显微镜使用与维护常见问题100问_35页.pdf

中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）1 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）1 中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）2目录目录1 问 显微镜的使用应该注意哪些事项？.12 问:荧光显微镜的汞灯应该怎么用?.13 问:体式荧光的汞灯怎么调中心?.14 问:相差该怎么调?.25 问:目镜和镜头该怎么擦?.26 问:光阑的作用是什么？.27 问:尼康显微镜三目怎么不能照相呢？.38 问:荧光照明不均匀是什么问题?.39 问:照相时遇到的问题.310 问:荧光灯泡的寿命有多少？.311 问:大家如何清洁显微镜呢？.412 问:如何用脱脂棉.613 问:怎样来使用与保养显微镜？.614 问:成茂显微镜操作器漏油该怎么办?.915 问:荧光滤色块脏了怎么办？.916 问:擦镜头大家是用棉签?还是用镊子+擦镜纸?.917 问:如何解决摄像相显微镜未检测到图象卡的问题?急!急!急!.918 问:那里有质量好的吹气球卖?.919 问:照相总有脏点，判断不出来倒底哪里脏.1020 问:我的多色荧光滤色块效果不好了,为什么?.1021 问:X-cite 光源需要调中心吗?.1122 问:X-CITE 光源用的液体光纤是消耗品吗?.1123 问:X-CITE 灯泡的寿命是多少?.1124 问:显微镜用什么溶液擦镜油?.1125 问:倒置显微镜微分干涉的影响因素.1126 问:体视镜照相时的光线不均匀.1127 问:请问，CCD 粘上灰了用什么擦？.1228 问:显微镜长霉了怎么办？.1229 问:大家平常都用什么牌子的显微镜油?.1230 问：新换的汞灯,好象不够亮,什么问题.1231 问：求助,40 倍物镜看不清楚了,什么问题.1232 问：如何解决失焦问题.1233 问：目镜测微尺怎么放到目镜里？.1334 问：倒置显微镜配高倍物镜后，物镜撞载物台怎么办？.1335 问：显微操作，注射针中填充的是什么油比较好？既能做到稳定又能保证精确.13中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）336 问：显微镜照相 中间清楚边缘模糊怎么解决？.1337 问：体视镜的透射底座有哪些影响成像的因素？.1338 问：配相差的时候有个对中目镜，怎么用的？.1439 问：显微镜不亮灯了？什么问题？.1440 问：如何清洗镜头上树脂？.1441 问：有关 CX41 的载物台旋钮.1442 扫地老太太来了。.1443 问：倒置 40 倍看荧光时问题.1544 显微镜常见故障排除.1545 问：怎么样利用目镜测微尺来测量目标物的实际长度，没有分析软件，无法定标？.1646 问：请问荧光衰减器的作用.1647 问：物镜前端的光栏是干什么用的?.1748 问：我的倒置荧光的亮度比人家正立的荧光亮度低,WHY?.1749 问：又是相机问题，这次是关于白平衡调节.1750 问：荧光显微镜的汞灯中心如何调节？.1851 问：金相显微镜使用要注意哪些事项？.1952 问：盖玻片一般的折射系数是多大？厚度是多少？有更好的盖玻片吗？.2153 问：聚光镜脏了会影响成像质量么？.2154 问：哪些光学部件脏了会影响成像质量？.2155 问：如何解决照相和观察不齐焦的问题？.2256 问：活细胞长时间观察时，焦点漂移问题，大家是怎么解决的？.2257 问：为什么显微镜在 10X 看没有问题，40X 看的时候看到一边有黑边？.2258 问：荧光显微镜串色了，紫外通道（DAPI）能看到 CFP，怎么办？.2259 问：不同公司物镜是否可以通用？.2360 问：为什么看的和拍出来的图像不一样？.2361 问：视野发黄是怎么回事?.2362 问：显微镜调焦钮有些紧,该如何解决?.2363 问：大家的显微镜多久擦拭一次？.2364 问：镜头是用脱脂棉擦好，还是用擦镜纸好？.2465 问：调焦机构滑到最下面了,没办法调上去,什么问题?.2466 问：实验室的 40 倍物镜不小那样蹭到了油，怎么都擦不干净，请问 DX 们怎么办？.2467 问：显微镜使用中容易坏的部分有哪些？.2468 问：汞灯爆了，怎么处理？.2469 问：ccd 开了一小时左右，屏幕就变成花花绿绿的世界了。.2570 问：我们配了一个 ludle 的电动载物台，没动它，但是照相时发现它会自己动。慢慢地漂，是不是出毛病了？.2571 问：双目生物显微镜看起来头晕，是什么原因？.2572 问：显微镜视野中间清楚，但边缘模糊时为什么？.2573 问：目镜测微尺上有灰尘，该怎么擦？.2574 问：荧光显微镜目镜下和照片背景接不够黑，怎么办？.2676 问：荧光怎么这样弱？.2677 问：载物台 XY 移动特别松是什么故障？.2778 问：普通 12V100W 灯泡需要调中心吗？.27中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）479 问：怎么可以延长卤素灯泡的使用寿命？.2780 问：在调节相差或者 DIC 光路前一定要调整科勒照明吗？.2781 问：聚光镜的数值孔径该如何调节？.2782 问：显微镜的电压一般调到多少比较合适？.2783 问：显微镜的使用环境有什么要求？.2884 问：荧光显微镜的光阑有什么作用？.2885 问：物镜前端的光栏怎么用?.2886 问：什么是显微镜的描绘器？.2888 问：怎么在显微镜上接照相机？.2889 问：4 倍物镜观察时，视野有严重的黑边，怎么办？.2890 问：带着眼镜可以看显微镜吗？.2891 问：相差显微镜上有个绿色的玻璃片是干什么用的？.2992 问：显微镜上配置的灰色滤色片上，有数字 25、50 是什么意思？干什么用？.2993 问：我们实验室的荧光显微镜看明视野时，背景变的特别红？.2994 问：CCD 拍出来的像只有目镜观察里的 30%，怎么办？.2995 问：我再用荧光显微镜观察时背景总有杂光干扰，怎么解决？.2996 问：体视镜看胚胎，光太热损伤了样品.2997 问：荧光显微镜电源打开了，但没有光？.2998 问：看显微镜时总容易把片子压碎，怎么办？.2999 问：显微镜自己都可以清洁哪些部件.29100 问：有关镜头上树脂的清洗.29 中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）1 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问问 1 问问 显微镜的使用应该注意哪些事项？显微镜的使用应该注意哪些事项？答：答：显微镜是光学仪器，尤其科研实验室使用的进口显微镜更动不动数万至数十万元，也有公司的销售人员宣称他们的一只物镜比一 1辆汽车还要值钱。所以使用时必须小心，有以下一些方面尤其注意。（1）低倍镜到高倍镜观察 低倍镜头的工作距离较长，确定好视野后转动到高倍物镜镜时，一定要从侧面仔细察看，此时经常因为高倍镜头工作距离过小而使镜头与载物台或载玻片撞上，如果用力过猛，非常容易伤害到镜头。对于此种操作，可以先降低载物台，转换物镜，再用微调垂直调整焦距。（2）油镜观察 油镜的工作距离很短，一般在 0.2mm 以内，因此使用油浸物镜时要特别小心，一定要使用微调调焦，否则非常容易一个不小心将载玻片压碎。将片子压碎倒是没有什么大问题，可是玻璃碴损害到物镜你就惨了！（3）非油镜观察 油镜因为在设计上考虑到油，所以密封都比较严密；但是对于不是油镜的物镜密闭程度就没那么好了。所以使用完油镜，改用其它物镜的时候，物镜很容易碰到玻片上的油，尤其是跟油镜相邻的高倍镜头，比如 40 倍。物镜进油是很麻烦的，几乎无法处理。即使返厂，也是把物镜整个拆开，重新清洁。公司可能要跟你收一只新物镜的费用啊！（4）清洁 用脱脂棉签蘸乙醚酒精混合液（7：3）在镜头圆心从内到外划圈。注意：棉花要缠好，千万不要让硬的签儿触到镜头表面；棉花用过一次就换新的，防止小沙粒划破镜头表面镀膜；擦镜头的原则是：宁可擦不干净，也不要擦坏；实在不行还可以找公司的人来擦嘛！2 问问:荧光显微镜的汞灯应该怎么用荧光显微镜的汞灯应该怎么用?汞灯好贵呀,好几千块钱一个,才能用 200 小时,有可以节约使用的办法吗?高手指点一下 答答:合理安排使用时间，尽量减少开关次数。不要频繁开关，打开后半小时内不要关，关闭后半小时内不要开 3 问问:体式荧光的汞灯怎么调中心体式荧光的汞灯怎么调中心?体式荧光的汞灯怎么调中心?好象和正立和倒立显微镜的方法不一样,调的半天调不好啊,郁闷!答答:如果有调节工具的话就很容易了。没有的话把灯箱拆上来，对着墙会看到两个灯泡的影子，把这两个影子调到中心并且重合。中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）24 问问:相差该怎么调相差该怎么调?我的细胞工作站,相差的效果总不是太好,斑竹简单指导一下怎么调?注意那些地方?答答:基本部件：相差物镜、明视野与相差兼用的多用途聚光镜、对中望远镜、绿色滤光片。调整方法如下：a.在库勒照明系统调整好的基础上，用明视野方法把样品调焦清晰；b.把聚光镜转到 Ph1 对准转盘刻度线位置，选用 10相差物镜，换上待观察的透明样品；c.拔掉其中一个目镜，换上对中望远镜，并调焦于视野中的两个相差环上（物镜的黑色相差环和聚光镜的透光相差环）；d.视野中的两个相差环不一定重合，调节聚光镜上的两个调节装置（调整相差环左右位置的调节杆和调整前后位置的摩擦式转钮），使透光环作前后左右移动而与黑环重合；e.调整好后，换回观察用目镜，将绿色滤光片按入光路中，即可观察到样品的相差像；f.有 20和 40物镜观察时，聚光镜应设在 Ph2 位置上，用 100 物镜时，聚光镜应设在 Ph3位置上。适用范围：适用于观察透明、未染色或不能染色的样品，如各种细胞、活组织、未染色或不染色的组织切片、水生生物等。5 问问:目镜和镜头该怎么擦目镜和镜头该怎么擦?我用擦镜纸和酒精和乙醚的混合溶液擦目镜和物镜,但擦的效果不理想,上面总有灰尘擦不掉,是不是我擦的方法不对?那位 DX 有经验指点一下!答答:应该是用擦镜纸包住木条，蘸上上面说的混合溶液(酒精和乙醚的混合溶液)，从镜头的中间开始，螺旋式往外擦，每次的纸只能用一次，不能反复使用，具体看图 1 和 2：6 问问:光阑的作用是什么？光阑的作用是什么？请教斑竹，透射光的视场光阑、聚光镜的孔径光阑，荧光的视场光阑、孔径光阑分别具有什么功能，对观察的效果有什么影响，如何才能正确地调节以得到最好的观察效果？中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）3答答:在光学系统中，不论是限制成像光束的光孔，或者是限制成像范围的光孔或框，都统称为“光阑”。光阑属于光学仪器（光具组）中的一种光学元件。按其作用的不同，分为孔径光阑和视场光阑两种。孔径光阑为限制入射光束大小的孔，其大小和位置对透镜所成像的清晰程度、正确性和亮度都有决定性的作用。如照相机镜头上的圆形光阑（俗称光圈）。视场光阑是限制成像景物的面积大小（视场）所用的孔。例如照相系统中的底片框。7 问问:尼康显微镜三目怎么不能照相呢？尼康显微镜三目怎么不能照相呢？我们实验室有一台 NIKON diaphoto 2 的三目显微镜，观察切片没有问题，最近配了一台 SPOT 数码 CCD，但是 CCD 上怎么检测不到图像呀 答答:硬件上：光路转换是否已经正确转换到摄像光路，一般是拉杆或转轮式的；软件上：CCD 控制软件的自动曝光是否打开，如果设置太高或太低有可能会采集不到图像或视野过亮掩盖住图像；如果以上都 OK 还有可能是齐焦的问题。就是 CCD 成像与观察时的 Z 轴位置不一样，这时需再调焦。8 问问:荧光照明不均匀是什么问题荧光照明不均匀是什么问题?我实验室的荧光显微镜，视野图象左边总是不如右的亮?不知道是什么原因,郁闷中 答答:1）汞灯没调好，不在中心，也有可能孔径光阑不在中心。2）从汞灯发出的光经过集光镜（对汞灯起活汇集作用）、孔径光阑、视野光阑、荧光光路、荧光滤色镜组、物镜、样本、物镜、目镜进入眼睛，需要调节所有这些部件的光轴位于同一中心，一般需要使用者调节的只是使灯泡及灯泡组件。9 问问:照相时遇到的问题照相时遇到的问题 我们的显微镜观察时一切正常，但照相时视野里一半黑一半亮，不知道什么原因。请厉害的大侠指教。答答:原因是因为整个光路系统中某个可移动的部件没有到位。包含照相转换，荧光防护屏，聚光镜转盘，中灰片的选择位置等等，沿着光路从上往下一个个检查可移动的部分。10 问问:荧光灯泡的寿命有多少？荧光灯泡的寿命有多少？中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）4我们实验室用的是蔡斯的共聚显微镜，买的时候送了我们十个汞灯光泡，随机器一起来的。开始的几个每个都能用 7、8 百个小时，公司的人说理论寿命是 200 小时，可是后面的几个最多只能用 300 多小时，还有一个用了一百多小时激发出的光就很暗了。这是怎么回事？答答:汞灯使用注意事项 汞灯使用注意事项 目前通常使用的为 50W 超高气压汞灯，灯管内通有一对钨电极和液态汞（室温下附在管壁上），未点燃时，管内气压很低，在灯管的两电极间施加电压角发点燃后，汞气化为汞蒸气形成汞弧而产生强光，温度升高，管内气压迅速升到 10 个大气压。由于是高气压的气体放电，必须了解其特性才能安全地使用汞灯。以下来自百度搜索 a.汞灯接通电源后需要 10-15min 预热时间，汞才能充分汽化并形成汞弧，产生高亮度而稳定的激发光。因此，观察前要提早通电；b.汞灯在使用过程中，不要随意开关汞灯的电源；c.关掉汞灯电源后，必须等待 15-20min，待汞灯自然冷却后才可再次接通电源，违反这一操作规定时，将会造成严重后果！由于汞灯内的汞蒸气未完全液化，汞蒸气内阻很小，一旦通电在两电极间施加电压，汞灯内形成强大的电流，轻则烧断保险丝或烧毁汞灯电源中的扼流圈，重则汞灯爆炸，汞蒸气弥漫整个实验室，造成工作人员中毒，不仅损失了汞灯，还会炸毁灯室内的集光-聚光部件。d.汞灯的使用寿命一般只有 300h，使用得当可达 600h，使用寿命与开关的次数成反比，应集中一批样品作 2-3h 的观察。汞灯价格及昂贵，应珍惜使用。e.汞灯寿命终结的标志是点燃困难，灯管发黑。11 问问:大家如何清洁显微镜呢？大家如何清洁显微镜呢？答答:光学器件清洁程序 对精密光学器件的清洁有可能降低器件的性能，不适当或不必要的清洁容易破坏器件的表面镀膜。正确取放器件并将器件保存在专用容器中，将最大限度地减少清洁次数和器件被损坏的可能。A、推荐清洁材料推荐清洁材料 聚乙烯实验室用手套 光学级的透镜清洁纸 脱脂长绒棉 根据环境按比例调配酒精、乙醚溶液进行光学零件表面清洁工作。推荐比例如下：a 室温：18-24时 乙醇：35 乙醚：65 b 室温：12-18时 乙醇：25 乙醚：75 中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）5B、推荐清洁步骤、推荐清洁步骤 1、用清洁空气吹掉表面浮尘。如果不能吹干净，取两张镜头纸裹在棉签上或将镜头纸折叠使之比要清洁的面积稍大。2、擦拭光学零件表面时，首先应用石油醚将毛砂面和框擦干净。3、擦拭圆形零件时，棉花球应从中心向边缘作螺旋线移动，同时棉花球本身也应转动，并顺势将棉球从镜片表面移出，不要在镜片边缘停留，以免留下印迹，如果利用回转器擦拭，则擦拭时，棉球应由中心向边缘作直线移动，棉球本身同时转动（棉球的自转量应略小于一周为宜）。4、擦拭棱镜时，可将棉球横放于被擦拭的表面，以直线形式进行擦拭。5、应在相对清洁的房间内擦拭，并用脱脂长绒棉擦拭，棉球上所含的清洗液不宜过多，擦拭时应在分划板刻线的交叉方向移动擦拭，以免将刻线内的填料层擦掉。6、在擦拭胶合光学零件时，棉球蘸混合液不应过多，以免溶剂侵入胶合层引起脱胶。7、镀铝加保护膜的反射零件，如果保护膜比较牢，可用蘸少许混合液的棉球或仔细脱脂的砂布擦拭。8、棉球应卷好，卷棉球的竹棍头部不应外露，以免划伤零件。棉球的大小和形状应随零件的大小和种类不同，一般是圆形零件用圆柱形棉球，平面零件用扁平形棉球，除镀膜表面（特别是反射镁）用松软的棉球外，其余情况下应把棉球卷紧。9、蘸混合剂的棉球侵入溶剂内时请不要超过三分之一的棉球长度。擦拭小贴士：擦拭小贴士：?擦拭前，操作人员应用洗涤液仔细清洗双手，并用脱脂过的毛巾擦干。?操作人员应将室内的一切用具擦拭清洁，有关与光学零件接触的工具、夹具，应进行脱脂。?一个棉球只能用来擦拭一遍，用过的棉球，请不要蘸溶剂重复使用。?清洁光学器件之前，请去掉手上的戒指及其他饰物，仔细清洗手部并戴上手套。?工作中，如手出汗或接触油脂后，需按照要求重新清洗双手。?擦拭光学零件，如必须用手拿光学零件的抛光面，请对戴着的手套进行脱脂处理。?擦拭带框的光学零件时，应注意不使污垢附着在靠框的周围或框上挂有纤维，不带框的光学零件应不使污垢附着在毛砂面上。图一:清洁工具:中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）6 12 问问:如何用脱脂棉如何用脱脂棉 答答:卷棉杆的使用方法：把脱脂棉拽的越蓬松越好，然后使卷棉杆的长轴与棉纤维方向平行，尖端插入棉絮中，顺势卷动（卷动中使卷棉杆与棉纤维垂直），棉纤维就卷到了卷棉杆上，根据所需卷成棉球的大小把缠绕在棉杆上的棉花拔出来。卷成棉球还需一种特殊工具，取一块干净的绸布，蒙在一个广口瓶上，四周用绳子扎紧。把上述缠有棉花的棉杆放在扎紧的绸布上转动，棉花就会缠得越来越紧，缠到适合的松紧度，棉球杆就做好了。棉球杆蘸取清洁液后，还可以在绸布上转动，以挤去多余的清洁液 13 问问:怎样来使用与保养显微镜？怎样来使用与保养显微镜？答答:中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）7一、使用一、使用 1观察前的准备 （1）置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为一寸左右。镜检者姿势要端正，一般用左眼观察，右眼便于绘图或记录，两眼必须同时睁开，以减少疲劳，亦可练习左右眼均能观察。显微镜构造见右图。（2）显微镜是光学精密仪器，在使用时要特别小心，使用前要熟悉显微镜的结构和性能，检查各总零件是否完好无损。镜身有无灰尘，镜头是否清洁，做好必要的清洁和调整工作。（3）调节光源 对光时应避免直射光源，因直射光源影响物像的清晰，损坏光源装置和镜头，并刺激眼睛。晴天可直接用窗外的散射光，如明暗天气，可用 830W 日光灯或显微镜灯照明 调节光源及光照的一般步骤：a 将低倍物镜旋至镜筒下方，旋转粗调节轮，使镜头和载物台距离约为 0.5cm 左右。b 上升聚光器，使与载物台表面同样高。否则使用油镜时光线较暗。c 左眼看目镜，调节反光镜镜面角度（反光镜有凹平两面，光线较强自然光源，宜用平面镜；光线较弱的天然光源或人工光源，宜用凹面镜。）对光使全视野内为均匀的明亮度。凡检查染色标本时，光线应强；检查未染色标本时，光线不宜太强。可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调节光线 2低倍镜观察 检查的标本须先用低信镜观察，因为低倍镜视野较大，易发现目标和确定检查的位置。（1）先将标本玻片置于载物台上，并将标本部位处于物镜的正下方，转动粗调节轮，下降物镜或上升载物台使物镜至标本 0.5cm 处。（2）左眼看目镜，同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮，当在视野内出现物象后，改用细调节轮，上下微微转动，直至视野内获得清晰的物象。然后认真观察标本各部位，确定并将需进一步要观察的部位移视野中央，准备用高倍镜观察。3高倍镜观察 将高倍镜转正至正下方，在转换接物镜时，需用眼睛在侧面观察，避免镜头与玻片相撞。然后由接目镜观察，再仔细调节光圈和聚光镜，使光线的明亮度适宜，同时再仔细正反两方向微转动细调节轮，直至获得清晰的物象后为止，找到最适宜于观察的部位。需进一步要观察的部位移视野中央，准备用油镜观察。4油镜观察：（1）上升聚光器，全开虹彩光圈 （2）用粗调节轮提起镜筒或下降载物台，转动转换器将油镜转至镜筒正下方。在玻片中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）8标本的镜检部位滴上一滴香柏油。右手顺时针方向慢慢转动粗调节轮使镜筒下降或载物台上升，与此同时，从显微镜的侧面观察使油镜浸入油中，直到几乎与标本接触时为止。注意不要压到标本，以免压碎玻片，甚至损坏油镜头。（3）从接目镜内观察，进一步调节光线，使光线明亮，再用粗调节轮将镜筒徐徐上升或将载物台徐徐下降，直到视野内出现物像为止，然后用细调节轮校正焦距。如油镜已离开油面而仍未见物象，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作至物象看清为止。换片 观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，需先将高倍物镜（或油竟镜）转回到低倍物镜，取出标本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在高倍物镜（或油竟镜）下换片，以防损坏镜头。二、保养二、保养 （1）油镜使用完毕，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再取一张擦镜纸，滴上少量的二甲苯擦拭，然后再取另一张新擦镜纸将镜头上残留的二甲苯擦净。否则粘固透镜的胶质会被二甲苯溶解，日久镜片易移位脱落。（2）下降聚光器，打开虹彩光圈，使反光镜垂直于镜座，以免积聚灰尘。（3）用绸布将镜身擦拭干净（切不可用手擦拭），除去灰尘、油污、水汽，以免生锈长霉。（4）使显微镜的各部件恢复回原位，下降镜筒，使物镜呈“八”字形置于载物台上，然后将显微镜送回镜箱中。（5）显微镜应存放在干燥阴凉的地方，不要放在强烈的日光下暴晒，霉雨季节应在显微镜箱内放置干燥剂（硅胶），如长时间不用，则光学部分应卸下放在干燥器中，以免受潮生霉。（6）显微镜应严禁与挥发性药品或腐蚀性药品放在一起，如碘片、盐酸、硫酸等药品。三、注意事项三、注意事项 1拿取显微镜必须一只手拿着镜臂，一只手托着镜座，并保持镜身的上下垂直，应避免震动，轻放台上。切不可一只手提起，以防显微镜、反光镜功目镜坠落。2使用前应将镜身擦拭一遍、用擦镜纸将镜头擦净（切不可用手指擦抹）。若遇到镜台或镜头上有干香柏油，可用擦镜纸沾取少量二甲苯将其擦去。3使用时如发现显微镜操作不灵活或有损坏，不要擅自拆卸修理，应立即报告指导教师处理。4注意保护镜头，切不可压碎标本被片，损坏镜头。5显微镜使用完毕，应登记显微镜使用卡经指导教师检查后放回镜箱。中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）914 问问:成茂显微镜操作器漏油该怎么办成茂显微镜操作器漏油该怎么办?成茂显微镜操作器用了 3 年,可是最近发现有点漏油了,怎么解决呢?答答:漏油很难处理,一般是需要换整个油路系统。15 问问:荧光滤色块脏了怎么办？荧光滤色块脏了怎么办？换滤色块的时候不小心把滤光片上印上手印了，怎么办啊？答答:1.首先使用一股干燥的气流将滤色片表面的异物吹掉。2.再用不含棉绒纸（lint-free cloth，我个人理解为擦镜纸或长纤维脱脂棉）轻轻地擦拭表面。3.最后用不含棉绒纸沾少许无水酒精擦拭。这样可以达到一个干净的效果，并对光学部件没有损害。16 问问:擦镜头大家是用棉签擦镜头大家是用棉签?还是用镊子还是用镊子+擦镜纸擦镜纸?擦镜头大家是用棉签?还是用镊子+擦镜纸?另外问一下哪里有好用的镊子卖?答答:镊子太危险，如果你没有接受到专业培训，建议你用棉签.17 问问:如何解决摄像相显微镜未检测到图象卡的问题如何解决摄像相显微镜未检测到图象卡的问题?急急!急急!急急!请各位指教.当我使用可射相显微镜时,打开与其相连的电脑上的显微分析,然后确定进入时,界面显示为-未检测到图象卡!-即不能进行射相了.请问各位这是什么原因,如何解决,谢谢了!答答:首先到电脑的硬件管理器去查一查,一般可以找到,看看是不是驱动程序没装好。如果没有就把电脑打开(电源关掉).把 PCI 卡拔出来重装.(注意重装是最后的选择)。如果是 1394 卡也一样,不过 1394 卡要特别注意，有的 1394 卡是不能用的。18 问问:那里有质量好的吹气球卖那里有质量好的吹气球卖?国产的吹气球质量好差呀,那里有质量好的进口吹气球卖?答答:捷特火箭形吹气球效果非常好。不过价格也不便宜，40-50 元一个 中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）10（不晓得是不是广告哎：）19 问问:照相总有脏点，判断不出来倒底哪里脏照相总有脏点，判断不出来倒底哪里脏 答答:答案 1 用排除法：如果老是有脏的东西的话，我想不会是在载玻片上的；如果脏的东西视野里和照片中是同一处，说明相机是干净的，一定是显微镜上有脏东西但肯定不是目镜脏了，因为 CCD 照相是不通过目镜的；如果是物镜脏了的话，通过换不同倍数的物镜可以检测是否是物镜脏了；如果不是物镜脏了的话，那就检查一下中间变倍，检查方法和物镜一样，更换不同倍数再看一下；如果没解决再看一下观察筒里面有没有灰；如果还没解决，直接拨打客服找厂家，教给他们解决了！答案 2 三步搞定：1、空载时转换物镜看视野脏点是否依然存在？2、旋转 CCD 接口连接处与显微镜转一定角度、观察图像脏点是否位移？3、拆除所有物镜至摄像接口间光路中的所有滤色片、偏振片等。20 问问:我的多色荧光滤色块效果不好了我的多色荧光滤色块效果不好了,为什么为什么?我用多色荧光滤色块同时看三种颜色的荧光,现在发现效果没有以前好,换了汞灯后效果还是改善不大,大家说这东西有寿命,第一回听说这么东西还有寿命.请教高手真是这么回事吗?答答:软镀膜的都有寿命.一年左右就要 OVER.中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）11 21 问问:X-cite 光源需要调中心吗光源需要调中心吗?X-cite 光源需要调中心吗?答答:不用，每台 X-CITE 都在显微镜适配器的位置作了中心校准。22 问问:X-CITE 光源用的液体光纤是消耗品吗光源用的液体光纤是消耗品吗?答答:是消耗品，寿命大概是 1 年左右。23 问问:X-CITE 灯泡的寿命是多少灯泡的寿命是多少?答答:2000 小时,灯泡有记忆功能,可以准确记录使用时间。24 问问:显微镜用什么溶液擦镜油显微镜用什么溶液擦镜油?答答:一般用酒精和乙醚的混合溶液，酒精：乙醚 3：7，要分析纯的,然后用擦镜纸轻轻擦拭,纸不可反复使用.25 问问:倒置显微镜微分干涉的影响因素倒置显微镜微分干涉的影响因素 我们的倒置显微镜在看微分干涉时，总是调不好效果，请问斑竹有什么可以影响效果？答答:1 一般的 DIC 都只适用于玻璃介质，如果你用的是塑料的 multi-well plate，基本上得到的图像不会很理想。2 是玻璃介质的话，需要用的也是 0.14-0.17mm 的盖玻片朝向镜头。如果镜头是有correction ring 的话，调到合适的位置也比较重要。3 DIC 开始之前校准。起偏器和检偏器需要正交；Condenser turret 上选的应该是对应物镜的位置，比如DIC 40 x；物镜下的DIC prism需要调节到一个 DIC 效果最好的位置，一般来说，跳到一个位置后，整个图像会比较黑，有点dark field的效果，然后在这个位置稍微朝一个方向调一下就可以了。4 当然，之前科勒照明（Koeller Illumination）一定要做好。26 问问:体视镜照相时的光线不均匀体视镜照相时的光线不均匀 通常在体视镜照相时为了降低成本，会选择民用数码相机拍照。但是在透射光拍照时，由于低倍时视野较大，相机的 lcd 显示屏会看到中间很亮，周围稍暗的情况，照明不均匀 不知道应该如何解决或避免这个问题？中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）12答答:找个软件做 shading 校正 27 问问:请问，请问，CCD粘上灰了用什么擦？粘上灰了用什么擦？CCD 粘上灰了用什么擦？吹气球吹不干净的时候 答答:呵呵，这个问题有意思，我以前遇到过，所以有如下经验：1.首先辨别 CCD 类型，如果属于无防尘玻璃的那种工业 CCD,不好意思，你最好只是用干净的吹气球吹就好了。否则无论多轻柔的清洗都有可能留下划痕。2.如果芯片外面有一层防尘玻璃，ok，你尽量请专业认识清洁。毕竟离成像面很近，如果处理不好，会严重影响成像质量。28 问问:显微镜长霉了怎么办？显微镜长霉了怎么办？实验室搬家的时候，发现有一台显微镜长霉了，不知道应该用什么擦？答答:如果没钱买个新的，还是想法擦一下嘛。虽然会对成像产生影响，但不会太明显的。如果找厂家来擦，也得花不少钱。我是自己擦的。反正是旧显微镜，擦坏了也不心疼。至于具体方法，你们作梦也想不到的：用棉球蘸蒸馏水浸湿后去擦！轻轻一下就掉了！如果用酒精或乙醚之类有机溶剂反而一点用也没有。当然，镜筒内的表面往往会有镀膜，一般情况下即使是轻轻一下也会损坏这层镀膜的。这种损坏对成像的影响不会太大，至少拍摄的照片用眼睛看是看不出什么影响的。最倒霉的情况是霉菌丝长到两个复合镜片的接缝里了，这就一点招也没有了。29 问问:大家平常都用什么牌子的显微镜油大家平常都用什么牌子的显微镜油?大家平常都用什么牌子的显微镜油?国产还是进口?答答:美国 Cargille，显微镜厂家提供的精油都是从这个公司贴牌的。30 问：新换的汞灯问：新换的汞灯,好象不够亮好象不够亮,什么问题什么问题 答：答：汞灯装上去是要调节位置的,否则效果会很差,结果就是不够亮.31 问：求助问：求助,40 倍物镜看不清楚了倍物镜看不清楚了,什么问题什么问题 答：答：在用 100 倍油镜后,要小心,如果不注意的话,在换到 40 倍观察时,镜油会沾到 40 物镜,如果这样就非常影响 40X 的效果了.不要紧,擦一下就好了.32 问：如何解决失焦问题问：如何解决失焦问题 我要在镜下进行长期观察，在软上上设置每隔半小时照一张相，可是不等半小时到镜下图像就跑了，如何解决这个问题？答：答：1)Nikon 和 Olympus 的产品有一个装置叫做“失焦补偿”，通过一个补偿装置可将下滑的中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）13焦距拉回来。）徕卡和蔡司说他们的调焦结构不存在机械性失焦。）对于热失焦现在还没有很好的解决办法，除非你花很多的钱安装一个恒温箱。）失焦问题比较复杂,有显微镜受重力作用导致的失焦。也有样品水分流失导致的,还有室内温度变化导致的,还发现有由于物镜进油导致的,所以要一一排除才对.短时间发生失焦的一般可以怀疑是显微镜的问题,长时间的问题就要仔细看了.33 问：目镜测微尺怎么放到目镜里？问：目镜测微尺怎么放到目镜里？请教高手，目镜测微尺怎么放到目镜里？答：答：目镜后端一般有个塑料的套筒，把它旋下来，然后把目镜测微尺放进去，再把套筒装上去,就 OK 了 34 问：倒置显微镜配高倍物镜后，物镜撞载物台怎么办？问：倒置显微镜配高倍物镜后，物镜撞载物台怎么办？答：答：高倍物镜一般都有弹簧保护，把握住物镜前端把弹簧摁回，再转一下，可以将物镜收回一部分，这样工作距离就没有那么长了，就不会磕到物镜。等到什么时候用了，再把弹簧放开就行了。35 问：显微操作，注射针中填充的是什么油比较好？既能做到稳定又能保证精确问：显微操作，注射针中填充的是什么油比较好？既能做到稳定又能保证精确 答：答：sigma M8410 mineral oil 36 问：显微镜照相问：显微镜照相 中间清楚边缘模糊怎么解决？中间清楚边缘模糊怎么解决？我用奥林巴斯数码相机接在显微镜的上面拍玻片的图像 照出来的图像中心很清楚，但是周围就比较模糊 越靠外越模糊 请问要怎么解决这个问题 是要怎么调呢？答：答：这个问题需要分析：1是否目镜观察图像的时候已经是这个样子了，如果目镜下观察已经出现严重场曲，那么再好的相机也没有办法挽救。2如果目镜下观察图像没有问题，平场性很好，那么就要看您是否正确的安装了数码相机，通常数码相机和显微镜连接拍摄需要转接口和照相目镜，如果没有使用这些东西，直接拍，恐怕有问题。37 问：体视镜的透射底座有哪些影响成像的因素？问：体视镜的透射底座有哪些影响成像的因素？答：答：透射底座无非就这么几个功能，1 直接透射没调节，2 反光镜调解透射光的角度，可以避免直接照射太亮，3 有的还带狭缝照明，通过调解狭缝的大小控制透过光的强度和以提高成像的衬度。仔细看看说明说，就能调好了。中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题显微镜使用与维护常见问题 100 问（系列之一）问（系列之一）1438 问：配相差的时候有个对中目镜，怎么用的？问：配相差的时候有个对中目镜，怎么用的？答：答：对中目镜是在调节相差效果时用得。?首先拔掉一个目镜，把对中目镜装上。?调到相差位置。?就可以看到一个亮环（环状光阑）和一个暗环（物镜后焦平面的相位板）。?通过调节聚光镜相差环状光阑的位置（亮环的位置），将两个环重合即可。?再把目镜换上就 ok 了。39 问：显微镜不亮灯了？什么问题？39 问：显微镜不亮灯了？什么问题？答：答：先看灯泡，再查保险，常见是这里出了问题。40 问：如何清洗镜头上树脂？问：如何清洗镜头上树脂？我们实验室有一台倒置显微镜，在观看切片的时候有树脂或者指甲油将 40 倍的镜头污染了，请问一下这还可以清洗干净吗？如果可以的话用什么溶液呢？酒精试过了，不行。答：答：酒精、乙醚肯定不行的！用氯仿吧，三氯甲烷，最好在通风橱内操作，要有耐心，不要太用力，10-15min 可清理干净。注意，最好用竹签之类的软棒缠脱脂棉，41 问：有关问：有关CX41 的载物台旋钮的载物台旋钮 调节载物台的旋钮不灵敏了，有种卡的感觉，怎么处理，谢谢各位强人指点。答：答：在手柄的最下面是一个可以调节松紧的旋钮，试一下看看。如果还是不行估计是齿轮有磨损了，需要换零件了。这是我的推测。有可能是手柄的齿轮和载物台的齿条咬合不正常。又有可能是载物台的滚珠导轨进了异物导致不平顺。42 扫地老太太来了。扫地老太太来了。据说在每一个实验室时，都有一个扫地的老太太。很偶然地，经过显微镜室看到烟酒生们正在看荧光样品，怎么也看不到镜下的荧光图片，急得直冒汗。老太太扫了一眼显微镜，悄悄地提醒那个烟酒生：shutter 还没打开呢。据说在每一个实验室时，都有一个扫地的老太太。很偶然地，经过显微镜室看到烟酒生们正在看切片样品，显示屏上的样品图片一半黑一半亮，不知咋回事，急得直冒汗。老太太扫了中国显微图像网 显微镜知识丛书 中国显微图像网 显微镜知识丛书 显微镜使用与维护常见问题