电化学发光检测技术原理ppt课件.ppt

Elecsys Principle电化学发光检测原理及要点解读电化学发光检测原理及要点解读.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准报警分析校准报警分析校准报警分析校准报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍主要内容主要内容.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005放免放免酶免酶免荧光免疫荧光免疫化学发光化学发光电化学发光电化学发光1960S197080S2000S1，抗体技术的革命，从使用多克隆抗体向使用单克隆抗体转变2，从手工操作向全自动分析仪的转变3，从液相放射免疫技术向均相和固相免疫分析技术的转变标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005缺点缺点半衰期短，试剂货架期短半衰期短，试剂货架期短 标记物不稳定标记物不稳定每次需做标准曲线每次需做标准曲线 反应时间长，反应时间长，不易自动化检测不易自动化检测 使用放射性核素，需要一定防护使用放射性核素，需要一定防护优点优点分子量小分子量小分子量小分子量小,免疫损耗小免疫损耗小免疫损耗小免疫损耗小简便简便简便简便、灵敏、特异、灵敏、特异、灵敏、特异、灵敏、特异可自行设计试剂盒可自行设计试剂盒可自行设计试剂盒可自行设计试剂盒应用范围广应用范围广应用范围广应用范围广 标记物:碘125标记免疫技术的发展放射免疫测定法标记免疫技术的发展放射免疫测定法(RIA)底物:无需底物.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005 优势优势优势优势灵敏度较高灵敏度较高试剂稳定试剂稳定较快的速度较快的速度无污染无污染缺点缺点缺点缺点包被包被表面积小（灵敏度和速度）表面积小（灵敏度和速度）包被均一性不足（精密度）包被均一性不足（精密度）检测技术多为颜色反应（特异性和灵检测技术多为颜色反应（特异性和灵敏度）敏度）反应时间不一致反应时间不一致,造成结果的造成结果的偏差偏差(特别特别在手工操作时在手工操作时)标记免疫技术的发展酶联免疫测定法标记免疫技术的发展酶联免疫测定法(ELISA)标记物:HRP辣根过氧化物酶/ALP碱性磷酸酶底物:TMB四甲基联苯胺/对硝基苯磷酸酯P-NPP.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005优势优势灵敏度较高灵敏度较高成本较低成本较低荧光检测信号荧光检测信号操作简便操作简便缺点缺点传统的微板吸附包被技术传统的微板吸附包被技术均一性差、均一性差、重复性差重复性差批量检测不能实现全自动批量检测不能实现全自动每次检测需要做定标曲线，每次检测需要做定标曲线，浪费成本浪费成本样本的前处理技术操作过程完全同样本的前处理技术操作过程完全同样本的前处理技术操作过程完全同样本的前处理技术操作过程完全同ELISAELISA方法方法方法方法标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展时间分辨荧光免疫时间分辨荧光免疫(TRFIA)标记物：铕(Eu3+)、钐(Sm3+)等镧系元素底物:镧系元素螯合物.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记物：标记物：ALP 碱性磷酸酶底物：底物：MUP（4甲基伞形酮酰磷酸甲基伞形酮酰磷酸）激发物：光激发物：光最终检测信号：最终检测信号：荧光强度荧光强度代表产品：代表产品：代表产品：代表产品：美国美国Abbott AXSYMAbbott AXSYM 法国bioMrieux VIDAS 标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展酶荧光免疫酶荧光免疫测定法测定法(MEIA).cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记物：标记物：HRP 辣根过氧化物酶辣根过氧化物酶/ALP 碱性磷酸碱性磷酸酶酶发光底物：发光底物：鲁米洛鲁米洛、金刚烷金刚烷激发物：特定的化学环境激发物：特定的化学环境最终检测信号：最终检测信号：可见光可见光强度强度代表产品：代表产品：代表产品：代表产品：美国美国J&J Ortho Vitros Eci美国美国BeckmanCoulter Access,Dxi800标记免疫技术的发展酶促化学发光标记免疫技术的发展酶促化学发光免疫免疫(CLIA).cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记物：标记物：吖啶酯,吖啶酯衍生物发光底物：无需底物发光底物：无需底物,标记物标记物直接发光直接发光激发物：特定的化学环境激发物：特定的化学环境最终检测信号：最终检测信号：可见光可见光强度强度代表产品：代表产品：代表产品：代表产品：德国德国SIEMENS Centaur XP 美国美国美国美国Abbott I2000Abbott I2000 标记免疫技术的发展直接化学发光标记免疫技术的发展直接化学发光(CLIA).cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记物：标记物：三联吡啶钌三联吡啶钌发光底物：三丙胺发光底物：三丙胺激发物：激发物：直流电场直流电场最终检测信号：最终检测信号：可见光可见光强度强度代表产品：代表产品：代表产品：代表产品：罗氏公司罗氏公司 e411,E170,e601,e602e411,E170,e601,e602标记免疫技术的发展电化学发光标记免疫技术的发展电化学发光(ECLIA).cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准报警分析校准报警分析校准报警分析校准报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍主要内容主要内容.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理-名称的由来名称的由来ELECTRO 电电 CHEMI 化学化学LUMINESCENCE 发光发光I MMUNO 免疫免疫ASSAY 分析分析.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光免疫测定系统电化学发光免疫测定系统 Elecsys 电化学发光电化学发光 链霉亲和素链霉亲和素-生物素间接包被技术生物素间接包被技术 磁性微粒子固相载体磁性微粒子固相载体 检测系统检测系统电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理-技术特点技术特点.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005 专利的电化学发光技术专利的电化学发光技术标记物：三联吡啶 Ru(bpy)32+递电子体：三丙胺 TPA反应启动方式:直流电场电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理-电化学发光电化学发光.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005里程碑式的标记物：三联吡啶钌里程碑式的标记物：三联吡啶钌u水溶性，分子量小u结构稳定，免疫损伤小,易于标记u应用广泛（激素，DNA等）u与三丙胺(Tripropylamine,TPA)共同构成电化学发光系统三联吡啶钌三联吡啶钌Ru(bpy)Ru(bpy)3 3 2+2+NHS(N羟基琥珀酰胺酯羟基琥珀酰胺酯)电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理-标记物标记物.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电极表面的电化学发光反应电极表面的电化学发光反应电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理-电化学发光的反应过程电化学发光的反应过程发光标记物发光标记物:三联吡啶钌Ru(bpy)32+三联吡啶钌三联吡啶钌“催化”三丙胺三丙胺发出可见光可见光反应产物:三丙胺自由基三丙胺自由基(TPA*)+620nm的光子的光子发光底物:三丙胺(TPA)电化学发光启动条件电化学发光启动条件:直流电场直流电场反应特点:迅速迅速,可控可控,循环发光循环发光.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005CH3CH2CH2-N-CH2CH2CH3CH2CH2CH3CH3CH2CH2-N-CH2CH2CH3 失失e-CH2CH2CH3CH3CH2CH2-N-C-CH2CH3CH2CH2CH3失失 H+CH3CH2CH2-N-HCH2CH2CH3+CH3CH2CHO.+.H氧化Ru(bpy)33+激发态激发态Ru(bpy)32+基态基态Ru(bpy)32+还原电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理电化学发光的反应过程电化学发光的反应过程三丙胺阳离子三丙胺自由基三丙胺自由基-e-电极电极 失失e-+丙醛二丙胺.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005独独特特的的磁磁性性微微粒粒作作为为固固相相载载体体u直径2.8um 表面的凸凹使包被面积放大u悬浮于反应体系中，形成均一稳定的液相,大大提高反应效能u磁性微珠易于通过磁场磁性吸引和分离电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理-固相载体固相载体显微镜下的磁微粒.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005专利的链霉亲和素生物素专利的链霉亲和素生物素系统系统电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理-链霉亲和素和生物素技术链霉亲和素和生物素技术SA链霉亲和素StreptoavidinSABBBBB生物素BiotinB生物素BiotinB生物素BiotinB生物素Biotin+=.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005适用于包被各种化合物，如多肽、脂多糖。适用于包被各种化合物，如多肽、脂多糖。SASA均匀牢固地包被在磁性微粒上均匀牢固地包被在磁性微粒上链霉亲和素链霉亲和素-生物素包被技术生物素包被技术Streptoavidin,SA Biotin，B B B衍生物衍生物结合结合的抗原或抗体的抗原或抗体与标本进行液相反应与标本进行液相反应电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理链霉亲和素和生物素技术链霉亲和素和生物素技术SA亲和素磁性颗粒抗体B抗体生物素B生物素SA亲和素 磁性颗粒.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005ECL检测原理检测原理ElectroChemiLuminescence(ECL)电化学发光技术电化学发光技术结合结合Ruthenium结合结合磁珠磁珠转移至转移至电极电极;标标记后免疫记后免疫复合物与复合物与游离组分游离组分分离分离施加电压施加电压启动化学启动化学发光反应发光反应信号检测信号检测 e analyzer performance.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005ECL检测原理检测原理免疫复合物的形成Source:Roche Diagnostics Research and Development抗体抗体Ruthenium生物素生物素抗体抗体抗原抗原免疫复合物免疫复合物第一抗体标记生物第一抗体标记生物 素（与微磁珠结合）素（与微磁珠结合）第二抗体标记第二抗体标记RutheniumRuthenium（产生光信（产生光信号）号）两种抗体皆能与靶抗两种抗体皆能与靶抗原特异性结合原特异性结合.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电极电极工作电极磁铁光电倍增管TPATPATPATPA电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理测量室中的反应测量室中的反应1.使用清洗液使用清洗液(Clean Cell)清洁测量室清洁测量室2.移入磁铁移入磁铁,并使用并使用TPA清洁清洁测量室活化电极测量室活化电极3.反应复合物随反应复合物随TPA一起一起吸入吸入测量室测量室,4.工作电极工作电极加电加电压压,6.移开磁铁，移开磁铁，TPA冲走所有冲走所有反应物反应物。磁微粒被吸附磁微粒被吸附未结合到固相的未结合到固相的游离标记游离标记物被冲走物被冲走7.使用清洗液使用清洗液(Cleancell)清洁测量室清洁测量室。5.电极表面反应后电极表面反应后发出光发出光子子,同时同时PMT检测光子信号检测光子信号.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005测量室组成和结构测量室组成和结构电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理测量室的结构测量室的结构v流动测量室v可升降的磁性分离系统v彻底的清洗系统v高度自动化.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理分析类型分析类型夹心法夹心法竞争法桥联法桥联法.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理夹心法检测原理夹心法检测原理1.加入R1-生物素结合的抗体2.加入R2-Ru(bpy)Ru(bpy)3 3 2+2+标记的的抗体3.加入待测样本，温育9min，形成双抗夹心复合物4.加入M-亲和素包被的磁微粒,温育9min，钌标记物通过待测样本和亲和素生物素连接到磁微粒上。5.反应复合物被吸入测量室进行磁性分离及其电化学发光测量。.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005 夹心法夹心法 测定成正比正比：信号信号低低 =浓度浓度低低 信号信号高高 =浓度浓度高高 检测有多个结合位点的抗原如TSH，HCG，HBsAg，AFP等电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理夹心法检测原理夹心法检测原理 测定大分子抗原.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理竞争法检测原理竞争法检测原理1.加入R1-Ru(bpy)Ru(bpy)3 3 2+2+标记的抗体2.加入待测样本，温育9min，形成抗原抗体复合物。-3.加入R2-生物素标记的与样本同源的抗体。4.,加入M-亲和素包被的磁微粒；温育9min。未与待测抗原结合的钌标记物通过R2结合到磁微粒上5.反应复合物被吸入测量室进行磁性分离及其电化学发光测量。.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005 竞争法竞争法 测定成反比：信号低=浓度高信号高=浓度低 检测仅一个结合位点的抗原等如FT3，E2，HBcAb等。测定小分子抗原电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理竞争法检测原理竞争法检测原理.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005桥联法（桥联法（Bridging Principle）电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理桥联法检测原理桥联法检测原理 理论基础：理论基础：单位单位IgGIgG分子具有分子具有2 2个个抗原结合位点抗原结合位点二聚体分泌型二聚体分泌型IgAIgA具有具有4 4个个抗原结合位点抗原结合位点五聚体五聚体IgMIgM可有可有1010个抗原结合位点个抗原结合位点检测相应的检测相应的IgG和和IgM抗体总量抗体总量。如。如HBcAb 测定成正比正比：信号信号低低 =浓度浓度低低 信号信号高高 =浓度浓度高高 双抗原夹心测定抗体.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准报警分析校准报警分析校准报警分析校准报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍主要内容主要内容.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理发光及检测系统发光及检测系统直直流流电电场场1.5v电电压压启启动动0.2-0.6秒达到发光峰值秒达到发光峰值发发光光光光子子数数可控迅速放大.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005稳定的试剂稳定的试剂电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理稳定的试剂稳定的试剂.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005mIU/ml372010.1和和2014.9 全球客户端全球客户端FSH病人结果分布病人结果分布mIU/ml%美国美国FT4项目项目20个不同批号的的病人结果分布个不同批号的的病人结果分布2010.1-2014.9全球客户端全球客户端FSH中位值变化中位值变化%pMol/l电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理优异的结果稳定性优异的结果稳定性.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005宽广的线性范围宽广的线性范围电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理线性范围线性范围光子数范围:0-10,000,000(1亿).cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005超宽的线性范围及检测灵敏度超宽的线性范围及检测灵敏度电化学发光免疫检测原理电化学发光免疫检测原理宽线性及灵敏度宽线性及灵敏度.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光免疫检测原理简单的试剂管理电化学发光免疫检测原理简单的试剂管理n多模块通用试剂E170,e411,e601,e602n二维条形码自动输入全部信息n试剂联体包成分独立稳定好n无需配制，即开即用n自动开闭试剂瓶盖，有效地防止挥发等.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准报警分析校准报警分析校准报警分析校准报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍主要内容主要内容.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July20051.参考系统标准曲线参考系统标准曲线Reference Standard CurveReference Standard Curve(Roche 研发部)根据“WHO”的标准化要求 使用1012个点 与试剂批号无关 是制作主校准曲线（制作主校准曲线（master calibratormaster calibrator）的基础）的基础电化学发光校准概念校准传递电化学发光校准概念校准传递.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July20052.主校准曲线主校准曲线Master Calibration CurveMaster Calibration Curve(Roche 生产部)使用5或6个点(master calibrators)使用特定批号的试剂（一级试剂，master reagent)总曲线的形状是用依照Rodbard 功能的4个参数来描绘的 主校准曲线数据被编码进了特定批号试剂的2维条形码 靶值被编码进了校准试剂盒（Cal Set）的条形码中 电化学发光校准概念校准传递电化学发光校准概念校准传递.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July20053.3.客户端的校准客户端的校准 测试2个校准品(CalSet 1 和CalSet 2)校准品的测量结果按照数学方法的计算结合到与Cal Set或试剂盒上的2维条形码信息上 仪器能够自动判断批校准（Lot Calibration）和盒校准（Regent Pack Calibration）样品结果的计算都是从这条定标曲线上的来的电化学发光校准概念校准传递电化学发光校准概念校准传递.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005 电化学发光校准概念批校准与盒校准电化学发光校准概念批校准与盒校准首次注册时间首次注册时间24小时小时满足校准通过满足校准通过条件条件盒校准盒校准生成生成,无无法生成批校准法生成批校准校准曲线仅适校准曲线仅适用该盒试剂用该盒试剂试剂盒或配套试剂盒或配套试剂过期试剂过期满足校准通过满足校准通过条件条件盒校准盒校准生成生成,无无法生成批校准法生成批校准校准曲线仅适校准曲线仅适用该盒试剂用该盒试剂试剂盒试剂盒批校准可以传递批校准可以传递给给相同相同批号的其他试剂盒批号的其他试剂盒盒校准只能适用于本试剂盒盒校准只能适用于本试剂盒.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005点击屏幕左上角图标进入系统概览界面选择试剂位点击Detail点击e601点击ReagentOverview电化学发光校准概念试剂首次注册时间电化学发光校准概念试剂首次注册时间.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005 校准频率建议：按照需要：例如质控结果超出特定的范围通常每28天进行一次批校准（当使用相同的试剂批号时）每7天进行一次2点校准（当使用同一试剂盒时）如果需要的话更频繁的校准（如ATPO，ATSHR等项目需每日校准)电化学发光校准概念校准曲线的稳定性电化学发光校准概念校准曲线的稳定性.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005在同一测量通道上，批校准可以传递给相同批号的试剂盒系统会根据试剂的第一次上机登录试剂来选择有效的批校准(Lot Calibration)不同测量通道上的批校准（Lot Calibration）不会互相传递。如果将试剂盒从E1移到E2（相同批号），系统会根据试剂第一次的上机登录时间来选择E2上有效的Lot Calibration。电化学发光校准概念校准曲线的传递规则电化学发光校准概念校准曲线的传递规则.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光溯源性溯源链电化学发光溯源性溯源链参考系统参考系统精选的检测方法精选的检测方法确认的参考物质确认的参考物质参考方法参考方法参考标准参考标准+一级试剂一级试剂RocheRoche一级参考系统校准品一级参考系统校准品+一级试剂一级试剂多点主校准品多点主校准品+新批号试剂新批号试剂客户两点校准品客户两点校准品+新批号试剂新批号试剂用人血清人血清进行方法学比较比较从一级校准品赋值传递一级校准品赋值传递给由试剂和分析仪组成的相应的系统确定典型的校准曲线参数对两点校准品CalSet赋值.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光溯源性基质效应（电化学发光溯源性基质效应（Matrix Effect）影响因素:防腐剂PH值蛋白浓度解离剂释放剂结合蛋白离子强度抗原抗体均一性脂质浓度代谢产物疏水基疏水基电荷电荷氢键氢键范德华力范德华力二硫键二硫键结合系数结合系数抑制系数抑制系数新鲜血清新鲜血清一级参考物质一级参考物质被认为无基质效应无基质效应动态平衡.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005标准化确保病人标本结果标准化确保病人标本结果不受试剂批号和检测平台不受试剂批号和检测平台影响影响PatientsampleElecsys PreciControlUniversalAFP=50.0ng/ml电化学发光溯源性批号特异性质控参考值电化学发光溯源性批号特异性质控参考值AFP=58.7ng/mlAFP=55.8ng/ml试剂批号A试剂批号B基质效应.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光溯源性批号特异性质控参考值电化学发光溯源性批号特异性质控参考值质控说明书中参考值表试剂盒说明书中批号特异性参考值表标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展标记免疫技术的发展电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光检测原理电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点电化学发光的技术特点校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准概念及溯源性校准报警分析校准报警分析校准报警分析校准报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析常见数据报警分析试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读试剂特性解读检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍检测菜单介绍主要内容主要内容.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光校准报警分析校准报警类型电化学发光校准报警分析校准报警类型错误类型描述Min最小信号值错误SignalNG漏测值错误Monotony线性方向错误Diff.最小差异范围错误Dupl.重复性错误Sys.Error系统错误Factor因数超限错误.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光校准报警分析定量项目校准报告电化学发光校准报警分析定量项目校准报告CalibratioCalibration n（校准）（校准）Status（状态）状态）CalibrationCalibrationResultResult（校准结果）（校准结果）点击相应试剂校准曲线生成校准曲线生成时间时间检测信号值检测信号值.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光校准报警分析定性项目校准报告电化学发光校准报警分析定性项目校准报告CalibratioCalibration n（校准）（校准）Status（状态）状态）CalibrationCalibrationResultResult（校准结果）（校准结果）点击相应试剂定性项目定性项目CutOffCutOff值值批批/盒校准信盒校准信息息.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005漏测值漏测值missing valueSingal NG定标点中定标点中有一点未出现结果有一点未出现结果定标报告会在相应的结果处定标报告会在相应的结果处提示提示 NGNG电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析Missing Value(漏测值错误漏测值错误).cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析Min（定量最小信号值错误）（定量最小信号值错误）Min(minimumsignal)最小信号值测量的信号值必须大于该测试要求的最小信号值，这个值包含在试剂的2维条形码中.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005 sig（定性项目）（定性项目）最大最大/最小信号值错误：最小信号值错误：这个指标包含在试剂条形码中，根据测试项目不同而变化电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析sig（定性最小信号值错误）（定性最小信号值错误）sig.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005试剂超过稳定期或效期使用未溶好或过期的定标液Procell被污染磁微粒搅拌不均，如结块试剂未平衡到室温试剂或定标液中有气泡定标液未平衡到室温试剂包受压，温度或储存条件不好试剂针或者Sipper针吸取错误电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析Min/Sig最小信号值错误最小信号值错误可能的原因：.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析Diff.(差异性错误差异性错误)Diff.(差异性差异性)水平1和水平2校准品测试信号值的最小可接受百分比差异：30定性测试：阴性和阳性的校准品测试信号值差异必须大于试剂2维条形码中所定义的值（不同的测试项目会有差异）这个最小可接受差异结果违反会显示 NG(Not Good)，校准失败。.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005定标液或试剂出现质量问题使用空的或过期的复溶体积不准的定标液磁微粒搅拌不均，如结块定标液未平衡到室温试剂未平衡到室温Procell被污染，例如混入cleancell试剂针或者Sipper针吸取错误试剂后定标液有气泡试剂包受压，温度或储存条件不好电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析Diff.(差异性错误差异性错误)可能的原因：.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析Monotony（线性方向错误）（线性方向错误）夹心法:Cal2光子数Cal1光子数竞争法:Cal2的光子数Cal1光子数线性方向线性方向Monotony 手工手工分配定标液时分配定标液时放放反反ProcellProcell被被污染污染可能的原因：.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005电化学发光校准报警分析电化学发光校准报警分析Dupl.（重复性错误）（重复性错误）重复性DUPL.(Deviation of duplication)同一定标点的两次检测的光子数差距过大。一般以CV10%为标准有些项目需改为CV Test .cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005Low Signal(LowSig/Sig)信号值过低信号值过低描述：检测到很弱的信号值。处理：检查样品杯或反应杯中是否有凝块；试剂或样本未正常加入竞争法检测时样本浓度过高；测量室状态不好。常见数据报警常见数据报警 LowSig/Sig.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005Technical Limit exceeded(LIMTH/LIMTL)信号值超限信号值超限描述：样本的信号值超过了试剂盒设置的信号值范围。处理：检查样本、试剂或测量室状态。常见数据报警常见数据报警 LIMTH/LIMTL.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005Repeat High/Low(REPTH/REPTL)超过重测限超过重测限描述：样本的浓度超过了设置的原倍血清重测的上限或下限。处理：检查样本、试剂等状态；考虑是否需要稀释或原倍重测。常见数据报警常见数据报警 REPTH/REPTL.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergb