小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实 验 目,1,、经过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动观察，加深了解细胞吞噬作用过程及其意义。,2,、掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。观察机体非特异性免疫现象。,3,熟悉细胞吞噬作用基本过程,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第1页,实 验 原 理,细胞吞噬作用原来是单细胞动物摄取营养物质方式，也是原始防御作用。伴随动物界进化，在高等动物中，则发展生成大小两类吞噬细胞,(,即巨噬细胞和嗜中性粒细胞,),，专司吞噬作用，成为非特异免疫功效主要组成部分。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第2页,巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成，然后进入血液抵达各组织内，并深入分化为各种巨噬细胞。当病原微生物或其它异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又有趋化性，能响应招引因子招引，产生活跃变形运动，主动向病原体和异物移行，在接触到病原体或异物时，即伸出伪足，将之包围并内吞人胞质，形成吞噬体，继而细胞质中初级溶酶体与吞噬泡发生融合，形成吞噬性溶酶体，经过其中水解酶等作用下，将病原体杀死，消化分解，最终将不能消化残渣排出细胞外。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第3页,在机体免疫过程中，巨噬细胞负担着噬菌、杀菌、去除体内被损伤和衰老细胞，以及传递抗原信息，巨噬细胞将捕捉抗原进行加工处理后，把降解抗原信息传递给,T,、,B,淋巴细胞。巨噬细胞又是天然杀伤细胞（,NK Cell),激活剂，而且对,B,淋巴细胞激活、增殖和分化含有调整作用。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第4页,【,试验用具,】,1,材料：小白鼠、,1%,鸡红细胞悬液,2,试剂：,6%,淀粉肉汤（含台盼蓝），,0.9%,生理盐水,3,仪器设备：显微镜、注射器、注射针头、吸管、试管架、解剖刀、解剖镊、载玻片、盖玻片、记号笔,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第5页,实 验 方 法,1,、在试验前一天，给小白鼠腹腔注射,5,鸡红细胞,lml/,只。注射时，先用右手抓住鼠尾提起，放在试验台上，用左手拇指和食指抓住小鼠两耳和头颈皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手无名指和小指按住尾巴与后肢，前肢可用中指固定，即可在腹部后,l,2,处一侧注射。进针勿过深，不然易损害肝及血管等，造成出血致死。腹腔注射,1,鸡红细胞悬液,lml,，轻按小白鼠腹部，使悬液分散。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第6页,2,、约,20,分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠,(,右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时向下按住鼠头，使脊髓与脑髓间断开致鼠死亡,),。,3,、将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内脏推向一侧，用不装针头注射器或吸管吸收腹腔液。,4,、每人取一张洁净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，置显微镜下观察。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第7页,5,、吸收腹腔液与,Hanks,液,1,：,1,混合，而且滴数滴于载玻片上，,37,O,C,温育,30,分钟。,6,、玻片取出，用生理盐水冲洗，吹干，甲醇固定,5,分钟。,7,、,Gimasa,染液染色，干燥后油镜观察。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第8页,【,试验结果,】,在高倍镜下可见有许多较大圆形和形状不规则巨噬细胞，因未染色细胞核不易见到，其胞质中含有数量不等兰色圆形小颗粒（即吞入含台盼兰淀粉肉汤所形成）；还可见少许黄色椭圆形有显著细胞核鸡红细胞，慢慢移动玻片标本，仔细观察视野中巨噬细胞表面，有红细胞已部分被吞入；有巨噬细胞内已吞入了一个或多个红细胞形成吞噬泡。,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第9页,巨噬细胞吞噬试验示教照片,鸡红细胞,巨噬细胞,吞噬鸡红细胞后巨噬细胞,吞噬鸡红细胞后巨噬细胞,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第10页,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第11页,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第12页,【,试验汇报,】,1,镜检时，你能在视野中看到几个类型细胞？绘图说明巨噬细胞吞噬过程。,2,巨噬细胞将怎样深入处理被吞噬红细胞？,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察专家讲座,第13页,