DB32∕T 3433-2018 草甘膦职业接触人群健康检查技术规范.pdf

ICS 13.100 C 60 备案号： DB32 江苏省地方标准 DB32/T 34332018 草甘膦职业接触人群健康检查技术规范 Technical specifications for medical examination of occupational exposure to glyphosate 2018 - 09 - 06 发布 2018 - 09 - 30 实施 江苏省质量技术监督局 发 布 DB32/T 34332018 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由江苏省卫生和计划生育委员会提出。 本标准由江苏省卫生标准化技术委员会归口。 本标准起草单位： 江苏省疾病预防控制中心、 扬州市疾病预防控制中心、 镇江市疾病预防控制中心、南通市疾病预防控制中心。 本标准主要起草人：朱宝立、张峰、潘丽萍、霍宗利、张恒东、窦建瑞、姜方平、葛晴娟、陆春花。 DB32/T 34332018 1 草甘膦职业接触人群健康检查技术规范 1 范围 本标准规定了草甘膦职业接触人群健康检查要求和检查结论。 本标准适用于职业接触草甘膦人群的健康检查，也适用于其他方式接触草甘膦人员的健康检查。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版）适用于本文件。 GB/T 8170 数值修约规则 GBZ 8 职业性急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准 GBZ 59 职业性中毒性肝病诊断标准 GBZ 71 职业性急性化学物中毒诊断(总则) GBZ 79 职业性急性中毒性肾病的诊断 GBZ/T 173 职业卫生生物监测质量保证规范 GBZ 188 职业健康监护技术规范 GBZ/T 210.5 职业卫生标准制定指南 第5部分：生物材料中化学物质测定方法 3 检查要求 3.1 上岗前职业健康检查 3.1.1 目标疾病 a) 慢性肝病。 b) 慢性肾脏疾病。 c) 全血胆碱酯酶活性明显低于正常者。 3.1.2 检查内容 a) 症状询问：重点询问头痛、头晕、乏力、恶心、食欲不振等症状。 b) 体格检查：内科常规检查。 c) 实验室和其他检查： 1) 必检项目：血常规、尿常规、肝功能、肾功能、全血或红细胞胆碱酯酶活性、心电图、肝脾肾 B 超； 2) 选检项目：尿 2-微球蛋白。 3.2 在岗期间职业健康检查 3.2.1 目标疾病 DB32/T 34332018 2 a) 职业病：职业性中毒性肝病、 职业性急性中毒性肾病、职业性急性有机磷杀虫剂中毒，诊断按照 GBZ 59、GBZ 79、GBZ 8 的要求进行。 b) 职业禁忌证：同 4.1.1。 3.2.2 检查内容 a) 症状询问：重点询问头痛、头晕、乏力、失眠、记忆力减退，恶心、食欲不振、上腹饱胀、肝区 b) 疼痛等症状。 c) 体格检查：内科常规检查，重点检查肝脏。 d) 实验室和其他检查： 1) 必检项目：血常规、尿常规、肝功能、肾功能、全血或红细胞胆碱酯酶活性、心电图、肝脾肾 B 超； 2) 选检项目：尿液中草甘膦和尿 2-微球蛋白，尿液中草甘膦的测定方法见附录 A。 3.2.3 健康检查周期 全血或红细胞胆碱酯酶活性测定，半年1次；健康检查周期为1年。 3.3 应急职业健康检查 3.3.1 目标疾病 应急职业健康检查的目标疾病是急性草甘膦中毒，按照GBZ 71的要求进行。 3.3.2 检查内容 a) 症状询问：重点询问短期内大量草甘膦的职业接触史及头昏、头痛、乏力、精神恍惚、恶心、呕吐、食欲减退、肝区疼痛等症状，或伴上呼吸道粘膜刺激等症状。 b) 体格检查： 1) 内科常规检查：注意肝脏触诊和压痛； 2) 神经系统常规检查。 c) 实验室和其他检查： 1) 必检项目：血常规、尿常规、肝功能、肾功能、全血或红细胞胆碱酯酶活性、心电图、肝脾肾 B 超； 2) 选检项目：尿液中草甘膦、尿 2-微球蛋白、心肌酶谱，尿液中草甘膦的测定方法见附录A。 3.4 离岗时职业健康检查 3.4.1 目标疾病 离岗时职业健康检查的目标疾病是职业性中毒性肝病、 职业性急性中毒性肾病、职业性急性有机磷杀虫剂中毒。 3.4.2 检查内容 离岗时职业健康检查内容同4.2.2。 4 检查结论 DB32/T 34332018 3 根据职业健康检查结果，对劳动者个体健康检查结论可分为以下4种： a) 目前未见异常：本次职业健康检查各项检查指标均在正常范围内； b) 疑似职业病：健康检查发现劳动者可能患有职业病，应提交职业病诊断机构进一步明确诊断； c) 职业禁忌证：健康检查发现有职业禁忌的患者，需写明具体疾病名称； d) 其他疾病或异常：除目标疾病之外的其他疾病或某些检查指标的异常。 DB32/T 34332018 4 A A 附 录 A （规范性附录） 尿液中草甘膦的衍生化-气相色谱质谱联用测定方法 A.1 原理 尿样中草甘膦用三氟乙酸酐（TFAA）-七氟丁醇（HFB）衍生化后，用氮气吹干，用柠檬醛乙酸乙酯溶液溶解残渣，以质谱定性、分子离子峰（m/z=612）面积定量，使用气相色谱质谱联用法测定尿中草甘膦浓度。 A.2 仪器 A.2.1 具赛试管，10mL。 A.2.2 容量瓶，10mL、100mL、500mL、1000mL。 A.2.3 移液器，50L、200L、1000L。 A.2.4 电子天平（感量为0.01mg） 。 A.2.5 高速冷冻离心机。 A.2.6 旋涡振荡仪。 A.2.7 氮吹浓缩仪。 A.2.8 干燥箱。 A.2.9 恒温水浴锅。 A.2.10 聚乙烯进样瓶（1.5ml） 、聚乙烯瓶（10mL、50mL等不同规格） 。 A.2.11 气相色谱质谱联用仪（带四级杆质量分析器） ，配有EI源和自动进样器。 A.2.12 尿比重计。 A.3 试剂 A.3.1 实验用水，石英玻璃亚沸蒸馏水。 A.3.2 草甘膦标准品，纯度大于98%。 A.3.3 三氟乙酸酐（TFAA） ，纯度99%。 A.3.4 七氟丁醇（HFB） ，纯度98%。 A.3.5 衍生化试剂： TFAA-HFB（2:1，体积比） ，临用前配制，并于-40以下的低温冰箱中冷冻保存。取0.8mL加入4mL衍生瓶中，加盖后放入-40以下的低温冰箱中冷冻0.5h，备用。 DB32/T 34332018 5 A.3.6 乙酸乙酯，色谱纯。 A.3.7 甲醇，色谱纯。 A.3.8 盐酸。 A.3.9 柠檬醛，纯度95%。 A.3.10 0.2%柠檬醛乙酸乙酯溶液： 100mL乙酸乙酯中加入200L柠檬醛，混匀，避光冷藏。 A.3.11 甲醇盐酸混合溶液：160mL水、2.7mL盐酸、40mL甲醇，混匀。 A.3.12 标准储备液：分别准确称取适量的草甘膦标准品，用水溶解后，加2滴盐酸，全部转移至10mL容量瓶中，用水定容至刻度，充分振摇混匀。配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。 A.3.13 标准应用液：将标准储备溶液分别稀释成10.0g/mL和100g/mL的标准应用液。 A.3.14 标准系列溶液：吸取不同的中间标准液，用水稀释成0.0g/mL 、0.50g/mL、2.50g/mL、5.00g/mL、10.00g/mL、20.0g/mL系列溶液。临用现配。 A.4 样品的采集、运输和保存 采集草甘膦接触工人班末尿样50mL以上，尽快测量比重后，冷藏运输。样品4条件下可保存3d，-20条件下可保存2周。 A.5 分析步骤 A.5.1 仪器操作参考条件 参照仪器条件，按下列要求，将仪调试至最佳状态： a) 色谱柱：DB-5MS（30m0.25 mm0.25m）毛细管色谱柱； b) 进样口温度：200；升温程序：80保持 1.5min，以 30/min 升至 260，保持 1min，再以 30/min 升至 300；无分流进样，0.75min 后开阀； c) 进样体积：2L； d) 载气为高度氦气（纯度99.999%），流速为 1.0mL/min； e) 离子源：EI（70eV）温度：250； f) 接口温度：270； g) 调谐方式：用 PFTBA 在 350m/z650m/z 范围，对 414m/z、502m/z、614m/z 进行手动调谐，使1.0ng/mL 标准溶液的色谱信噪比10：1； h) 选择离子监测方式：草甘膦衍生物的定性离子 m/z 为 611、584、460； i) 草甘膦衍生物的定量离子 m/z 为 612。 A.5.2 标准工作曲线的配制和测定 取1.0mL空白尿样，加入0.1mL不同浓度的标准系列溶液，0.2mL甲醇盐酸混合溶液，于具塞试管中，涡旋30s充分混匀，离心60s后，吸取25L上清液在冰水浴条件下向衍生剂液面下缓慢加入，加盖小心混匀后于90衍生1h（每15min小心振摇一次）。取出冷却至室温，用氮气吹干，并继续氮吹0.5h。加DB32/T 34332018 6 入250L 0.2%柠檬醛乙酸乙酯溶液溶解残渣，混匀后供GC-MS分析。根据定量离子峰面积与当标准溶液浓度（g/mL）计算回归方程。出现谱峰异常时应考虑重新配置。 A.5.3 样品处理和测定 将尿样放至室温，混匀。用测定标准系列溶液的操作条件测定样品空白和样品溶液，测得的定量离子峰面积值由回归方程计算样品中草甘膦的浓度 (g/mL )。 当样品中草甘膦浓度超过检测范围时应稀释后重新检测。 A.6 计算 A.6.1 按式（1）计算尿样中草甘膦的浓度： . (1) 式中： C0 尿样中草甘膦的浓度，单位微克每毫升（g/mL）； c 测得的样品溶液中草甘膦浓度（减去样品空白），单位微克每毫升（g/mL）； F 稀释倍数。 A.6.2 为了校正尿液的稀释作用，将尿样中草甘膦的浓度用尿比重进行校正。校正公式见式（2） ： . (2) 式中： C1 比重校正后尿样中草甘膦的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）； d 尿液比重。 A.7 说明 A.7.1 本法按照GBZ/T 210.5 的方法和要求进行研制。 本法检出限为0.013g/mL； 方法测定范围为0.050g/mL 2.000g/mL，在此范围内相关系数0.999；方法批内精密度相对标准偏差为2.3%7.2%（n6） ；方法批间精密度相对标准偏差范围为5.3%9.3%（n6） ；最低定量浓度为0.031g/mL，尿样加标回收率为91.0%98.4%。 A.7.2 草甘膦代谢产物不干扰本法的测定。 A.7.3 本法在使用过程中，如发现灵敏度显著降低，不能满足检测需求，应及时更换色谱柱，并重新实验。 A.7.4 实验用水可使用经检验不含有机溶剂的纯净水。 A.7.5 本方法衍生过程应在有通风防护的情况下进行。 A.7.6 样品在在4下可保存3天。 A.7.7 色谱分离图见图A.1。 A.7.8 尿中草甘膦含量大于0.6mg/L时，建议加强医学观察。 DB32/T 34332018 7 保留时间 （min） 图A.1 空白尿样中草甘膦及其代谢产物氨基甲酸酯衍生物色谱分离图 注：1氨基甲酸酯衍生物, 2草甘膦衍生物 _ 响应值 1 2 2