DB41T2585-2024大口黑鲈四种病毒性疾病防控技术规范.pdf

ICS 65.150 CCS B 52 41 河南省地方标准 DB41/T 25852024 大口黑鲈四种病毒性疾病防控技术规范 2024-02-01 发布 2024-05-01 实施 河南省市场监督管理局 发 布 DB41/T 25852024 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 临床症状.2 5 流行病学特征.2 6 诊断.3 7 防控要求.3 8 日常管理.4 9 发病期处置.5 附录 A（资料性）大口黑鲈弹状病毒检测引物.6 DB41/T 25852024 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河南省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：河南省水产技术推广站、深圳技术大学、深圳海关动植物检验检疫技术中心、郑州市水产技术推广站、济源市渔业技术推广站。本文件主要起草人：刘熹、杨雪冰、贾鹏、李旭东、邱慧玲、孙艳辉、王健华、赵黎明、陈颖、尚胜男。DB41/T 25852024 1 大口黑鲈四种病毒性疾病防控技术规范 1 范围 本文件规定了大口黑鲈蛙虹彩病毒病、大口黑鲈弹状病毒病、大口黑鲈病毒性神经坏死病、大口黑鲈传染性脾肾坏死病的病原、临床症状、流行病学特征、监测、预防控制等技术要求。本文件适用于大口黑鲈蛙虹彩病毒病、大口黑鲈弹状病毒病、大口黑鲈病毒性神经坏死病和大口黑鲈传染性脾肾坏死病的预防控制。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 11607 渔业水质标准 GB 13078 饲料卫生标准 GB 21045 大口黑鲈 GB/T 27638 活鱼运输技术规范 GB/T 36191 真鯛虹彩病毒病诊断规程 GB/T 36192 活水产品运输技术规范 SC/T 1098 大口黑鲈 亲鱼、鱼苗和鱼种 SC/T 1132 渔药使用规范 SC/T 7015 染疫水生动物无害化处理规程 SC/T 7103 水生动物产地检疫采样技术规范 SC/T 9101 淡水池塘养殖水排放要求 OIE Manual of Diagnostic Testing for Aquatic Animal(2021)Chapter 2.1.2 OIE Manual of Diagnostic Testing for Aquatic Animal(2021)Chapter 2.3.12 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 大口黑鲈蛙虹彩病毒病（largemouth bass ranavirusdisease,LMBVD）由大口黑鲈蛙虹彩病毒（Largemouthbassranavirus，LMBV）感染大口黑鲈等宿主并导致其发病和死亡的病毒性传染病，俗称烂身病。LMBV属于虹彩病毒科（Iridoviridae）蛙病毒属（Ranavirus）成员，有囊膜，呈二十面体，直径约150 nm170 nm，基因组大小100 kbp210 kbp,为单分子线性双链DNA病毒。3.2 大口黑鲈弹状病毒病（Micropterus salmoides rhabdovirus disease，MSRVD）DB41/T 25852024 2 由大口黑鲈弹状病毒（Micropterus salmoides rhabdovirus，MSRV）感染大口黑鲈并导致其发病和死亡的病毒性传染病。MSRV属于弹状病毒科（Rhabdovirus）水泡病毒属（Vesiculovirus），呈子弹状，大小约53 nm 140 nm，基因组大小约11.5 kb，为单股负链RNA病毒。3.3 大口黑鲈病毒性神经坏死病（Viral nervous necrosis,VNN）由病毒性神经坏死病毒（Viral nervous necrosis virus,VNNV）感染大口黑鲈等病原并导致其发病和死亡的病毒性传染病。VNNV属于野田村病毒科（Nodaviridae）乙型野田村病毒属（Betanodavirus），呈球形，无囊膜，直径约25 nm，基因组大小为4.5 kb，为双节段单股正链RNA病毒。3.4 大口黑鲈传染性脾肾坏死病（Infectious spleen and kidney necrosis,ISKN）由传染性脾肾坏死病毒（Spleen and kidney necrosis virus,ISKNV）感染大口黑鲈等并导致其发病和死亡的病毒性传染病，俗称白肝白鳃。ISKNV属于虹彩病毒科（Iridoviridae）肿大细胞病毒属（Megalocytivirus），具有囊膜，呈二十面体，直径约150 nm，基因组大小为111,362kb，为双链线性DNA病毒。4 临床症状 4.1 大口黑鲈虹彩病毒病临床症状 通常无特征性临床症状，部分病例可见病鱼失去平衡，肌肉坏死，体表溃烂，溃烂处呈鲜红色，鳍基部常见红肿，溃烂处易继发细菌和真菌感染。解剖可见鱼鳔增大或发红，眼有白内障，或伴有心腔血块聚积，鳃动脉扩张淤血呈“血窦”。急性感染以头部出血为主。4.2 大口黑鲈弹状病毒病临床症状 病鱼在水中打转，体色变黑，体表出血，腹部肿大，内脏充血，偶见腹水，部分病鱼可见身体消瘦甚至出现弯曲。解剖可见肝、脾、肾肿大或充血呈“花肝”。4.3 大口黑鲈病毒性神经坏死病临床症状 病鱼体表发黑，有螺旋式、涡旋状等异常行为或腹部朝上，有时伴有鱼鳔发炎或卧于池塘底部、快速打转或向前移动，停止摄食。鱼鳔过度膨胀，有时伴有发炎，病理检测可见脊髓、脑及视网膜神经细胞的空泡化和坏死。4.4 大口黑鲈传染性脾肾坏死病临床症状 病鱼鱼体变黑，游动异常，腹部和鳍出血。解剖可见脾肾肿大，呈暗红色，肝脏发白有出血点。5 流行病学特征 大口黑鲈四种病毒性疾病的流行病学特征见表1。DB41/T 25852024 3 表1 大口黑鲈四种病毒性传染病流行病学特征 疾病/流行病因子 发病水温 宿主易感阶段 死亡率a 潜在传染源 靶器官 大口黑鲈蛙虹彩病毒病 2532 幼鱼和成鱼 1090 载毒冰鲜鱼、甲壳动物无节幼虫和轮虫等饵料、野生水生动物、被污染的水和捕捞工具。鳔、鳃和后肾 大口黑鲈弹状病毒病 1825 幼鱼 1090 肝脏、脾脏和肾脏 大口黑鲈病毒性神经坏死病 2532 鱼苗和幼鱼 7090 脑、视网膜、脾脏和肾脏 大口黑鲈传染性脾肾坏死病 2530 幼鱼和成鱼 幼鱼约100、成鱼约30 脾脏和肾脏 a 死亡率与养殖密度、水质、水温变化、诺卡氏菌和嗜水气单胞菌等细菌性疾病继发感染以及其他应激因素密切相关 6 诊断 根据4、5所规定的临床症状和流行病学特征进行初步诊断。大口黑鲈病毒性疾病的确诊应基于实验室检测结果，实验室诊断方法按如下标准执行：大口黑鲈蛙虹彩病毒病检测按OIE Manual of Diagnostic Testing for Aquatic Animal(2021)Chapter 2.1.2执行；病毒性神经坏死病检测按OIE Manual of Diagnostic Testing for Aquatic Animal(2021)Chapter 2.3.12执行；大口黑鲈传染性脾肾坏死病检测按GB/T 36191执行；大口黑鲈弹状病毒病检测参照附录A执行。7 防控要求 7.1 病原控制 7.1.1 水源要求 采用河水、水库水或地下水作为养殖水源，水源水质应符合GB 11607的要求。养殖场应选择临近水源处，入水口设置拦网防止敌害生物进入。7.1.2 养殖池（塘）消毒 用于亲鱼培育、交配、产卵、孵化、苗种培育、成鱼养殖的池塘，在使用前15 d应彻底清淤、翻塘暴晒并使用含氯石灰等常规消毒药物清塘。对有病毒性疾病发生史的池塘，在水温升至18 22 时，用无刺激性消毒剂消毒1次，并翻塘暴晒。7.1.3 养殖对象 7.1.3.1 苗种选择 苗种来源应选择正规育苗场或经过全国水产原良种委员会审定的新品种。所选苗种必须经水生动物检验检疫机构检疫合格，苗种无携带大口黑鲈蛙虹彩病毒、大口黑鲈弹状病毒、大口黑鲈病毒性神经坏DB41/T 25852024 4 死病毒和大口黑鲈传染性脾肾坏死病。质量符合GB 21045、SC/T 1098或水产苗种管理办法相关规定。7.1.3.2 苗种隔离 苗种引进后，须在隔离池隔离30 d以上，确保苗种健康。隔离结束后，转入养殖池。7.1.4 养殖过程 7.1.4.1 合理控制养殖密度，避免养殖密度过高。南方地区池塘养殖密度控制在 5000 尾/亩10000 尾/亩为宜，其它地区池塘养殖密度控制在 2000 尾/亩4000 尾/亩为宜。跑道和陆基养殖投放密度 50 尾100 尾/立方米为宜。7.1.4.2 根据养殖对象调节水质，视水质情况换水，每周换水 1 次为宜，每次换水 20 cm30 cm，水体透明度约 30 cm，池水溶解氧含量应保持在 4 mg/L 以上。跑道和陆基养殖方式使用循环水控制。7.1.4.3 换季、气温多变时尽量减少拉网、杀虫和消毒等操作，每天少量换水，延长换水时间。7.1.4.4 大暴雨或阴雨天应防止水质剧烈变化。7.1.4.5 养殖过程要建立种质来源及饲养档案，便于管理和溯源。7.1.5 药物管理 四种病毒性疾病无有效治疗药物，应做早期准确诊断提前预防，不宜盲目滥用药物。疾病防治采用的药物须符合SC/T 1132的规定。7.2 疾病监测 选择疾病发生的最适水温期，采集样品送有资质实验室进行大口黑鲈虹彩病毒、弹状病毒、病毒性神经坏死病毒、传染性脾肾坏死病的检测，每年监测两次。及时检测防控大口黑鲈诺卡氏菌、嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌等细菌性疾病与病毒性疾病交叉感染。疾病监测采样数量按SC/T 7103执行。8 日常管理 8.1 日常巡塘 8.1.1 定期巡塘，确定相应的饲养管理措施。定时测量水温，观察水色、天气及鱼类吃食情况。定期清理水面杂物。8.1.2 定期检测 pH 值、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐等水质指标，保持水质良好、稳定。养殖水质指标按GB 11607 执行。8.1.3 注意增氧、改底、调水、藻菌调控等，改善鱼体生存环境，避免缺氧、底质或水质恶化、藻毒素等环境影响，提高鱼体免疫力。8.1.4 发现鱼类异常死亡、疑似病例应立即采样送水生动物疫病病原检测专业机构或实验室进行确诊。8.1.5 疫区要采取严格的隔离、消毒措施，不得将疫区水体随便排放。8.2 投喂 8.2.1 投喂人工配合饲料，蛋白质含量应达到 45左右。饲料质量安全应符合饲料与饲料添加剂管理条例和 GB 13078 等规定。鱼种期配合饲料投饵率为 48，成鱼养殖阶段则为 13。8.2.2 养殖期间坚持“四定”投饵原则。四定：定质、定量、定时、定位。DB41/T 25852024 5 8.2.3 定期在饲料中添加免疫多糖、维生素、中草药等免疫增强剂，提高鱼体免疫力，降低大口黑鲈病毒性疾病发病和死亡风险。8.2.4 不得投喂变质的配合饲料。8.3 及时分池（塘）适时分池疏养或轮捕，根据鱼种生长速度、规格差异进行分塘管理，维持适宜的存塘量。8.4 规范捕运 起捕拉网时，应小心操作，避免鱼体受伤感染。运输时应遵循GB/T 36192、GB/T 27638要求。运输过程要注意控制温度、溶氧、密度等，维持储运水体卫生，避免细菌、真菌等感染水产品，避免外源性污染物介入。9 发病期处置 9.1 流行期 9.1.1 发病季节提前内服免疫增强剂，提高鱼体抵抗力。9.1.2 发现异常死亡鱼体，及时采样送水生动物疫病检测专业机构进行病原检测。9.1.3 立即停料或减料，以正常投喂量的 70 80为宜，避免过量投喂。9.1.4 采用聚维酮碘等温和的消毒剂进行水体消毒，防止细菌继发感染，忌用刺激性较强的药物。9.2 发病期 9.2.1 养殖场确诊发生病毒性疾病，应遵守“三停一开”的原则，即停投饲、停用药、停操作，多开增氧机。9.2.2 避免大量换水，减少引发鱼产生应激反应的活动。9.2.3 发病初期、中期不宜使用任何药物或调水剂等。9.2.4 当死亡率明显下降后，可少量投喂饲料并内服抗菌药物。避免使用刺激性大的杀虫剂、消毒剂和抗生素等药物。9.2.5 停止投喂。9.3 恢复期 当养殖场病情有所缓解，死亡率持续降低，应注意控制投饵率，投饵率不高于1，且不宜增料过快，应及时停止用药，当水温升至28 以上，无死鱼出现后，才可转入正常养殖生产。9.4 病死鱼处理 及时清理病死鱼，进行深埋或者焚烧等无害化处理，应符合SC/T 7015的要求。9.5 避免传染 发病池排水避免进入其它池塘，避免池塘工具交叉使用。对生产工具等存在被污染风险的器具设备进行彻底消毒，养殖尾水排放前应进行彻底消毒，且应符合SC/T 9101的要求。DB41/T 25852024 6 A 附录A （资料性）大口黑鲈弹状病毒检测引物 A.1 普通 RT-PCR 引物 MSRV-F：ATAAGGGTAGTTGAGAAGAAG；MSRV-R:CTTCTTGTTGCTCTTCTTAAA 该方法扩展目的片段大小372 bp。A.2 荧光 RT-PCR 引物 qMSRV-N F:GCCCACATCGCATCATTCAC；qMSRV-N R:GTGGCAGAGTAAGGGGACAC DB41/T 25852024 7