三七总皂苷联合沙棘多糖对小鼠降血脂和保肝作用的研究.pdf

第 36 卷第 3 期2023 年 6 月华 夏 医 学Acta Medicinae SinicaVol.36 No.3Jun.2023DOI:10.19296/ki.1008-2409.2023-03-007论 著ORIGINAL ARTICLE三七总皂苷联合沙棘多糖对小鼠降血脂和保肝作用的研究伍昊文,李嘉诚,李毅臻,余 敏,刘 意,胡小建(长沙医学院,湖南 长沙 410000)摘要 目的:分析三七总皂苷联合沙棘多糖对小鼠血脂和保肝作用的影响。方法:将高脂血症模型小鼠分为三七总皂苷组、沙棘多糖组、联合用药组、辛伐他汀对照组和模型对照组。给药 4 周后,采眼球血测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量。结果:联合用药组 TC、TG 和LDL 低于模型对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05);联合用药组的 HDL 高于三七总皂苷组和沙棘多糖组(P0.05);联合用药组的 AST 和 ALT 水平均显著低于模型对照组(P0.05);联合用药组的 AST 水平显著低于三七总皂苷组(P0.05);联合用药组的 AST 和 ALT 水平均显著低于沙棘多糖组(P0.05)。结论:三七总皂苷联合沙棘多糖保肝作用优于单用三七总皂苷或沙棘多糖。关键词:三七总皂苷;沙棘多糖;高脂血症;保肝中图分类号:R965 文献标志码:A 文章编号:1008-2409(2023)03-0037-04Study of panax notoginseng saponins combined with seabuckthornpolysaccharide on blood lipid and hepatoprotective effect in miceWU Haowen,LI Jiacheng,LI Yizhen,YU Min,LIU Yi,HU Xiaojian(Changsha Medical University,Changsha 410000,China)Abstract Objective:To investigate the effect of panax notoginseng saponins combined with seabuckthornpolysaccharide on blood lipid and hepatoprotective effect in mice.Methods:Hyperlipidemia mice modelsestablished were randomized into the Panax notoginseng saponins group,seabuckthorn polysaccharidegroup,combined drug administration group,simvastatin control group and model control group.After 4weeks of administration,eye blood of all groups was collected to measure the levels of serum cholesterol(TC),triglyceride(TG),low-density lipoprotein cholesterol(LDL),high-density lipoprotein cholesterol(HDL),aspartate aminotransferase(AST)and alanine aminotransferase(ALT).Results:TC,TG andLDL levels in the combined drug administration group were significantly lower than those in the modelcontrol group,which were of statistical differences(P0.05).HDL level in the combined drug73基金项目:长沙医学院大学生创新创业项目(长医教202147 号-139)。第一作者简介:伍昊文,本科生在读,研究方向为中药提取物的功用及量效关系。通信作者:胡小建,E-mail:32897069 。第 3 期华 夏 医 学第 36 卷administration group was higher than that of the panax notoginseng saponins group and seabuckthornpolysaccharide group(P 0.05).AST and ALT level in combined drug administration group weresignificantly lower than that of the model control group(P 0.05).AST level of the combined drugadministration group was lower than that of Panax notoginseng saponins group(P0.05).and AST andALT level in combined drug administration group were significantly lower than that seabuckthornpolysaccharide group(P0.05).Conclusion:The hepatoprotective effect of the combined use of panaxnotoginseng saponins with seabuckthorn polysaccharide is superior the use of panax notoginseng saponins orSBP alone.Keywords:panax notoginseng saponins;seabuckthorn polysaccharide;hyperlipidemias;hepatoprotective 随着生活水平的提高和生活方式的转变,高脂血症已然成为中老年人群中的常见病和高发病,并且在青壮年人群中的发生率也呈上升的趋势,而血脂病理性增高又常会诱发心脑血管系统疾病,如高血压、冠心病和脑卒中1。三七在我国有着悠久的药用历史,三七总皂苷是三七的主要有效成分之一。既往的研究2显示,三七总皂苷可以调节脂质代谢,降低血清脂类物质的含量,抑制非酒精性脂肪肝的形成和进展并减少心血管系统的并发症3-4。沙棘含有丰富的黄酮、多糖、维生素、氨基酸和 Cu、Zn、Fe、Mn 等微量元素及营养成分5,并且在我国分布广泛,产量可观,有着广阔的市场前景6。沙棘多糖又名鼠李糖,是由葡萄糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖和甘露糖等成分组成的中性多糖,可以降低血脂水平,减轻高脂血对心血管系统的损害7。此次研究采取三七总皂苷与沙棘多糖联合用药及单独用药的方式,分别探究其对血脂代谢的影响及各组之间保肝作用的差异,以期为临床用药提供参考。1 材料与方法1.1 实验动物从长沙市天勤生物技术有限公司购买 48 只 KM小鼠(雌雄比例=1 1,单重 1822 g),许可证号:SCXK(湘),2019-0014,6 周龄,清洁级,高脂型饲料(购自江苏协同医药生物工程有限公司,证书号:QC20220500098601),维持型饲料(购自江苏协同医药生物工程有限公司,证书号:QC20220500071701)。本研究经本院医学伦理委员会审核批准(伦理审批号:2022044)。1.2 实验材料三七总皂苷(购自西安云奇生物科技有限公司,纯度为 80%,产品批号:20220128),沙棘多糖(购自西安米先尔生物科技有限公司,纯度为 60%,产品批号:20220128),辛伐他汀(购自浙江京新药业股份有限公司,产品批号:A21122805),血脂分析仪(购自桂林优利特医疗电子有限公司,生产许可证编号:桂食药监生产许 20130017 号,桂械注准:20202220019,产品批号:22010296M),血脂测试条(购自桂林优利特医疗电子有限公司,桂械注准:20212400093,产品批号:22020262M3)、AST 检测试剂盒(Sigma 公司,产品编号:MAK055),ALT 检测试剂盒(Sigma 公司,产品编号:MAK052)。1.3 实验方法1.3.1 实验动物造模先将所有 48 只实验小鼠用维持饲料适应性喂养 1 周,随机选取其中 8 只作为空白对照组,其余 40 只以高脂饲料喂养进行高脂血症造模,4 周后断尾取血,检测血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL),当其血脂含量高于正常小鼠对照组 20%时,视为造模成功,将造模成功的小鼠随机分为 5 组:三七总皂苷组、沙棘多糖组、辛伐他汀组、联合用药组和模型对照组。1.3.2 实验动物给药 随机分组后,三七总皂苷组每100 g 小鼠给予三七总皂苷20 mg;沙棘多糖组每100 g小鼠给予沙棘多糖 10 mg;联合用药组每 100 g 小鼠给予三七总皂苷 20 mg 和沙棘多糖 10 mg;辛伐他汀组每 100 g 小鼠给予辛伐他汀 4 mg。各实验组的试剂均用 40 左右的蒸馏水溶解,当日现配现用,配制完成后剂量为 1 ml/100 g。高脂血症模型对照组83第 3 期伍昊文等:三七总皂苷联合沙棘多糖对小鼠降血脂和保肝作用的研究第 36 卷与空白对照组则给予蒸馏水 1 ml/100 g,各组灌胃给药,1 次/d。1.3.3 指标检测连续给药 4 周,将小鼠以乙醚麻醉后眼球取血,以 3000 r/min 的速度离心处理后取上层血清,先按照血脂分析仪和血脂测试条的使用方法对小鼠 TC、LDL、HDL 和 TG 的含量进行检测,再按照 AST 和 ALT 试剂盒的使用方法用紫外分光光度计测量 AST 和 ALT 的含量。1.4 统计学方法采用 SPSS 26.0 统计学软件分析数据,计量资料以(xs)表示,采用单因素方差分析检验。P0.05为差异具有统计学意义。2 结果2.1 血脂检测结果给药 4 周之后,联合用药组的 TC、TG 和 LDL 均显著低于模型对照组(P0.05),提示三七总皂苷与沙棘多糖联合用药确实能够降低高脂血模型小鼠的血脂水平;联合用药组的 HDL 高于三七总皂苷组和沙棘多糖组(P0.05),提示联合用药的降血脂效果不优于单独给予三七总皂苷或沙棘多糖,见表 1。表 1 各组血脂检测结果比较(xs,mmol/L)组别nTCHDLTGLDL三七总皂苷组83.370.64 2.170.432.170.251.660.30沙棘多糖组83.490.86 2.020.462.140.631.800.27联合用药组83.880.492.910.352.630.661.610.41辛伐他汀组83.450.73 2.030.712.710.521.760.45模型对照组8 4.840.502.980.37 3.340.683.060.55正常对照组8 1.980.441.470.542.400.62 1.090.25 与联合用药组比较,P0.052.2 AST、ALT 检测结果AST 和 ALT 是检测肝功能的最常用指标,给药4 周后,联合用药组小鼠的 AST 和 ALT 水平均显著低于模型对照组(P0.05);联合用药组的 AST 水平显著低于三七总皂苷组(P0.05);联合用药组的 AST 和ALT 水平均显著低于沙棘多糖组(P0.05),提示联合用药的保肝效果优于单独给予三七总皂苷或沙棘多糖,见表 2。表 2 各组 AST、ALT 检测结果比较(xs,U/L)组别nASTALT三七总皂苷组8182.2327.4194.6512.57沙棘多糖组8195.7122.36138.5516.32联合用药组8132.1731.8586.2810.69辛伐他汀组8189.9443.28122.4925.80模型对照组8265.7958.47154.8333.52正常对照组8126.6118.3973.1211.97 与联合用药组比较,P0.053 讨论近年来,中药提取物在慢性病治疗方面越来越受到关注。相关研究表明,三七总皂苷不仅具有降血脂、预防动脉粥样硬化8、保肝9等作用,还可以抗炎、抗氧化,改善心肌组织缺血-再灌注损伤10,并通过多种途径发挥抗肿瘤作用11。沙棘多糖可以改善大鼠高脂血,提高糖耐量12,清除自由基,抗脂质过氧化13,抗运动性疲劳,抗氧化14,抗衰老15等作用。将三七总皂苷与沙棘多糖进行联合用药,选择KM 小鼠作为实验动物,在建立高脂血症小鼠模型时,参考吴志焕等16方法,通过高脂饲料喂养法建立高脂血症小鼠模型,KM 小鼠高脂血症模型与人类的高脂血症有诸多相似之处。高脂血作为“三高”之一,对中老年人群的健康造成了不小的损害。中医认为高脂血症的相关症状为“肝失疏泄,脾失健运”的结果,血脂长期处于升高状态会促进机体自由基生成,进而造成体内脂质过氧化物积存,诱发动脉粥样硬化,增加脑卒中的风险17。在我国人口老龄化93第 3 期华 夏 医 学第 36 卷的背景之下,高脂血症防治的相关研究就显得很有必要。对于肝功能的检测,本研究以 AST 和 ALT 作为参考指标,这是由于 AST 和 ALT 在肝脏中的含量很高,少量的肝细胞变性坏死即可使血清中的 AST 和ALT 水平显著升高,可以很好地提示肝脏的损伤程度。本研究结果表明,联合用药组的 AST 和 ALT 水平均显著低于模型对照组;与单独给予三七总皂苷相比,联合用药时小鼠的 AST 水平显著降低,ALT 水平虽有降低但效果并不十分理想;与单独给予沙棘多糖相比,联合用药组小鼠的 AST 和 ALT 水平均显著降低。以上结果提示,相较于单独给予三七总皂苷或沙棘多糖,联合用药的保肝作用显著增强。同时,联合用药组的 TC、TG 和 LDL 均显著低于模型对照组,提示三七总皂苷与沙棘多糖联合用药确实能够降低高脂血模型小鼠的血脂水平。但是与单独给予三七总皂苷或沙棘多糖相比,除 HDL 显著升高外,TC、TG 和 LDL 之间的差异不明显,提示虽然联合用药对心血管系统的保护作用有所增强,但联合用药的降脂作用不优于单独用药。参考文献:1 李梅娟.自拟降脂清浊饮治疗高血脂症的有效性探讨J.饮食保健,2021(49):145-147.2 吴江立,安然,常宏.三七总皂苷对高血脂金黄地鼠脏器的影响J.河北中医药学报,2020,35(2):9-11.3 梁晓莲,刘纤纤,李文莉,等.三七总皂苷药理作用及临床应用研究进展J.湖北农业科学,2021,60(6):15-19.4 刘小玲,谢学军.三七总皂苷临床应用研究进展J.中医眼耳鼻喉杂志,2015,5(2):117-119.5 SABIR S M,MAQSOOD H,HAYAT I,et al.Elementaland nutritional analysis of sea buckthorn(Hippophae rham-noides ssp.turkestanica)Berries of Pakistani originJ.JMed Food,2005,8(4):518-522.6 隋明,朱克永,谢慧蓉,等.谈甘孜州地区沙棘多糖的应用及前景J.广东蚕业,2019,53(10):20-21.7 王瑞琴,杨晓光,许文婷,等.沙棘多糖的研究进展J.食品研究与开发,2017,38(13):221-224.8 吴江立,安胜军,常宏.三七总皂苷对金黄地鼠 PCSK9-LDLR 表达及血脂水平的影响J.中国病理生理杂志,2020,36(1):140-145.9 刘辰,郑惠珍.三七总皂苷的研究进展J.中国医药指南,2012,10(16):71-74.10 张剑峰,张丹参.三七总皂苷药理作用研究进展J.医学综述,2007,13(6):472-474.11 公为亮,庄海涛.三七总皂苷抗肿瘤作用的研究进展J.药学研究,2022,41(3):183-186.12 黄晓青,瞿伟菁,张晓玲.沙棘多糖对小鼠实验性高脂血症的影响J.营养学报,2004,26(3):232-234.13 任薇,包晓玮,张志芳,等.沙棘多糖清除自由基及抗脂质过氧化作用研究J.食品工业科技,2019,40(8):272-277.14 刘雅娜,包晓玮,王娟,等.沙棘多糖抗运动性疲劳及抗氧化作用的研究J.食品工业科技,2021,42(10):321-326.15 包晓玮,李建瑛,任薇,等.沙棘多糖对 D 半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用J.食品工业科技,2020,41(4):293-297,306.16 吴志焕,曹丹丹,周瑾.昆明小鼠高血脂症模型的建立J.唐山师范学院学报,2021,43(6):37-40.17 马俊萍,张娟.高血脂症的中西医结合治疗进展J.内蒙古中医药,2021,40(2):167-168.收稿日期:2022-12-26责任编辑:杨建香 英文编辑:阳雨君04