硝化细菌培养基配方及检测方法.doc

硝化细菌培养基配方及检测方法

一、培养基
1、蛋白胨：1% 酵母膏：0.5% 氯化钠：1% 琼脂：2%
蒸馏水：100ml PH：7.2-7.5
2、土豆：20% 蛋白胨：0.5% 白糖：1% 葡萄糖：1%
混合无机盐：1% 琼脂：2% 自来水：100ml PH：7.0
3、蛋白胨：1% 牛肉膏：0.3% 氯化钠：0.5% 琼脂：2%
蒸馏水：100ml PH：7.0
二、测定步骤
1、样品稀释
从样品中准确称10.0g，加入90ml带玻璃珠数粒的无菌水三角瓶中，30℃水浴锅内，浸泡30-40分钟，拿出后反正摇各60次，即成10-1稀释液，立等用1ml无菌吸管吸中下层菌液1ml，移入装有9ml无菌水试管中，充分吹匀（约吹20余次），即成10-2稀释液，以此类推，连续稀释到10-6稀释液。10-7试管内装8ml无菌蒸馏水，从10-6稀释液中吸取2ml菌液加入到装有10-7稀释液试管中，再用1ml移液管吹动20余次，取0.5ml菌液放入准备好的（装有培养基）培养皿内，用玻璃刮刀慢慢将菌液抹平（样品适宜的每个培养基做3个培养皿）。
2、培养
将培养皿倒放在35℃的培养箱内培养，从10小时开始计数，每隔1小时计数1次菌落，并用记号笔标注，防止菌落连成片无法数清，培养到48小时，培养结束（每个菌落的单位都是亿个/克）。
3、计算
累计每次三个平皿内菌落的平均数，相加就是这个样本的活菌含量，单位是亿个/克。

混合无机盐配方

硫酸铵：77% 磷酸二氢钾：15% 硫酸镁：8%