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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,1,中药显微鉴别应用简介,2,3,洋葱表皮细胞构造图,4,洋葱表皮细胞构造,5,重要内容,一、显微鉴别的概述,二、常用中药材的显微鉴别特性,三、显微镜的构造与使用简介,四、中药显微制片操作,五、中药材及中成药显微鉴别实例,6,显微鉴别概述,显微鉴别运用显微镜观测药材的组织构造、细胞形状及其后,含物的特性,用以鉴定药材真伪的一种措施。,特点 经济、简便,迅速、直观,取样量少,专属性强,历史 上世纪50年代,中国科学院院士、中国生药学研究的创始人徐国钧先生开始开展中药材及中成药显微鉴别研究,先后完毕石斛夜光丸、六味地黄丸等100多种中成药的显微鉴别,打破了“丸散膏丹,神仙难辨”老式认识,为后人留下了宝贵的显微鉴别经验和资料。,应用 中国药典从1977年版一部开始,在中药材和中药成方制剂鉴别项下收录了显微鉴别内容,此后历版药典不停充实并予以完善。,7,8,9,10,11,显微鉴别概述,定义:,特点:经济、简便,迅速、直观,取样量少,专属性强,12,常用中药材的显微鉴别特性,植物细胞,细胞后含物,13,(一)植物细胞,细胞:是构成植物体形态构造和生命活动的基本单位。,特点:,形状多样:随植物种类及在植物体内存在,部位和行使机能不一样而异。,大小悬殊:一般细胞直径在10m 100m,之间,小的直径只有0.1m,长的,如苘麻的纤维细胞可长达200mm。,14,常见植物细胞类型,薄壁细胞:构成植物体的基本组织,为活细胞,含多种内含物。显微镜下细胞壁薄。,15,常见植物细胞类型,木栓细胞:,存在于木本植物的树皮或根皮,细胞壁内渗透了脂肪性的木栓质,隔绝外界的水和空气,排列紧密,对植物内部组织起保护作用,为死细胞。,16,香加皮,草酸钙方晶,石细胞长方形或类多角形,木栓细胞棕黄色,多角形。,乳管含无色油滴状颗粒,淀粉粒甚多,单粒类圆形或长圆形,17,常见植物细胞类型,石细胞,为细胞壁强烈木质化的,厚壁细胞,,在植物体内存在广泛,分布:根、茎、叶、果实、种子。果皮、种皮中较多,形成坚硬的保护组织。如椰子、核桃坚硬的内果皮。特点:单个散生或群生;形状多样;壁极厚,木化、栓化、角化细胞腔小;形成分枝纹孔道。,18,石细胞,19,枸杞子:,种皮石细胞淡黄色,壁厚,波状弯曲。,20,黄芩石细胞:,类圆形、类方形或长方形,壁较厚或甚厚,21,鸡血藤石细胞:成群,有的具有红棕色物质或方晶,22,鸡血藤石细胞:成群,有的具有红棕色物质或方晶,23,常见植物细胞类型,花粉粒,细胞功能 为植物生殖细胞,存在于,花类药材的雄蕊上。,形态特性 外壁多具雕纹和萌发孔,是花,类药材的重要鉴别特性。,24,不一样植物的花粉粒,25,常见植物细胞类型,纤维:,多存在于植物的木质部和韧皮部,起支撑作用。显微镜下为两端尖斜的长形细胞,具有全面增厚的次生壁,壁上有少数纹孔。,有的纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶纤维。如鸡血藤、黄柏,26,鸡血藤,晶纤维,27,黄柏,晶纤维,28,黄芩,韧皮纤维,微黄色,梭形,孔沟明显,两头尖或斜尖,29,常见植物细胞类型,导管:重要存在于植物的木质部中,起输送水分和无机盐的作用,镜下呈长管状或筒状,细胞壁不全面不均匀增厚,根据增厚状况,分为环纹、螺纹、梯纹、网纹及孔纹导管。,30,环纹,网纹,梯纹,螺纹,孔纹,31,甘草,具缘纹孔导管,32,(二)细胞后含物,后含物的概念:细胞在代谢过程中产生的营养物质、废物和储备物质统称为细胞后含物。,贮藏的营养物质重要为淀粉、蛋白质、脂肪油,另有多糖团块及菊糖等。,代谢废物重要为晶体,有草酸钙结晶和碳酸钙结晶以及砂晶。,33,1,),淀粉粒,淀粉粒:葡萄糖分子聚合而成的长链碳水化合物,在细胞中以颗粒状态存在,称为淀粉粒。所有的薄壁细胞中几乎均有淀粉粒的存在,尤以根、根茎及种子中为多。多数淀粉粒表面均有层纹和脐点,不一样植物淀粉粒大小、层纹、脐点各有特性,可以作为药材的鉴定根据之一。,单粒:只有一种脐点和围绕脐点的许多轮纹。,如山药、川贝母等。单粒淀粉多见,复粒:由若干分粒构成,有两个以上的脐点,每,个脐点各有轮纹围绕。,34,山药,的淀粉粒单粒扁卵形、三角状卵形、类圆形或矩圆形,脐点点状、人字状等,可见层纹,35,马铃薯,淀粉粒,浙贝母,淀粉粒,36,2),结晶,晶体是植物细胞的代谢废物,常见的有两种类型:草酸钙结晶和碳酸钙结晶(桑叶)。,草酸钙结晶:为无色半透明或稍呈暗灰色的晶体,一般一种植物只能见到一种形状,少数有两种或多种(如曼陀罗叶),在同一植物中晶体的分布以及形态特性较稳定,是植物显微鉴别的重要特性之一,37,草酸钙结晶的类型,簇晶:由许多八面体、三棱形单晶体汇集而成,,如:大黄、人参、白芍等。,单晶 一般呈正方形、长方形、斜方形等,包括方,晶、砂晶、棱晶等。例如:葛根、甘草等。,针晶 晶体呈两端锋利的针状,在细胞中多成束存,在,称针晶束,一般存在于单子叶植物的粘,液细胞中,在双子叶植物中较少见。,如:半夏、山药、巴戟天、茜草等。,38,簇晶,大黄簇晶,39,方晶,香加皮的方晶,甘草的方晶,40,针晶,半夏的针晶束 白及的针晶束,41,钩藤的砂晶 淫羊藿的柱晶,42,3,)脂肪和脂肪油,是由脂肪酸和甘油结合而成的脂。常温下呈固体或半固体的称为脂,如柯柯豆脂;呈液体的称为油,如芝麻油、大豆油。脂肪油常呈小滴状分散于细胞质中。,检查:遇苏丹试液显橘红色或红色。,花生子叶细胞,43,黑芝麻,油滴,鲜橘皮,中的油滴,44,4,)菊糖,菊糖是由果糖分子聚合而成的,重要存在于菊科、桔梗科等部分植物根的薄壁细胞中(如木香、白术、桔梗、党参),菊糖能溶于水,在细胞中呈溶解状态存在,不溶于乙醇,乙醇处理后,可成球形、半球形或扇状结晶析出,久置不溶化。,水合氯醛装片(不加热),可见呈扇形或不规则的菊糖团块,表面现放射状线纹,久置渐溶化。,45,菊糖,桔梗,-,木香,46,菊糖,茅苍术,47,5,)黏液,黏液为杂多糖,是植物正常的生理产物,多存在于种子、果实、根及根茎等的黏液细胞中(如白及、山药)。,48,山药,的粘液细胞,白及,的粘液细胞 (内含草酸钙针晶束),49,菌类药材显微特性,大多以子实体或菌核的形式入药,无淀粉粒和高等植物的显微特性。观测时应注意菌丝的形状、有无分枝、颜色、孢子的形态;结晶的有无及形态。,50,茯苓,水合氯醛装片,未加热透化 加热透化,51,冬虫夏草菌的菌丝,52,三、显微镜使用简介,显微镜重要是由机械部分与光学部分构成,虽然新型显微镜不停面市,但其原理及各部分的构造均大同小异。,机械部分,光学部分,53,显微镜的构造,54,显微镜使用注意事项,制片时盖玻片上不得有试液残留,防止污染物镜,及载物台,损伤镜头。,变换物镜时,牢记先低倍、后高倍,先粗调、后,微调。由低到高逐层变换。,使用高倍物镜时,只能用细螺旋调整焦距,严禁,用粗螺旋调整;也不得装卸载玻片。,使用完毕,应将最小物镜与通光孔相对,关闭光,源,罩好,收置起来。,显微镜的光学部分,只能用特殊的擦镜头纸擦拭,55,偏光的应用,显微鉴别中,常运用某些物质具有双折射性的特点,采用偏光检测。,淀粉粒在偏光显微镜下展现黑十字现象;草酸钙结晶类型多样,在偏光显微镜下呈不一样的多彩颜色;矿物类多具有偏光特性。其他如石细胞、纤维、导管等也展现出不一样的偏光特性。可作为药材鉴别的补充。,56,偏光显微镜下淀粉粒形态,山药淀粉粒,浙贝母淀粉粒,马铃薯淀粉粒,57,偏光显微镜下多种结晶形态,58,四、中药显微制片,1、药材粉末制片,重要用于粉末状药材及含药材粉末的成方制剂的观测。,药材粉末制备 取干燥药材,研磨或锉成细粉(一般应过80目以上药筛)。,制备粉末时需注意取样的代表性。例如:根类药材要切取根头、根中段及根尾等部位,并所有磨粉,过筛,混匀,不得丢弃渣头。,需观测淀粉粒时,一般干燥温度不能超过60,防止淀粉粒糊化,有碍观测。,59,制片注意事项,1)透化时加热温度不能过高,以防水合氯醛试液沸腾太过,使组织内带入气泡;加热时应将载玻片不停移动,以免受热不匀而炸裂。,2)如需观测菊糖等多糖物质,加水合氯醛试液不要加热。,60,2.,药材切面制片,-,徒手切片,是平常检查中最为常用、简便的切片措施。,切片前的药材预处理:,1、质地软硬适中的样品可直接进行切片。,2、质地坚硬的药材,需先软化后再切片,最以便,常用的措施为水浸泡。,3、过于柔软的样品,可将其浸入70%95%乙醇,中,约20分钟后可变硬些,再切片;或用硬物,包裹后切片。,61,五、中药材及成药,显微鉴别,实例,1.,橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别,苦杏仁石细胞特性,橙黄色,贝壳形,壁较厚,较宽一边纹孔明显,62,1.,橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别,苦杏仁 检查过程中个别厂家样品显微镜下找不到苦杏仁石细胞,怀疑未投料,采用HPLC法进行验证,未检测到苦杏仁苷,证明确实未投料。,尚有厂家的样品也找不到苦杏仁的石细胞,沟通时厂家坚称确实投料了,经HPLC法验证,可以检出苦杏仁苷后经理解,厂方使用的是沸水燀后脱皮苦杏仁。,63,紫菀 下皮细胞长方形,垂周壁波状弯曲,,有的含紫色色素。,64,1.,橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别,紫菀:,检查时有个厂家样品中找不到紫菀的显微,特性,采用TLC法验证也没有紫菀的特性斑,点,之后让厂方提供了投料药材,经鉴定,其投料药材不是紫菀正品。,65,2,一批造假西红花的鉴别,西红花,掺伪西红花,66,体视显微镜下,西红花,造假西红花,67,水浸泡后,西红花,造假西红花,68,西红花正品显微特性,表皮细胞,环纹及螺纹导管,69,造假西红花显微镜下构造,无定型物,植物纤维,一般卷纸显微特性,70,3,海金沙,合格品,不合格品,71,海金沙,孢子,孢子为四面体三角状圆锥形,孢子外壁有,颗粒状雕纹,72,海金沙,孢子,合格品镜检特性,不合格品镜检特性,总灰分高达,55%,73,4.,麦冬与山麦冬的鉴别,74,麦冬与山麦冬维管束比较,韧皮部束,16,22,个,麦冬横切面放大,40,倍,韧皮部束,7,15,个,山麦冬放大,100,倍,75,谢谢!,
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