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金黄色葡萄球菌的检测方法的.ppt

上传人:天**** 文档编号:6551678 上传时间:2024-12-13 格式:PPT 页数:24 大小:1.56MB
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资源描述

1、金黄色葡萄球菌的检测方法,简介,一,生物学特性,(,1,)典型的金黄色葡萄球菌为,球型,,直径,0.8m,左右,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度,37,C,,最适生长,pH 7.4,。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径,1-2mm,。,(,2,)血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在,10-15%NaCl,肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,,VP,反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝

2、酸盐,液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。,检测方法,1.,纸片法,2.,免疫学方法,3.,分子生物学方法,4.,直接平板计数法,一,.,纸片法,目前广泛应用的一种方法,用纸片、膜、胶片等作为培养基载体,将特定的培养基和显色物质附着在上面,通过观察微生物在测试片上面的生长、显色来测定食品中微生物。,采用快速测试片检测具有显著的优点:,a.,可测定少量检品,不需要配制试剂,不需要大量的玻璃器皿,操作简便迅速,b.,易于消毒保存,便于运输携带方便,价格低廉;,c.,除纸片外无其他任何废液废物,大大减少了工作量;,d.,可以在取样时同时接种,

3、结果更能反映当时样本中真实细菌数,防止延长接种时间时细菌繁殖造成的污染。,Title,Lorem ipsum dolor sit amet,consectetuer adipiscing elit.Vivamus et magna.Fusce sed sem sed magna suscipit egestas.,Lorem ipsum dolor sit amet,consectetuer adipiscing elit.Vivamus et magna.Fusce sed sem sed magna suscipit egestas.,技术优点:操作简单使用方便,避免了繁琐的操作。,技术缺

4、点:用时间比较长,无法准确定性及计数。,此方法现在应用于快速检测领域,美国,3M,公司,Petri film,为载体的测试片应用最为广泛。但其也存在一些问题:,Petri film,测试片上覆盖了一层薄膜,当样品粘液过多时会出现菌落的扩散和融合,影响计数;,Petri film,测试片面积较小,当菌量大于,250cfu,时,准确计数较困难;待测样品中含有的某些有机物可能使显色减缓。使目视效果下降,导致计数偏低。,二,.,免疫学方法,免疫学方法的基本原理都是抗原抗 体反应。,抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。,金黄色葡萄球菌特异的抗原能激发机体产生相应的特异性抗体。,在免

5、疫检测中,可利用单克隆抗体检测金黄色葡萄球菌的特异抗原,也可利用金黄色葡萄球菌抗原检测体内产生的特异抗体,两种方法均能判断机体的感染状况。,(,1,)抗原抗体技术,(,2,)免疫学方法技术,免疫学方法包括下面两个部分,(,1,)抗原抗体技术分析:,抗原抗体技术是免疫技术中的核心部,分,对于金黄色葡萄球菌检测全菌免,疫筛选抗体是很困难的事情,现在目,前市场有的大多都是对金黄色葡萄球,菌毒素类进行免疫得到的抗体,(,2,)免疫学方法技术分析:,上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧向层析技术。,酶联免疫技术广泛应用于实验室检测,由于一次可以检测多个样本,此技术多用于体外诊断,目前也广泛用

6、于食品安全。,(酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者,ELISA,法),三 分子生物学方法,金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶,分子生物学方法的技术主要分为:聚合酶链式反应,PCR,技术和实时荧光定量,PCR,(,rtPCR,)技术、生物芯片技术、测序技术。,分子生物学检测技术由于检测方法复杂,需要仪器设备及专业人员操作,对实验室环境有要求,检测成本高等因素,目前该技术没有广泛应用。,通过不断的研究和总结金黄色葡萄球菌快速增殖的环境和条件,在增菌液中进行扩增,使菌数达到胶体金的检测下限,用胶体金方法检测,操作简单,不用任何实验室仪器设备,检测试剂盒价格低廉,比较适

7、合金黄色葡萄球菌检测初筛。,检测方法:将待检测食品取,10g,食物样品在,10%NaCl,溶液中涮洗,5,次,加入增菌液增菌(配合,37,手持小仪器使用可缩短增菌时间),加入菌裂解液摇匀,取,3,滴点板。结果判断如下图示:,谢 谢,后面内容直接删除就行,资料可以编辑修改使用,资料可以编辑修改使用,主要经营:网络软件设计、图文设计制作、发布广告等,公司秉着以优质的服务对待每一位客户,做到让客户满意!,致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、,PPT,设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,

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