SN∕T 4675.32-2021 出口葡萄酒中氮稳定同位素比值测定方法(出入境检验检疫).pdf

I C S6 7. 1 6 0. 1 0C C SX6 2中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T4 6 7 5. 3 22 0 2 1 出口葡萄酒中氮稳定同位素比值测定方法M e t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f n i t r o g e n s t a b l e i s o t o p e r a t i o i n w i n e f o r e x p o r t2 0 2 1 - 1 1 - 2 2发布2 0 2 2 - 0 6 - 0 1实施中华人民共和国海关总署发 布中华人民共和国出入境检验检疫行 业 标 准出口葡萄酒中氮稳定同位素比值测定方法S N/T 4 6 7 5. 3 22 0 2 1*中国海关出版社有限公司出版发行北京市朝阳区东四环南路甲1号(1 0 0 0 2 3)编辑部: (0 1 0)6 5 1 9 4 2 4 2 - 7 5 3 1网址 www. c u s t o m s k b . c o m/b o o k中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本8 8 01 2 3 0 1/1 6 印张0. 5 字数1 4千字2 0 2 1年 月第一版 2 0 2 1年 月第一次印刷印数 1 *书号: 1 5 5 1 7 57 0 9 定价8. 0 0元前 言 本文件按照G B/T 1. 12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分: 标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。本文件是S N/T 4 6 7 5的第3 2部分。S N/T 4 6 7 5已经发布了以下部分: 第1部分: 出口葡萄酒中甘油的测定 酶法; 第2部分: 出口葡萄酒中2,3 -丁二醇的测定 气相色谱法; 第3部分: 出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定; 第4部分: 出口葡萄酒中乳酸的测定 酶法; 第5部分: 出口葡萄酒中有机酸的测定 离子色谱法; 第6部分: 出口葡萄酒中葡萄糖、 果糖和蔗糖的测定; 第7部分: 出口葡萄酒中乙醛的测定 气相色谱-质谱法; 第8部分: 出口葡萄酒中5 -羟甲基糠醛的测定 液相色谱法; 第9部分: 出口葡萄酒中二甘醇的测定 气相色谱-质谱法; 第1 0部分: 出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定 液相色谱-质谱/质谱法; 第1 1部分: 出口葡萄酒中7种花色苷的测定 超高效液相色谱法; 第1 2部分: 出口葡萄酒中溶菌酶的测定 液相色谱法; 第1 3部分: 出口葡萄酒中2,4,6 -三氯苯甲醚残留量的测定 气相色谱-质谱法; 第1 4部分: 出口葡萄酒中纳他霉素的测定 液相色谱-质谱/质谱法; 第1 5部分: 出口葡萄酒中水杨酸、 脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定 液相色谱法; 第1 6部分: 出口葡萄酒中富马酸的测定 液相色谱-质谱/质谱法; 第1 7部分: 出口葡萄酒中丁基锡含量的测定 气相色谱-质谱/质谱法; 第1 8部分: 出口葡萄酒中二硫代氨基甲酸酯残留量的测定 顶空气相色谱法; 第1 9部分: 出口葡萄酒中钠、 镁、 钾、 钙、 铬、 锰、 铁、 铜、 锌、 砷、 硒、 银、 镉、 铅的测定; 第2 0部分: 出口葡萄酒中稀土元素的测定 电感耦合等离子体质谱法; 第2 1部分: 出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定 离子色谱法; 第2 2部分: 出口葡萄酒中总二氧化硫的测定 比色法; 第2 3部分: 出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定 连续流动分析仪法; 第2 4部分: 出口葡萄酒福林肖卡指数的测定 分光光度计法; 第2 5部分: 出口葡萄酒颜色的测定 C I E 1 9 7 6(L*a *b*) 色空间法; 第2 6部分: 出口葡萄酒浊度的测定 散射光法; 第2 7部分: 出口葡萄酒碱性灰分的测定; 第2 8部分: 出口葡萄酒中细菌、 霉菌及酵母的计数; 第2 9部分: 出口葡萄酒中酒香酵母检验 实时荧光P C R法; 第3 0部分: 出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验 S Y B R G r e e n荧光P C R法; 第3 1部分: 出口葡萄酒中丙三醇碳稳定同位素比值的测定 液相色谱-稳定同位素比值质谱法; 第3 2部分: 出口葡萄酒中氮稳定同位素比值测定方法。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。S N/T4 6 7 5. 3 22 0 2 1本文件起草单位: 中华人民共和国深圳海关食品检验检疫技术中心、 中华人民共和国上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、 中国检验检疫科学研究院、 宁夏德龙国际葡萄酒庄有限公司。本文件主要起草人: 吴浩、 赵超敏、 赵旭、 谢丽琪、 靳保辉、 陈波、 岳振峰、 张锋、 陈德启。S N/T4 6 7 5. 3 22 0 2 1出口葡萄酒中氮稳定同位素比值测定方法1 范围本文件规定了葡萄酒中氮稳定同位素比值(1 5N/1 4N) 的测定方法。本文件适用于葡萄酒中氮稳定同位素比值的测定与确证。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中, 注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件; 不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于本文件。G B / T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 符号 下列符号适用于本文件。 N2- a i r 氮同位素的国际标准物质为N2- a i r( 大气中的氮气) , 由于大气中氮气量大, 且同位素比值稳定, 因此按照惯例, 自然存在的氮1 5含量以N2- a i r表示。 1 5N/1 4N 给定样品的氮1 5和氮1 4的比率。 1 5N 以千分率表示的氮稳定同位素比值。5 方法提要样品经干燥后, 在元素分析仪燃烧炉中充分燃烧后去除水分和杂质, 氮元素以氮气形式用稳定同位素质谱测定其1 4N1 4N和1 5N1 4N的相对比率, 通过国际标准N2- a i r计算1 5N的相对含量, 以1 5N表示。6 试剂和材料除非另有说明, 所用水为G B/T 6 6 8 2规定的一级水。6. 1 氮同位素标准品:I A E A - 6 0 0( 由国际原子能机构I A E A提供) ,1 5N=1 ; 或采用其他认可的氮稳定同位素标准物质。6. 2 锡杯( 直径高度) :4 mm6 mm 或5 mm8 mm。6. 3 蒸发皿( 直径) : 6 0 mm1 5 0 mm, 或者以小烧杯(5 0 mL) 代替。7 仪器和设备7. 1 元素分析仪: 元素分析仪需要具备氧化还原装置, 能够将锡杯包裹的样品通氧充分燃烧, 并且能在1S N/T4 6 7 5. 3 22 0 2 1线将燃烧生成的氮氧化物还原成N2; 同时具备气体分离装置, 能在线将N2与其他杂质气体分离开, 保证燃烧和分离过程中没有任何同位素分馏。7. 2 稳定同位素比率质谱仪: 同位素比质谱仪配备有连续流系统。稳定同位素质谱仪内部精度需小于 0. 0 5 , 配备两个以上接收杯。7. 3 冷冻干燥器: 设备冷阱温度不高于-5 0 , 极限真空度不高于1 5 P a。7. 4 干燥箱: 配有循环风机, 可在6 0 2 恒温。7. 5 天平: 感量0. 0 0 1 m g 和感量1 m g。 8 分析步骤 8. 1 样品处理葡萄酒样品经混匀后取约5 mL, 置于事先清洗干净的蒸发皿(6. 3) 中, 置入冷冻干燥器(7. 3) 或干燥箱(7. 4)6 0 温度下干燥。样品干燥至恒重, 将干燥后样品混合均匀, 取约3 m g放入锡杯(6. 2) 密封包裹, 备测。8. 2 测定条件8. 2. 1 元素分析-质谱参考条件8. 2. 1. 1 反应管:9 6 0 恒温。8. 2. 1. 2 柱温:6 0 恒温。8. 2. 1. 3 载气: 氦气, 纯度9 9. 9 9 9 %; 流速:1 1 0 mL/m i n。8. 2. 1. 4 参考气: 高纯氮气, 纯度9 9. 9 9 9 %, 压力0. 1 4 MP a。8. 2. 1. 5 氧气: 高纯氧气, 纯度9 9. 9 9 %, 流速1 7 5 mL/m i n。8. 2. 2 同位素质谱参考条件8. 2. 2. 1 离子源:2. 9 9 k V。8. 2. 2. 2 真空度:1. 41 0-5 P a。8. 2. 2. 3 H e气压:0. 4 MP a。8. 3 测定8. 3. 1 参考物质准备称取0. 2 m g 0. 1 m g I A E A - 6 0 0标准品, 用4 mm6 mm锡杯包裹严密备用, 此标准物质可作为质控样品。质控样品可以是国际标准物质, 也可以是与国际标准物质相近的参考物质。8. 3. 2 参考气较准参考气N2(8. 2. 1. 4) 采用国际标准物质对N2的稳定同位素比值进行较准后用于样品的氮稳定同位素比值分析。注: 参考气需要在更换参考气后, 第一次使用前较准, 宜每三个月重新校准一次。8. 3. 3 仪器稳定性检测确认元素分析仪(7. 1) 和同位素质谱仪(7. 2) 的工作环境、 气密性、 离子室真空度等指标均符合质谱运行要求。利用参考气进行质谱稳定性检测,1 0组参考气标准偏差应小于 0. 0 6 。2S N/T4 6 7 5. 3 22 0 2 18. 3. 4 样品分析通过比较待测样品与经N2- a i r校正的工作标准之间的差异计算样品的氮稳定同位素比值(1 5N) ,用表示。每个样品做3次重复, 结果取其平均值。同时每5个8个样品需要设置质控样。典型的样品质谱峰图参见附录图A. 1。标准品测定时稳定同位素比值发生较小的变化(0. 5) 时, 需根据工作标准和实际值予以校正。根据插入的质控样品值的变化, 可利用线性插值对结果进行漂移校正。9 质量控制样品分析前应先分析锡杯空白, 空锡杯的氮稳定同位素信号背景应低于5 0 mV。标准物质氮稳定同位素比值3次分析的平均值与其真实值的偏差应小于0. 5 。同一样品重复测定3次, 标准偏差应小于0. 5 。1 0 结果计算和表述葡萄酒中氮稳定同位素比值按照公式(1) 计算:1 5Ns a m p l e/r e f=(Rs a m p l e/Rr e f-1)1 0 0 0( 1 )式中:1 5Ns a m p l e/r e f 样品相对于参考物质的氮稳定同位素比值;Rs a m p l e 样品中1 5N/1 4N同位素比值;Rr e f 参考气体氮气的1 5N/1 4N同位素比值。1 5N值和N2- a i r的关系表示见公式(2) :1 5Ns a m p l e/N2- a i r=1 5Ns a m p l e/r e f+1 5Ns a m p l e/N2- a i r+(1 5Ns a m p l e/r e f1 5Nr e f/N2- a i r) /1 0 0 0( 2 )式中:1 5Ns a m p l e/N2- a i r 样品相对于N2 - a i r的氮稳定同位素比值;1 5Nr e f/N2- a i r 参考物质相对于N2 - a i r的氮稳定同位素比值。S N/T4 6 7 5. 3 22 0 2 1S N/T 4 6 7 5. 3 22 0 2 1附 录 A( 资料性)标准品质谱峰图 标准品质谱峰图见图A. 1。图A. 1 标准品的氮稳定同位素I RM S质谱峰图1202235764 T/NS版权专有 侵权必究*书号:1 5 5 1 7 57 0 9定价:8. 0 0元