微生物的接种技术(斜面接种和平板接种).doc

晋兴职业中专学校食品教研组

公
开
教
学
材
料

课题：微生物的接种技术（斜面接种和平板接种）
授课教师：苏秀华
授课时间：2013年5月22日
授课班级：12食品班
授课地点：实训室
公开课级别：校级

课题：微生物的接种技术（斜面接种和平板接种）
食品组 苏秀华
一、学习目标
1. 认知目标：理解“接种”的概念，掌握斜面接种和平板接种的操作方法
2. 情感态度观念：培养科学严谨的实验态度，养成良好的职业习惯
3. 运用：能够正确规范地完成斜面接种和平板接种
二、教材分析
1. 教学重点：斜面接种和平板接种的操作
2. 教学难点：斜面接种和平板的操作规范化
3. 教学方法：讲授法、演示法、实验法
三、教学过程
（一）复习：
1.按照物理性质，培养基可以分为：
2.细菌培养基的配制流程为：
（二）新课：
1.实验目的
学习掌握微生物的几种接种技术；
建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节
2.实验说明
将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，则实验结果就不可靠，影响下一步工作的进行。
3.实验器材
器械和用品 酒精灯，火柴，试管架、接种环等接种工具
菌种和培养基 菌种：金黄色葡萄球菌； 培养基：普通琼脂斜面和平板
4.实验流程
准备琼脂斜面→斜面接种
准备琼脂平板→平板接种
5.操作步骤
（1）斜面接种

斜面接种是从已生长好的菌种斜面上挑取少量菌种移植至另一支新鲜斜面培养基上的一种接种方法。具体操作如下：
A、贴标签 接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等。贴在距试管口约2-3cm的位置。(若用记号笔标记则不需标签)。
B、点燃酒精灯。
C、接种 用接种环将少许菌种移接到贴好标签的试管斜面上。操作必须按无菌操作法进行。简述如下：
a.手持试管： 将菌种和待接斜面的两支试管用大拇指和其他四指握在左手中，使中指位于两试管之间部位。斜面面向操作者，并使它们位于水平位置。
b.旋松管塞 先用有于松动棉塞或塑料管盖，以便接种时拔出。
c.取接种环 右手拿接种环(如握钢笔一样)，在火焰上将环端灼烧灭菌。然后将有可能伸入试管的其余部分均灼烧灭菌，重复此操作，再灼烧一次。
d.拔管塞 用右手的无名指、小指和手掌边先后取下菌种管和待接试管的管塞，然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧得过烫)。
e.接种环冷却 将灼烧过的接种环伸入菌种管，先使环接触没有长菌的培养基部分，使其冷却。
f.取菌 待接种环冷却后，轻轻沾取少量菌体，然后将接种环移出菌种管，注意不要使接种环的部分碰到管壁，取出后不可使带菌接种环通过火焰。
g.接种 在火焰旁迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。从斜面培养基的底部向上部作“Z”形来回密集划线，切勿划破培养基。有时也可用接种针仅在斜面培养基的中央拉一条直线作斜面接种，直线接种可观察不同菌种的生长特点。
h.塞管塞 取出接种环，灼烧试管口，并在火焰旁将管塞旋上。塞棉塞时不要用试管去迎棉塞，以免试管在移动时纳入不洁空气。
i.将接种环灼烧灭菌。放下接种环，再将棉花塞旋紧。
（2）平板接种
以中指、无名指和小指托住培养皿下盖底部，用虎口及食指扶住上盖，再将斜面菌种管放于培养皿之上，以拇指压住。然后用接种环移取菌种按“Z”形划线。（其他细节参考斜面接种技术）
6 思考题：接种要注意哪些环节才能避免杂菌的污染？