志贺氏菌检验方法.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,志贺氏菌检验方法,1,志贺氏菌简介,志贺氏菌检验,1,2,2,生物学性状,志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短小，长约,2-3 m,宽,0.5-0.7 m,。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。为兼性厌氧菌，在有氧和无氧条件下均能生长；最适生长温度为,36,，最适,pH,为,7.2,7.4,；,36,培养,18-24,小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约,2mm,，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。,3,致病因素,志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒素，外毒素。志贺氏菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞表面，继而在侵袭蛋白作用下穿入上皮细胞内，一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素。志贺氏菌,A,群,型及部分,II,型菌株还可产生外毒素，称志贺氏毒素。,4,志贺氏菌属（,Shigella,）是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。可经由食物，水，日常接触，苍蝇等传播。,5,抵抗力,志贺氏菌属在外界环境中的生存力，对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱，对酸敏感。,一般在潮湿土壤中能存活,34,天，,37,水中存活,20,天，在粪便内（室温）存活,11,天。日光直接照射,30,分钟，,56-6010,分即被杀死，对高温和化学消毒剂很敏感，,1%,石炭酸中,15-30,分钟即被杀死，对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。,6,志贺氏菌检验流程图,36,，,6,h,8,h,41.5,，,16 h,20 h,厌氧培养,XLD,琼脂,MAC,琼脂,或志贺氏菌显色培养基,36,，,20 h,48 h,挑取可疑菌落,TSI,，葡萄糖半固体，营养琼脂斜面,血清学分型,生化鉴定,志贺氏菌属分群及分型结果,报告,检样,25 g,（或,25 mL,）样品,+,志贺氏菌增菌肉汤,225 mL,检样,25 g,（或,25 mL,）样品,+,GN,增菌液,225 mL,7,XLD琼脂平板,志贺氏菌,沙门氏菌,菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。,粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径,1 mm,2 mm,。,8,9,麦康凯琼脂平板,无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径,2 mm,3 mm,。,10,培养物中出现下述情况之一者即可弃去：,a,）在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长；,b,）发酵乳糖或蔗糖的；,c,）不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的；,d,）产气的（福氏志贺氏菌,6,型可产生少量气体）；,e,）产生硫化氢的；,f,）有动力的培养物,11,2,志贺氏菌,3,沙门氏菌,4,大肠杆菌,12,13,血清学分型,凡疑为志贺氏菌，,挑取营养琼脂斜面上的培养物，做玻片凝集试验。,先用,4,种志贺氏菌多价血清检查，如果由于,K,抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查；,如果呈现凝集，则用,A1,、,A2,、,B,群多价和,D,群血清分别试验。,如系,B,群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见附表。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。,14,4,种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价,1,、,2,、,3,分别检查，并进一步用,1,15,各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌,3,12,型多价血清及各型因子血清检查。,15,进一步的生化试验,1.VITEK GNI+(,革兰氏染色，氧化酶,),2.API 20E(,革兰氏染色，氧化酶,),3.,志贺氏菌生化鉴定套装,16,Thank You!,17,