实验3鸡卵中蛋白质的分离纯化及分析鉴定.doc

其实粗提取主要大概分为两种，一个是调ph，一个是用硫酸铵的那个，成本和大量工业制备的问题。

实验3　鸡卵中蛋白质的分离纯化及分析鉴定

一、实验目的：
综合性设计性实验是根据实验室条件给定学生实验题目，实验要求学生自主设计和完成实验内容，即由学生自主设计一个实验流程，并通过实验操作去实现。以提高了学生的动手能力、分析问题和解决问题的能力。
通过综合性设计性实验――细胞破碎、分离纯化、定性定量、分析鉴定等，让学生完整地理解并掌握蛋白质研究的相关技术。
首先给出一个蛋白纯化问题，学生通过文献查阅、实验设计、实验操作，将众多生化实验技术联系在一起去解决问题，从而达到深刻理解理论知识、切实提高实验技能、并在过程中增强学习兴趣的目的。
二、实验安排和考核办法：
（1）文献查阅、实验设计、实验论证20%
（2）实验过程及实验结果50%
（3）实验总结、讨论及报告30%
三、设计性实验实施指南：
1、给出题目：
鸡卵中蛋白质的分离纯化及分析鉴定,如卵白蛋白、卵粘蛋白、卵转铁蛋白及卵溶菌酶，或其它你感兴趣的蛋白，任选其一或二
目标：培养学习兴趣，提出问题
2、查文献、实验设计、讨论及论证：
学生按照兴趣去查阅文献资料（每个人不少于三篇）、确定纯化的目标分子、小组论证并设计实验（阐明选择技术路线的理由和对此技术路线的理解），老师参与论证并督促他们查阅文献和思考――“用头脑进行实验”。
目标：培养查阅文献资料的能力和获取知识的能力，通过查文献和论证，让学生理解并掌握相关的基础知识。
学生需要了解的知识点：
目标蛋白质的组成、活性中心和构象、物理化学性质；蛋白质含量、纯度、活性测定方法等。
3、 确定实验方案，进行实验准备（一周内完成）
与指导老师讨论并确定实验方案，准备实验仪器、试剂及材料等。
实验方案包括：
1）实验的依据（文献综述）500字（附参考文献）
2）实验的内容：实验所需试剂及仪器清单、具体的实验方案、技术路线图、（注：贵重试剂要提前申请）
3）创新及特色之处
4）时间安排
4、实验操作：（一周内完成）
各个组灵活安排时间，不限定具体时间、滚动实验；
在实验操作过程中，不断修正实验路线和方法；像研究生一样进行实验。
目标：培养学生解决实际问题的能力，并通过此过程学习相关理论，并将理论用于实践。
学生需要了解的知识点：
材料选择的基本原则及处理、细胞的破碎、初分离方法、纯化方法、浓缩除盐冻干结晶、分析鉴定等方法。
5、 总结讨论：
不限定学生的具体的分离纯化、鉴定等方法、只给出候选的参考技术，使学生在实验过程中、及实验结束后的讨论过程中通过相互的交流和讨论能对相关技术一并了解。