同化激素类专题知识讲座.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,同化激素类专题知识讲座,同化激素类专题知识讲座,第1页,7.1,概述,同化激素类专题知识讲座,第2页,同化激素,亦称蛋白同化激素，是一个能够促进细胞生长与分化，使肌肉扩增，增强骨头强度与大小甾体激素。,多年来人工合成一些衍生物,其雄激素作用大为减弱,而同化作用则保留或增强,这些衍生物称同化激素。,同化激素类专题知识讲座,第3页,雄激素能显著地促进蛋白质合成,(,同化作用,),能使肌肉发达,体重增加,;,同时氨基酸分解降低,(,异化作用,),使尿素生成降低降低氮质血症。但使用雄激素常可出现男性化现象,因而限制了它应用。,同化激素主要用于蛋白质同化或吸收不足、降低亢进和损失过多等情况。畜牧业中使用同化激素,能够很快产生显著和直接经济效益,所以对生产者有很大吸引力。,同化激素类专题知识讲座,第4页,17.2,性状、药动学及残留情况,同化激素类专题知识讲座,第5页,17.2.1,内源性激素,性激素是由性腺所分泌，肾上腺皮质及胎盘也少有产生，他们属类固醇激素，包含雄激素、雌激素及孕激素。,睾酮、孕酮和雌二醇为最具活性天然激素，在畜牧业中应用主要作为生长促进剂。,同化激素类专题知识讲座,第6页,（,1,）雌二醇,该品为白色或乳白色结晶性粉末；无臭。在二氧六环或丙酮中溶解，在乙醇中略溶，在水中不溶。,内服后胃肠道吸收快，经肝脏首先代谢而失效。与血浆蛋白有广泛结合，与蛋白质结合少，主要与性甾体结合球蛋白。,同化激素类专题知识讲座,第7页,（,2,）孕酮,白色或几乎白色结晶性粉末，无臭，在氯仿中极易溶解，在乙醇、乙醚或植物油中溶解，水中不溶。,肠道吸收后快速在肝脏内失活。舌下、直肠、阴道给药有效，肌肉注射吸收快速，血中半衰期仅几分钟。,动物经孕酮处理后，可食组织中残留量极低。,同化激素类专题知识讲座,第8页,（,3,）睾酮,白色或类白色结晶粉末，无臭，在氯仿中极易溶解，在乙醇或乙醚中易溶，在醋酸乙酯中溶解，在植物油中略溶，在水中不溶。,同化激素类专题知识讲座,第9页,17.2.2,外源性激素,外源性激素是一类蛋白同化作用强、雄激素作用较弱睾酮衍生物。药理作用和不良反应与雄激素有许多相同之处，促进蛋白质合成能力强，雄性化不良影响较雄激素小。,同化激素类专题知识讲座,第10页,（,1,）去氢甲睾酮,蛋白同化作用强于雄激素样作用，孕激素样活性小,能促进蛋白质合成，抑制蛋白质异生，促进食欲，使肌肉生长，体重增加,促进钙磷在骨中沉积，加速骨骼生长,促进组织新生和创伤修复,降低血清胆固醇,同化激素类专题知识讲座,第11页,（,2,）司坦唑醇,蛋白同化作用强，为甲睾酮,30,倍，雄激素活性仅为其四分之一,能促进蛋白质合成，抑制蛋白质异生,降低血清胆固醇，甘油三酯水平,促进钙磷在骨中沉积，减轻骨髓抑制,男性不良反应小,主要用于预防遗传性血管性水肿,同化激素类专题知识讲座,第12页,（,3,）醋酸甲羟孕酮,作用与黄体酮相同,孕激素活性强,无雌激素和雄激素活性,有抗雌激素作用。,内服、注射都有效。内服在胃肠道吸收,在肝内降解。肌内注射后,23,天血药浓度到达峰值。血药峰值越高,药品去除越快。肌注,150mg,后,69,个月血中才检不出药品。,同化激素类专题知识讲座,第13页,（,4,）去甲睾酮,牛注射去甲睾酮后,脂肪中残留能被检出,并连续,73,天,;,尿中残留低于,1g/kg,。,内服后脂肪中残留未被检出,但尿中残留可检出。,同化激素类专题知识讲座,第14页,（,5,）醋酸甲地孕酮,本品为孕激素对垂体促性腺激素释放有一定抑制作用,但比左炔诺孕酮和炔诺酮为弱。不含有雌激素和雄激素样活性,但有显著抗雌激素作用。与雌激素适用,抑制排卵。,动物致畸试验表明对家兔含有死胎率增加和致畸作用。,同化激素类专题知识讲座,第15页,（,6,）醋酸美仑孕酮,内服时孕激素作用约为黄体酮,75,倍,无雌激素和雄激素活性,含有显著排卵抑制作用。,小母牛用药后,母药和代谢物主要由粪便排出。停药,6h,肝、脂肪、肾和肌肉组织中残留量分别为,915g/kg,、,78g/kg,、,1.21.8g/kg,和,0.51g/kg,。脂肪、肝、肾和肌肉中母药残留量分别占总残留,80%,、,37%,、,30%,和,45%,。,美国,FDA,要求休药期,48h,但欧盟禁止使用。,同化激素类专题知识讲座,第16页,17.3,样品处理,同化激素类专题知识讲座,第17页,17.3.1,提取,液体样品,(,奶、血液、尿液,),提取前需要脱脂肪,通常在,4,、,7000g,离心,除去浮在上层脂肪，用水或磷酸盐缓冲液稀释。,半固体样品,(,肌肉、肝、肾,),先要用切碎机或匀浆器进行组织破碎，提取均质，,40-60,下加热，使脂肪融化成液体。,同化激素类专题知识讲座,第18页,粗提取液净化方法包含液,-,液萃取、固相萃取法、液相色谱、免疫亲和色谱和超临界流体色谱等。为了到达更加好纯化效果,可将几个方法结合应用。,液,-,液萃取大多是去除水溶性提取液中脂肪,比如,乙腈或甲醇提取液中加入正己烷或异辛烷,可脱去脂类物质。,17.3.2,净化,同化激素类专题知识讲座,第19页,固相萃取法,固相萃取法含有简便、快速、经济等优点,已广泛应用于激素类药品净化。正相柱常见硅胶、氧化铝、氰基型和氨基型吸附剂,反相柱常见,C,18,和,C,8,吸附剂。,固相萃取柱净化效果有时并不能满足质谱检测要求,所以有些人将固相萃取法与色谱法相结合,对样品提取液作更高纯化。,同化激素类专题知识讲座,第20页,17.4,分析方法,生物样品中同化激素类分析主要采取色谱法,包含薄层色谱法、气相色谱法和液相色谱法。,同化激素类专题知识讲座,第21页,17.4.,1 薄层色谱法,薄层色谱法含有快速、经济等优点,适合残留分析初筛。为了提升薄层色谱分析灵敏度和选择性,在显色剂研究上做了大量工作,一些与雌酮、雌二醇、己烯雌酚、玉米赤霉醇和玉米赤霉烯醇发生显色反应染料被相继报道。,重氮基染料与雌激素反应,形成重氮基衍生物、酚基和二羟基苯甲酸内酯类雌激素衍生物,它们色泽强度各不相同。另外,科林斯红和快蓝BB与激素反应成盐后,含有很强色泽。,同化激素类专题知识讲座,第22页,17.4.2,气相色谱法,20世纪80年代出现毛细管GC使GC-MS结构简化、仪器成本下降。毛细管GC和SIM检测方式使GC-MS发展成为一个成熟、集高效分离、高灵敏度检测和结构判定为一体分析技术。,同化激素及其代谢产物结构中含有多个羟基或酮基等极性基团,为高极性、难挥发、热稳定差化合物,GC法难以直接分析,所以需衍生化使形成易挥发、热稳定性好衍生物,以提升其色谱性能。,同化激素类专题知识讲座,第23页,17.4.3,液相色谱法,HPLC比GC更常见于激素分析。分析极性较大雌激素结合物常采取阴离子交换色谱法或反相离子对色谱法,尤其是后者分离效果更加好。,环糊精色谱也被用于雌激素分析,该法能有效地分离结构异构雌激素结合物。,雌二醇和雌三醇在200nm处有一中等强度较尖紫外吸收峰,在280nm处有一较宽弱吸收峰。,同化激素类专题知识讲座,第24页,孕酮和睾酮在,240nm处有较强紫外吸收,紫外检测RP-HPLC法是分析生物样品主要方法。普通紫外检测可取得足够灵敏度,但荧光检测更适合于组织样品测定。,RP-HPLC和NP-HPLC均被用于雄激素分析。体液中睾酮含量较高时,可采取紫外检测;不然,可将睾酮与衍生化试剂反应制备成荧光衍生物后再用紫外检测,或采取高灵敏度荧光检测器进行检测。,同化激素类专题知识讲座,第25页,Lagana等报道LC法检测鸡肉、牛肉和牛肝中9种同化激素(群勃龙、睾酮、孕酮、雌二醇、己烯雌酚、左环十四酮酚、玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮、玉米赤霉醇)残留。,Andresen等报道了LC法测定脂肪中醋酸美仑孕酮、醋酸甲地孕酮和醋酸氯地孕酮残留量。,万美梅等采取LC-电化学检测法测定动物组织中己烯雌酚残留量。,同化激素类专题知识讲座,第26页,Davoli等报道了在线萃取液相色谱/快速原子轰击质谱法测定鼠和牛尿中己烯雌酚残留。,Fang等报道了LC-MS/MS法测定鸡和兔肝中玉米赤霉醇残留量。,秦燕等建立了不一样动物肌肉中类固醇同化激素(表睾酮、丙酸睾酮、19-去甲基睾酮、甲基睾酮、孕酮、甲羟孕酮、雌二醇、雌三醇、炔雌醇、雌酮)多残留LC-MS/MS分析方法。,同化激素类专题知识讲座,第27页,