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美国《实验动物管理和使用指南》内容摘要

美国《实验动物管理和使用指南》主要内容摘要
1．第一章，机构的政策及职责——指导动物管理和应用
(1)公共机构动物管理及使用委员会：机构行政管理部门需要任命IACUC，其职责是监 督评价该单位动物的管理方法、标准操作规程、设施环境，审查及评价动物管理及使用指南执 行情况；IACUC的功能包括检查硬件设施、评价方法及动物活动区，审查实验方案的动物使用 申请。IACUC成员应该包括：①一位合格的兽医师，对实验动物学及医学具有经验或受过培训， 或具有该种动物使用经验的专业人员；②至少一位参与动物实验的研究人员；③至少一位民意 代表，提供民众对正确与合理管理和使用动物的看法，该成员不是实验动物使用者，不能与机 构或机构内各成员有直接联系。IACUC至少每6个月开一次会，报告由IACUC多数委员签字 后才能生效，保存会议记录及审议结果。
(2)动物管理和使用方案：应该包括：①动物研究的目的；②应用动物种类及数目的理由：③对实验方法的探讨，是否可以应用替代方法；④实验技术操作人员是否受过相关培训及具有 经验；⑤是否需要特殊饲养方式及管理要求；⑥镇静、止痛及麻醉程序；⑦进行多次重大外科 手术程序；⑧制订确定实验终点的规范或程序；⑨实验后的管理；⑩动物安乐死方法及动物丢 弃方法；○11职员工作环境的安全性。
(3)保定指使用手或应用械器对动物活动进行部分或完全限制，以便进行检查、采样、投 药、治疗或进行实验操作等。以下是应用保定装置的一些原则：①不能将动物保定看成正常饲 养方式；②不能随意使用保定工具；③在完成实验目的的前提下，尽量缩短固定时间；④使用 保定装置前，应先训练动物去适应该设备及操作人员；⑤委员会应该根据情况来决定是否要对 保定动物进行定期观察；⑥在保定期间，当观察到有受伤害或不适情况时，应该提供给兽医护 理。
(4)多次重大手术程序：重大手术指侵入或暴露体腔的操作；或手术过程会导致物理或生 理性机能丧失，不提倡在同一只动物个体上进行多次重大手术，如果有必要，阐述其科学依据， 并需要经IACUC同意批准。
(5)饲料／饮水的限制：如果在实验过程中需要对食物或饮水作限制时，必须提供少量或 微量食物饮水以维持幼小动物发育、维持动物长期的健康。通常饮食限制应该以自由喂食每日 摄取量百分比量或体重变化百分比多少为标准来计算。当对动物饮水做限制时，避免紧急或慢 性脱水情形发生。
(6)兽医学管理：机构应该有兽医管理措施，监测和评价实验动物健康状况，指导镇静剂、止痛或麻醉药品的应用。根据动物实验管理和使用计划的目的及动物数量等，决定需要专职兽医、兼职兽医师或仅需要兽医顾问。
(7)职员资格及培训：职员资格及数量由下列因素决定：机构性质及规模、动物管理组织机构、建筑设备的特征、饲养动物种类及数目、研究、试验及教学活动的性质。职员必须接受适当培训，机构也应该提供正规信息课程或在职培训机会，根据研究性质和项目不同，参与项目人员也要参加不同领域的培训，包括饲养管理、实验动物学及病理、职业卫生及安全、行为管理、遗传管理及其他相关支持技术。技术人员培训方式可有多种选择，大学兽医技术方面选修课程，美国实验动物学会(AALAS)认定的实验动物专业技术员资格，阅读出版教材，参加 专业会议等；动物麻醉、手术及实验操作需要培训或工作经验，取得资格。
(8)职业卫生与人员安全：该部分重点内容是保持安全与卫生的工作环境。需要根据设施、研究性质、危险物品及动物种类而确定管理办法。
(9)危险物品标识及危险性评价：接触危险性物质(含生物性、化学性或物理性的危险物质，其中物理性又含离子化或非离子化辐射线物质)的研究人员，必须具有特定资格，并具有能力评价和判断相关危险，以及能够针对危险种类采用适当的保护装备。建立一套职业卫生与安全措施，确保降低动物实验的危险程度；在使用动物过程中，可能产生的危害如动物咬伤、化学性清洁剂、过敏原及人畜共传的疾病等，也应该加以明确指出及评估。
(10)人员培训应该提供给从事具有危害性作业人员一套明确的操作程序，应该明确告知可能接触到的危害物质的情况，使其能够熟练使用必要的安全防护装备。针对下列情况进行培训，人畜共患传染性疾病、化学物质的安全、微生物及物理性危害(包含放射性物质及过敏原)，与实验程序相关的特殊情况及物品(例如应用转基因动物或在免疫缺陷动物中使用人体组织等)、废弃物处理、个人卫生及其他与危害工作场所有关情况，如人员处于怀孕、疾病或抵抗力较弱的情况下，则要特别考虑其工作环境及条件。
(11)个人卫生：强调职员保持个人清洁卫生，例如在动物房工作，应该穿工作服、戴手套、口罩、外袍、连身工作服及鞋套等，常洗手及更换衣物，禁止在动物房内进食、饮水、抽烟及使用化妆品等。
(12)设施及操作规程的监控：在卫生及安全防护措施中，提供给职员清洗及淋浴设备及操作处理程序；有安全防护设备时，需要定期加以维修校正。动物房选择需要根据专业知识、危害物品种类、动物种类、实验设计、便于处理动物排泄物及污染物等因素而定。
(13)动物实验的危险性物质处置：在选择特殊防护设备进行危险物动物实验时，应该特别考虑动物管理及饲养的操作程序、试剂储藏及领取程序、剂量配制及给予方式、体液及组织处置、废弃物及动物尸体处理、职员保护措施。只有由受过培训的合格人员，并且严格按照安全的操作程序工作，才能确保工作安全。机构对具有危险性实验(生物性、化学性或物理性)应该有明文规定的管制措施。
(14)个人防护：穿保护服，如衣服、鞋子、鞋套及手套，在离开工作区时均应淋浴；对具有潜在危险性工作区职员，针对危险物品种类、性质、提供保护措施，例如在灵长类动物区工作人员、供应手套、手臂保护装备、面罩、脸部保护镜片等，而在高噪音工作区，提供听觉保护设备耳塞。在空气传染性污染工作区，提供适当呼吸系统保护装备。
(15)职员医疗评价及预防医学：要求从事动物试验工作之前，提供健康检查报告，具有危险性作业人员进行定期健康检查，适当的预防接种，动物管理人员接受破伤风注射。针对有机会感染传染性疾病的职员，如狂犬病及B型肝炎职员的疫苗接种；对于人畜共传疾病的监控是职业健康计划中重要项目之一，当可能或已知暴露感染物或遭遇危害健康及危及生命时，立即向主管报告，针对意外事件发生如动物咬伤、抓伤及过敏反应等，机构应该建立处理程序。
2．第二章，动物饲养的房舍环境及管理
(1)硬件环境：①微环境与大环境。微环境是指动物饲养中直接接触的周边硬件环境设施，即主要围栏，它有特定环境温度、湿度、特有空气中气体及微粒成分：次要围栏的硬件环境，例如动物房等，则定义为大环境。②饲养笼舍。a．主要围栏，通常指饲育盒、栏舍，要求的条件有：满足动物正常生理及行为活动需求，允许同种动物间进行社会行为(群体)及建立位序，保持动物干爽，通风良好，可让动物自由地获取饮水及食物，而且易于补充、更换操作、清洗，提供坚固安全的环境，使动物不易逃脱，无尖锐边缘或突出物，造成动物伤害，允许进行动物观察而不干扰动物。b．自然环境。c．需求空间，最低限度，给予的空间应该足够使动物能够自由转身，变换姿势，很容易地摄食饮水，及足够的干净区域作为休息场所，且不受到干扰。d．温度及湿度，将体温调节维持在适当的变异范围，如果将动物移至高温(>29．4℃，)或过低温 (冷)(<4．4℃=的环境，该动物往往会产生临床体征，甚至致死，动物对相对湿度的要求不太严谨，可接受范围在30％～70％。e．换气，换气目的是提供足量的氧气；移除由动物呼吸、光源、机器设备产生的热源；稀释室内气体性及微粒性污染物质；调节室内空气中湿度；在某些情况下，用以产生不同区域之间的静压压差；被认可的换气次数是每小时10～15次。f．照明及光源直接影响不同动物的生理、体态及行为，光对动物的影响因素包括：光强度、光照时间、波长、动物的光敏史、动物眼内有无色素、24h内光照周期、体温、内分泌激素状态、年龄、种类、性别及品种；对有视网膜病变的动物，建议光照强度在饲育盒的高度，在130～325lx。
h．噪音：噪音对动物的危害受以下因素影响：噪音强度、频率、发生速度、持续时间、共振、音频、不同品种动物对噪音的敏感性等，动物暴露在85分贝以上噪音环境时，同时会对听觉及非听觉系统产生影响，包含红血球减少、肾上腺增重、降低受孕率等，而非人灵长类出现血压上升等。
(2)行为与环境：①结构与环境，主要围栏的构成包括饲养盒内配件、环境充实物、动物玩具、供粮设施、筑巢材料、盒内的复杂物品等。②社会环境，适度的社交行为有助于正常发育及成长，在选择社交环境时，应该首先考虑动物是否有领域性或群居性，以决定将动物独居、配对或群居饲养。③活动能力，一般是指肌肉神经的活动力，但是，也包括动物的认知及社交活动。④饲料，确定饲料质量、没有化学药剂或微生物的污染、原料不含天然毒物、具有高利 用率的营养成分及好的口感，制造商提供主要营养成分分析报告及没有污染存在的监测报告， 饲料购买、运输、储存及处理过程中，以避免如疾病、寄生虫、病媒介或化学物质污染；使用 者应该知道制造日期、储存期限，以及腐败、运送储存不当可以造成饲料营养成分丧失。应该 清点登记每批购进的饲料量，经常调整存放位置，遵循先购进饲料先使用的原则。饲料或饲料 原料存放、处理区域应保持干净，且密闭免害虫进入，饲料包装开启后，未使用完毕饲料并放 于防害虫侵入的容器内避免污染。在高温(2l℃)高湿、污秽环境、光照、氧气、昆虫及其他 害虫，均会加速饲料变质败坏。饲料盒的设计及放置位置应该方便动物进食及避免粪、尿的污 染。⑤饮用水，适合饮用且没有污染的水质，水质监测项目应该包括pH、硬度、微生物及化学 物质污染；应该每日检查供水设备如吸水管、自动给水器、给水瓶，确定其正常运转。⑥垫料， 兽医或机构管理者应该与研究人员讨论，选择最适用垫料材质。⑦卫生管理，内容包括笼具垫 料更换、处理及消毒等工作，清理指扫除过量尘土及屑片，消毒是指减少或去除微生物。消毒 方式及频率根据下列因素确定：a．区域、种类、物理特性及大小；b．盒中动物数量、大小、 年龄及繁殖状态；c．使用垫料及其种类；d．温度及相对湿度；e．造成肮脏而需要消毒的原因： f．动物正常的生理及行为特征；g．盒内污染程度及速率。⑧垫料更换，污秽垫料应该随即更 换，以确保动物干爽，垫料更换频度由动物数量、动物大小、容器大小、排尿量、垫料外观及 潮湿程度决定。⑨主要围栏的清理及消毒，对于饲育盒、笼架及相关配件，如饲料盒及给水设 备等的清洁、消毒频率，由饲育盒种类、饲养管理措施包括更换垫料、悬挂式冲洗粪盘等决定； 在一般情况下，主要饲育器及其配件，如盖子，至少每两周清洗一次，而对实底盒子，水瓶及 吸水管，则每周至少要清洗两次；主要围栏消毒方式可采用化学药剂或热水或两者兼用。⑩次 要围栏的清理消毒，包括动物房及辅助区域，例如储藏区、笼舍清洗设备、走道及操作室等， 应该经常清理和消毒。○11清洁效率评价，监测清洁操作应该根据过程及清除物性质而定，包括 巡回观察、水温监控、微生物监测等。○12废弃物的丢弃，一般生物性或有危害性的废弃物处理 要考虑其安全性及合法性，一般交给商业性废弃物处理机构处理或就地焚烧：对有危险性生物 废弃物，首先灭菌、隔离或采用其他方式处理；对放射性废料应该保存在具有明确标识容器储 存；对于具有毒性、致癌、易燃、腐蚀性、反应或不稳定的物质，应该存放在标识清楚的容器 内，根据职业健康及安全专员指示来丢弃。○13害虫的控制，动物饲养环境中，应该有一套防治、 控制、清除害虫的计划；因为杀虫剂会引发毒性效用，而影响到实验结果，因此仅在必须时应 用，并且与研究人员沟通，避免对实验结果的影响，记录杀虫剂的应用。○14紧急事件，周末及 节假日的管理，每日巡回观察动物，包括周末及节假日，确保动物健康，并满足研究要求。当 遭遇紧急状况时，机构安全员、消防员或警察应该能够与单位负责动物管理人员直接联系。如 将紧急操作流程、人员姓名及联络电话张贴在机构内、安全部门中或交予电话转接服务中心。 对特殊设施或特殊操作的紧急处理步骤应张贴在明显处。应该有针对人员及动物灾害防治措施。
(3)群体管理：①动物的标识及辨别，动物辨识的方法如房间、台车、栏、笼具位置号码 利用文字书写或号码条记载于卡片上或标记于下列方式上，如颈圈、条形码、名牌及标签、有 颜色染料、打耳洞或耳上标记、文身、皮下传讯器、冷烙等。对较小啮齿类动物切除趾足节作 为标记辨识方法。如果可能，标识还应该包括动物来源、动物品种、品系、负责人姓名、工作 场所位置、相关的日期及计划编号等。②遗传及命名，遗传特征，对动物选择及管理，以及在 族群育种及生物医学研究上是相当重要的。利用标准命名规则将品系或支系或各动物之遗传背 景数据翔实记录也是一项重要工作。
3．第三章，兽医学管理
(1)动物的获得与运输：评价供货商提供动物的质量，合格的动物供货商定期提供与动物 遗传及健康状况相关的报告。动物运送方式、类别、包括在机构之间的运输，应该有详尽规划， 以降低运送所需时间及避免人与动物间相互感染几率，另外避免动物暴露于极端恶劣的气候或 过度拥挤的环境。
(2)预防医学：①检疫、适应与隔离，检疫是指将新到动物与已经饲养的动物暂时分隔饲 养，直至健康情形及微生物状况被评价，且合格为止。检疫程序可减少病源菌被带入已经饲养 的动物种群中的几率。不论检疫期长短，任何新引进动物在使用之前，都需要经过一段时期的 饲养，使其生理、心理及营养需求状态均能够适应新的环境。②疾病的监测、诊断及控制，每 日必须由受过培训的人员监测有无疾病、受伤体征或出现的异常行为，应用适当方式监测及诊 断疾病；疾病防治、诊断、治疗方式，应该采用目前可以被接受的方法；对病毒性感染的主要 监测方式为血清检查方法。
(3)手术，影响手术成功的因素有：手术前的计划、人员培训、无菌、操作技术、动物健 康状况及动物生理状态等。
(4)疼痛、止痛剂及麻醉，兽医管理项目之一是避免或减轻因实验操作及手术处理引发的 动物痛苦；对实验动物正确使用麻醉剂或止痛剂，不论在道德上或是科学上都是绝对必要的。
(5)安乐死：安乐死为一种处决的方式，应用安乐死可使动物在瞬间昏迷致死，而不会对 动物造成疼痛及痛苦。对于安乐死方法的评价考虑以下标准：能否有效地使动物昏迷并致死， 而且，不会让动物产生不适、疼痛、焦虑，并且考虑其可靠性、不可恢复性、引发昏迷所需的 时间、品种及年龄上的限制、与实验性质是否有冲突、对执行人员安全性及情绪的影响：动物 安乐死应该由技术熟练的人来负责实施。
4．第四章，动物房的设施
(1)作业区一般包括：①动物饲养、管理及清洁消毒区域。②接收、检疫及隔离动物的区 域。③根据动物品种进行分隔或根据实验方案需要单独分隔饲养动物。④储存区域。对于多功 能动物设施机构，作业区包括：①邻近动物饲养区内特殊性质的实验室，如外科手术、尸体解 剖、x光摄影、特殊饲料制备、实验操作、临床治疗及诊断实验等试验室。②操作使用危险性 生物、物理及化学药剂应该隔离防护的设施。③饲料、垫料、药品、生物制剂及耗材接收及储 存区。④设备、器械清洗及消毒灭菌区，空间大小根据工作量及清洗饲育盒、水瓶、玻璃器皿、 台车及废弃物容器等机型大小而定；清洗水槽；用以消毒灭菌设备；饲料、垫料高压灭菌机： 分别存放污秽及干净设备的空间。⑤未焚化或移除废弃物的储存空间。⑥冷藏及尸体放置空间。⑦行政及监督管理人员的办公区域，也应该包含教育人员使用的区域。⑧淋浴车、盥洗台、更 衣室、厕所及人员休息区。⑨保安系统，例如门禁卡片系统、电子监控及警报系统。
(2)建筑指南：①走廊，宽度方便职员及设备工作。一般宽度在182．8～243．8cm；通向具 有噪音工作区的走廊如狗房，应该设置双门或阻隔噪音设施；各种管道(水管、排水管、电线 管路)及其他设施应该设有维修孔道，并置于动物房外的走廊，以便管理维修。警铃、灭火器、 电话等设备应放在壁橱或较高处，避免因设备搬动而碰损。②动物室房门，应该开向内侧，如 果需要开向走廊，应该设置玄关；门宽大约在106．7cm×213．4cm，方便台车及设备进出。门与 门框要密封，以避免害虫侵入动物房。门的材质要能耐腐蚀。③外部窗户，应该考虑窗户对室 内温度、光照及安全性维持的影响。④地板，防潮、无吸水性、耐撞击、平坦。⑤排水，地面 斜坡设计，利于排水。排水系统必须能迅速将水排除，使地面保持干燥。⑥墙面，光滑平坦、 防潮、无吸附性、耐撞击，表面能耐清洁剂、消毒药水的清洗及耐高压水柱的冲洗。⑦天花板， 密封、平滑、抗潮、接合处平整、表面材质耐清洁剂及消毒药水的清洗。⑧加热换气机空调设 备(Heating，Ventilation，and Air-conditioning，HVAC)，HVAC设计原则为可靠、易于维修 及节省能源，且能满足动物对环境气候因子的需求。HVAC系统应具备调整干式球温度计温度 在±l℃的能力，且对相对湿度经常维持在30％～70％。⑨电力与照明，注意安全性能，而且能 够提供适当照明度、足够的电源插座及提供正确安培数，以供特殊仪器使用。当停电时，备份 电力供应系统或紧急发电系统工作；动物房内灯具、定时器、开关及插座等密封处理及安装防 护罩，保护动物及职员安全，以及避免害虫藏身其内：在较潮湿区域，如清洗区、狗房、猴房、 所使用的开关、插座应防潮处理，并有断电跳脱保护设备。⑩储藏区域，存放设备、耗材、饲 料、垫料及废弃物；饲料及垫料与有毒害危险物品分别存放：废弃物单独存放；死亡动物尸体 及脏器应该存放在--70℃以下的冷藏室。○11噪音防护，应该考虑将会产生噪音的设备如饲养笼 具清洗机，与饲养区及实验室隔开：考虑使用吸音及隔音材料。○12机械清洗设施：考虑以下因 素：a．放置地点与动物房、废弃物存放区及储物室之间的关系；b．方便进出，如门要足够宽， 以方便设备的移动；c．足够空间配置及操控设备；d．具有适当垫料废弃方式及洗前规定；e．清 洁区域及污染区域间动物及设备之间的物流应该分开：f．墙面及天花板作防潮处理；g．隔音； h．冷、热水、蒸汽、地面排水系统及电源供应的设计；i．通风(排风)设施及排除消毒作业 时残留的蒸汽及气体的装备。
(3)无菌手术设施：外科手术设施必须根据手术动物种类及手术程序的复杂性而定。对于 大多数手术，无菌外科手术包括有外科手术供应区、动物准备室、外科医师准备室、手术室和 恢复室等；手术设施主要考虑如何有效地控制污染源及容易清理，外科手术供应区应该作为器 械清洗、消毒和耗材、器械储存场所，手术恢复区应该满足动物在麻醉状态中及苏醒时的需求， 可以对动物进行充分的观察护理。