第3章荧光分析法习题.doc

第3章　荧光分析法习题及解答
2．用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量时，取本品20片（每片含炔诺酮应为0.54～0.66mg，含炔雌醇应为31.5～38.5μg），研细溶于无水乙醇中，稀释至250mL，过滤，取滤液5mL，在激发波长285nm和发射波长307nm处测定荧光强度。如果炔雌醇对照品的乙醇溶液（1.4μg/mL）在同样测定条件下荧光强度为65，问：合格片的荧光强度读数应在什么范围之间？
【解】测定液中炔雌醇的浓度范围在

的对照品溶液的荧光计读数为65，由，得：
合格片的荧光计读数应在58.5～71.5之间。

3．谷物试样1.00g，用酸处理后分离出核黄素及少量无关杂质，加入少量KMnO4，将核黄素氧化，过量的KMnO4用H2O2除去。将此溶液移入50mL容量瓶并稀释至刻度摇匀。吸取25.00mL放入样品池中以测定荧光强度。事先将荧光计用硫酸奎宁调整至刻度100处。测得氧化液的读数为6格。加入少量连二亚硫酸钠（Na2S2O4），使氧化态核黄素（无荧光）重新转化为核黄素，这时荧光计读数为55格。在另一样品池中重新加入24mL被氧化的核黄素溶液，以及1mL核黄素标准溶液（0.50μg/mL），这一溶液的读数为92格，计算试样中核黄素的含量（μg/g）。
【解】方法一：
25mL氧化液的荧光读数为6.0格，相当于空白背景；
25mL测定液的荧光读数为55格，其中核黄素的荧光为55－6＝49格；
24mL氧化液＋1mL核黄素标准溶液的荧光读数为92格，
其中核黄素标准溶液（0.5g/mL）的荧光为96－6＝86格；
则25mL测定液中含核黄素：。
方法二：依据公式计算：
25mL测定液中含核黄素：
那么：1g谷物（50mL）中核黄素的含量为：

备注：被测几个化合物的结构式
化合物名称
炔诺酮
炔雌醇
英文名称
norethindrone；
17alpha-ethynyl-19-nortestosterone。
ethynylestradiol；17alpha-ethynyl-
1,3,5(10)-estratriene-3,17beta-diol
结构式

化合物名称
核黄素/维生素B2

英文名称
riboflavin；Vitamin B2；lactoflavin。

结构式