的是处理组合 8 的（A3B2），其与理论最优水平组合相一致（表 56），即微波辐射和清水浸种的组合可改变种壳吸水，提高种壳吸水量，可采用此 2 因素的最优水平组合处理种子。表 5 处理组合的种子及其构件吸水率Table5WaterabsorptionratesofseedsinvolvedwhichcomponentstheTCs处理组合种子吸水率种仁吸水率种壳吸水率平均/%CV/%平均/%CV/%平均/%CV/%16.920.136B3.418.841.142B10.50.980.33859.829.560.049A0.922.141.557AB12.23.240.63934.139.820.202A3.623.240.844A6.32.980.67639.346.630.558B14.615.001.118C12.92.310.64648.4510.441.369A22.723.800.558A4.13.691.85587.169.680.128A2.321.220.546AB4.53.760.40018.479.390.368A6.819.450.841B7.54.210.86935.7810.381.374A22.920.950.474AB3.94.871.87066.5910.080.166A2.923.430.796A5.93.290.42622.4总计9.210.32718.420.900.58014.43.260.35256.1注：不同大写字母表示差异极显著（PAABBABAABAB理论优水平组合A3B2A1B3A3B2实际试验最高组合A2B2A2B2A3B2注：不同大写字母表示差异极显著（P0.01）。处理组合的种仁和种壳吸水量分别占种子吸水量的 70.8%90.5%和 9.5%29.2%（图 1），结合华山松种仁和种壳的吸水率进一步表明，华山松种壳属吸水较低的种子构件，但微波辐射和清水浸种在一定程度上可改变其吸水状况。可根据实际需要，进行此 2 因素组合处理华山松种子以改变其吸水量。020406080100123456789种子吸水量的分配/%处理组合种仁种壳图 1 种子吸水量的构成Fig.1Compositionofseedwaterabsorption 3.3 种仁和种子发芽率的分析3.3.1处理组合种仁和场圃发芽率及其差异分析处理组合测定和未测定生活力的种仁以及种子（场圃）发芽率分别为 4.0%22.8%、52.7%90.0%和 56.0%71.6%（CK 的 为 4.7%、60.0%和 56.0%），种子场圃（65.3%）和未测定生活力的种仁（69.6%）发芽率极显著高于测定生活力的种仁（10.4%）发芽率，表明 TTC 溶液染色对华山松种子造成损伤而降低发芽率。未测定生活力的处理组合间，种仁发芽率具有显著的差异（P0.05，图 2），与生活力的结果不一致，未测定生活力的种仁和场圃发芽率最高的分别是处理组合2 和 6（表 3、图 2）。由此表明：一方面，种子生活力并不能准确地反映其发芽率；另一方面，试验的因素水平组合有利于华山松种子发芽。Babaabab babb abbAbA0102030405060708090100123456789 平均CK发芽率/%处理组合测定生活力后的未测定生活力的场圃不同小写字母表示差异显著（P0.05）；平均值多重比较为种仁测定和未测定以及种子场圃处理组合之间平均发芽率的比较。图 2 种仁和种子发芽率Fig.2Germinationratesofseedkernelsandseeds3.3.2种仁和场圃发芽率随因素水平变化的分析由表 5 可知，微波辐射是影响种仁发芽率的主导因子，种子场圃发芽率则主要受清水浸种时间和 GA3溶液浸种浓度的交互作用（BC）影响；因素水平间，种仁发芽率随微波辐射时间的延长而降低，种子场圃发芽率则相反，呈上升趋势；未测定生活力的种仁，微波辐射 10s 和 15s的发芽率显著高于 20s 的（P0.05），测定生活力的种仁和种子场圃发芽率未呈现显著差异。测定生活力的种仁，发芽率随清水浸种时间的延长而提高；未测定生活力的种仁，发芽率随清水浸种时间的延长呈现先升高后降低的趋势，表明华山松种仁达饱和含水量后继续延长浸种时间，发芽率降低；种子的场圃发芽率随清水浸种时间的延长略微上升；场圃发芽率随 GA3溶液浸种浓度的升高而降低，但始终高于CK（56.0%），表明GA3溶液浸种有利于华山松种子发芽。测定和未测定生活力的种仁发芽率的理论最优水平组合分别为A1B3和 A1B2，与实际最优的处理组合 2、3 相一致，说明试验的结果可靠；种子场圃发芽率的理28西 南 林 业 大 学 学 报第43卷论最优水平组合为 A3B2C1，实际场圃发芽率最高的是处理组合 6（A2B3C1）的，理论与实际最优水平组合不一致（图 2、表 7），是试验的交互作用导致的（BC，PBABAABBBCCAB理论优水平组合A1B3A1B2A3B2C1实际试验最高组合A1B3A1B2A2B3C1注：不同小写字母表示差异显著（P0.05）。4 结论与讨论种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚所具有的生命力，是反映种子品质优劣的1 个指标26。本研究中，微波辐射和清水浸种降低华山松种子生活力。一方面，也许是此 2 因素单独或者组合处理，使生活力较弱的种子损伤乃至完全失去生活力导致的；另一方面，也许与随着浸种时间延长，清水中的氧气含量降低，导致生活力较弱的种子失去生活力有关。生产实践中，在苗木培育中处理种子，应结合苗木生长进行，也许处理后，虽然降低种子发芽率，但若有效促进苗木生长，微波辐射和浸种的组合也可应用于种子处理中。因此，生产实践中，林木种子采用微波辐射或清水浸种，应在试验研究证实其有效改善种子发芽或促进苗木生长基础上再行应用。随着科学的发展带来的设备使用便利性，微波辐射逐渐应用于林木种子的预处理。王永强等7指出，低功率微波辐射（160W 和 480W）15s 促进华山松种子发芽，反之高功率微波辐射和 640W 下辐射 45s 则抑制；赵铎等8指出，适宜的微波辐射提高云南松种子发芽率；郑书绿等9指出，微波辐射 10s 促进云南松种子发芽；鲍雪纤等10的研究结果与郑书绿等9的相一致，微波辐射 10s 促进滇青冈种子发芽。本研究中，适宜的微波辐射时间提高华山松种仁及种子发芽的结果，与已有研究的相类似，但其最佳辐射时间长短与赵铎等8、鲍雪纤等10和郑书绿等9的研究结果不同，也许是树种不同导致的。清水浸种是林木种子发芽预处理采用的方法。陈振生等12和马宏伦等13采用温度为 21的清水分别浸泡马尾松和湿地松种子（12、24、48、72、96、120、144h），浸种 24120h 的马尾松种子发芽率最高，湿地松发芽率最高的则是浸种 1272h 的；冯聪聪等14的研究表明，清水浸泡柴胡种子 12h，其发芽率和发芽势最高；陈玉昭15指出，清水浸种 12h 的腊肠树种子发芽率最高，浸种 24h，其前期出芽最快。本研究中，清水浸种 8h 提高华山松种仁（未测定生活力的）发芽率的结果与已有研究的相类似，最佳浸种时间的不同，也许主要因树种不同等因素导致的。然而，本研究的清水对华山松种子场圃发芽率的影响不明显，也许在场圃条件下，播种基质保水性能较好，种子容易从其获得水分有关。李超等17的研究表明，GA3溶液浸种对提高灯笼树种子的发芽率效果最佳，且 100mg/L 浸种6h 的种子发芽率最高；黄宁等18指出，100mg/LGA3溶液浸泡枫香种子，其发芽率和发芽指数最高；杨楠等19的研究表明，500mg/LGA3浸泡48h 后较大提高野生山樱桃种子发芽率，浓度过低或过高均不利于种子发芽。与以上文献的研究不同，本研究中 GA3溶液浸种抑制华山松种子发芽，也许是树种或因素的组合不同导致的，GA3溶液浸种对华山松种子发芽的影响还需开展单或多因素的试验研究，以揭示其影响作用及其机理。种子生活力可通过 TTC 染色法快速测定，其原理为四唑溶液穿透生物组织，与氢离子释放的酶参与呼吸过程形成不溶性红色化合物，从而将呼吸组织染成红色2729。一般地，种子生活力的测定，首先在清水浸种后，再剥出种仁染色后进第5期张合瑶等：微波辐射和浸种对华山松种子生活力和发芽的影响29行测定。本研究中的清水浸种降低华山松种子生活力的结果，揭示对该树种，浸种后测定的种子生活力准确性略有偏差，是否存在更加准确快速的华山松种子生活力测定的方法，有待进一步探讨后，进行试验研究。水分是种子发芽的必要条件，干燥的种子必须吸收大量的水分才能萌发。本研究中，微波辐射主要促进种壳吸水，浸种 8h 时，华山松种子吸水基本饱和，浸种 8h 后，种子吸水率略微下降，也许是种子吸水饱和后，种子水分逐渐被析出导致的。微波辐射和清水浸种的不同水平组合总体降低华山松种子生活力；清水浸种 8h 时，种子吸水基本饱和，其中，种仁是华山松种子吸水的主要构件；微波辐射和清水浸种在一定程度上可改变华山松种子及其构件的吸水状况。华山松种子场圃以及未测定生活力的种仁发芽率极显著高于测定生活力的种仁发芽率，即 TTC 溶液染色降低华山松种仁发芽率。微波辐射和清水浸种组合中，种仁发芽主要受微波辐射的影响；微波辐射结合清水和 GA3溶液浸种组合中，种子场圃发芽率则主要受清水浸种时间和 GA3溶液浸种浓度的交互作用影响，即因素的组合不同，影响发芽率的主导因子不同，可通过多因素的组合提高华山松种子发芽率。微波辐射 15s，清水浸种 12h 后0.05g/LGA3溶液浸种，促进华山松种子发芽，可应用于生产实践。参 考 文 献 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志:第七卷 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