接种操作手册.doc

荷仙菇接种操作规范（草稿）
一、 灭菌
打开接种箱门，把酒精灯、打火机、接种勺、镊子、小瓷盘、消毒剂、灭菌好的菌袋、菌种放入接种箱，整理袖套，接种箱以内的部分套上一个橡皮筋，左手袖套外部用橡皮筋扎紧，关闭接种箱门，用胶带把门封严，然后把手从右边袖套内伸入，用打火机把小盘中的克霉灵点燃（每只接种箱每次用1袋），迅速关闭箱门，熏蒸30分钟。
注意：a.盛放克霉灵的小盘要离酒精灯和菌袋有一定距离。b.把菌袋放入接种箱时要检查菌袋是否有破损，破损即报废；环盖的海绵是否缺失，缺失即作废，把报废的菌袋放到指定位置，并做好记录。
二、 接种
1. 在更衣室换上工作服，带好帽子和口罩，用肥皂洗手1分钟，在干手器下吹干，准备接种。
2. 把手伸入接种箱袖套中，用75%酒精棉球洗手，把棉球放在小盘中，稍待片刻待酒精挥发完。
注意：接种室内不宜大声讲话，用酒精消毒后，在操作完成之前不能将手伸出接种箱，不能接听手机；若有事必须离开接种箱，必须将酒精灯熄灭，必须把袖套封紧。回来时必须重新进行第1、2步后才能继续操作。
3. 取下酒精灯灯帽，正立放到台面上，用打火机点燃酒精灯，右手持接种勺放在酒精中，然后在火焰上来回灼烧勺端及勺柄30秒，并待其冷却，打开菌种瓶的封膜，左手食指和拇指握住菌袋套环，右手小拇指轻轻旋开套环环盖，将菌种挑起一勺迅速放入待接菌袋的接种孔内，旋转勺柄使菌块落下，抽出接种勺，盖上环盖。再次灼烧接种勺，放在接种架上。把接好的菌袋放在另一边，如此反复接种，直至把接种箱内菌袋全部接完。
注意：a.操作过程要迅速，并且要在酒精灯火焰旁进行操作，同时要注意不要将菌袋离火焰太近，以防被烧化。b.接种时接种勺不能接触除菌种外的其他物体，如果接触到要重新灼烧后才能使用。c.左手握住菌袋时，不能将菌袋直立起来。d.接种时手指任何时候不能接触到套环及套环盖内侧。e.菌袋接种好后摆放时要注意不能滚落。
4. 待全部接种完毕后，用酒精灯灯帽盖灭酒精灯，用记号笔在菌袋中部写明菌种名称，接种日期，接种人姓名。
注意：记号笔用完后必须盖紧笔帽。
5. 本次接种完毕后，将菌袋从接种箱内取出，放入周转箱中，转移到培养室中进行培养。
6. 操作时，注意安全。如棉塞或菌袋着火，用手紧握或放在桌面上按灭即可，接种完成后收拾到废物桶内。每次的污染物应小心放在盘内，拿出室外丢弃。
三、 接种完毕后
1. 清理接种箱，将接种勺放到接种架上，检查酒精灯内的酒精剩余量，不足总容量2/3的要补充酒精。
2. 擦拭接种箱玻璃，打扫接种室卫生，填写当天的接种记录，把工作服，帽子，口罩放到指定位置后方可离开接种室。
酒精灯时必须注意：
　　①绝对禁止向燃着的酒精灯里添加酒精，以免失火。
　　②绝对禁止用酒精灯引燃另一只酒精灯。
　　③用完酒精灯后必须用灯帽盖灭，不可用嘴吹灭。
　　④酒精洒在桌子上燃烧起来后，应立刻用湿抹布扑盖。